水中亞硝酸鹽現場快速檢測試劑盒及制備方法
【專利摘要】本發明公開了一種可消除試劑空白影響的水中亞硝酸鹽現場快速檢測試劑盒，為此，本發明還提供了該試劑盒的制備方法。本發明試劑盒在pH5.0醋酸-醋酸鈉緩沖液中，水中的亞硝酸鹽與對氨基苯磺酸和鹽酸萘乙二胺發生反應生成紅色配合物，此紅色配合物的顏色深淺與亞硝酸鹽濃度成正比，將扣除試劑空白的亞硝酸鹽標準色卡顏色與空白管顏色疊加后與測試管對比，得出待測水樣中亞硝酸鹽濃度，特別適合水中亞硝酸鹽現場快速檢測。
【專利說明】
水中亞硝酸鹽現場快速檢測試劑盒及制備方法
技術領域
[0001] 本發明涉及水質檢測領域，尤其涉及一種水中亞硝酸鹽現場快速檢測試劑盒及制 備方法。
【背景技術】
[0002] 亞硝酸鹽廣泛地存在于自然界中，尤其是在氣態水、地表水和地下水中W及動植 物體與食品內。亞硝酸鹽現已被公認為我們日常生活飲水中的一項主要污染物指標，該指 標一定程度上反映了水中受到含氮類有機物污染的程度。該物質一旦進入人體后將會引發 高鐵血紅蛋白癥，出現常見的組織缺氧癥狀，還可W與仲胺類物質結合成致癌物質，嚴重地 影響和威脅人類的身體健康。基于亞硝酸鹽的危險性廣泛存在，國家衛生標準已經明確規 定了生活飲用水中N02《1. Omg/L。長期攝入亞硝酸鹽濃度高的飲用水，亞硝酸鹽會與人體 蛋白質結合形成具有強致癌性的亞硝胺，送種物質會引起食道癌、胃癌、肝癌和大腸癌等。
[0003] 水中亞硝酸鹽的檢測多采用紫外分光光度法、可見光分光光度法、化學發光法、離 子色譜法等，送些方法均需將水樣帶回專口的實驗室，由專業的操作技術人員化驗完成，大 部分方法還需要價格高昂的大型專用儀器，不能滿足快速、簡便的現場檢測要求，在一些特 殊時間和地點還存在采樣不及時、不能客觀反映采樣現場水體質量的情況。
[0004] 目前市場上現有的亞硝酸鹽現場檢測試劑多為W比色法為基礎的干粉型檢測試 劑，該檢測試劑在進行測量時取一定量的水樣與干粉型檢測試劑混合、溶解、反應一段時間 后產生特定的顏色，直接與標準色卡對照得出水樣待測物質的濃度。此類方法快速、方便、 公眾參與度高，但測量時無法消除試劑空白的變化對測定結果的影響，只有在試劑空白恒 定不變時才具有較高的準確性。但是，實際檢測發現，無論是液體型還是干粉型的檢測試 劑，在存儲過程中都不可避免的存在試劑空白逐漸變大或變小的情況。此外，使用干粉型的 檢測試劑進行水樣檢測時，需要先用待測水樣把檢測試劑充分溶解，再與水樣中的具體污 染物進行反應產生特定顏色。由于不同季節、不同區域采集的水樣溫度不盡相同，溶解干粉 型檢測試劑時所需時間也不盡相同，整個檢測過程所需時間難W有效控制，也對檢測結果 的準確性造成不利影響。
[0005] 因此，需求一種使用液體型檢測試劑、可消除試劑空白對檢測結果影響、使用標準 色卡直接目視比色定量的水中亞硝酸鹽的檢測試劑盒，對于實現水中亞硝酸鹽現場快速檢 測顯得尤為重要。
【發明內容】
[0006] 本發明所要解決的技術問題是要提供一種可消除試劑空白影響的水中亞硝酸鹽 現場快速檢測盒，為此，本發明還要提供一種該試劑盒的制備方法。
[0007] 本發明試劑盒的原理是；在抑5. 0醋酸-醋酸鋼緩沖液中，水中的亞硝酸鹽與對 氨基苯礙酸和鹽酸蔡己二胺發生反應生成紅色配合物，此紅色配合物的顏色深淺與亞硝酸 鹽濃度成正比，將扣除試劑空白的亞硝酸鹽標準色卡顏色與空白管顏色疊加后與測試管對 比，得出待測水樣中亞硝酸鹽濃度。
[0008] 為解決上述技術問題，本發明所采用的技術方案是：
[0009] 用于水中亞硝酸鹽現場快速檢測的試劑盒，它的組成為：
[0010] 1、液體型亞硝酸鹽檢測試劑；80mmol/L P冊.0醋酸-醋酸鋼緩沖液，含有2-5g/L 對氨基苯礙酸、0. 2-0. 5g/L鹽酸蔡己二胺、0. 1-0. 3ml/L乳化劑OP、10-20ml/L己二醇；
[001U 2、亞硝酸鹽標準色卡：由扣除試劑空白、濃度分別為0. 05mg/L、0. lOmg/L、 0. 20mg/L、0. 30mg/L、0. 40mg/L、0. 50mg/L的亞硝酸鹽標準溶液反應所產生的標準色組成。
[0012] 上述液體型亞硝酸鹽檢測試劑的制備方法為；稱取2-5g對氨基苯礙酸、0. 2-0. 5g 鹽酸蔡己二胺，加800ml 80mmol/L P冊.0醋酸-醋酸鋼緩沖液攬拌溶解，再加入0. 1-0. 3ml 乳化劑0P、10-20ml己二醇，攬拌溶解后用80mmol/L P冊.0醋酸-醋酸鋼緩沖液定容至 1000 ml。
[0013] 上述亞硝酸鹽標準色卡的制備方法為：精密稱取0. 20g優級純亞硝酸鋼，加去離 子水溶解并定容至1000 ml,得到濃度為200mg/L亞硝酸鹽（W亞硝酸鋼計）儲備液，再用去 離子水將亞硝酸鹽儲備液稀釋成濃度為0. 05mg/L、0. 10mg/L、0. 20mg/L、0. 30mg/L、0. 40mg/ L、0. 50mg/L的亞硝酸鹽（W亞硝酸鋼計）標準溶液；取7根IOml玻璃比色管，設置第I根 比色管為空白管、第2-7根比色管為標準管，分別在空白管和標準管中加入IOml去離子水 和IOml亞硝酸鹽標準溶液，再加入0. 2ml液體型亞硝酸鹽檢測試劑，5-4(TC反應5-15分 鐘；由比色管底部向上拍取各管反應所產生的顏色，用地Otoshop 7. 0作圖軟件將各標準 管顏色扣除空白管顏色后，將所得的顏色及對應的亞硝酸鹽標準溶液的濃度打印在厚度為 l-2mm的無色透明PVC塑料板上，得到扣除試劑空白后的亞硝酸鹽標準色卡。
[0014] 本發明的積極效果如下：
[0015] 具有方法簡單、準確性高、易于操作的優點；使用液體型亞硝酸鹽檢測試劑進行檢 巧||，可有效控制整個檢測過程所需時間；通過將空白管顏色疊加在標準色卡上再與樣品管 進行比色對照的方法，可有效消除試劑空白對檢測結果的影響，特別適合水中亞硝酸鹽現 場快速檢測。
[0016] 本發明的檢測試劑盒與現有的采用標準色卡直接比色的亞硝酸鹽檢測試劑盒相 比較，結果見表1。
[0017] 表 1
[0018]
[0019]
【具體實施方式】
[0020] 下面結合實施例對本發明做進一步的說明，W下所述，僅是對本發明的較佳實施 例而已，并非對本發明做其他形式的限制，任何熟悉本專業的技術人員可能利用上述掲示 的技術內容加 W變更為同等變化的等效實施例。凡是未脫離本發明方案內容，依據本發明 的技術實質對W下實施例所做的任何簡單修改或等同變化，均落在本發明的保護范圍內。 [00川 實施例1
[0022] -種水中亞硝酸鹽現場快速檢測試劑盒，本試劑盒是由W下物質組成的：
[0023] 液體型亞硝酸鹽檢測試劑1瓶（IOml)
[0024] 亞硝酸鹽標準色卡 1張
[00巧]本試劑盒的制備方法是通過W下步驟實現的：
[0026] 1、液體型亞硝酸鹽檢測試劑的制備方法：
[0027] (1)、稱取3. 5g對氨基苯礙酸、0. 35g鹽酸蔡己二胺，加800ml80mmol/L P冊.0醋 酸-醋酸鋼緩沖液攬拌溶解；
[002引 似、加入0. 2ml乳化劑0P、15ml己二醇，攬拌溶解；
[0029] (3)、用SOmmol/L抑5. 0醋酸-醋酸鋼緩沖液定容至1000ml。
[0030] 2、亞硝酸鹽標準色卡的制備方法：
[0031] (1)、精密稱取0.20g優級純亞硝酸鋼，加去離子水溶解并定容至1000 ml,得到濃 度為200mg/L亞硝酸鹽（W亞硝酸鋼計）儲備液，再用去離子水將亞硝酸鹽儲備液稀釋成 濃度為 0. 〇5mg/L、0. 10mg/L、0. 20mg/L、0. 30mg/L、0. 40mg/L、0. 50mg/L 的亞硝酸鹽（W亞硝 酸鋼計）標準溶液；
[003引 似、取7根IOml玻璃比色管，設置第1根比色管為空白管、第2-7根比色管為標準 管，分別在空白管和標準管中加入IOml去離子水和IOml亞硝酸鹽標準溶液，再加入0. 2ml 液體型亞硝酸鹽檢測試劑，在2(TC反應10分鐘；
[0033] (3)、由比色管底部向上拍取各管反應所產生的顏色，用地Otoshop 7. 0作圖軟件 將各標準管顏色扣除空白管顏色后，將所得的顏色及對應的亞硝酸鹽標準溶液的濃度打印 在厚度為1mm的無色透明PVC塑料板上，得到扣除試劑空白后的亞硝酸鹽標準色卡。
[0034] 檢測方法：
[003引取2根IOml玻璃比色管，設置第1根比色管為空白管、第2根比色管為樣品管，分 別在空白管和樣品管中加入IOml去離子水和IOml待測水樣，再加入液體型亞硝酸鹽檢測 試劑0. 2ml，在2(TC反應10分鐘；將標準色卡置于空白管底部，由比色管底部向上觀察空白 管與標準色卡疊加后的顏色，并與樣品管顏色對照，當兩者顏色一致時，在10分鐘內讀取 標準色卡所對應的亞硝酸鹽濃度，得出水樣中亞硝酸鹽濃度。
[003引 實施例2
[0037] 為了進一步證明本發明的創造性，本發明做了如下對比試驗，考察試劑空白的變 化對測定結果準確性的影響。按本法實施例1所述的水中亞硝酸鹽現場快速檢測試劑盒為 測試組，W不扣除試劑空白、采用標準色卡直接比色的檢測試劑盒為對照組，將兩組試劑盒 的檢測試劑分別置4°C冰箱和37水浴儲存7天，并對同一份已經用鹽酸蔡己二胺分光光度 法測定亞硝酸鹽濃度為0. lOmg/L的水樣進行測定，同時用去離子水代替水樣進行試劑空 白測試，用721分光光度計記錄試劑空白值，測試時比色皿光徑為1cm，測試波長為550nm， 參比溶液為去離子水，結果見表2。
[0038] 表 2
[0039]
[0040] 從表2可W看出，在相同的實驗條件下，隨著試劑空白的逐漸增大，測試組的測定 結果保持不變，但對照組的測定結果明顯變大，表明本發明所述的方法可有效去除試劑空 白的變化對亞硝酸鹽測試結果的影響。
[0041] 盡管已經示出和描述了本發明的實施例，對于本領域的普通技術人員而言，可W 理解在不脫離本發明的原理和精神的情況下可W對送些實施例進行多種變化、修改、替換 和變型，本發明的范圍由所附權利要求及其等同物限定。
【主權項】
1. 用于水中亞硝酸鹽現場快速檢測的試劑盒，其特征在于：它的組成為： (1) 、液體型亞硝酸鹽檢測試劑：80mmol/L pH5. 0醋酸-醋酸鈉緩沖液，含有2-5g/L對 氨基苯磺酸、0. 2-0. 5g/L鹽酸萘乙二胺、0. 1-0. 3ml/L乳化劑OP、10-20ml/L乙二醇； (2) 、亞硝酸鹽標準色卡：由扣除試劑空白、濃度分別為0· 05mg/L、0. 10mg/L、0. 20mg/ L、0. 30mg/L、0. 40mg/L、0. 50mg/L的亞硝酸鹽標準溶液反應所產生的標準色組成。2. 根據權利要求1所述的用于水中亞硝酸鹽現場快速檢測的試劑盒的制備方法，其特 征在于：液體型亞硝酸鹽檢測試劑的制備方法為：稱取2-5g對氨基苯磺酸、0. 2-0. 5g鹽酸 萘乙二胺，加800ml 80mmol/L pH5.0醋酸-醋酸鈉緩沖液攪拌溶解，再加入0. 1-0. 3ml乳化 劑OP、10-20ml乙二醇，攪拌溶解后用80mmol/L pH5. 0醋酸-醋酸鈉緩沖液定容至1000ml。3. 根據權利要求1所述的用于水中亞硝酸鹽現場快速檢測的試劑盒的制備方法，其 特征在于：亞硝酸鹽標準色卡的制備方法為：精密稱取0. 20g優級純亞硝酸鈉，加去離子水 溶解并定容至l〇〇〇ml，得到濃度為200mg/L亞硝酸鹽（以亞硝酸鈉計）儲備液，再用去離 子水將亞硝酸鹽儲備液稀釋成濃度為0· 05mg/L、0. 10mg/L、0. 20mg/L、0. 30mg/L、0. 40mg/L、 0. 50mg/L的亞硝酸鹽（以亞硝酸鈉計）標準溶液；取7根10ml玻璃比色管，設置第1根 比色管為空白管、第2-7根比色管為標準管，分別在空白管和標準管中加入10ml去離子水 和10ml亞硝酸鹽標準溶液，再加入0. 2ml液體型亞硝酸鹽檢測試劑，5-40°C反應5-15分 鐘；由比色管底部向上拍取各管反應所產生的顏色，用Photoshop 7. 0作圖軟件將各標準 管顏色扣除空白管顏色后，將所得的顏色及對應的亞硝酸鹽標準溶液的濃度打印在厚度為 l_2mm的無色透明PVC塑料板上，得到扣除試劑空白后的亞硝酸鹽標準色卡。
【文檔編號】G01N21/78GK105987904SQ201510093484
【公開日】2016年10月5日
【申請日】2015年3月3日
【發明人】袁巧仙, 高琴, 吳靈萍, 連國軍
【申請人】溫州醫科大學