一種利用羅丹明類熒光探針檢測三價鉻離子的方法
【專利摘要】本發明提供了一種利用羅丹明類熒光探針檢測三價鉻離子的方法，其特征在于，包括：配制不同濃度的三價鉻離子溶液，靜置，在激發波長為560nm的條件下，檢測發射波長為582nm的熒光強度，以鉻離子的濃度為橫坐標，熒光強度為縱坐標作圖，得到線性關系曲線；將羅丹明類熒光探針溶液加入到NaOH/NaH2PO4緩沖溶液中得到含有熒光探針的緩沖體系，加入待測的三價鉻離子溶液，靜置，在激發波長為560nm的條件下，檢測發射波長為582nm的熒光強度，根據步驟4中得到的線性關系曲線，計算鉻離子的濃度。本發明熒光探針能選擇性識別三價鉻離子，并且不受其它常見離子的干擾、熒光強度高、熒光強度高。
【專利說明】
一種利用羅丹明類熒光探針檢測三價鉻離子的方法
技術領域
[0001] 本發明屬于熒光探針材料檢測方法領域，特別涉及一種利用羅丹明類熒光探針檢 測三價鉻離子的方法。
【背景技術】
[0002] 鉻是一種自然界中常見的元素，在地球上分布廣泛。常見的鉻元素化合物的化合 價主要是+3、+6價，它在保證人類健康、調節植物生長、促進工業發展等方面具有極其重要 的作用。在人類健康方面，三價鉻是平衡人體和動物飲食的主要元素，人體和動物體每天大 概需求50-200iig。并且，三價鉻在糖類、蛋白質、脂肪和核酸的新陳代謝中起著至關重要的 作用。首先，鉻元素可以抑制突變，有一定的防癌作用；其次，鉻元素可以調節糖代謝，一定 程度上可以預防糖尿病;再者，鉻元素可以調節脂肪代謝，可以降低膽固醇和甘油三脂的含 量。在調節植物生長方面，微量的鉻會使得植物體內酶的活性得到提高，可以提高植物的光 合作用，增強植物對疾病的抵抗能力進而提高農作物的產量。在工業方面，鉻是工業生產過 程中是必不可或缺的，比如皮革制造、鍍層、木材防腐劑、顏料等，其中三價鉻廣泛應用金屬 材料、金屬加工材料、金屬材料的熱處理等行業，三價鉻含量對鍍層質量至關重要。目前，我 國地表中水中三價鉻的含量為〇.5mg/L，該含量可以滿足人體中正常鉻的需求量，過量的鉻 離子對人體健康會造成傷害。隨著人們生活水平的提高，在裝飾建筑材料的大量使用，使越 來越多的鉻暴露在環境中，這對環境是一種負擔，同時對人類健康也是存在一種潛在的威 脅。因此，一種具有良好選擇性、方便、快速檢測鉻離子的方法對于環境的保護和監測顯得 尤為重要。
[0003] 傳統的三價鉻離子的檢測需要借助大型儀器，多數使用伏安法、原子吸收光譜法、 表面等離子體增強共振散射以及最近比較受關注的比色法等，雖然這些方法可以用來檢測 三價鉻離子，但是由于儀器體積龐大而受到限制。例如硫酸亞鐵銨滴定法可以用來檢測三 價鉻離子，但是由于樣品中含有大量的釩對體系產生很大的影響，因此限制此方法的使用。 常見的二苯碳酰二肼分光光度法具有設備簡單、精密、檢測線低而被廣泛使用，但是該法需 要使用加熱來煮沸消解，從而易引起爆沸，煮沸水樣的體積難以把握，從而影響檢查的準確 性和靈敏度。電感耦合法等離子炬為激發光源的一類光譜分析方法，已在常規分析中廣泛 使用，具有分析速度快、精密度高等優點，但在分析過程中樣品需要消解，而且需要借助大 型儀器，不利于實時監測。而熒光探針法主要是熒光探針物質與重金屬離子發生絡合作用， 通過肉眼可以觀察到顏色的變化，具有簡單、快速、靈敏度高等優點。
【申請人】申請的中國專 利201510869087.0"檢測汞離子的反應型羅丹明類熒光探針及其制備與應用"，在乙腈溶液 中，使用熒光光譜法，在激發波長為560nm，檢測發射波長為580nm，檢測汞離子的濃度在 0.89-60iiM的范圍達到一個很好地線性，采用熒光探針法檢測汞離子溶液，可實現對汞離子 的實時和快速的檢測，在環境檢測方面有較好的應用前景。中國專利201310410725.3 "利用 Y _聚谷氨酸穩定的金納米顆粒檢測三價鉻離子的方法"，在硼氫化鈉溶液中加入不同濃度 的三價鉻離子，Y _聚谷氨酸穩定的金納米顆粒對三價鉻離子有較好的靈敏性和選擇性。
[0004] 羅丹明B類熒光染料是一種很好的生物熒光物質，具有良好的光物理性質，其吸收 和發射都在長波處（>550nm)，熒光量子產率高，摩爾消光系數大，背景干擾小等優點，因此 在發展熒光探針方面具有重要應用前景。
【發明內容】
[0005] 本發明的目的是提供一種羅丹明類熒光探針檢測三價鉻離子的新方法，該方法操 作簡單、檢測快速且靈敏度高，能進行溶液中三價鉻離子的高靈敏識別。
[0006]為了達到上述目的，本發明提供了一種羅丹明類熒光探針在檢測三價鉻離子含量 中的應用。
[0007]優選地，所述的羅丹明類熒光探針的結構式為：
[0009] 本發明還提供了一種利用羅丹明類熒光探針檢測三價鉻離子的方法，其特征在 于，包括：
[0010] 步驟1:配制羅丹明類熒光探針溶液；
[0011] 步驟2:配制三價鉻離子溶液；
[0012] 步驟3:配制pH=6 ? 0~7 ? 0的NaOH/NaH2P〇4緩沖溶液；
[0013] 步驟4:分別將步驟1得到的羅丹明類熒光探針溶液加入到步驟3得到的NaOH/ NaH2P04緩沖溶液中得到多個含有熒光探針的緩沖體系，分別加入不同體積的步驟2所得的 三價鉻離子溶液，得到不同濃度的三價鉻離子溶液，靜置，在激發波長為560nm的條件下，檢 測發射波長為582nm的熒光強度，以鉻離子的濃度為橫坐標，熒光強度為縱坐標作圖，得到 線性關系曲線；
[0014] 步驟5:將步驟1得到的羅丹明類熒光探針溶液加入到步驟3得到的NaOH/NaH2P〇4緩 沖溶液中得到含有熒光探針的緩沖體系，加入待測的三價鉻離子溶液，靜置，在激發波長為 560nm的條件下，檢測發射波長為582nm的熒光強度，根據步驟4中得到的線性關系曲線，計 算鉻離子的濃度。
[0015]優選地，所述的步驟1中的羅丹明類熒光探針的結構式為：
[0017]優選地，所述的步驟1中的羅丹明類熒光探針溶液的配制方法包括:稱取一定摩爾 量的羅丹明類熒光探針在乙腈溶劑中配置成l〇〇mL濃度為lxl(T3M的熒光探針溶液，然后取 lmL上述的濃度為lxl(T3M的熒光探針溶液加入到lOmL容量瓶中，然后用乙腈溶劑定容、搖 勻，得到1x10、的熒光探針溶液，取lmL上述的濃度為1x10、的熒光探針溶液加入到10mL 容量瓶中，然后用乙腈溶劑定容、搖勻，得到lxl〇_ 5M的羅丹明類熒光探針溶液。
[0018] 更優選地，所述的乙腈溶劑的純度為95~98wt%。
[0019]優選地，所述的步驟2中的三價鉻離子溶液的配制方法包括:稱取一定摩爾量的三 價鉻化合物在乙腈溶劑中配置成l〇〇mL濃度為lxl(T3M的三價鉻離子溶液，然后取lmL上述的 濃度為lx 1(T3M的三價鉻離子溶液加入到1 OmL的容量瓶中，然后用乙腈溶劑定容、搖勻，得到 濃度為1x10_4M的三價鉻離子溶液，然后取lmL上述的濃度為lxl(T 4M的三價鉻離子溶液加入 到lOmL的容量瓶中，然后用乙腈溶劑定容、搖勻，得到濃度為lxl(T5M的三價鉻離子溶液。 [0020]更優選地，所述的三價鉻化合物的純度為95~98wt%。
[0021]優選地，所述的步驟3中的Na0H/NaH2P04緩沖溶液的配制方法包括:稱取氫氧化鈉 配制0. lmol/L的氫氧化鈉溶液，稱取磷酸二氫鈉0.68g，加入0. lmol/L的氫氧化鈉溶液 29 ? lmL，用水稀釋至100mL，得到pH=6 ? 0~7 ? 0的NaOH/NaH2P〇4緩沖溶液。
[0022] 更優選地，所述的磷酸二氫鈉的純度為95~98wt%，所述的氫氧化鈉的純度為95 ~98wt%。
[0023]優選地，所述的步驟4中的羅丹明類熒光探針溶液的用量為10此，所述的步驟5中 的羅丹明類熒光探針溶液的用量為1〇此。
[0024]優選地，所述的羅丹明類熒光探針對三價鉻離子溶液的檢測限達l.OyM。
[0025]本發明的羅丹明類的熒光探針在乙腈溶液中與三價鉻離子發生絡合，顏色由無色 變成紅色，使用熒光光譜法，在激發波長為560nm，檢測其發射波長為582nm，此熒光探針的 熒光強度隨著三價鉻離子濃度的增加而增加的特性，進行的高靈敏度檢測。在三價鉻離子 的濃度為1. 〇_55yM的范圍內，熒光探針的熒光強度變化值與三價鉻離子的濃度成良好的線 性關系，相關系數為0.952。
[0026] 與現有技術相比，本發明的有益效果為：
[0027] (1)本發明熒光探針能選擇性識別三價鉻離子，并且不受其它常見離子的干擾、熒 光強度高。
[0028] (2)采用本發明所制備的熒光探針進行三價鉻離子的檢測，檢測過程簡單方便、靈 敏度高、檢測線低，可實現對三價鉻離子的快速靈敏檢測。
[0029] (3)該探針適用于pH值范圍為7.0-11.0,這個范圍可以滿足絕大多數生物樣品的 要求，該探針的靈敏度高檢測線可達到1. 〇yM。
[0030] (4)本發明方法操作簡單、檢測快速、靈敏度高且選擇性好，該熒光探針對三價鉻 離子有很好的選擇性，在環境檢測方面具有較好的使用效果。
【附圖說明】
[0031] 圖1為熒光探針加入三價鉻離子前后的紫外變化圖譜;在圖1中，橫坐標為紫外吸 收波長(nm)，縱坐標為吸光度。
[0032] 圖2為熒光探針加入三價鉻離子前后的熒光變化圖譜;在圖2中，橫坐標為熒光發 射波長(nm)，縱坐標為熒光強度。
[0033]圖3為濃度為10yM在乙腈溶液中對不同的金屬離子(Fe3+、Co2+、Ni 2+、Sr2+、Ba2+、Mn2 +、21!2+、？132+辦2+說2+)選擇干擾性檢測的熒光響應圖；在圖3中，橫坐標為不同的金屬離子， 縱坐標為熒光強度。
[0034]圖4為濃度為10yM在乙腈溶液中對三價鉻離子的熒光光譜響應圖；在圖4中，橫坐 標為焚光發射波長(nm)，縱坐標為焚光強度。
[0035]圖5為濃度為60yM與三價鉻離子絡合比的Job-Plot曲線;橫坐標為c [ Cr3+] /c [ Cr3+ +探針]，縱坐標為熒光F-F〇，其中F、F〇是在560nm的熒光發射強度。
[0036]圖6為濃度為1 OyM在不同溶劑（甲醇、乙醇、丙酮、乙腈、DMF)中對三價鉻離子的熒 光響應譜圖；橫坐標為不同的溶劑，縱坐標為熒光強度。
[0037]圖7為濃度為50yM的探針溶液使用磷酸二氫鈉/氫氧化鈉緩沖溶液配置了 一系列 不同pH的緩沖溶液，然后向探針溶液中加入一定量的三價鉻離子，檢測熒光強度橫坐標為 焚光發射波長(nm)，縱坐標為焚光強度。
[0038]圖8所示，10yM探針在乙腈溶液中加入0到1000yM的Cr3+離子的熒光發射光譜圖，當 其達到1. OyM和55yM之間有良好的線性，線性相關系數達到0.952，其最低檢測限為1. OyM。 橫坐標為Cr3+的濃度，縱坐標為探針的相對熒光強度F/F〇,然后所做出的線性關系曲線(l x = 560nm) 〇
【具體實施方式】
[0039] 下面結合具體實施例，進一步闡述本發明。應理解，這些實施例僅用于說明本發明 而不用于限制本發明的范圍。此外應理解，在閱讀了本發明講授的內容之后，本領域技術人 員可以對本發明作各種改動或修改，這些等價形式同樣落于本申請所附權利要求書所限定 的范圍。以下各實施例中所用的乙腈溶劑的純度為99wt %，磷酸二氫鈉的純度為98wt %，所 述的氫氧化鈉的純度為98wt%。
[0040] 以下實施例中的羅丹明類熒光探針的結構式為式（1)，其合成方法記載在中國專 利201510869087.0"檢測汞離子的反應型羅丹明類熒光探針及其制備與應用"中的實施例1 中。
[0041 ] 實施例1
[0042] (1)將羅丹明類熒光探針溶于在乙腈溶劑中，配成10iiM熒光探針溶液，將硝酸鉻溶 于乙腈溶劑中，配制成10yM三價鉻離子溶液，將lmL 10yM熒光探針溶液加入到lmL 10yM三 價鉻離子溶液中，測試加入三價鉻離子溶液前后熒光探針溶液的紫外變化圖譜，結果如圖1 所示。
[0043] (2)將羅丹明類熒光探針溶于在乙腈溶劑中，配成10iiM熒光探針溶液，將硝酸鉻溶 于乙腈溶劑中，配制成10yM三價鉻離子溶液，將lmL 10yM熒光探針溶液加入到lmL 10yM三 價鉻離子溶液中，測試加入三價鉻離子溶液前后熒光探針溶液的熒光激發和發射變化圖 譜，結果如圖2所示。
[0044] (3)將羅丹明類熒光探針溶于在乙腈溶劑中，配成lOiiM熒光探針溶液，分別將 ?6(：13、(：〇(：12、附(：12、3^：12、8&(：12、]?11(：12、211(：12、？13(勵3)2、〇&(：12、〇(1(：12溶于乙腈溶劑中，配成 1 OyM 的 Fe3+、Co2+、Ni2+、Sr2+、Ba 2+、Mn2+、Zn2+、Pb2+、Ca2+和 Cd2+金屬離子溶液，將熒光探針溶于 乙腈溶劑中，配制成l〇yM三價鉻離子溶液，進行選擇干擾性檢測，具體步驟為：分別將lmL 10yM 熒光探針溶液與 lmL 10yM 的？63+、(：〇2+、附2+、3￥+、83 2+、]?112+、2112+、？132+、03 2+和〇12+離子溶 液混合，在激發波長為560nm的條件下，檢測發射波長為582nm的熒光強度;將lmL 10yM熒光 探針溶液與〇.5mL 10yM三價鉻離子溶液混合后，再分別與0.5mL 10yM的Fe3+、Co2+、Ni2+、Sr2 +』&2+蠢2+、2112+、？13 2+、0&2+和0(12+離子溶液混合，在激發波長為56011111的條件下，檢測發射波 長為582nm的焚光強度;結果如圖3所不。
[0045] (4)基于Stern-Volmer理論，考察羅丹明類熒光探針溶液對于Cr3+離子進行檢測時 的線性范圍和實際最低檢測濃度。
[0046] 將羅丹明類熒光探針溶于在乙腈溶劑中，配制成熒光探針溶液，分別將此熒光探 針溶于乙腈溶劑中，配制成三價鉻離子溶液，依次在OyM、1 yM、2yM、3yM、4yM、5yM、6yM、7yM、8 yM、9虛和10虛熒光探針溶液中按體積比1:1加入10虛、9虛、8虛、7虛、6處、5虛、4處、3yM、2y M、lyM和OyM三價鉻離子溶液，通過進行熒光測試其譜圖變化，激發波長為560nm，發射波長 為582nm，然后根據熒光強度的最大變化值作圖并作出絡合比的Job-Plot曲線；橫坐標為c [Cr 3+]/c[Cr3++探針]，縱坐標為熒光F-F〇,其中F、F〇是在560nm的熒光發射強度。焚光探針溶 液在560nm的激發光激發下，熒光強度很弱，隨著鉻離子的加入，熒光強度不斷增強，根據 Stern-Volmer 方程：
[0047] F/Fo=l+KsvCq
[0048] 其中Fo和F分別表示加入Cr3+離子前后所測得的羅丹明類熒光探針的熒光強度，Ksv 是增強常數，Cq為的Cr3+離子濃度。RHPT增強程度與Cr3+離子呈現良好的線性關系，如圖5所 不。
[0049] (5)將羅丹明類熒光探針分別溶于甲醇、乙醇、丙酮、乙腈、DMF溶劑中，配成lOiiM熒 光探針溶液，將硝酸鉻溶于乙腈溶劑中，配制成l〇yM三價鉻離子溶液，將lmL 10yM熒光探針 溶液加入到lmL 10yM三價鉻離子溶液中，激發波長為560nm，發射波長為582nm，結果如圖6 所示。
[0050] (6)將羅丹明類熒光探針溶于在乙腈溶劑中，配成50iiM熒光探針溶液，將硝酸鉻溶 于乙腈溶劑中，配制成10yM三價鉻離子溶液，分別在lmL 50yM熒光探針溶液加入lmL pH為 0、1.0、2.0、3.0、4.0、5.0、6.0、7.0、8.0、9.0、10.0、11.0、12.0 的磷酸二氫鈉 / 氫氧化鈉緩沖 溶液，再加入lmL 10yM三價鉻離子溶液，激發波長為560nm，發射波長為582nm，檢測加入鉻 離子溶液前后的熒光強度，結果如圖7。
[0051] (7)將羅丹明類熒光探針溶于在乙腈溶劑中，配成50iiM熒光探針溶液，將硝酸鉻溶 于乙腈溶劑中，配制成0~l〇〇yM三價鉻離子溶液，取lmL的羅丹明類熒光探針依次加入不同 濃度的三價鉻離子溶液，激發波長為560nm，發射波長為582nm，檢測加入鉻離子溶液前后的 熒光強度，當其到達5yM和55yM之間有良好的線性，線性相關系數達到0.981，其最低檢測限 為l.OyM，結果如圖8,其中熒光檢測儀器中狹縫寬度的設置也會使檢測限的高低發生相對 變化。
[0052] 實施例2
[0053] 一種利用羅丹明類熒光探針檢測三價鉻離子的方法，具體步驟為：
[0054]步驟1:配制羅丹明類熒光探針溶液:稱取一定摩爾量的羅丹明類熒光探針在乙腈 溶劑中配置成100mL濃度為lxl(T3M的熒光探針溶液，然后取lmL上述的濃度為lxl(T3M的熒 光探針溶液加入到10mL干燥的容量瓶中，然后用乙腈溶劑定容、搖勻，得到lxl(T 4M的熒光探 針溶液，取lmL上述的濃度為lxl(T4M的熒光探針溶液加入到10mL干燥的容量瓶中，然后用乙 腈溶劑定容、搖勾，得到1x10_5M的羅丹明類焚光探針溶液；
[0055]步驟2:配制三價鉻離子溶液:稱取一定摩爾量的三價鉻化合物硝酸鉻在乙腈溶劑 中配置成l〇〇mL濃度為lxl(T3M的三價鉻離子溶液，然后取lmL上述的濃度為lxl(T3M的三價 鉻離子溶液加入到10mL的干燥的容量瓶中，然后用乙腈溶劑定容、搖勻，得到濃度為lxl(T 4M 的三價鉻離子溶液，然后取lmL上述的濃度為1x1(T4M的三價鉻離子溶液加入到10mL的干燥 的容量瓶中，然后用乙腈溶劑定容、搖勻，得到濃度為lxl(T 5M的三價鉻離子溶液；
[0056] 步驟3:配制pH=7.0的NaOH/NaH2P〇4緩沖溶液:稱取氫氧化鈉配制0. lmol/L的氫氧 化鈉溶液，稱取磷酸二氫鈉〇 . 68g，加入0 . lmol/L的氫氧化鈉溶液29 . lmL，用水稀釋至 100mL，得到 pH=7.0的NaOH/NaH2P〇4 緩沖溶液。
[0057] 步驟4:分別將步驟1得到的羅丹明類熒光探針溶液10uL加入到步驟3得到的NaOH/ NaH2P〇4緩沖溶液10uL中得到多個含有熒光探針的緩沖體系，分別加入0uL、10uL、20uL、 30uL、40uL、50uL、60uL、70uL、80uL，、90uL、100uL的步驟2所得的三價鉻離子溶液，得到不同 濃度的三價鉻離子溶液，使用乙腈溶液進行定容，靜置lmin，在激發波長為560nm的條件下， 檢測發射波長為582nm的熒光強度，以鉻離子的濃度為橫坐標，熒光強度為縱坐標作圖，得 到線性關系曲線y = 1.0597+0.02253x;
[0058] 步驟5:將步驟1得到的羅丹明類熒光探針溶液10uL加入到步驟3得到的NaOH/ NaH2P〇4緩沖溶液10uL中得到含有熒光探針的緩沖體系，加入待測的三價鉻離子溶液10uL， 靜置lmin，在激發波長為560nm的條件下，檢測發射波長為582nm的熒光強度，根據步驟4中 得到的線性關系曲線，計算鉻離子的濃度為l.〇xl(T 6M。
[0059] 實施例3
[0060] -種利用羅丹明類熒光探針檢測三價鉻離子的方法，具體步驟為：
[0061]步驟1 :配制羅丹明類熒光探針溶液：所述的羅丹明類熒光探針參照 201510869087.0"檢測汞離子的反應型羅丹明類熒光探針及其制備與應用"的合成方法。所 述的的羅丹明類熒光探針溶液的配制方法為:稱取一定摩爾量的羅丹明類熒光探針在乙腈 溶劑中配置成100mL濃度為lxl(T 3M的熒光探針溶液，然后取lmL上述的濃度為lxl(T3M的熒 光探針溶液加入到10mL干燥的容量瓶中，然后用乙腈溶劑定容、搖勻，得到lxl(T 4M的熒光探 針溶液，取lmL上述的濃度為lxl(T4M的熒光探針溶液加入到10mL干燥的容量瓶中，然后用乙 腈溶劑定容、搖勾，得到lxl〇_ 5M的羅丹明類焚光探針溶液；
[0062]步驟2:配制三價鉻離子溶液:稱取一定摩爾量的三價鉻化合物硝酸鉻在乙腈溶劑 中配置成l〇〇mL濃度為lxl(T3M的三價鉻離子溶液，然后取lmL上述的濃度為lxl(T3M的三價 鉻離子溶液加入到10mL的干燥的容量瓶中，然后用乙腈溶劑定容、搖勻，得到濃度為lxl(T 4M 的三價鉻離子溶液，然后取lmL上述的濃度為1x1(T4M的三價鉻離子溶液加入到10mL的干燥 的容量瓶中，然后用乙腈溶劑定容、搖勻，得到濃度為lxl(T 5M的三價鉻離子溶液；
[0063] 步驟3:配制pH=7.0的NaOH/NaH2P〇4緩沖溶液:稱取氫氧化鈉配制0. lmol/L的氫氧 化鈉溶液，稱取磷酸二氫鈉〇 . 68g，加入0 . lmol/L的氫氧化鈉溶液29 . lmL，用水稀釋至 100mL，得到 pH=7.0的NaOH/NaH2P〇4 緩沖溶液。
[0064] 步驟4:分別將步驟1得到的羅丹明類熒光探針溶液10uL加入到步驟3得到的NaOH/ NaH2P〇4緩沖溶液10uL中得到10個含有熒光探針的緩沖體系，分別加入10，20，30，40，50，60， 70，80，90，100yL的步驟2所得的三價鉻離子溶液，得到不同濃度的三價鉻離子溶液，使用乙 腈溶劑進行定容至2mL，靜置lmin，在激發波長為560nm的條件下，檢測發射波長為582-584nm的熒光強度，結果如圖4所示。（圖4中的小圖是羅丹明類的熒光探針加入到0~lOOyM 的三價鉻離子中熒光強度表化的線性曲線圖，而在5~55yM有較好的線性變化。）
[0065] 從熒光光譜可得知熒光探針的熒光強度隨著三價鉻離子濃度的增加而增加，到最 后趨于穩定，且熒光強度的增強值與三價鉻離子濃度有良好的線性關系，R 2 = 〇. 981。
[0066] 本發明利用熒光探針，進行三價鉻離子的高靈敏檢測，熒光探針的熒光強度變化 值與三價鉻離子濃度有良好的線性關系，相關系數為R 2 = 〇.952,對三價鉻離子的檢測線可 達到l.OiiM。本發明方法操作簡單、靈敏度高、檢測快速且選擇型好，可對混合樣品中的三價 鉻離子進行在線原位快速靈敏檢測。
[0067] 盡管本發明的實施方案已公開如上，但其并不僅僅限于說明書和實施方式中所列 運用，它完全可以被適用于各種本發明的領域，對于熟悉本領域的人員而言，可容易的實施 另外的修改，因此在不背離權利要求及等同范圍要求所限定的一般概念下，本發明并不限 于特定的細節和這里示出與描述的實施例。
【主權項】
1. 一種羅丹明類巧光探針在檢測=價銘離子含量中的應用。2. -種利用羅丹明類巧光探針檢測=價銘離子的方法，其特征在于，包括： 步驟1:配制羅丹明類巧光探針溶液； 步驟2:配制=價銘離子溶液； 步驟3:配制pH=6.0~7.0的化OH/Na出P化緩沖溶液； 步驟4:分別將步驟1得到的羅丹明類巧光探針溶液加入到步驟3得到的化OH/化出Kk緩 沖溶液中得到多個含有巧光探針的緩沖體系，分別加入不同體積的步驟2所得的=價銘離 子溶液，得到不同濃度的S價銘離子溶液，靜置，在激發波長為560nm的條件下，檢測發射波 長為58化m的巧光強度，W銘離子的濃度為橫坐標，巧光強度為縱坐標作圖，得到線性關系 曲線； 步驟5:將步驟1得到的羅丹明類巧光探針溶液加入到步驟3得到的化OH/化出P〇4緩沖溶 液中得到含有巧光探針的緩沖體系，加入待測的=價銘離子溶液，靜置，在激發波長為 560nm的條件下，檢測發射波長為58化m的巧光強度，根據步驟4中得到的線性關系曲線，計 算銘離子的濃度。3. 如權利要求2所述的利用羅丹明類巧光探針檢測=價銘離子的方法，其特征在于，所 述的步驟1中的羅丹明類巧光探針的結構式為：4. 如權利要求1所述的利用羅丹明類巧光探針檢測=價銘離子的方法，其特征在于，所 述的步驟1中的羅丹明類巧光探針溶液的配制方法包括:稱取一定摩爾量的羅丹明類巧光 探針在乙臘溶劑中配置成IOOmL濃度為IxlCT3M的巧光探針溶液，然后取ImL上述的濃度為 1 Xl(T3M的巧光探針溶液加入到IOmL容量瓶中，然后用乙臘溶劑定容、搖勻，得到1 Xl(T4M的 巧光探針溶液，取ImL上述的濃度為IxlCT4M的巧光探針溶液加入到IOmL容量瓶中，然后用乙 臘溶劑定容、搖勻，得到IxlCT5M的羅丹明類巧光探針溶液。5. 如權利要求1所述的利用羅丹明類巧光探針檢測=價銘離子的方法，其特征在于，所 述的步驟2中的=價銘離子溶液的配制方法包括:稱取一定摩爾量的=價銘化合物在乙臘 溶劑中配置成IOOmL濃度為IxlCT3M的S價銘離子溶液，然后取ImL上述的濃度為IxlCT3M的 S價銘離子溶液加入到IOmL的容量瓶中，然后用乙臘溶劑定容、搖勻，得到濃度為IxlCT4M的 =價銘離子溶液，然后取ImL上述的濃度為IxlO-4M的=價銘離子溶液加入到IOmL的容量瓶 中，然后用乙臘溶劑定容、搖勻，得到濃度為IxlCT5M的=價銘離子溶液。6. 如權利要求1所述的利用羅丹明類巧光探針檢測=價銘離子的方法，其特征在于，所 述的步驟3中的化OH/Na出Kk緩沖溶液的配制方法包括:稱取氨氧化鋼配制0.1mol/L的氨氧 化鋼溶液，稱取憐酸二氨鋼0.68旨，加入0.1111〇1幾的氨氧化鋼溶液29.11111^，用水稀釋至 IOOmL，得到抑=6.0~7.0的NaOH/Na出P〇4緩沖溶液。7. 如權利要求1所述的利用羅丹明類巧光探針檢測=價銘離子的方法，其特征在于，所 述的步驟4中的羅丹明類巧光探針溶液的用量為lOiiL，所述的步驟5中的羅丹明類巧光探針 溶液的用量為10化。8. 如權利要求1所述的利用羅丹明類巧光探針檢測=價銘離子的方法，其特征在于，所 述的羅丹明類巧光探針對=價銘離子溶液的檢測限達l.OyM。
【文檔編號】G01N21/64GK105911039SQ201610259469
【公開日】2016年8月31日
【申請日】2016年4月22日
【發明人】光善儀, 徐曼曼, 趙剛, 徐洪耀
【申請人】東華大學