一種快速定量檢測h-fabp的時間分辨熒光免疫層析試劑及制備方法
【專利摘要】本發明公開一種快速定量檢測H?FABP的時間分辨熒光免疫層析試劑及其制備方法，屬于臨床醫學診斷領域。該試劑由試紙條和熒光液兩部分組成。其中，試紙條包括底板、Fusion5、硝酸纖維素膜和吸水墊；所述Fusion5、硝酸纖維素膜和吸水墊水平方向順序連接固定于底板上。所述硝酸纖維素膜上包被有H?FABP單克隆抗體1的檢測線和兔IgG抗體構成的質控線。熒光液包含H?FABP單克隆抗體2標記的時間分辨熒光微球、羊抗兔抗體標記的時間分辨熒光微球。本發明利用時間分辨熒光微球提高熒光強度，降低背景信號，同時定量檢測全血、血清或血漿中的H?FABP含量,樣本僅需要10～20微升。該試紙條具有方便快捷、操作簡單、檢測時間短、特異性強、靈敏度高、檢測結果更加準確，適用于臨床POCT的快速診斷。
【專利說明】
一種快速定量檢測H-FABP的時間分辨熒光免疫層析試劑及制 備方法
技術領域
[0001] 本發明屬于臨床醫學診斷領域，具體涉及一種快速定量檢測H-FABP的時間分辨熒 光免疫層析試劑及制備方法。
【背景技術】
[0002] 脂肪酸結合蛋白（FABPs)在活性脂肪酸代謝的組織中大量存在，如心臟和肝臟，它 們的主要功能促進細胞內的長鏈脂肪酸運輸。現已確定九個不同類型的FABP，其中，H-FABP (心臟型脂肪酸結合蛋白）是最廣泛的，因為它大量存在于心肌細胞。其低分子量和細胞質 的位置相結合，使H-FABP成為急性冠脈綜合癥(尤其是胸痛發作6小時內）的一個高敏的早 期標志物，缺血性發作30分鐘后即可檢測。這可能是因為在心肌缺血和心肌壞死以后，它迅 速從細胞質進入血液循環。H-FABP在6-8小時左右達到濃度峰值，然后在24-30小時左右恢 復至正常水平。如此迅速恢復至正常水平得益于高腎清除率，這意味著H-FABP不僅能夠用 作AMI早期標志物，還是理想的心肌梗死復發診斷標志物。盡管H-FABP的釋放特點與肌紅蛋 白相似，但其心肌特異性是肌紅蛋白的15-20倍；因此H-FABP是更有效的心肌損傷標志物。 此外，H-FABP的正常血清/血漿值比肌紅蛋白低，從而降低假陽性比率。
[0003] 相較于單獨使用肌鈣蛋白的情況，使用H-FABP和肌鈣蛋白的組合已證實，在癥狀 出現后的早期（〈4小時或〈6小時），可顯著改善MI/ACS的診斷敏感性。關于預后，一些大型臨 床試驗中肌鈣蛋白陽性和肌鈣蛋白陰性的患者分層長期ACS的風險已經說明了H-FABP的價 值。即使在使用高度敏感的肌鈣蛋白的情況下，診斷和預后，也常增添H-FABP。除了ACS，H-FABP還用于其他范圍，例如肺栓塞(PE)，冠狀動脈搭橋手術(CABG)和腦血管疾病。
[0004]時間分辨熒光(TRF)分析技術是以具有獨特熒光特性的鑭系元素及其螯合劑作為 示蹤物，建立的一種新型的非放射性微量分析技術。自從1983年Pettersson等采用時間分 辨熒光免疫分析(TRFIA)法定量測定hCG以來，TRFIA方法學研究和臨床應用發展迅速，成為 既RIA之后標記免疫分析發展的一個新的里程碑，國內外相繼研制出了多鐘TRFIA儀和配套 的商業化試劑盒。TRFIA技術具有靈敏度高、標準曲線范圍寬、操作簡便、無放射性污染、多 標記等優點，廣泛地應用于腫瘤、傳染病、內分泌疾病、自身免疫性疾病、遺傳性疾病的臨床 實驗室診斷，已成為生物醫學研究和臨床超微量生化檢驗常用的分析手段之一。將TRF、聚 苯乙烯微球及硝酸纖維素膜結合，可用于快速體外診斷領域。專利（ZL03819391.4)涉及一 種采用時間分辨熒光的基于膜的檢測，用于檢測測試樣本中分析物的存在和含量;專利(CN 202149903 U)發明C反應蛋白時間分辨熒光免疫層析定量檢測；專利(CN 202166649 U)發 明新喋呤時間分辨熒光免疫層析定量檢測試紙條;專利(CN 102879559 A)發明一種時間分 辨熒光免疫層析即時定量檢測試劑盒方法;專利(CN 103760368 A)發明一種AFP和Free-P-HCG時間分辨熒光雙標的定量檢測試劑盒;專利(CN 204514928 U)發明一種基于時間分辨 熒光免疫層析法檢測胃蛋白酶原I和II的試紙條以及其應用的試紙條。
[0005]專利(CN 2783324 Y)發明一種心血管疾病診斷和預測多指標蛋白芯片檢測試劑 盒，用于CRP、My o、cTn I、cTnT、NT-proBNP、CKMB、H-FABP、GPBB 的聯合檢測。
[0006] 專利(CN 102226811B)發明一種檢測尿液中心臟型脂肪酸結合蛋白診斷試劑的制 備方法，主要采用固相膠體金免疫層析法。
[0007] 專利（CN102520194B)發明一種定量檢測人心臟脂肪酸結合蛋白的熒光免疫層析 試劑盒，主要采用基于量子點標記的固相免疫層析法。
[0008] 專利(CN102608325A)發明一種脂肪酸結合蛋白測定試劑盒，主要采用膠乳增強免 疫比濁法。
[0009] 專利（CN102628864B)發明一種膠乳增強免疫比濁法測定血清或尿液中心臟型脂 肪酸結合蛋白的試劑盒。
[0010] 專利(CN102788880A)發明一種心型脂肪酸結合蛋白檢測試劑盒及其制備方法，主 要采用免疫比濁法。
[0011] 專利（CN103123319B)發明一種心型脂肪酸結合蛋白含量檢測試劑盒及其制備方 法，主要采用膠乳增強免疫比濁法。
[0012] 專利(CN103543272A)發明一種同時檢測心型脂肪酸結合蛋白和肌鈣蛋白I的快速 定量檢測裝置及檢測方法，主要采用膠體金免疫層析法。
[0013] 專利(CN104215772A)發明一種心臟型脂肪酸結合蛋白檢測試劑盒及其制備方法， 主要采用膠乳增強免疫比濁法。
[0014] 專利(CN104330576A)發明一種心型脂肪酸結合蛋白檢測試劑及其制備方法，主要 采用膠體金顆粒進行標記。
[0015] 專利(CN104678098A)發明一種心肌肌鈣蛋白I和心型脂肪酸結合蛋白聯檢試紙制 備方法，主要采用膠體金固相免疫層析方法。
[0016] 專利(CN104714015A)發明一種心型脂肪酸結合蛋白檢測試劑盒及檢測方法，主要 采用固相熒光免疫層析法。
[0017] 專利(CN203490224U)發明一種人心臟型脂肪酸結合蛋白免疫層析試紙條，主要采 用上轉發光固相免疫層析法。
[0018] 專利(CN204228721U)發明一種心型脂肪酸結合蛋白定量檢測試紙條，主要采用固 相熒光免疫層析法。
[0019] 專利(CN204287199U)發明一種心臟型脂肪酸結合蛋白免疫層析定量檢測試紙條， 主要采用固相熒光免疫層析法。
[0020] 專利(CN204405681U)發明一種用于心型脂肪酸結合蛋白檢測的試紙條，主要采用 量子點熒光免疫層析法。
[0021] 目前，H-FABP檢測的方法主要有酶聯免疫吸附法、膠乳增強免疫比濁法、膠體金免 疫層析法、熒光免疫層析法等。酶聯免疫吸附法操作復雜、檢測時間長、檢測范圍窄；膠乳增 強免疫比濁需要結合大型儀器，成本高;膠體金免疫層析法定性或定量檢測，靈敏度低、線 性范圍窄，不能滿足定量、準確檢測的要求;熒光免疫層析法大多數采用熒光素或其他物質 作為發光源，雖然有較高的線性范圍，但受背景信號的干擾，不能夠保證低端靈敏度。
[0022] 盡管時間分辨熒光免疫層析法已經廣泛用于多種項目的檢測，但是大多數都采用 將時間分辨熒光微球固定在結合物釋放墊上，由于微球的釋放不均一，導致不精密度很大， 無法滿足靈敏度要求高的項目，尤其是肌鈣蛋白I的檢測。此外，為了檢測全血樣本，多數廠 家的樣品墊采用人工處理過玻璃纖維作為結合物釋放墊，同樣增加了不精密度。
[0023] 綜上所述，在H-FABP定量檢測時，迫切需要一種樣本量少、精密度高、檢測背景信 號低、靈敏度高、線性范圍寬、樣品墊不需處理就能檢測全血樣本的時間分辨熒光免疫層析 試劑。
【發明內容】
[0024] 本發明的目的是提供一種快速定量檢測H-FABP的時間分辨熒光免疫層析試劑，該 試劑能在較短的檢測時間內完成H-FABP的檢測，檢測時間短，檢測靈敏度高。
[0025] 本發明還提供了快速定量檢測H-FABP的時間分辨熒光免疫層析試劑的制備方法。
[0026] -種快速定量檢測H-FABP的時間分辨熒光免疫層析試劑由試紙條和熒光液兩部 分組成
[0027]所述的試紙條包括底板(l)、Fusi〇n5(2)、硝酸纖維素膜(3)和吸水墊(4)。
[0028]所述Fusion5(2)、硝酸纖維素膜（3)和吸水墊（4)水平方向順序連接固定于底板 上。
[0029]所述的熒光液(7)包含H-FABP單克隆抗體2標記的時間分辨熒光微球、羊抗兔抗體 標記的時間分辨焚光微球
[0030] 所述硝酸纖維素膜(3)上包被有H-FABP單克隆抗體1(5)、的檢測線和兔IgG抗體 (6)構成的質控線。
[0031] 所述的時間分辨熒光微球選自修飾過的聚苯乙烯微球。
[0032]所述的聚苯乙稀微球，表面修飾官能團為羧基、羥基或環氧基的一種，粒徑為100 ~500nm。
[0033]所述的時間分辨熒光微球內部填充鑭系元素的螯合物。
[0034] 所述的鑭系元素為銪、釤、鉍、鏑中的一種。
[0035] 所述的時間分辨熒光微球標記步驟如下：
[0036] (1 )H_FABP單克隆抗體2標記時間分辨熒光微球的制備及稀釋：
[0037]將時間分辨熒光微球溶于MES緩沖液中，加入活化劑活化；隨后加入氨基乙酸，使 得微球表面連接手臂;洗滌、離心后，再次加入活化劑活化;再次洗滌、離心，將時間分辨熒 光微球用硼酸緩沖液復溶，隨后加入H-FABP單克隆抗體2進行反應，硼酸緩沖液、微球與抗 體的質量比為l〇mg: 0.0 lmg~10mg: 2. Omg;反應完后加入封閉劑進行封閉;封閉過后，洗滌、 離心，再次用硼酸緩沖液及封閉劑復溶、超聲，使微球均勻分散在緩沖液中，2-8°C避光保 存。選擇合適的緩沖液稀釋熒光微球，工作濃度在〇. 5~50μg/ml，用于H-FABP性能的評估。 [0038] (2)羊抗兔抗體標記的熒光微球的制備及稀釋過程同（1)所述。
[0039] 優選的，采用銪粒子螯合物填充的時間分辨熒光微球，粒徑為：100~500nm;
[0040] 優選的，微球與抗體的包被比例為：10mg: 0.0 lmg~10mg: 2. Omg;
[00411優選的，熒光液的工作濃度為:0 ? 5~50μg/ml;
[0042] 一種快速定量檢測H-FABP的時間分辨熒光免疫層析試劑及制備方法，包括如下步 驟：
[0043] (1)制備檢測線和質控線:硝酸纖維素膜(3)在免疫熒光試紙條中用于固定包被抗 體，同時也是免疫反應的發生的場所;檢測線（5)是將H-FABP單克隆抗體1使用檸檬酸鹽或 蔗糖稀釋液稀釋，劃線于所述硝酸纖維素膜(3)上;質控線(6)是將兔IgG抗體使用檸檬酸鹽 或蔗糖稀釋液稀釋，劃線與所述硝酸纖維素膜(3)上。將劃好的硝酸纖維素膜置于真空干燥 箱(37~45°C)，烘干24~48小時。檢測線(5)位于質控線(6)左側，即液體首先接觸的位置；
[0044] (2)試紙條的組裝:試紙條底板（1)由左到右依次粘附Fusion5(2)、硝酸纖維素膜 (3)、吸水紙(4)。將組裝好的大板切成小條，即得到所述快速定量檢測H-FABP的時間分辨熒 光免疫層析試紙條。
[0045] 優選的，檸檬酸鹽或蔗糖稀釋液稀中檸檬酸鹽或蔗糖占5-20% ;
[0046] 優選的，檢測線和質控線抗體的劃膜濃度為0.5~2mg/ml;
[0047]優選的，檢測線和質控線抗體的劃膜噴量為0.5~2. Oyl/cm;
[0048]以上快速定量檢測H-FABP的時間分辨熒光免疫層析試劑的檢測方法，其步驟包 括：
[0049] (1)標準曲線的繪制：取10~2(^1的1?^?標準品與80~50(^1的熒光混合液(11- FABP、羊抗兔熒光液)混合，取混合液70~100y 1滴加到試紙條的Fus ion5上，反應時間15~ 20分鐘，通過與試紙條配套的時間分辨免疫層析定量分析儀讀取系統檢測信號，然后以標 準品的各濃度為橫坐標，各濃度系統檢測信號的平均值為縱坐標，擬合制備標準品曲線； [0050] (2)待測樣品的檢測，分別取10~20yl的待測樣品與80~500yl的熒光混合液(H- FABP、羊抗兔熒光液)混合，取混合液70~100y 1滴加到試紙條的Fus ion5上，反應時間15~ 20分鐘，通過系統檢測信號的值即可得到待測樣品中的H-FABP的濃度值。
[0051 ]所述（1)中，H-FABP標準品的濃度分別為:0、1、2、5、10、20、40、80、120ng/ml;
[0052]本發明的有益效果是：
[0053] (1)本發明采用Fusion5為樣品墊，摒棄了傳統的樣品墊及結合物釋放墊，無需預 處理，可以進行全血、血清、血漿樣本的檢測，能夠極大的提高檢測精密度和準確性。
[0054] (2)本發明將熒光液置于硝酸纖維素膜之外，不同于傳統方法將熒光微球固定于 結合物釋放墊上，不存在熒光微球釋放不均一的現象，同樣能夠極大的提高檢測精密度和 準確性。
[0055] (3)本發明采用銪粒子螯合物填充的時間分辨熒光微球，由于其大的Stokes位移 (激發波長為340nm左右，發射波長為615nm左右，差值為275nm左右），能夠明顯降低背景信 號值，提高檢測的靈敏度。
[0056] (4)本發明的采用極少的樣本量(10~20yl)，能夠有效的排除樣本的干擾。
【附圖說明】
[0057] 圖1是本發明快速定量檢測H-FABP的時間分辨熒光免疫層析試劑的結構示意圖（1 為底板、2為Fusi〇n5、3為硝酸纖維素膜、4為吸水墊、5為H-FABP檢測線、6為兔IgG質控線）： [0058]圖2是本發明H-FABP的標準品曲線；
[0059] 圖3是本發明奧普與膠乳增強免疫比濁H-FABP的相關性曲線；
【具體實施方式】
[0060] 下面結合實施例，對本發明作進一步說明：
[0061 ]本發明中，H-FABP抗體和熒光微球的供應商和貨號如下所示
[0063] 實施例1
[0064] H-FABP時間分辨熒光免疫層析試紙條的制備：
[0065] (1)檢測線(T)溶液的制備：用10倍、50mM的檸檬酸鹽溶液稀釋H-FABP單克隆抗體1 至1~2mg/ml;
[0066] (2)質控線(C)溶液的制備：用用10倍、50mM的檸檬酸鹽溶液稀釋兔I gG抗體至1~ 2mg/ml；
[0067] 在帶有背膠的底板（1)上采用搭接的方式，首先粘貼硝酸纖維素膜(3)，然后再硝 酸纖維素膜(3)的兩端分別粘貼Fusion5膜(2)和吸水紙(4)。在硝酸纖維素膜(3)且靠近 Fusion5膜⑵處，劃T(H-FABP捕獲線（5))、，在靠近吸水紙(4)的一端劃C(兔IgG)線，T、C的 間距為5mm。
[0068] 在T線處劃T線，在C線處劃C線。T線抗體的終濃度為lmg/ml，C線兔IgG的終濃度為 lmg/ml，C、T線的噴量為1 .Oyl/crn。
[0069]將噴好的大卡置于37°C恒溫烘箱中烘烤24小時。烘烤完后，在濕度小于40%的房 間，用切條機將其切成3.85mm寬度的試紙條，將其裝入塑料殼中壓實，然后裝入一袋干燥 劑，封口置于干燥柜中保存，待用。具體如圖1所示。
[0070] 實施例2
[0071 ] H-FABP時間分辨熒光免疫層析試紙條的檢測 [0072] (1)制備H-FABP、羊抗兔時間分辨熒光微球
[0073] 將時間分辨熒光微球(粒徑為200nm左右)溶于100mM MES緩沖液(PH為6.0)中，加 入活化劑(NHS，20mg/ml; EDC，20mg/ml)活化15分鐘；洗滌、離心，將時間分辨熒光微球用 60mM硼酸緩沖液(PH為8.5)復溶，隨后加入H-FABP單克隆抗體2進行反應2小時(微球與抗體 的質量比在l〇mg:0.5mg);反應完后加入封閉劑(BSA，100mg/ml)進行封閉2小時;封閉過后， 洗滌、離心，再次用60mM硼酸緩沖液(PH為8.5)及封閉劑(BSA，100mg/ml)復溶、超聲，使微球 均勻分散在緩沖液中，2-8 °C避光保存。
[0074] 羊抗兔抗體標記的熒光微球的制備過程同H-FABP制備微球的過程相同。
[0075] (2)滴配
[0076]用PH為8.0、200mM的Tris緩沖液將步驟（1)中的H-FABP、羊抗兔包被的熒光微球進 行稀釋。其中，H-FABP包被的熒光微球稀釋200~300倍，羊抗兔包被的熒光微球稀釋2000~ 3000倍，混合后即為所需要的熒光混合液。
[0077] (3)標準曲線的繪制
[0078] 用小牛血清稀釋H-FABP標準品，濃度為：0、1、2、5、10、20、40、80、120ng/ml。分別取 1 〇y 1混合標準品與80y 1熒光混合液混合，再取80y r混合液滴加載實施例1中的H-FABP時間 分辨熒光免疫層析試紙條上，反應15分鐘后，通過與H-FABP時間分辨熒光免疫層析試紙條 配套的免疫層析讀數儀，讀取系統檢測信號，每個混合標準品的濃度檢測三次，具體數值如 表1所示。表1標準品檢測值
[0081 ]由表1數據可知，H-FABP的靈敏度可達lng/ml，檢測上限可達120ng/ml。本發明H-FABP檢測性能均優于膠體金層析法，同膠乳增強免疫比濁試劑性能相近，體現出時間分辨 熒光免疫層析法的優勢。
[0082] (4)制作 ID 卡：
[0083]以標準品H-FABP濃度值為橫坐標，各濃度的系統檢測信號平均值為縱坐標，繪制 標準品曲線，具體如圖2所示，燒錄ID卡，并導入配套儀器中。
[0084] 實施例3 [0085]精密度檢測
[0086]用實施例2中的測試方法，測試H-FABP的標準品（濃度為10和80ng/ml)，每個標準 品重復檢測十次，具體檢測數值如下表2所示。
[0087]表2精密度測試結果表
[0090] 如表2數據可知，采用本發明的H-FABP檢測試紙條，H-FABP的精密度小于10%，完 全符合P0CT產品精密度小于15 %的要求。
[0091] 實施例4
[0092]臨床樣本的相關性檢測
[0093]用實施例2中的測試方法，選取40例國外膠乳增強免疫比濁法檢測H-FABP的臨床 樣本(樣本濃度覆蓋標準品的檢測范圍），采用上海奧普生物的H-FABP試劑進行檢測。具體 檢測結果如表3所示。
[0094]表3上海奧普三聯檢測與膠乳增強免疫比濁法檢測數據
[0097]以膠乳增強免疫比濁法檢測的H-FABP濃度為橫坐標，上海奧普生物檢測H-FABP濃 度為縱坐標，繪制樣本相關性曲線。如圖3。其中，H-FABP的相關性方程為y = 0.935x+l. 163， 相關性系數R大于0.95，完全符合臨床試驗的要求。
【主權項】
1. 一種快速定量檢測H-FABP的時間分辨熒光免疫層析試劑，其特征在于:該試劑由試 紙條和熒光液兩部分組成;所述的試紙條包括底板(l)、Fusi 〇n5(2)、硝酸纖維素膜(3)和吸 水墊(4); 所述Fusion5(2)、硝酸纖維素膜(3)和吸水墊(4)水平方向順序連接固定于底板上； 所述的熒光液(7)包含H-FABP單克隆抗體2標記的時間分辨熒光微球、羊抗兔抗體標記 的時間分辨焚光微球。2. 根據權利要求1所述的快速定量檢測H-FABP的時間分辨熒光免疫層析試劑，其特征 在于:所述硝酸纖維素膜(3)上包被有H-FABP單克隆抗體1 (5 )、的檢測線和兔IgG抗體(6)構 成的質控線。3. 根據權利要求1所述的快速定量檢測H-FABP的時間分辨熒光免疫層析試劑，其特征 在于:所述的時間分辨熒光微球選自修飾過的聚苯乙烯微球。4. 根據權利要求3所述的快速定量檢測H-FABP的時間分辨熒光免疫層析試劑，其特征 在于:所述的聚苯乙稀微球，表面修飾官能團為羧基、羥基或環氧基的一種，粒徑為100~ 500nm〇5. 根據權利要求1所述的快速定量檢測H-FABP的時間分辨熒光免疫層析試劑，其特征 在于:所述的時間分辨熒光微球內部填充鑭系元素的螯合物。6. 根據權利要求5所述的快速定量檢測H-FABP的時間分辨熒光免疫層析試劑，其特征 在于:所述的鑭系元素為銪、釤、鉍、鏑中的一種。7. 根據權利要求1所述的一種快速定量檢測H-FABP的時間分辨熒光免疫層析試劑，其 特征在于:所述的時間分辨熒光微球標記步驟如下： (1) H-FABP單克隆抗體2標記時間分辨熒光微球的制備及稀釋： 將時間分辨熒光微球溶于MES緩沖液中，加入活化劑活化;隨后加入氨基乙酸，使得微 球表面連接手臂;洗滌、離心后，再次加入活化劑活化;再次洗滌、離心，將時間分辨熒光微 球用硼酸緩沖液復溶，隨后加入H-FABP單克隆抗體2進行反應，硼酸溶液、微球與抗體的質 量比為IOmg: 0 · 0 Img~I Omg: 2 · Omg;反應完后加入封閉劑進行封閉；封閉過后，洗滌、離心， 再次用硼酸緩沖液及封閉劑復溶、超聲，使微球均勻分散在緩沖液中，2-8°C避光保存。選擇 合適的緩沖液稀釋熒光微球，工作濃度在〇. 5~50μg/ml，用于H-FABP性能的評估。 (2) 羊抗兔抗體標記的熒光微球的制備及稀釋過程同（1)所述。8. -種快速定量檢測H-FABP的時間分辨熒光免疫層析試劑及制備方法，包括如下步 驟： (1) 制備檢測線和質控線：硝酸纖維素膜(3)在免疫熒光試紙條中用于固定包被抗體， 同時也是免疫反應的發生的場所;檢測線(5)是將H-FABP單克隆抗體1使用檸檬酸鹽或蔗糖 稀釋液稀釋，劃線于所述硝酸纖維素膜(3)上;質控線(6)是將兔IgG抗體使用檸檬酸鹽或蔗 糖稀釋液稀釋，劃線與所述硝酸纖維素膜(3)上。將劃好的硝酸纖維素膜置于真空干燥箱， 在37~45°C下，烘干24~48小時。檢測線(5)位于質控線(6)左側，即液體首先接觸的位置； (2) 試紙條的組裝:試紙條底板（1)由左到右依次粘附Fusion5(2)、硝酸纖維素膜(3)、 吸水紙⑷。將組裝好的大板切成小條，即得到所述快速定量檢測H-FABP的時間分辨熒光免 疫層析試紙條。9. 根據權利要求8所述的快速定量檢測H-FABP的時間分辨熒光免疫層析試劑的制備方 法，其特征在于:所述的檸檬酸鹽或蔗糖稀釋液中檸檬酸鹽或蔗糖占5-20%。
【文檔編號】G01N33/68GK105891508SQ201610223375
【公開日】2016年8月24日
【申請日】2016年4月12日
【發明人】朱傳增, 石曉強, 朱奇朗, 安永君, 張蕾
【申請人】上海奧普生物醫藥有限公司