超高效液相色譜檢測凍干血栓通的方法
【技術領域】
[0001]本發明提供一種測定血栓通的方法，具體地說，是超高效液相色譜檢測凍干血栓通的方法;屬于化學檢測技術領域。
【背景技術】
[0002]注射用血栓通(凍干)是用三七總皂苷，加注射用水，灌裝，冷凍干燥，制成的制劑，收載于國家藥品監督管理局標準(試行)WS-10460(ZD-0460)-2002。因為世界衛生組織(WH0)、美國食品與藥物管理局(FDA)以及中國食品藥品監督管理局(SFDA)等機構已經把HPLC指紋圖譜作為一種可靠的質量控制方法。
【發明內容】
[0003]針對上述不足，本發明的目的是提供一種避免其他雜質干擾，高效省時，鑒定結果客觀準確的檢測血栓通的方法。
[0004]—種超高效液相色譜檢測凍干血栓通的方法，依次包括下述步驟:
[0005]精密稱取注射用血栓通0.5g，置1mL量瓶中，加水稀釋至刻度，0.22μπι微孔濾膜濾過，取Ιμ?注入超高效液相色譜儀，所述的色譜條件如下:
[0006]色譜柱采用以十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑，以含0.5%甲酸的水為流動相Α，乙腈為流動相B，按照的Α:Β的不同比例進行梯度洗脫;洗脫時間20分鐘，紫外檢測的檢測波長287nm，
[0007]進一步的，上述的一種超高效液相色譜檢測凍干血栓通的方法，所述的十八烷基娃燒鍵合娃膠的規格2.1mm X 50mm，1.7μηι。
[0008]進一步的，上述的一種超高效液相色譜檢測凍干血栓通的方法，所述的高效液相色譜儀為島津超高效液相色譜儀Nexera UHPLC LC-30A。
[0009]進一步的，上述的一種超高效液相色譜檢測凍干血栓通的方法，所述的洗脫梯度#^:^nT:0-lmin，l%A、99%B;l-5min，20%-80%A、80%-20%B;5-7min，30%-70%A、70%-30%B；7-15min,40%-60%A^60%-40%B；15-20min,30%-70%A^70%-30%B；20-20.1min，80%A、20%Bo
[0010]與現有技術相比，本發明提供的技術方案通過該方法可得到準確的檢測結果，避免其他雜質干擾，高效省時，鑒定結果客觀準確，可用于注射用凍干型血栓通的質量控制。
【具體實施方式】
[0011]下面結合【具體實施方式】，對本發明的權利要求做進一步的詳細說明，但不構成對本發明的任何限制，任何在本發明權利要求保護范圍所做的有限次的修改，仍在本發明的權利要求保護范圍之內。
[0012]本發明所涉及的到百分含量濃度，除特殊說明外，溶質為液體的均為體積濃度，溶質為固體的均為質量濃度。
[0013]實施例1
[0014]—種超高效液相色譜檢測凍干血栓通的方法，依次包括下述步驟:
[0015]精密稱取注射用血栓通0.5g，置1mL量瓶中，加水稀釋至刻度，0.22μπι微孔濾膜濾過，取Ιμ?注入島津超高效液相色譜儀Nexera UHPLC LC-30A，所述的色譜條件如下:
[0016]色譜柱采用以十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑(2.1mm X 50mm，1.7μπι)，柱溫35 V，以含0.5%甲酸的水為流動相Α，乙腈為流動相B，按照的Α:Β的不同比例進行梯度洗脫;洗脫時間20分鐘，紫外檢測的檢測波長287nm，
[0017]所述的洗脫梯度參數如下:0-lmin，l%A、99%B;l-5min，20%-80%A、80%-20%B；5-7min,30%-70%A^70%-30%B；7-15min,40%-60%A^60%-40%B；15-20min,30%-70%A、70%-30%B;20-20.1min，80%A、20%B。
[0018]在上述色譜條件下測定三七皂苷Rl、人參皂苷Rgl和人參皂苷Rbl對照品，并與樣品圖譜中相應色譜峰進行比較，發現樣品圖譜中保留時間及紫外光譜分別與三七皂苷R1、人參皂苷Re和人參皂苷Rbl吻合，故樣品指紋圖譜中鑒定為三七皂苷R1、人參皂苷Rgl、人參皂苷Re、人參皂苷Rbl。
[0019]為了驗證本法明提供的技術方案，取同一樣品供試液，連續進樣6次，進行精密度實驗，圖譜中共有峰的相對保留時間的相對標準差(RSD)分別為0.43 %、0.27 %、0.61 %、
0.21%、0.54%、0.20%、0.23%、0.28%、0.25%、0.19%、0.25%、0.19%。表明方法精密度較好。
[0020]取同一樣品供試液，于2、4、8、12h進樣，測定3次，指紋圖譜中共有峰的相對峰面積的相對標準差(1^0)分別為1.02%、1.07%、1.35%、1.34%、1.14%、1.57%、1.51%、1.12%、1.43%、1.28%、1.21%、1.30%，表明供試液在2411內穩定。
【主權項】
1.一種超高效液相色譜檢測凍干血栓通的方法，其特征在于，依次包括下述步驟: 精密稱取注射用血栓通0.5g，置1mL量瓶中，加水稀釋至刻度，0.22μπι微孔濾膜濾過，取Ιμ?注入超高效液相色譜儀，所述的色譜條件如下: 色譜柱采用以十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑，以含0.5%甲酸的水為流動相Α，乙腈為流動相B，按照的Α:Β的不同比例進行梯度洗脫;洗脫時間20分鐘，紫外檢測的檢測波長287nm02.根據權利要求1所述的一種超高效液相色譜檢測凍干血栓通的方法，其特征在于，所述的十八烷基硅烷鍵合硅膠的規格2.1mm X 50mm，1.7μπι。3.根據權利要求1所述的一種超高效液相色譜檢測凍干血栓通的方法，其特征在于，所述的高效液相色譜儀為島津超高效液相色譜儀Nexera UHPLC LC-30A。4.根據權利要求1所述的一種超高效液相色譜檢測凍干血栓通的方法，其特征在于，所述的洗脫梯度參數如下:0-lmin，l%A、99%B;l-5min，20%-80%A、80%-20%B;5-7min，30%-70%A^70%-30%B；7-15min,40%-60%A^60%-40%B；15-20min,30%-70%A^70%-30%B;20-20.1min，80%A、20%B。
【專利摘要】本發明提供了一種超高效液相色譜檢測凍干血栓通的方法，旨在提供一種避免其他雜質干擾，高效省時，鑒定結果客觀準確的檢測血栓通的方法；該方法依次包括下述步驟：精密稱取注射用血栓通0.5g，置l0mL量瓶中，加水稀釋至刻度，0.22μm微孔濾膜濾過，取1μl注入超高效液相色譜儀，所述的色譜條件如下：色譜柱采用以十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑，以含0.5％甲酸的水為流動相A，乙腈為流動相B，按照的A∶B的不同比例進行梯度洗脫；洗脫時間20分鐘，紫外檢測的檢測波長287nm；屬于化學檢測技術領域。
【IPC分類】G01N30/02
【公開號】CN105675769
【申請號】CN201610259518
【發明人】陳學松, 林冬杰, 李亞, 梁慧敏, 李澄
【申請人】廣西壯族自治區梧州食品藥品檢驗所
【公開日】2016年6月15日
【申請日】2016年4月25日