一種2-氨基丁醇對映異構體的hplc分離檢測方法
【技術領域】
[0001 ]本發明屬于藥物分析技術領域，具體涉及一種2-氨基丁醇對映異構體的HPLC分離 檢測方法。
【背景技術】
[0002] 右蘭索拉唑，化學名為：（R)-2_[ [3-甲基-4-(2,2，2_三氟乙氧基)吡啶-2-基]甲基 亞磺酰基]-1H-苯并咪唑，分子式:C16H14F3N30 2S，其化學結構如下式所示：
右蘭索拉唑為質子栗抑制劑，該藥是蘭索拉唑的對映體，又被稱為右旋蘭索拉唑，用于 非糜爛性胃食管反流病引起的胃灼熱，糜爛性食管炎治療和治愈后糜爛性食管炎的維持治 療。由日本武田制藥公司研發，于2009年1月30日獲得美國FDA批準上市。2010年在加拿大上 市。具有不受飲食影響、每日服藥一次且晝夜均可保持較高的抑酸水平、藥物相互作用少、 用藥方便且病人依從性良好等優點，使得該藥物在藥品市場銷售快速增長，目前在中國藥 品市場也算是重碌級品種。
[0003] 從右蘭索拉唑的結構式中可以看出右蘭索拉唑有一個手性中心，該手性中心是由 (R)-2_氨基丁醇引入的，如果(R)-2_氨基丁醇的光學純度較低，則會存在另一個異構體，這 樣就會生成蘭索拉唑，而蘭索拉唑的藥效及毒副作用均沒有右蘭索拉唑好，所以（R)-2-氨 基丁醇的光學純度直接影響著右蘭索拉唑的光學純度也就影響著右蘭索拉唑治療食管炎 的療效。雖然該藥品上市時間較短，但由于其用藥方便且病人依從性良好等優點引發了對 這種新藥的大量需求，從而導致對右蘭索拉唑手性源(R)-2-氨基丁醇的大量需求。因此制 備高標準、高光學純度的(R)-2_氨基丁醇，對于合成新藥右蘭索拉唑具有重要的意義。
[0004] 馮桂春等(CN101024617 A)，葉菲等(CN101863779 A)，臧力等(廣州化工)通過測 定比旋光度值進行手性純度的分析。通過比旋光度值來測定手性純度，誤差較大。
[0005] 2-氨基丁醇沒有具有紫外吸收的官能團，所以不能直接用高效液相色譜與紫外聯 用來檢測其含量以及對映異構體的分離，如何準確控制其手性純度一直困擾業內人員的一 大難題。
[0006] 通過與帶紫外吸收的手性試劑進行快速雙衍生化，得到既有紫外吸收又形成三個 手性基團的衍生物，既能在紫外檢測器下檢測，又能直接通過反相高效液相進行異構體的 分離檢測。
[0007]
【發明內容】
[0008] 本發明的目的在于克服現有技術的缺陷，提供一種2-氨基丁醇對映異構體的分離 檢測方法，可以快捷準確的實現定性、定量和對映體過量率分析。
[0009] 為了實現上述目的，本發明采取的技術方案如下： 一種2-氨基丁醇對映異構體的分離檢測方法，具體包含如下步驟： 步驟一、衍生化 將2-氨基丁醇溶于有機溶劑中，在一定的溫度條件下，以(R)-( + )_l-苯基乙磺酰氯為 衍生化試劑，控制2-氨基丁醇和(R)-( + )-1-苯基乙磺酰氯的摩爾比，進行雙衍生化反應，得 到衍生化化后的2-氨基丁醇，反應式見式I: 式I
步驟二、分離檢測 采用反相高效液相色譜-紫外檢測器對衍生化后的2-氨基丁醇進行定性、定量和對映 體過量率測定。
[0010]所述的有機溶劑選自四氫呋喃、四氯化碳、二氯甲烷、1，2_二氯乙烷和石油醚中的 一種或兩種以上的組合。
[0011] 所述的有機溶劑與2-氨基丁醇的體積比為1~300:1，優選的為5~30:1。
[0012] 所述的一定溫度是指從0°C到回流溫度，優選為20~35°C。
[0013] 本發明的回流溫度具體數值與有機溶劑的選擇有關，本領域技術人員可以根據溶 劑的選擇清楚的確定回流溫度的范圍。
[0014] 所述的2-氨基丁醇和(R)-( + )-1-苯基乙磺酰氯的摩爾比為1:2~20。
[0015] 所述的紫外檢測器的檢測波長為210~300nm，優選230~270nm。
[0016]所述的反相高效液相色譜使用的色譜柱是普通反相柱。優選色譜柱為反相C18柱， 最優選的為迪馬反相C18柱(250X4.6mm，5ym，pH范圍2.0~8.0)。
[0017 ]所述的反相高效液相色譜的流動相由緩沖鹽的水液和有機溶劑組成，有機溶劑選 自甲醇、乙醇、異丙醇和乙腈中的一種或兩種；有機溶劑占流動相的體積比例范圍為50%~ 100%〇
[0018] 所述的流動相中緩沖鹽為碳酸氫鈉、磷酸二氫鉀、磷酸氫二鈉、檸檬酸鉀和醋酸 鈉，優選為50mmol/L醋酸鈉和30mmol/L三乙胺水溶液。
[0019] 所述的流動相的流速為0.2~3. Oml/min，優選流速為1. OmL/min。
[0020] 本發明中，反相高效液相色譜分析條件優選為：紫外檢測波長為254nm，柱溫為30 °C，流動相70%甲醇-30%( 50mmol/L醋酸鈉)水溶液，pH值為3.5，流速為1. OmL/min，進樣體積 為20yL。
[0021 ]與現有技術相比，本發明所取得的有益效果如下： 本發明采用衍生化的方法，使2-氨基丁醇和過量的衍生化試劑(R)-( + )_l-苯基乙磺酰 氯反應生成2-氨基丁醇的衍生物，通過高效液相色譜-紫外檢測器聯用，C18色譜柱能夠有 效的分離測定2-氨基丁醇及其對映異構體。本發明解決了 2-氨基丁醇沒有紫外吸收且使用 手性色譜柱較昂貴的問題，從而保證了用高效、高靈敏度的高效液相色譜方法使得2-氨基 丁醇及其對映異構體的分離。
【附圖說明】
[0022]圖l:(R)-( + )-1-苯基乙磺酰氯與(RS)-2_氨基丁醇衍生化后色譜圖； 在附圖中：1為00-( + )-1-苯基乙磺酰氯與00-2-氨基丁醇的衍生物;2為(R)-( + )_l-苯基乙磺酰氯和(S) -2-氨基丁醇的衍生物。
【具體實施方式】
[0023]以下結合附圖對本發明進行進一步詳細的敘述。
[0024] 實施例1: (R)-( + )-1-苯基乙磺酰氯與2-氨基丁醇衍生物的液相色譜分析 l-l:(R)-( + )-1-苯基乙磺酰氯與(RS)-2_氨基丁醇衍生物的液相色譜分析 稱取(RS)-2-氨基丁醇5.15g(0.05mol)，溶于60mL四氯化碳中，在40°C下磁力攪拌，緩 慢滴加(R)-( + )_l-苯基乙磺酰氯40.93g(0.20mol) JLC監測反應，反應結束后用減壓真空 栗蒸干溶劑得(RS)-2-氨基丁醇和(R)-( + )-1-苯基乙磺酰氯的衍生物。
[0025] 將(RS)-2_氨基丁醇和(R)-( + )_l-苯基乙磺酰氯的衍生物用流動相溶解后采用高 效液相色譜進行檢測分析。液相色譜條件:迪馬C18色譜柱，流動相為甲醇-50mmol/L醋酸鈉 水溶液(體積比為70:30)，pH值為3.5，紫外檢測波長為254nm，流速為1. OmL/min，柱溫為30 °C，進樣體積20yL，測得手性e.e.%值為0.22。保留時間和峰面積分析見表1，其圖譜見圖1。
[0026] 表 1
不整^^臾哪錄^勻安卩整」酔啊」土似日'巴1首方機 (R)-( + )-1-苯基乙磺酰氯與(S)-2-氨基丁醇衍生物的液相色譜分析 稱取(S)-2-氨基丁醇5.15g(0.05mol)，溶于60mL四氯化碳中，在40°C下磁力攪拌，緩慢 滴加(R)-( + )_l-苯基乙磺酰氯40.93g(0.20mol) JLC監測反應，反應結束后用減壓真空栗 蒸干溶劑得(S)-2-氨基丁醇和(R)-( + )-1-苯基乙磺酰氯的衍生物。
[0027] 將（S) _2_氨基丁醇和(R )-( + )-1-苯基乙橫酰氯的衍生物用流動相溶解后米用尚 效液相色譜進行檢測分析。液相色譜條件:迪馬C18色譜柱，流動相為甲醇-50mmol/L醋酸鈉 水溶液(體積比為70:30)，pH值為3.5，紫外檢測波長為254nm，流速為1. OmL/min，柱溫為30 °C，進樣體積20yL，測得手性e. e. %值為99.7。
[0028] l-3:(R)-( + )_l-苯基乙磺酰氯與(R)-2_氨基丁醇的衍生物的液相色譜分析 稱取(R)-2-氨基丁醇5.15g(0.05mol)，溶于60mL四氯化碳中，在40°C下磁力攪拌，緩慢 滴加(R)-( + )_l-苯基乙磺酰氯40.93g(0.20mol) JLC監測反應，反應結束后用減壓真空栗 蒸干溶劑得(R)-2-氨基丁醇和(R)-(+)_l-苯基乙磺酰氯的衍生物。
[0029] 將(R)-2_氨基丁醇和(R)-( + )_l-苯基乙磺酰氯的衍生物用流動相溶解后采用高 效液相色譜進行檢測分析。液相色譜條件:迪馬C18色譜柱，流動相為甲醇-50mmol/L醋酸鈉 水溶液(體積比為70:30)，pH值為3.5，紫外檢測波長為254nm，流速為1. OmL/min，柱溫為30 °C，進樣體積20yL，測得手性e. e. %值為99.6。
[0030] 實施例2:(RS)-2_氨基丁醇和(R)-( + )_l-苯基乙磺酰氯的衍生化條件考察試驗 2-1:取(RS)-2-氨基丁醇5.15g(0.05mol)，溶于50mL乙酸乙酯中，在30°C下磁力攪拌， 緩慢加入(R)-(+)_l-苯基乙磺酰氯30.7(^(0.15111〇1)。孔(：監測反應，反應結束后用減壓真 空栗蒸干溶劑得(R)-2_氨基丁醇和(RS)-(+)-1-苯基乙磺酰氯的衍生物。
[0031] 將(RS)-2_氨基丁醇和(R)-( + )_l-苯基乙磺酰氯的衍生物用流動相溶解后采用高 效液相色譜進行檢測分析。液相色譜條件:迪馬C18色譜柱，流動相為甲醇-50mmol/L醋酸鈉 水溶液(體積比為70:30)，pH值為3.5，紫外檢測波長為254nm，流速為1. OmL/min，柱溫為30 °C，進樣體積20yL，色譜圖同實施例1 -1。
[0032]:取(RS)-2-氨基丁醇5.15g(0.05mol)，溶于60mL二氯甲燒中，在30°C下磁力攪拌， 緩慢加入(R)-(+)_l-苯基乙磺酰氯20.478(0.1111〇1)。11(：監測反應，反應結束后用減壓真空 栗蒸干溶劑得(RS)-2-氨基丁醇和(R)-(+)-1-苯基乙磺酰氯的衍生物。
[0033]將(RS)-2_氨基丁醇和(R)-( + )_l-苯基乙磺酰氯的衍生物用流動相溶解后采用高 效液相色譜進行檢測分析。液相色譜條件:迪馬C18色譜柱，流動相為甲醇-50mmol/L醋酸鈉 水溶液(體積比為70:30)，pH值為3.5，紫外檢測波長為254nm，流速為1. OmL/min，柱溫為30 °C，進樣體積20yL，色譜圖同實施例1 -1。
[0034]:取(RS)-2-氨基丁醇5.15g(0.05mol)，溶于200mL石油醚中，35°C下磁力攪拌，緩 慢加入(R)-( + )_