一種穩定性強的肌酐苦味酸法檢測試劑盒的制作方法
【技術領域】
[0001] 本發明設及一種穩定性強的肌酢苦味酸法檢測試劑盒，屬于臨床體外檢測技術領 域。
【背景技術】
[0002] 肌酢（creatinine,Cre)是肌肉在人體內代謝的產物，豐要由腎小球濾過排出體 夕F。當急、慢性腎小球腎炎等使腎小球濾過功能減退時，肌酢會在體內蓄巧使血清肌醉的濃 度升高。檢測血清肌酢值升高時，表明腎臟代謝廢物的能力下降，對臨床檢測腎功能障礙患 者有極其重要的意義。
[0003] 肌酢的檢測方法主要分為2種，苦味酸法和酶法。苦味酸法雖然沒有酶法檢測的 精度高、線性范圍廣，但其檢測結果不影響臨床檢驗判斷、檢測成本比酶法低70%等優點， 使其在中小型醫院仍是檢測肌酢的首選方法。
[0004] 目前，苦味酸法檢測肌酢的準確度已經達到臨床檢測的要求，但試劑的穩定性仍 然需要改進。其主要原因是由于R1的強堿體系不能夠持續。在開瓶實驗中，氨氧化鋼能夠 自發的吸收空氣中的二氧化碳，從而降低了體系的PH值，使測得的結果降低，影響了臨床 檢測判斷。
【發明內容】
[0005] 為解決現有技術中存在的問題，本發明提供了一種穩定性強的肌酢苦味酸檢測試 劑盒。
[0006] 本發明采用W下技術方案： 本發明的有益效果是： 1)本發明選擇使用了液體石蠟作為R1的液面保護劑，液體石蠟保證了R1中的氨氧化 鋼不能夠與空氣中的二氧化碳反應，提高了試劑的穩定性。
[0007] 2)本發明試劑中添加了曲拉通-100,使液體石蠟能夠均勻平展的覆蓋在R1的表 面，使石蠟分布的更均勻。
[0008] 3)本發明中選取了新型的表面活性劑-壬基酪聚氧乙締醜，有效的控制了反應的 進度，從而保證了檢測結果的準確性。
【附圖說明】
[0009] 圖1是本發明實施例1-3與對照組7天37°C熱穩定性試驗結果圖； 圖2是本發明實施例1-3與對照組15天試劑開瓶穩定性試驗結果圖。
【具體實施方式】
[0010] 下面結合具體實施例對本發明做進一步的詳細說明。
[0011] 實施例1 一種穩定性強的肌酢苦味酸法檢測試劑盒，所述試劑包括： R1 :氨氧化鋼 0. 32mol/L 碳酸鋼 0. 15mol/L 疊氮鋼 0. 5g/L 液體石蠟 100y1/L 曲拉通 100y1/L 將PH值調為13. 5; R2 :苦味酸 0. 04mol/L 王基驗塞氧乙締酸 0. 2g/L 將PH值調為5. 5。
[0012] 將上述各組分依次溶于1L蒸饋水中制備完成R1、R2。
[001引 實施例2 一種穩定性強的肌酢苦味酸法檢測試劑盒，所述試劑包括： R1 :氨氧化鋼 0. 32mol/L 碳酸鋼 0. 15mol/L 疊氮鋼 0. 5g/L 曲拉通 100y1/L 將PH值調為13. 5; R2 :苦味酸 0. 04mol/L 王基驗塞氧乙締酸 0. 2g/L 將PH值調為5. 5。
[0014] 將上述各組分依次溶于1L蒸饋水中制備完成。
[001引實施例3 一種穩定性強的肌酢苦味酸法檢測試劑盒，所述試劑包括： R1 :氨氧化鋼 0. 32mol/L 疊氮鋼 0. 5g/L 曲拉通 100y1/L 將PH值調為13. 5 ; R2 :苦味酸 0. 04mol/L 王基驗塞氧乙締酸 0. 2g/L 將PH值調為5. 5。
[0016] 將上述組分依次溶于1L蒸饋水中制備完成。
[0017] 將本發明實施例1-3所制得的試劑進行穩定性試驗驗證。試驗分為15天開瓶穩 定性驗證和7天37 °C熱穩定性驗證試驗。
[0018] 試驗所用校準品和質控品分別為： 校準品：朗道復合標準（909UN)，其中CREA的含量為135ymol/L。
[0019] 質控品：朗道復合質控（950UN)其中CREA的祀值為121ymol/L，祀值范圍： 96.7-145ymol/L。
[0020] 試劑穩定性驗證試驗的具體操作方法： 將本發明實施例1-3中所得檢測試劑作為試驗組，取一種市售肌酢苦味酸法檢測試劑 盒（品牌：寧波美康，產品編號：H305)作為對照組，試驗組與對照組試劑每組各自取相同的 兩份，一份做15天開瓶穩定性試驗，將試劑開瓶放置在儀器的2-8°C冷藏箱中（15天不取 出)，作為巧天開瓶穩定性檢測；另一份做37〇C熱穩定性檢測試驗，封閉放置在37〇C恒溫水 浴鍋中（每天僅在檢測的時候取出，檢測完畢后，依然封口放回37°C水浴鍋中，連續7天)， 作為7天37°C熱穩定性驗證。將試劑同時在東芝-120全自動生化分析儀器上，按照如下 表1方法進行檢測，并在儀器上建立標準曲線。取朗道的凍干粉質控品，溶解均勻后，各自 平均分成15份，-2(TC儲存，每天取值質控各取一個，并且跟蹤檢測結果，其跟蹤監測趨勢 如附圖1和附圖2。
首先在主波長505nm/輔助波長600皿下，讀取試劑R2加入后20s時的吸光度值A1，再 讀取R2加入后80s時的吸光度A2。計算肌酢的含量為： 肌酢的含量（ymol/L) = (AA測定/min~^AA標準/min)XC標準。
[002引通過附圖1和附圖2的比較可W看出，該試劑主要受開瓶的影響，而試劑的抗熱穩 定性較強。試劑R1中加入碳酸鋼和液體石蠟后會明顯使試劑的穩定性提高且新發明的試 劑優于一般市場上現有的產品，有利于臨床推廣使用。運主要是由于本發明試劑中所加入 的液體石蠟起到了隔離空氣中二氧化碳的作用，另外試劑中也加入了碳酸鋼，使碳酸根離 子的濃度處于飽和狀態，運使試劑不能再吸收空氣中的二氧化碳。另外從附圖2中還可W 得到，液體石蠟在保持試劑的開瓶穩定性中起了關鍵作用。
【主權項】
1. 一種穩定性強的肌酐苦味酸法檢測試劑盒，由RU R2雙試劑組成 其特征在于： Rl :氫氧化鈉 0? 32 mol/L 碳酸鈉 0? 15 mol/L 疊氮鈉 0. 5 g/L 液體石錯 100 y 1/L 曲拉通 100 y 1/L 將PH值調為13. 25 ; R2 :苦味酸 0? 04 mol/L 千基酚聚氣乙燔醚 〇? 2 g/L 將PH值調為5. 5。2. 根據權利要求1所述的試劑盒，其特征在于，所述試劑Rl和試劑R2在使用時的比例 為 Rl:R2 = 200 :100。
【專利摘要】本發明涉及一種穩定性強的肌酐苦味酸法檢測試劑盒，屬于臨床體外檢測技術領域。此肌酐苦味酸法檢測試劑盒，由R1、R2雙試劑組成。R1為：氫氧化鈉0.32mol/L，碳酸鈉0.15mol/L，疊氮鈉0.5g/L，液體石蠟100μl/L，曲拉通100μl/L，混勻后PH值調為13.25；R2為：苦味酸0.04mol/L，壬基酚聚氧乙烯醚0.2g/L，混勻后PH值調為5.5。本發明使用液體石蠟作為R1液面保護劑，提高試劑穩定性。試劑中添加曲拉通-100，使液體石蠟能均勻覆蓋在R1表面，分布更均勻。選取新型表面活性劑-壬基酚聚氧乙烯醚，有效控制反應進度，保證檢測結果準確性。
【IPC分類】G01N21/31
【公開號】CN105115915
【申請號】CN201510426300
【發明人】甘宜梧, 趙民, 謝清華, 譚柏清, 趙新
【申請人】山東博科生物產業有限公司
【公開日】2015年12月2日
【申請日】2015年7月20日