一種環丙唑醇殘留的gc-npd方法及其應用
【技術領域】
[0001] 本發明涉及一種檢測方法，具體涉及一種環丙唑醇殘留的GC-Nro方法及其應用。
【背景技術】
[0002] 環丙唑醇化學名稱為2-(4-氯苯基）-3-環丙基-1-(1H-1，2,4-三唑-1-基） 丁-2-醇，是瑞士先正達公司1987年研制開發的一種新的具有治療和內吸作用的三唑類殺 菌劑，通過抑制細菌體內留醇的生物合成而起作用。國內外文獻關于環丙唑醇的殘留檢測 方法的報道主要有：Papadopoulou-Mourkidou等通過丙酮提取、C18柱凈化、正己燒定容， 氣相色譜-氮磷檢測器檢測，最低檢測濃度為0. 05mg ? kg'研宄了葡萄中環丙唑醇的檢測 方法;Miyauchi等通過甲醇提取、Oasis MCX固相萃取小柱凈化、乙腈-磷酸鹽緩沖液定容， 液相色譜-二極管陣列檢測器檢測，研宄了木材中環丙唑醇的檢測方法Jim6nez等通過甲 醇和水提取，Lichrolut EN固相萃取柱凈化，氣相色譜-電子轟擊離子源質譜法檢測，研 宄了葡萄酒中環丙唑醇的檢測方法；Momohara等通過甲醇提取，DISMIC-25HP濾膜過濾，丙 酮-正己烷（1 : 1)溶液定容，氣相色譜-電子轟擊離子源質譜法檢測，研宄了木材中環丙 唑醇的檢測方法。
[0003] 環丙唑醇對小麥根腐病、白粉病具有較好的防治效果，但是沒有關于其在小麥粒、 小麥植株和其生長土壤中的檢測方法的報道，且以上方法的提取液是甲醇或丙酮，丙酮提 取時用量較大、雜質多，不利于后期凈化；甲醇提取時需要旋蒸，工作效率低，氣相色譜-電 子轟擊離子源質譜儀沒有氣相色譜普及率高。
【發明內容】
[0004] 為解決上述問題，本發明提供了一種環丙唑醇殘留的GC-Nro方法及其應用，用于 分析小麥粒、小麥植株及土壤中環丙唑醇殘留，精確度高。
[0005] 為實現上述目的，本發明采取的技術方案為：
[0006] 一種環丙唑醇殘留的GC-NPD方法，包括如下步驟：
[0007] S1、稱取樣品5-10g于200ml玻璃瓶中，加10ml水及40-50ml乙腈，充分混勻后， 超聲30min，然后用濾紙過濾至加有5g氯化鈉的具塞量筒中，劇烈振蕩lmin，靜置lh后取 20mL上清液于100ml燒杯中，置于35 °C加熱板上蒸干；
[0008] S2、將弗羅里硅土柱用5mL正己烷潤洗，當溶劑液面達到柱吸附層表面時，用5mL 丙酮-正己烷（體積比10 : 90)溶解步驟S1所得的樣品，過柱淋洗，重復2次，淋洗液棄 去，用5mL丙酮-正己烷（體積比20 : 80)洗脫液淋洗弗羅里硅土柱，重復5次，合并洗脫 液，置于電加熱板上35°C揮發近干，正己烷準確定容至2mL，0. 22 y m濾膜過濾，待測；
[0009] S3、將樣品倒入進樣瓶中，置于自動進樣器中；
[0010] S4、按照以下儀器條件設置儀器參數進行進樣，柱溫：150 250°C， 5min ;進樣口溫度：260°C;檢測器溫度：300°C;柱流量：氫氣2. 3mL 空氣60mL ?mirT1， 氮氣2mL ? mirT1;進樣量1 y L(不分流）；
[0011] S5、采集色譜峰面積，用外標法（峰面積）-標準曲線法對樣品中環丙唑醇的殘留 量進行定量，計算公式為：
[0013] 式中：C-待測樣品中農藥殘留量，mg/Kg ;
[0014] Qr標準溶液濃度，y g/ml ;
[0015] A-待測樣品峰面積；
[0016] Af標準溶液峰面積；
[0017] V。-標準溶液進樣體積，y 1 ;
[0018] -待測樣品定容的體積，ml ;
[0019] V2-待測樣品的進樣體積，y 1 ;
[0020] M-待測樣品的質量，g。
[0021] 其中，所述氮氣作為載氣，純度多99. 999%
[0022] 本發明具有以下有益效果：
[0023] 本發明建立了乙腈提取土壤、小麥植株及小麥籽粒中環丙唑醇的前處理方法和氣 相色譜儀-氮磷檢測器檢測的儀器方法，最小檢出量為8.2 X l(T12g，空白添加平均回收率 為79. 2 % -95. 6 %，相對標準偏差為1. 9 % -10. 0 %，最低檢測濃度均為0. 05mg/kg。本方法 以50mL乙腈作為提取液，與已報道的丙酮作為提取液相比用量較少，后期凈化較簡單；與 甲醇作為提取液相比，提取、鹽析后，加熱板蒸干，不需要旋蒸，能提高工作效率；檢測所用 的儀器普及率較高，方法易推廣應用。方法的重現性，準確度、精密度及檢出限均可滿足該 農藥在小麥上的殘留分析要求。
【附圖說明】
[0024] 圖1為本發明實施例中標準曲線的示意圖。
【具體實施方式】
[0025] 為了使本發明的目的及優點更加清楚明白，以下結合實施例對本發明進行進一步 詳細說明。應當理解，此處所描述的具體實施例僅僅用以解釋本發明，并不用于限定本發 明。
[0026] 以下實施例中，所使用的試劑為：乙腈（分析純），正己烷（分析純），丙酮（分析 純及色譜純），氯化鈉（分析純，140°C烘烤4h)。弗羅里硅土固相萃取柱（lOOOmg，6mL)。 [00 27] 實施例1
[0028] 土壤：稱取樣品10. 0g于200ml玻璃瓶中，加10ml水及40ml乙腈，充分混勾后， 超聲30min，然后用濾紙過濾至加有5g氯化鈉的具塞量筒中，劇烈振蕩lmin，靜置lh后取 20mL上清液于100ml燒杯中，置于35°C加熱板上蒸干。
[0029] 實施例2
[0030] 植株：稱取樣品5. 0g于200ml玻璃瓶中，加10ml水及50ml乙腈，充分混勻后，超 聲30min，用濾紙過濾至加有5g氯化鈉的具塞量筒中，劇烈振蕩lmin，靜置lh后取25mL上 清液于100ml燒杯中，置于35°C加熱板上蒸干。
[0031] 實施例3
[0032] 小麥籽粒：將籽粒打碎成粉，稱取樣品10. 0g于200ml玻璃瓶中，加10ml水及40ml 乙腈，充分混勾后，超聲30min，用濾紙過濾至加有5g氯化鈉的具塞量筒中，劇烈振蕩lmin， 靜置lh后取15mL上清液于100ml燒杯中，置于35°C加熱板上蒸干。
[0033] 將弗羅里硅土柱用5mL正己烷潤洗，當溶劑液面達到柱吸附層表面時，5mL丙 酮-正己烷（體積比10 : 90)溶解上述實施例1-實施例3所處理樣品，過柱淋洗，重復2 次，淋洗液棄去，用5mL丙酮-正己烷（體積比20 : 80)洗脫液淋洗弗羅里硅土柱，重復 5次，合并洗脫液，置于電加熱板上35°C揮發近干，正己烷準確定容至2mL，0. 22 y m濾膜過 濾，待測。
[0034] 稱取一定量的環丙唑醇標準品，用正己烷溶解定容制成1000mg/L的母液，再逐級 稀釋為〇? 〇5mg/L、0.1 mg/L、0. 5mg/L、l. 0mg/L、2mg/L的標準溶液，以進樣量（ng)-峰面積 (A)作標準曲線，回歸方程為y= 266482X+2296. 7,R2= 0.9997,見圖1。
[0035] 在小麥植株、土壤、籽粒的空白對照樣品中添加不同濃度的環丙唑醇標準溶液，搖 勻，放置2h后按照樣品提取、凈化方法處理，測得添加回收率見表1。當添加水平為0. 05mg/ 1^、0.111^/1^、0.211^/1^時，測得土壤的平均回收率為79.24%~91.33%，相對標準偏差 為1. 86 %~5. 51% ;植株的平均回收率為84. 82 %~95. 60%，相對標準偏差為4. 09 %~ 5. 11% ;籽粒的平均回收率為86. 68%~91. 97%，相對標準偏差為6. 85%~9. 96%，符合 殘留分析要求。
[0036] 表1小麥植株、土壤、籽粒的空白對照樣品中添加不同濃度的環丙唑醇標準溶液 后所測得的添加回收率。
[0038] 綜上所述，本具體實施建立了乙腈提取土壤、小麥植株及小麥籽粒中環丙唑醇的 前處理方法和氣相色譜儀-氮磷檢測器檢測的儀器方法，最小檢出量為8. 2 X l(T12g，空白 添加平均回收率為79. 2% -95. 6%，相對標準偏差為1.9% -10.0%，最低檢測濃度均為 0. 05mg/kg。本方法以50mL乙腈作為提取液，與已報道的丙酮作為提取液相比用量較少，后 期凈化較簡單；與甲醇作為提取液相比，提取、鹽析后，加熱板蒸干，不需要旋蒸，能提高工 作效率；檢測所用的儀器普及率較高，方法易推廣應用。方法的重現性，準確度、精密度及檢 出限均可滿足該農藥在小麥上的殘留分析要求。
[0039] 以上所述僅是本發明的優選實施方式，應當指出，對于本技術領域的普通技術人 員來說，在不脫離本發明原理的前提下，還可以作出若干改進和潤飾，這些改進和潤飾也應 視為本發明的保護范圍。
【主權項】
1. 一種環丙挫醇殘留的GC-NTO方法，其特征在于，包括如下步驟： 51、 稱取樣品5-lOg于200ml玻璃瓶中，加10ml水及40-50ml己膳，充分混勻后，超聲 30min，然后用濾紙過濾至加有5g氯化鋼的具塞量筒中，劇烈振蕩Imin，靜置比后取20mL 上清液于100ml燒杯中，置于35 °C加熱板上蒸干； 52、 將弗羅里娃±柱用5血正己燒潤洗，當溶劑液面達到柱吸附層表面時，用5血丙 酬-正己燒溶解步驟S1所得的樣品，過柱淋洗，重復2次，淋洗液棄去，用5mL丙酬-正己 燒洗脫液淋洗弗羅里娃±柱，重復5次，合并洗脫液，置于電加熱板上35°C揮發近干，正己 燒準確定容至2mL，0. 22ym濾膜過濾，待測； 53、 將樣品倒入進樣瓶中，置于自動進樣器中； 54、 按照W下儀器條件設置儀器參數進行進樣，柱溫；15(TC^"^25(TC，5min;進樣 口溫度；260°C;檢測器溫度；300°C;柱流量：氨氣2. 3血?min-i，空氣60血?min-i，氮氣 2mL? 進樣量1化； 55、 采集色譜峰面積，用外標法-標準曲線法對樣品中環丙挫醇的殘留量進行定量，計 算公式為：式中；C-待測樣品中農藥殘留量，mg/kg; C。-標準溶液濃度，μg/ml; A-待測樣品峰面積； A。-標準溶液峰面積； V。-標準溶液進樣體積，; Vi-待測樣品定容的體積，ml; V2-待測樣品的進樣體積，yi; M-待測樣品的質量，g。2. 根據權利要求1所述的一種環丙挫醇殘留的GC-NTO方法，其特征在于，所述氮氣作 為載氣，純度> 99. 999%。
【專利摘要】本發明公開了一種環丙唑醇殘留的GC-NPD方法，包括如下步驟：樣品提取精華后倒入進樣瓶中，并置于自動進樣器中；按照規定的儀器條件設置儀器參數進行進樣，采集色譜峰面積，用外標法-標準曲線法對樣品中環丙唑醇的殘留量進行定量。本發明建立了乙腈提取土壤、小麥植株及小麥籽粒中環丙唑醇的前處理方法和氣相色譜儀-氮磷檢測器檢測的儀器方法，最小檢出量為8.2×10-12g，空白添加平均回收率為79.2％-95.6％，相對標準偏差為1.9％-10.0％，最低檢測濃度均為0.05mg/kg，后期凈化較簡單；提取、鹽析后，加熱板蒸干，不需要旋蒸，能提高工作效率。
【IPC分類】G01N30/02
【公開號】CN104931614
【申請號】CN201510309891
【發明人】吳緒金, 張軍鋒, 馬婧瑋, 周玲, 劉丹黎, 李通, 董小海, 王鐵良, 周娟
【申請人】河南省農業科學院農業質量標準與檢測技術研究所
【公開日】2015年9月23日
【申請日】2015年6月4日