采用sle法分離飼料中的沙丁胺醇的方法
【技術領域】
[0001] 本發明涉及動物飼料的檢測領域，特別是一種采用SLE法分離飼料中的沙丁胺醇 的方法。
【背景技術】
[0002] 樣品前處理是分析檢測過程的關鍵環節，是濃縮被測定的痕量組分，提高方法的 靈敏度，及除去對分析系統有干擾的物質的重要手段。萃取是從樣品集體中分離出目標化 合物的一項技術，是樣品預處理中最重要的方法之一。目前，液液萃取仍然是應用最廣泛的 樣品制備方法之一，但是，傳統的液液萃取的操作繁瑣費時、有機溶劑消耗量大，而且容易 出現乳化現象的缺陷，使得在實際應用中具有一定的局限性。
[0003] 1998年，科學家提出了在傳統的液液萃取的基礎上，利用一種具有吸附性和較大 的比表面積的惰性多空填料作為介質，建立的一種新型高效樣品的制備方法-介質液液萃 取（supportedliquidextraction簡稱SLE)，SLE萃取技術就是選用一種多孔性惰性材 料-煅燒硅藻土作為介質，取代分液漏斗，增大了兩相接觸時的作用面積，實現高效、快速 的萃取過程。
[0004] 當水溶液樣品加樣到固定的聚丙烯注射管中的煅燒硅藻土上后，經過一定時間 (一般分為幾分鐘），水相溶液以一層薄薄的液膜形式分布在填料表面，之后，將有機溶劑 從柱管上端加入，當互不相溶的兩相在硅藻土表面接觸的同時萃取立即發生，最后萃取液 在重力作用下流出，必要情況下，可以施加較小的壓力，而水相保留在介質中。盛接的流出 液直接將溶劑吹干，復溶后，即可用于下一步分析檢測。
[0005] 現有的國標和現有公開的文獻所涉及動物飼料中的沙丁胺醇的分離方法主要為 液液萃取法（LLE)得到，分離的效率低于85%。
【發明內容】
[0006] 本發明的目的在于提供一種分離效率高、測量準確的采用SLE法分離飼料中的沙 丁胺醇的方法。
[0007] 本發明的技術方案為：一種采用SLE法分離飼料中的沙丁胺醇的方法，包括以下 步驟：
[0008] 步驟1 :取飼料樣品，加入到緩沖溶液中，經過漩渦混合器混合處理后再經過離心 處理，漩渦混合器混合處理的時間為0. 5~1. 5分鐘，取離心處理后的上清液少量；
[0009] 步驟2 :將上清液加入到SLE柱后，靜置2~4分鐘；
[0010] 步驟3 :采用二元洗脫劑對SLE柱洗脫至少兩次，接收洗脫液，得到含有沙丁胺醇 的洗脫液；
[0011] 其中，所述的緩沖溶液為：Ph范圍為6. 5~7. 0的磷酸緩沖液，所述的二元洗脫劑 為乙酸乙酯和正己烷的混合物，其中乙酸乙酯和正己烷的重量比為1:0. 5~1. 5。
[0012] 在上述的采用SLE法分離飼料中的沙丁胺醇的方法中，所述的飼料樣品為lg，緩 沖溶液為5ml，步驟2中所取的上清液為0. 5ml，所述的步驟3中，每次洗脫時所用的洗脫劑 為 0? 5ml。
[0013] 在上述的采用SLE法分離飼料中的沙丁胺醇的方法中，所述的步驟1中，所述的離 心處理的具體操作為：將經混合處理的溶液在離心機中以9000~11000轉/分鐘的速度離 心0. 5~1. 5分鐘。
[0014] 本發明的有益效果如下：
[0015] 采用SLE法分離飼料中的沙丁胺醇分離效率高，本發明的緩沖溶液能夠有效的分 離樣品中的沙丁胺醇，二元洗脫劑對沙丁胺醇有特別優異的萃取效果，可以應用于以96孔 板結構為代表的高通量體系。經過檢測，本發明的方案的萃取率為：95. 4%。
【具體實施方式】
[0016] 下面結合【具體實施方式】，對本發明的技術方案作進一步的詳細說明，但不構成對 本發明的任何限制。
[0017] 實施例1
[0018] 步驟1 :取飼料樣品lg，加入到5ml的緩沖溶液中，經過漩渦混合器混合處理處理 1分鐘后再經過離心處理，取離心處理后的上清液0. 5ml;離心處理的轉速為10000轉/分 鐘，離心時間1分鐘。所述的緩沖溶液為：ph為6. 5的磷酸緩沖液。
[0019] 步驟2 :將上清液加入到SLE柱（奧秘山東科技有限公司生產的介質液液萃取SLE 柱）后，靜置3分鐘；
[0020] 步驟3 :采用二元洗脫劑對SLE柱洗脫2次，接收洗脫液，得到含有沙丁胺醇的洗 脫液；每次消耗的洗脫劑為〇. 5ml，所述的二元洗脫劑為乙酸乙酯和正己烷的混合物，其中 乙酸乙酯和正己烷的重量比為1:1。
[0021] 實施例2
[0022] 步驟1 :取飼料樣品lg，加入到5ml的緩沖溶液中，經過漩渦混合器混合處理處理 1分鐘后再經過離心處理，取離心處理后的上清液0. 5ml;離心處理的轉速為9000轉/分 鐘，離心時間1分鐘。所述的緩沖溶液為：ph為6. 8的磷酸緩沖液。
[0023] 步驟2 :將上清液加入到SLE柱后，靜置2分鐘；
[0024] 步驟3 :采用二元洗脫劑對SLE柱洗脫2次，接收洗脫液，得到含有沙丁胺醇的洗 脫液；每次消耗的洗脫劑為〇. 5ml，所述的二元洗脫劑為乙酸乙酯和正己烷的混合物，其中 乙酸乙酯和正己烷的重量比為1:0. 8。
[0025] 實施例3
[0026] 步驟1 :取飼料樣品lg，加入到5ml的緩沖溶液中，經過漩渦混合器混合處理處理 1分鐘后再經過離心處理，取離心處理后的上清液0. 5ml;離心處理的轉速為9000轉/分 鐘，離心時間1分鐘。所述的緩沖溶液為：ph為7. 0的磷酸緩沖液。
[0027] 步驟2 :將上清液加入到SLE柱后，靜置2分鐘；
[0028] 步驟3 :采用二元洗脫劑對SLE柱洗脫2次，接收洗脫液，得到含有沙丁胺醇的洗 脫液；每次消耗的洗脫劑為〇. 5ml，所述的二元洗脫劑為乙酸乙酯和正己烷的混合物，其中 乙酸乙酯和正己烷的重量比為1:1.5。
[0029] 標準樣的制備
[0030] 稱取沙丁胺醇標準品（純度彡99% )0? 1000g，置于100ml容量瓶中，用重量比為 1:1的乙酸乙酯和正己烷的混合物的溶劑溶解定容，其濃度為1000μg/ml;
[0031] 取上述濃度為1000yg/ml的沙丁胺醇溶液于100ml容量瓶中，配制成為 0? 100yg/ml、0. 200yg/ml、0. 500yg/ml、1. 000yg/ml、2. 000yg/ml的標準樣。
[0032] 對比例1
[0033] 與實施例1大體相同，不同的地方在于，步驟3中，洗脫劑為氨水與乙酸乙酯的混 合物，其制備方法為3. 5ml濃氨水加入到100ml容量瓶中，通過乙酸乙酯定容。
[0034] 分析：
[0035] 檢測方法具體為：
[0036] 儀器：LC-2010型高效液相色譜儀（日本島津）
[0037] 色譜柱：C18 柱，150mm*3. 9mmID
[0038] 柱溫：室溫
[0039] 流動相：丙酮：乙腈=100:20 ;
[0040] 檢測器：UV檢測器；
[0041]檢測波長：220nm;
[0042]進樣量：5〇yL
[0043] 以 0? 100yg/ml、0. 200yg/ml、0. 500yg/ml、1. 000yg/ml、2. 000yg/ml的標準 樣進行測試，回歸方程為Y= 982X+3. 7,R2= 0. 9998,X為待測物濃度，Y為峰面積。
[0044] 以實施例1所萃取的樣品為待測樣品，待測樣品的具體組分為70wt%玉米、 3〇wt%蛋白質伺料，其中蛋白質伺料由柏、棉柏和采柏組成，所述柏、棉柏和采柏的重 量比為4 : 1.5 : 0.5。此外，每千克待測組分中還加入有含有10mg沙丁胺醇的沙丁胺醇 溶液。
[0045] 待測樣品分為10份，每份lg，采用實施例1的步驟1所述的方法進行操作，每份樣 品平行取出2份0. 5ml的溶液，同一樣品的所取得的兩份0. 5ml的溶液為一組，共10組，每 組的溶液分別按照實施例1的步驟2-3進行操作和按照對比例1的步驟2-3進行操作。共 得到按實施例1所取得的10份洗脫液A，編號為A1-A10,和按照對比例1所取得的10份洗 脫液B，編號為B1-B10。
[0046] 按照上述檢測方法進樣檢測，得到如下的檢測結果：
[0047]
【主權項】
1. 一種采用SLE法分離飼料中的沙丁胺醇的方法，其特征在于，包括以下步驟： 步驟1 :取飼料樣品，加入到緩沖溶液中，經過漩渦混合器混合處理后再經過離心處 理，漩渦混合器混合處理的時間為0. 5~1. 5分鐘，取離心處理后的上清液少量； 步驟2 :將上清液加入到SLE柱后，靜置2~4分鐘； 步驟3 :采用二元洗脫劑對SLE柱洗脫至少兩次，接收洗脫液，得到含有沙丁胺醇的洗 脫液； 其中，所述的緩沖溶液為：Ph范圍為6. 5~7. 0的磷酸緩沖液，所述的二元洗脫劑為乙 酸乙酯和正己烷的混合物，其中乙酸乙酯和正己烷的重量比為1:0. 5~1. 5。
2. 根據權利要求1所述的采用SLE法分離飼料中的沙丁胺醇的方法，其特征在于，所述 的飼料樣品為lg，緩沖溶液為5ml，步驟2中所取的上清液為0. 5ml，所述的步驟3中，每次 洗脫時所用的洗脫劑為〇. 5ml。
3. 根據權利要求3所述的采用SLE法分離飼料中的沙丁胺醇的方法，其特征在于，所 述的步驟1中，所述的離心處理的具體操作為：將經混合處理的溶液在離心機中以9000~ 11000轉/分鐘的速度離心0. 5~1. 5分鐘。
【專利摘要】本發明公開了一種采用SLE法分離飼料中的沙丁胺醇的方法，包括以下步驟：步驟1：取飼料樣品，加入到緩沖溶液中，經過漩渦混合器混合處理后再經過離心處理，漩渦混合器混合處理的時間為0.5～1.5分鐘，取離心處理后的上清液少量；步驟2：將上清液加入到SLE柱后，靜置2～4分鐘；步驟3：采用二元洗脫劑對SLE柱洗脫至少兩次，接收洗脫液，得到含有沙丁胺醇的洗脫液。本發明的目的在于提供一種分離效率高、測量準確的采用SLE法分離飼料中的沙丁胺醇的方法。
【IPC分類】G01N30-14
【公開號】CN104820046
【申請號】CN201510238760
【發明人】陳學松, 張云平, 賴秀梅, 陳啟釗, 郭振旺
【申請人】廣西壯族自治區梧州食品藥品檢驗所
【公開日】2015年8月5日
【申請日】2015年5月12日