采用sle法同時分離飼料中的萊克多巴胺、克侖特羅、沙丁胺醇的方法
【技術領域】
[0001]本發明涉及動物組織和排泄物的檢測領域，特別是一種采用SLE法同時分離飼料中的萊克多巴胺、克侖特羅、沙丁胺醇的方法。
【背景技術】
[0002]樣品前處理是分析檢測過程的關鍵環節，是濃縮被測定的痕量組分，提高方法的靈敏度，及除去對分析系統有干擾的物質的重要手段。萃取是從樣品集體中分離出目標化合物的一項技術，是樣品預處理中最重要的方法之一。目前，液液萃取仍然是應用最廣泛的樣品制備方法之一，但是，傳統的液液萃取的操作繁瑣費時、有機溶劑消耗量大，而且容易出現乳化現象的缺陷，使得在實際應用中具有一定的局限性。
[0003]1998年，科學家提出了在傳統的液液萃取的基礎上，利用一種具有吸附性和較大的比表面積的惰性多空填料作為介質，建立的一種新型高效樣品的制備方法-介質液液萃取(supported liquid extract1n簡稱SLE)，SLE萃取技術就是選用一種多孔性惰性材料-煅燒硅藻土作為介質，取代分液漏斗，增大了兩相接觸時的作用面積，實現高效、快速的萃取過程。
[0004]當水溶液樣品加樣到固定的聚丙烯注射管中的煅燒硅藻土上后，經過一定時間(一般分為幾分鐘)，水相溶液以一層薄薄的液膜形式分布在填料表面，之后，將有機溶劑從柱管上端加入，當互不相溶的兩相在硅藻土表面接觸的同時萃取立即發生，最后萃取液在重力作用下流出，必要情況下，可以施加較小的壓力，而水相保留在介質中。盛接的流出液直接將溶劑吹干，復溶后，即可用于下一步分析檢測。
[0005]農業部1063號公告-6-2008《飼料中13種β —受體激動劑的檢測液相色譜——串聯質譜法》采用陽離子型交換柱來提取飼料中的β —受體激動劑，如何降低上述分離提取操作的用時，提高上述提取的準確度是本領域技術人員需要思考的問題。
【發明內容】
[0006]本發明的目的在于提供一種分離效率高、操作簡單的采用SLE法同時分離飼料中的萊克多巴胺、克侖特羅、沙丁胺醇的方法。
[0007]本發明的技術方案為:一種采用SLE法同時分離飼料中的萊克多巴胺、克侖特羅、沙丁胺醇的方法，包括以下步驟:
[0008]步驟1:取飼料樣品，加入到緩沖溶液中，經過漩渦混合器混合處理后再經過離心處理，取離心處理后的上清液少量；
[0009]步驟2:將上清液加入到SLE柱后，靜置2?4分鐘；
[0010]步驟3:采用三元洗脫劑對SLE柱洗脫至少兩次，接收洗脫液，得到含有萊克多巴胺、克侖特羅、沙丁胺醇的洗脫液；
[0011]其中，所述的三元洗脫劑為正丁醇、正己烷和乙酸甲酯的混合物，其中，所述的三元洗脫劑由以下重量份組成:
[0012]正丁醇2?4份；
[0013]正己烷2?4份；
[0014]乙酸甲酯2?8份；
[0015]所述的緩沖溶液為:Ph范圍為6.5?7.0的磷酸緩沖液。
[0016]在上述的采用SLE法同時分離飼料中的萊克多巴胺、克侖特羅、沙丁胺醇的方法中，所述的飼料樣品為lg，緩沖溶液為5ml，步驟2中所取的上清液為0.5ml，所述的步驟3中，每次洗脫時所用的洗脫劑為0.5ml。
[0017]在上述的采用SLE法同時分離飼料中的萊克多巴胺、克侖特羅、沙丁胺醇的方法中，所述的步驟I中，漩渦混合器混合處理的時間為0.5?1.5分鐘。
[0018]在上述的采用SLE法同時分離飼料中的萊克多巴胺、克侖特羅、沙丁胺醇的方法中，所述的步驟I中，所述的離心處理的具體操作為:將經混合處理的溶液在離心機中以12000?14000轉/分鐘的速度離心0.5?1.5分鐘。
[0019]在上述的采用SLE法同時分離飼料中的萊克多巴胺、克侖特羅、沙丁胺醇的方法中，所述的SLE柱為奧秘山東科技有限公司生產的介質液液萃取SLE柱。
[0020]本發明的有益效果如下:
[0021]采用SLE法分離飼料中的萊克多巴胺、克侖特羅、沙丁胺醇，采用三元萃取劑可以有效的提高多組分萃取對象的萃取效率。
【具體實施方式】
[0022]下面結合【具體實施方式】，對本發明的技術方案作進一步的詳細說明，但不構成對本發明的任何限制。
[0023]實施例1
[0024]步驟1:取飼料樣品lg，加入到5ml的緩沖溶液中，經過漩渦混合器混合處理處理I分鐘后再經過離心處理，取離心處理后的上清液0.5ml ;離心處理的轉速為12000轉/分鐘，離心時間I分鐘。所述的緩沖溶液為:ph為6.5的磷酸緩沖液。
[0025]步驟2:將上清液加入到SLE柱后，靜置3分鐘；
[0026]步驟3:采用三元洗脫劑對SLE柱(奧秘山東科技有限公司生產的介質液液萃取SLE柱)洗脫兩次，接收洗脫液，得到含有萊克多巴胺、克侖特羅、沙丁胺醇的洗脫液；每次消耗的洗脫劑為0.5ml。
[0027]其中，所述的三元洗脫劑為正丁醇、正己烷和乙酸甲酯的混合物，其中，所述的三元洗脫劑由以下成分組成:
[0028]正丁醇30wt% ；
[0029]正己烷30wt% ；
[0030]乙酸甲酯40wt%。
[0031]實施例2
[0032]步驟1:取飼料樣品lg，加入到5ml的緩沖溶液中，經過漩渦混合器混合處理處理I分鐘后再經過離心處理，取離心處理后的上清液0.5ml ;離心處理的轉速為14000轉/分鐘，離心時間I分鐘。所述的緩沖溶液為:ph為7的磷酸緩沖液。
[0033]步驟2:將上清液加入到SLE柱后，靜置4分鐘；
[0034]步驟3:采用三元洗脫劑對SLE柱(奧秘山東科技有限公司生產的介質液液萃取SLE柱)洗脫兩次，接收洗脫液，得到含有萊克多巴胺、克侖特羅、沙丁胺醇的洗脫液；每次消耗的洗脫劑為0.5ml。
[0035]其中，所述的三元洗脫劑為正丁醇、正己烷和乙酸甲酯的混合物，其中，所述的三元洗脫劑由以下成分組成:
[0036]正丁醇20wt% ；
[0037]正己烷30wt% ；
[0038]乙酸甲酯50wt%。
[0039]分析:
[0040]檢測方法具體為:
[0041]儀器:LC_2010型高效液相色譜儀(日本島津)
[0042]色譜柱:C18柱，150mm*3.9mmID
[0043]柱溫:室溫
[0044]流動相:丙酮:乙腈=50:50(體積比)；
[0045]檢測器:UV檢測器；
[0046]檢測波長:217nm；
[0047]進樣量:50μ L
[0048]采用上述的檢測方法分別測量萊克多巴胺、克侖特羅、沙丁胺醇的標準樣，并分別繪制萊克多巴胺、克侖特羅、沙丁胺醇的回歸方程，同時，采用實施例1的樣品按上述參數進行檢測，根據217nm條件下的萊克多巴胺、克侖特羅、沙丁胺醇的回歸方程測定萊克多巴胺、克侖特羅、沙丁胺醇的含量，其中，沙丁胺醇出峰時間為7.0min，萊克多巴胺出峰時間為8.9min，克侖特羅的出峰時間為9.8min。
[0049]以上所述的僅為本發明的較佳實施例，凡在本發明的精神和原則范圍內所作的任何修改、等同替換和改進等，均應包含在本發明的保護范圍之內。
【主權項】
1.一種采用SLE法同時分離飼料中的萊克多巴胺、克侖特羅、沙丁胺醇的方法，其特征在于，包括以下步驟: 步驟1:取飼料樣品，加入到緩沖溶液中，經過漩渦混合器混合處理后再經過離心處理，取離心處理后的上清液少量； 步驟2:將上清液加入到SLE柱后，靜置2?4分鐘； 步驟3:采用三元洗脫劑對SLE柱洗脫至少兩次，接收洗脫液，得到含有萊克多巴胺、克侖特羅、沙丁胺醇的洗脫液； 其中，所述的三元洗脫劑為正丁醇、正己烷和乙酸甲酯的混合物，其中，所述的三元洗脫劑由以下重量份組成: 正丁醇2?4份； 正己燒2?4份； 乙酸甲酯2?8份； 所述的緩沖溶液為:Ph范圍為6.5?7.0的磷酸緩沖液。
2.根據權利要求1所述的采用SLE法同時分離飼料中的萊克多巴胺、克侖特羅、沙丁胺醇的方法，其特征在于，所述的飼料樣品為lg，緩沖溶液為5ml，步驟2中所取的上清液為0.5ml，所述的步驟3中，每次洗脫時所用的洗脫劑為0.5ml。
3.根據權利要求2所述的采用SLE法同時分離飼料中的萊克多巴胺、克侖特羅、沙丁胺醇的方法，其特征在于，所述的步驟I中，漩渦混合器混合處理的時間為0.5?1.5分鐘。
4.根據權利要求2所述的采用SLE法同時分離飼料中的萊克多巴胺、克侖特羅、沙丁胺醇的方法，其特征在于，所述的步驟I中，所述的離心處理的具體操作為:將經混合處理的溶液在離心機中以12000?14000轉/分鐘的速度離心0.5?1.5分鐘。
5.根據權利要求1所述的采用SLE法同時分離飼料中的萊克多巴胺、克侖特羅、沙丁胺醇的方法，其特征在于，所述的SLE柱為奧秘山東科技有限公司生產的介質液液萃取SLE柱。
【專利摘要】本發明公開了一種采用SLE法同時分離飼料中的萊克多巴胺、克侖特羅、沙丁胺醇的方法，包括以下步驟：步驟1：取飼料樣品，加入到緩沖溶液中，經過漩渦混合器混合處理后再經過離心處理，取離心處理后的上清液少量；步驟2：將上清液加入到SLE柱后，靜置2～4分鐘；步驟3：采用三元洗脫劑對SLE柱洗脫至少兩次，接收洗脫液，得到含有萊克多巴胺、克侖特羅、沙丁胺醇的洗脫液。本發明的目的在于提供一種分離效率高、操作簡單的采用SLE法同時分離飼料中的萊克多巴胺、克侖特羅、沙丁胺醇的方法。
【IPC分類】G01N30-06
【公開號】CN104807926
【申請號】CN201510239869
【發明人】陳學松, 陳啟釗, 葉小強, 郭振旺, 吳嵐, 鄧水德
【申請人】廣西壯族自治區梧州食品藥品檢驗所
【公開日】2015年7月29日
【申請日】2015年5月12日