同時測定食品或保健品當中多種水溶性維生素含量的方法
【技術領域】
[0001] 本發明涉及一種可同時測定食品或保健品中多種水溶性維生素含量的方法。
【背景技術】
[0002] 維生素是維持人體正常物質代謝和某些特殊生理功能不可缺少的低分子有機化 合物，多數是輔基和酶的組成部分。維生素根據其物理性質可分為脂溶性維生素和水溶性 維生素。水溶性維生素包括B族維生素（VB 1JB2JB3JB6JB1^)Jc,泛酸等。人體每天 需要攝取不同的維生素來參與人體的正常生理代謝過程，而這些維生素主要來源于食物。 但是人體攝取的維生素太多和太少都有可能引起身體的不適，嚴重的還會引起病變。例如， 能促進食欲的維生素 VB9 (葉酸），不僅存在于綠色蔬菜中，也存在于肝臟和腎臟中，腸道中 細菌也能合成。VB9缺乏會引起骨髓巨紅細胞成熟受損，引起巨紅細胞貧血，白血球減少癥， 還會導致孕婦妊娠中毒、早產等。因此，測定食品和飲料中維生素含量具有十分重要的意 義。
[0003] 食品中多種維生素含量的檢測方法已有一些報道，但多數是對基體較為簡單，維 生素種類少的食品進行檢測。在液相色譜中，為了提高檢測的靈敏度，也采用多種檢測器并 用。韓雅珊等同時檢測四種維生素（VB 1JB2JB5JB6)，在檢測波長為254nm下測定VB 1JB2 和VB5，而在熒光（EX295/EX395nm)條件下測定VB6。廖國東等人采用膠束液相色譜分離測 定嬰兒食品中的水溶性維生素，使用十二烷基磺酸鈉的水溶液為流動相，加入三乙胺等有 機改性劑，考察了 6種水溶性維生素 （VBp VB2、VB6、VC、PP)的最佳分離條件，與其他相關 報道相比，該方法結果比較滿意，但分析的維生素種類仍然較少。
[0004] 高效液相色譜法由于能進行快速、靈敏準確的測定，并能與其他分析技術聯用等 優點，已經成為了目前最常用的分析手段，如中國專利申請201210584541. 4中揭示的一種 檢測水溶性維生素的方法，雖然能同時測定維生素&、B2、B3、B 6四種維生素，但測試種類仍 然較少。
【發明內容】
[0005] 本發明的目的在于解決上述技術問題，提出一種同時測定食品或保健品當中多種 水溶性維生素含量的方法。
[0006] 本發明的技術方案是：一種同時測定食品或保健品當中多種水溶性維生素含量的 方法，所述食品或保健品包括片劑、粉劑、膠囊、軟膠囊、沖劑、口服液、飲品形式。
[0007] 具體包括如下步驟：
[0008] 步驟一、標準液的制備
[0009] 按照以下參數進行各種維生素標準液的制備
【主權項】
1. 同時測定食品或保健品當中多種水溶性維生素含量的方法，其特征在于：具體包括 如下步驟： 步驟一、標準液的制備 分別配制水溶性維生素 VB1, VB2, VB3, VC，VB5, VB6, VB9, VB1^標準樣品溶液，進而按一 定比例提取各標準樣品溶液，然后定量加入已知濃度的H3PO4溶液，配制成多組混合標樣； 步驟二、待測液的制備 取含有多種水溶性維生素的食品或保健品樣品，在樣品中加入提取溶劑，進行蝸旋、超 聲，再加入稀釋溶劑，再超聲離心，最后用稀釋溶劑稀釋后通過過濾膜進行過濾；其中， 所述提取溶劑按以下步驟制備獲得：稱取硫氰酸銨置于離心管中，加入二甲基亞砜和 冰醋酸，超聲使其溶解； 所述稀釋溶劑按以下步驟制備獲得：稱取硫酸鈉置于離心管中，加入冰醋酸和去離子 水，超聲使其溶解； 步驟三、利用串聯有紫外檢測器和熒光檢測器、柱溫箱、二元梯度泵、自動進樣器組成 的高效液相色譜儀，以乙腈-磷酸溶液為流動相梯度洗脫分離各種維生素，對步驟一和步 驟二制得的各混合標樣和待測液當中的各種水溶性維生素的含量進行檢測； 步驟四、根據步驟三的檢測結果，依據多組混合標樣的檢測數據進行線性回歸，得到 VB1, VB2, VB3, VC，VB5, VB6, VB9, VB1^線性回歸方程，進而依據這些線性回歸方程以及待測 液的檢測數據，分析計算待測液中水溶性維生素 VB1, VB2, VB3, VC，VB5, VB6, VB9, VB12含量，從 而推知所測食品或保健品樣品當中各種水溶性維生素的含量。
2. 如權利要求1所述的同時測定食品或保健品當中多種水溶性維生素含量的方法，其 特征在于：步驟三當中，色譜條件如下： 色譜柱：Phenomenex Luna C18, 5. 0 μ m，4. 6mmX 250mm 內徑； 流動相：流動相A :0. 1% H3PO4，流動相B :80%乙腈； 流速：〇· 8-lml/min ; 柱溫：30°C ; 進樣量：20 μ 1 ; 洗脫時間：〇~5min，100%A ;5~13min，線性下降至70%Α ;13~25min，保持在70% A0
3. 如權利要求1或2所述的同時測定食品或保健品當中多種水溶性維生素含量的方 法，其特征在于：波長經過優化，水溶性維生素的最優紫外吸收波長最終確定為=VB^eOnm, VB3280nm，VC 230nm，VB5210nm，VB9210nm，VB12210nm，VB 2210nm;VB6的熒光檢測波長為 Ex 290nm/Em 395nm。
4. 如權利要求1或2所述的同時測定食品或保健品當中多種水溶性維生素含量的方 法，其特征在于：步驟二待測液的配制過程中，使用0. 45 μ m的濾膜進行過濾。
5. 如權利要求1所述的同時測定食品或保健品當中多種水溶性維生素含量的方法，其 特征在于：步驟一中樣品標準液的配制按照以下參數進行制備，
然后，分別吸取 0.6ml VBpOJml VB2,0.2ml VB3,0.4ml VB5,0.4ml VB9,0.1ml VB6， 0.1ml VC，0.1 ml VB12置于5ml離心管中，加入1.9ml 0.85% H3PO4,配成混合標樣，再將配 制好的混合標樣溶液用0. 85% H3PO4四倍稀釋成4個不同濃度的混合標樣。
6. 如權利要求1所述的同時測定食品或保健品當中多種水溶性維生素含量的方法，其 特征在于：所述食品或保健品為復合維生素片，所述步驟二中待測液的制備過程中，先將復 合維生素片研磨成粉末，然后加入提取溶劑，繼而再進行后續處理。
7. 如權利要求1所述的同時測定食品或保健品當中多種水溶性維生素含量的方法，其 特征在于：所述食品或保健品包括片劑、粉劑、膠囊、軟膠囊、沖劑、口服液、飲品。
【專利摘要】本發明揭示了一種同時測定食品或保健品當中多種水溶性維生素含量的方法，具體步驟包括：分別制備樣品混合標準溶液和待測液，利用高效液相色譜儀，以乙腈-磷酸溶液為流動相梯度洗脫分離各種維生素，對各混合標樣和待測液進行檢測，然后依據多組混合標樣的檢測數據進行線性回歸，進而依據這些線性回歸方程以及待測液的檢測數據，分析計算待測液中水溶性維生素VB1，VB2，VB3，VC，VB5，VB6，VB9，VB12的含量，從而推知所測食品或保健品樣品當中各種水溶性維生素的含量本發明能一次性同時完成8種水溶性維生素的檢測分析，能夠有效改善多種維生素的分離效率，可以測定基質較為復雜的樣品。
【IPC分類】G01N30-88
【公開號】CN104730190
【申請號】CN201510096034
【發明人】張盟, 李鵬高, 張先勇
【申請人】蘇州源澤生物技術有限公司
【公開日】2015年6月24日
【申請日】2015年3月4日