一種輔助篩選低脂肉雞的血清生化標記及應用
【技術領域】
[0001] 本發明涉及一種輔助篩選低脂肉雞的血清生化標記及應用，屬于禽類遺傳育種技 術領域。
【背景技術】
[0002] 在過去半個多世紀，肉雞育種者們致力于對肉雞生長速度和飼料轉化率的選擇， 并取得了顯著的遺傳進展。然而，肉雞生長速度的過快增加帶來了腹部脂肪沉積和代謝綜 合癥等負面因素。腹脂沉積過多有諸多不利，它不僅影響飼料效率，同時影響肉雞胴體品質 等。因此，控制脂肪在雞體內的過多蓄積，進一步提高肉雞的飼料轉化效率和胴體質量是我 國急需研宄解決的重大問題。選育低脂肉雞配套系是世界范圍內肉雞育種的重要奮斗目標 之一。在肉雞育種上，通常采用的傳統的育種技術主要是依據表型進行選擇，因此需要將肉 雞屠宰以后測定腹部脂肪量，進而根據全同胞或半同胞關系進行選育。這種選擇方法時間 較長，另外選擇效果也不是很好。因此，在低脂肉雞配套系培育方面急需一種新的育種技 術，即可縮短世代間隔，又能獲得較好的育種效果，大大提高育種進程。雞的脂肪代謝包含 許多復雜的生物學過程，包括脂類的消化吸收、脂肪酸的合成、脂肪轉運、脂肪的降解和貯 存、及脂肪動員等。脂肪即甘油三酯，由甘油和脂肪酸組成，并且主要儲存在脂肪細胞內。在 這些復雜的生物學過程中，有很多血液生化物質的參與。這些血液生化物質可能對肉雞的 腹部脂肪沉積非常重要，因此檢測這些血液生化指標的水平對理解肉雞的脂肪代謝有很大 的幫助。如果篩選出與肉雞腹部脂肪量相關較大的血清生化標記，根據該血清生化指標的 水平進行早期選種，將大大提高育種進程，從而選育低脂肉雞配套系。
【發明內容】
[0003] 為解決上述問題，本發明提供了一種輔助篩選低脂肉雞的血清生化標記及應用， 所采取的技術方案如下：
[0004] 本發明的目的在于提供一種輔助篩選低脂系肉雞的血清生化標記，該標記是雞血 清中HDL-C/LDL-C的水平。
[0005] 所述血清生化標記用于肉雞腹部脂肪量的鑒定和低脂系肉雞選育。
[0006] 本發明的另一目的在于提供一種應用所述血清生化標記的方法，該方法的步驟如 下：
[0007] 1)檢測待測肉雞血清中的HDL-C/LDL-C水平；
[0008] 2)比較分析步驟1)所得的待測肉雞之間的HDL-C/LDL-C水平確定低脂系肉雞。
[0009] 本發明的另一目的在于提供一種所述血清生化標記的篩選方法，該方法的步驟如 下：
[0010] 1)根據腹部脂肪量確定待篩選肉雞種群中的高脂系肉雞和低脂系肉雞；
[0011] 2)確定并檢測不同世代待篩選高脂系肉雞和低脂系肉雞中的血清生化指標，確定 血清生化指標在高脂系肉雞和低脂系肉雞中差異的顯著性，篩選出差異顯著的血清生化指 標，獲得第一次篩選指標；
[0012] 3)確定步驟2)所得的第一次篩選指標的遺傳相關系數，根據所得遺傳相關系數 進行第二次篩選，獲得第二次篩選指標；
[0013] 4)確定步驟3)所得的第二次篩選指標的遺傳力，根據所得的遺傳力進行第三次 篩選，獲得血清生化標記。
[0014] 步驟1)所述腹部脂肪量，是指腹脂重和腹脂率。
[0015] 步驟2)所述不同世代肉雞，是第16、17和18世代的肉雞。
[0016] 步驟3)所述第二次篩選，是剔除存在以下任意一種情況的第一次篩選指標：
[0017] a)遺傳相關系數大于0. 30或小于-0. 30 ;
[0018] b)遺傳相關系數為正，高脂系的血清HDL-C/LDL-C水平低于低脂系；
[0019] c)遺傳相關系數為負，高脂系的血清HDL-C/LDL-C水平高于低脂系。
[0020] 步驟4)所述第三次篩選，是剔除遺傳力低于0. 5的第二次篩選指標。
[0021] 本發明取得的有益效果如下：
[0022] 本發明所提供的血清生化指標在低脂系肉雞和高脂系肉雞中存在顯著性差異。同 時，該血清生化指標具有很高的遺傳相關系數。當存在正遺傳相關系數時，該指標在低脂系 肉雞中的水平低于高脂系肉雞相應水平，而當存在負遺傳相關系數時，該指標在低脂系肉 雞的水平高于高脂系肉雞相應水平。此外，該血清生化指標具有較高的遺傳力，可在不同世 代中穩定遺傳。
【具體實施方式】
[0023] 下面結合具體實施例對本發明做進一步說明，但本發明不受實施例的限制。
[0024] 實施例1
[0025] 一、實驗材料
[0026] 1.實驗動物和性狀測定
[0027] 以東北農業大學選育的肉雞高、低脂雙向選擇系第十六、十七和十八世代公雞為 實驗群體。7周齡時，肉仔雞禁食12小時后，屠宰前測定活重，屠宰后測定腹脂重，并除以7 周齡活重計算出腹脂率。采集頸動脈血，于5ml離心管中（未添加抗凝劑），血樣以3000r/ min離心15min制得血清，放入EP管中，于-20°C冰箱保存備用。
[0028]2?藥品和酶
[0029] 甘油三酯檢測試劑盒；總膽固醇檢測試劑盒；高密度脂蛋白膽固醇檢測試劑盒； 低密度脂蛋白膽固醇檢測試劑盒；總膽汁酸檢測試劑盒；總蛋白檢測試劑盒；白蛋白檢測 試劑盒；葡萄糖檢測試劑盒；尿酸檢測試劑盒；肌酐檢測試劑盒；谷丙轉氨酶檢測試劑盒； 谷草轉氨酶檢測試劑盒；y-谷氨酰轉肽酶檢測試劑盒；游離脂肪酸檢測試劑盒。
[0030] 3?主要儀器
[0031] 離心機、C8000全自動生化分析儀。
[0032] 二、實驗方法
[0033] 1.實驗個體的選擇
[0034] 在十六世代，所有家系的腹脂率均值被計算，并將家系根據腹脂率均值排序，在高 脂系中，從腹脂率由高到低的家系中選出103只個體；在低脂系中，從腹脂率由低到高的家 系中選出103只個體。在十七世代，所有雞只的腹脂率均值被計算，并將雞只根據腹脂率均 值排序，在高脂系中，從腹脂率由高到低的雞只中選出88只個體；在低脂系中，從腹脂率由 低到高的雞只中選出88只個體。在十八世代，個體選擇方法同十七世代，高、低脂系各選出 88只個體。三個世代共選出558只個體。
[0035] 2.血清生化指標的測定
[0036] 以下14項血清生化指標，采用全自動生化分析儀檢測：甘油三酯：酶比色法；總膽 固醇：酶比色法；高密度脂蛋白膽固醇：均相酶比色法；低密度脂蛋白膽固醇：均相酶比色 法；總膽汁酸：循環酶法；總蛋白：雙縮脲法；白蛋白：溴甲酚綠法；葡萄糖：己糖激酶法；尿 酸：酶比色法；肌酐：酶比色法；谷丙轉氨酶：連續監測法；谷草轉氨酶：連續監測法；y-谷 氨酰轉肽酶：連續監測法；游離脂肪酸：酶比色法。
[0037] 以下4項血清生化指標通過計算得到：球蛋白（總蛋白一白蛋白）、高密度脂蛋白 膽固醇/低密度脂蛋白膽固醇（HDL-C/LDL-C)、白蛋白/球蛋白、谷草轉氨酶/谷丙轉氨酶。
[0038] 3.統計模型建立
[0039] 根據東北農業大學肉雞高、低脂雙向選擇系群體的特點，構建統計模型如下：
[0040] Y=y+L+F(L)+D(F，L) +BW7+e①
[0041] Y=y+G+L+Animal+e②
[0042] Y為性狀觀察值，y為群體均值，G為世代固定效應，L為品系固定效應，F(L)為品 系內家系的隨機效應，D(F，L)為家系與品系內母雞的隨機效應，BW7為7周齡體重作協變 量（分析腹脂率時BW7不作為協變量），Animal為動物個體效應，e為剩余值。
[0043] 使用模型①通過統計軟件JMP4.0(SASInstitute，2000)，對高、低脂系肉雞之間 的血清生化指標和腹脂性狀進行比較，并估計性狀的最小二乘均值。
[0044] 使用模型②通過統計軟件MTDFREML，對血清生化指標的遺傳參數進行估計，包括 血清生化指標的遺傳力、血清生化指標與腹脂性狀的遺傳相關和表性相關。
[0045] 實施例2雞血清生化指標在高、低脂雙向選擇系肉雞之間的比較
[0046] 以東北農業大學選育的肉雞高、低脂雙向選擇系第十六、十七和十八世代雞只為 實驗材料，對每個世代內高、低脂系肉雞之間的體脂性狀進行比較分析。結果顯示，在三個 世代中，高脂系肉雞的腹脂重和腹脂率均極顯著高于低脂系肉雞（p〈0.01)(表1)。
[0047] 表1第十六、十七和十八世代高、低脂系肉雞之間體脂性狀的比較
[0048]
【主權項】
1. 一種輔助篩選低脂系肉雞的血清生化標記，其特征在于，是雞血清中HDL-C/LDL-C 的水平。
2. 權利要求1所述血清生化標記，其特征在于，用于肉雞腹部脂肪量的鑒定和低脂系 肉雞選育。
3. 權利要求2所述應用，其特征在于，步驟如下： 1) 檢測待測肉雞血清中的HDL-C/LDL-C水平； 2) 比較分析步驟1)所得的待測肉雞之間的HDL-C/LDL-C水平確定低脂系肉雞。
4. 一種權利要求1所述血清生化標記的篩選方法，其特征在于，步驟如下： 1) 根據腹部脂肪量確定待篩選肉雞種群中的高脂系肉雞和低脂系肉雞； 2) 確定并檢測不同世代待篩選高脂系肉雞和低脂系肉雞中的血清生化指標，確定血清 生化指標在高脂系肉雞和低脂系肉雞中差異的顯著性，篩選出差異顯著的血清生化指標， 獲得第一次篩選指標； 3) 確定步驟2)所得的第一次篩選指標的遺傳相關系數，根據所得遺傳相關系數進行 第二次篩選，獲得第二次篩選指標； 4) 確定步驟3)所得的第二次篩選指標的遺傳力，根據所得的遺傳力進行第三次篩選， 獲得血清生化標記。
5. 權利要求4所述方法，其特征在于，步驟1)所述腹部脂肪量，是指腹脂重和腹脂率。
6. 權利要求4所述方法，其特征在于，步驟2)所述不同世代肉雞，是第16、17和18世 代的肉雞。
7. 權利要求4所述方法，其特征在于，步驟3)所述第二次篩選，是剔除存在以下任意一 種情況的第一次篩選指標： 1) 遺傳相關系數大于〇. 30或小于-0. 30 ; 2) 遺傳相關系數為正，高脂系的血清HDL-C/LDL-C水平低于低脂系； 3) 遺傳相關系數為負，高脂系的血清HDL-C/LDL-C水平高于低脂系。
8. 權利要求4所述方法，其特征在于，步驟4)所述第三次篩選，是剔除遺傳力低于0. 5 的第二次篩選指標。
【專利摘要】本發明公開了一種輔助篩選低脂肉雞的血清生化標記及應用，屬于禽類遺傳育種技術領域。本發明所提供的血清生化標記是雞血清中HDL-C/LDL-C的水平。該指標在低脂系肉雞和高脂系肉雞中存在顯著性差異，同時具有很高的遺傳相關系數和遺傳力，可用于肉雞腹部脂肪量的鑒定和低脂系肉雞的育種。另外，本發明還提供了該血清生化標記的應用和篩選方法。
【IPC分類】G01N33-92
【公開號】CN104714038
【申請號】CN201510154893
【發明人】李輝, 張慧, 董佳強
【申請人】東北農業大學
【公開日】2015年6月17日
【申請日】2015年4月2日
【公告號】CN104502615A