頂空氣相色譜法測定紅霉素發酵尾氣中丙醇含量的方法
【技術領域】
[0001]本發明屬于生物原料檢測技術領域，特別是涉及一種頂空氣相色譜法測定紅霉素發酵尾氣中丙醇含量的方法。
【背景技術】
[0002]紅霉素(erythromycin, Er)是大環內酯類抗生素，是由紅色糖多孢菌(Saccharopolyspora erythraea)經三級發酵,合成的次級代謝產物，臨床上主要用于抑制革蘭氏陽性菌。發酵前期會在發酵液中加入前提物質正丙醇，目的是提高發酵液中紅霉素效價。加入的正丙醇一部分被細菌利用，一部分隨著空氣揮發。為了考察正丙醇加入量、微生物利用量、揮發量間的關系，必須對發酵尾氣中正丙醇含量進行檢測。
【發明內容】
[0003]本發明的目的就在于建立一種能測定紅霉素發酵尾氣中丙醇含量的方法。
[0004]為實現上述發明目的所采取的技術方案為:樣品準備:將發酵尾氣通過細管，導入20ml頂空瓶底部，并保持10?15min，立即取出導管，加塞，并用鋁蓋鉗緊。對照準備:用微量移液器移取丙醇對照品0.5?I μ 1，置20ml頂空瓶內，加塞，并用鋁蓋鉗緊。操作:取裝有樣品及對照的頂空瓶，置頂空進樣器內，按頂空氣相色譜法進行檢測。頂空進樣器條件為:樣品瓶加熱溫度為90°C，加熱時間20?30min，定量環溫度100°C，傳輸管溫度110°C，進樣量為lml。氣相色譜條件為:色譜柱:聚乙二醇20000，0.5311111^30111，膜厚1.(^111。柱溫110°C,運行15min。載氣為氮氣,流速3ml/min。
【具體實施方式】
[0005]I頂空條件:樣品瓶加熱溫度為90°C，加熱時間20?30min，定量環溫度100°C，傳輸管溫度110°c，進樣量為lml。
[0006]2色譜條件:
色譜柱:聚乙二醇20000，0.53mmX30m,膜厚LOym ;載氣為氮氣，流速3ml/min。柱溫110°C，運行15min，進樣口溫度為150°C
3樣品準備:將發酵液尾氣通過細管，導入20ml頂空瓶底部，并保持10?15min，立即取出導管，加塞，并用鋁蓋鉗緊。對照準備:用微量移液器移取丙醇對照品0.5?I μ 1，置20ml頂空瓶內，加塞，并用鋁蓋鉗緊。
[0007]4測定:取裝有樣品及對照的頂空瓶，置頂空進樣器內，按頂空氣相色譜法進行檢測。
[0008]實施例1、
I頂空條件:樣品瓶加熱溫度為90°c，加熱時間20min，定量環溫度100°C，傳輸管溫度110°C，進樣量為lml。
[0009]2色譜條件: 色譜柱:HP-1NNOwax 30mX0.53mm,膜厚1.0 μ m ;載氣為氮氣，流速3ml/min。柱溫110°C，運行15min，進樣口溫度為150°C。
[0010]3樣品準備:將發酵液尾氣通過細管，導入20ml頂空瓶底部，保持lOmin，立即取出導管，加塞，并用鋁蓋鉗緊。對照準備:用微量移液器移取丙醇對照品0.5μ 1，置20ml頂空瓶內，加塞，并用鋁蓋鉗緊。
[0011]3 測定:
取裝有樣品及對照的頂空瓶，置頂空進樣器內，按頂空氣相色譜法進行檢測。
[0012]供試品批號:130721，供試品來源:寧夏啟元藥業有限公司測定結果:0.18ppm
實施例2
I頂空條件:樣品瓶加熱溫度為90°C，加熱時間25min，定量環溫度100°C，傳輸管溫度110°C，進樣量為lml。
[0013]2色譜條件:
色譜柱:HP_INNOwax 30mX0.53mm,膜厚1.0 μ m ;載氣為氮氣，流速3ml/min。柱溫110°C，運行15min，進樣口溫度為150°C。
[0014]3樣品準備:將發酵液尾氣通過細管，導入20ml頂空瓶底部，保持12min，立即取出導管，加塞，并用鋁蓋鉗緊。對照準備:用微量移液器移取丙醇對照品0.8μ 1，置20ml頂空瓶內，加塞，并用鋁蓋鉗緊。
[0015]3 測定:
取裝有樣品及對照的頂空瓶，置頂空進樣器內，按頂空氣相色譜法進行檢測。
[0016]供試品批號:130722，供試品來源:寧夏啟元藥業有限公司測定結果:0.23ppm
實施例3
I頂空條件:樣品瓶加熱溫度為90°C，加熱時間30min，定量環溫度100°C，傳輸管溫度110°C，進樣量為lml。
[0017]2色譜條件:
色譜柱:HP_INNOwax 30mX0.53mm,膜厚1.0 μ m ;載氣為氮氣，流速3ml/min。柱溫110°C，運行15min，進樣口溫度為150°C。
[0018]3樣品準備:將發酵液尾氣通過細管，導入20ml頂空瓶底部，并保持15min，立即取出導管，加塞，并用鋁蓋鉗緊。對照準備:用微量移液器移取丙醇對照品I μ 1，置20ml頂空瓶內，加塞，并用鋁蓋鉗緊。
[0019]3 測定:
取裝有樣品及對照的頂空瓶，置頂空進樣器內，按頂空氣相色譜法進行檢測。
[0020]供試品批號:130723，供試品來源:寧夏啟元藥業有限公司測定結果:0.20ppm。
【主權項】
1.一種頂空氣相色譜法測定紅霉素發酵尾氣中丙醇含量的方法，其特征在于:將發酵液尾氣通過細管，導入20ml頂空瓶底部，并保持10?15min，取裝有樣品及對照的頂空瓶，置頂空進樣器內，按頂空氣相色譜法進行檢測。
2.按照權利要求1所述的頂空氣相色譜法測定紅霉素發酵尾氣中丙醇含量的方法，其特征是發酵液尾氣導入頂空瓶底部后，保持10?15min，樣品瓶加熱溫度為90°C，加熱時間20?30min，定量環溫度100°C，傳輸管溫度110°C，進樣量為1ml。
3.按照權利要求1所述的頂空氣相色譜法測定紅霉素發酵尾氣中丙醇含量的方法，其特征在于上述氣相色譜法的色譜條件是:色譜柱:聚乙二醇20000,0.53mmX30m，膜厚I μ m,柱溫:110°C,運行15min，載氣為氮氣，流速3ml/min。
【專利摘要】本發明涉及一種頂空氣相色譜法測定紅霉素發酵尾氣中丙醇含量的方法。該方法采用頂空氣相色譜法，將發酵尾氣用導管充入頂空瓶內，于90℃加熱后，取1ml注入氣相色譜儀進行測定。本方法對設備要求不高，操作快速，準確性高。
【IPC分類】G01N30-02
【公開號】CN104655739
【申請號】CN201310585508
【發明人】鄒學鋒, 孫瑞君, 郭海燕, 靳艷仿, 張志
【申請人】寧夏啟元藥業有限公司
【公開日】2015年5月27日
【申請日】2013年11月21日