氨芐青霉噻唑酸檢測試劑盒和檢測方法
【技術領域】
[0001] 本發明屬于酶聯免疫試劑盒領域，具體涉及一種氨芐青霉噻唑酸檢測試劑盒和檢 測方法。
【背景技術】
[0002] 青霉素類抗生素具有殺菌活性強、毒副作用小等特點，在動物飼養中應用非常廣 泛，主要用于治療動物疾病，部分產品同時具有促進動物生長的作用。然而，動物性食品中 殘留的抗生素進入人體后，具有一定的危害作用。一般來說，動物性食品中殘留的抗生素對 人并不表現為急性毒性作用。人們長期攝入低劑量殘留抗生素的食品，隨著時間的推移，人 體內殘留的抗生素逐漸蓄積，從而引起各種慢性毒性作用。某些過敏體質的人在接觸殘留 的抗生素后也可引起過敏（變態）反應。動物性食品中的抗生素殘留對人體健康的影響廣 泛，會造成人體胃腸道菌群失調，導致機會性感染的可能性增加，還可表現為過敏、毒性作 用、細菌耐藥性、致畸、致突變和致癌作用等多個方面。
[0003] 氨芐青霉素為P-內酰胺類藥物，其結構中的0 -內酰胺環不穩定，在堿性環境及 3 _內酰胺酶存在的情況下易發生斷裂，生成氨芐青霉噻唑酸，不易被相應氨芐青霉素抗體 檢出。而用其他檢測方法，如薄層色譜法（TLC)和高效液相色譜法（HPLC)檢測時，檢測結 果易受流動相pH值、溫度和其他因素的影響而開環，導致TLC和HPLC方法的穩定性和重現 性不好，回收率不高。
【發明內容】
[0004] 為了解決現有技術存在的上述問題，本發明提供了一種氨芐青霉噻唑酸檢測試劑 盒和檢測方法，具有快速高效、靈敏度高、重現性好的特點。
[0005] 本發明所采用的技術方案為：
[0006] 一種雜交瘤細胞株，其保藏編號為CGMCCN0. 10112,保藏日期為2014年12月5 日，保藏單位為中國微生物菌種保藏管理委員會普通微生物中心，保藏地址為北京市朝陽 區北辰西路1號院3號。
[0007] -種由雜交瘤細胞株分泌的氨芐青霉噻唑酸單克隆抗體。
[0008] 氨芐青霉噻唑酸單克隆抗體在制備檢測氨芐青霉噻唑酸的試劑盒方面的應用。
[0009] -種用于檢測氨芐青霉噻唑酸的試劑盒，包括酶標板、封閉液、氨芐青霉噻唑酸標 準品、抗體工作液、酶標記抗體、顯色液及終止液；所述抗體工作液為所述雜交瘤細胞株分 泌的氨芐青霉噻唑酸單克隆抗體的稀釋液。
[0010] 一種用于檢測氨芐青霉噻唑酸的試劑盒，還包括樣品稀釋液和濃縮洗滌液，所述 樣品稀釋液為PH6. 5-8. 5的磷酸鹽緩沖液，所述濃縮洗滌液為樣品稀釋液與吐溫20的混合 液。
[0011] 一種氨芐青霉噻唑酸試劑盒在檢測動物性食品中的應用。
[0012] 本發明的有益效果為：采用特異性的氨芐青霉噻唑酸單克隆抗體，定量檢測青霉 素類藥物及其代謝產物在動物性食品中的殘留；檢測結果快速、準確度高、重現性好、檢測 靈敏度高。
【附圖說明】 圖1是本發明進行精密度實驗的實驗數據。
【具體實施方式】
[0013] 本實驗采用氨芐青霉噻唑酸偶聯蛋白作為免疫原，從而獲得氨芐青霉噻唑酸特異 性抗體。氨芐青霉素結構如（式1)所示，青霉素代謝產物青霉噻唑酸的結構如（式2)所 示，氨芐青霉噻唑酸結構式為（式3)所示。
【主權項】
1. 一種雜交瘤細胞株，其保藏編號為CGMCC NO. 10112。
2. -種由權利要求1所述的雜交瘤細胞株分泌的氨芐青霉噻唑酸單克隆抗體。
3. 根據權利要求2所述的單克隆抗體在制備檢測氨芐青霉噻唑酸的試劑盒方面的應 用。
4. 一種用于檢測氨芐青霉噻唑酸的試劑盒，其特征在于：包括酶標板、封閉液、氨芐青 霉噻唑酸標準品、抗體工作液、酶標記抗體、顯色液及終止液；所述抗體工作液為如權利要 求1所述的雜交瘤細胞株分泌的氨芐青霉噻唑酸單克隆抗體的稀釋液。
5. 根據權利要求4所述的一種用于檢測氨芐青霉噻唑酸的試劑盒，其特征在于：還包 括樣品稀釋液和濃縮洗滌液，所述樣品稀釋液為PH6. 5?8. 5的磷酸鹽緩沖液，所述濃縮洗 滌液為樣品稀釋液與吐溫20的混合液。
6. -種利用權利要求4-5任一項所述的用于檢測氨芐青霉噻唑酸的試劑盒在檢測動 物性食品中的應用。
【專利摘要】本發明涉及一種雜交瘤細胞株、雜交瘤細胞株分泌的氨芐青霉噻唑酸單克隆抗體和單克隆抗體在制備檢測氨芐青霉噻唑酸的試劑盒方面的應用。一種用于檢測氨芐青霉噻唑酸的試劑盒，包括酶標板、封閉液、氨芐青霉噻唑酸標準品、抗體工作液、酶標記抗體、顯色液及終止液；所述抗體工作液為所述雜交瘤細胞株分泌的氨芐青霉噻唑酸單克隆抗體的稀釋液。本發明還涉及一種雜交瘤細胞和雜交瘤細胞分泌的氨芐青霉噻唑酸單克隆抗體。本發明的有益效果為：采用特異性的氨芐青霉噻唑酸單克隆抗體，定量檢測部分青霉素類藥物及其代謝產物在動物性食品中的殘留；檢測結果快速、準確度高、重現性好、檢測靈敏度高。CGMCC NO.1011220141205
【IPC分類】G01N33-577
【公開號】CN104614529
【申請號】CN201510018846
【發明人】陸彥, 吳國娟, 劉雨琦, 高琦, 王晶, 趙紅玉
【申請人】北京農學院, 陸彥
【公開日】2015年5月13日
【申請日】2015年1月14日