高效植物生長調節劑的微流電色譜分離方法
【技術領域】
[0001] 本發明屬于分析化學領域，具體涉及一種高效植物生長調節劑的微流電色譜分離 方法。
【背景技術】
[0002] 植物生長調節劑，是用于調節植物生長發育的人工合成化學物質，主要分為植物 生長促進劑、植物生長延緩劑、植物生長抑制劑，其中1- (2-氯-4-吡啶基）-3-苯基脲屬于 苯脲類細胞分裂素，1-對氯苯基-2-(1，2, 4-三唑-1-基）-4, 4-二甲-3-戊醇屬于內源赤 霉素合成的抑制劑，2, 4-二氯苯氧乙酸屬于生長素類似物，在實際生產中應用廣泛。
[0003] 關于植物生長調節劑的檢測，國內外已建立了多種方法，主要為高效液相色譜法、 氣相色譜質譜聯用法、液相色譜-質譜聯用法等。對于1_(2_氯-4-吡啶基）-3-苯基脲、 1-對氯苯基-2- (1，2, 4-三唑-1-基）-4, 4-二甲-3-戊醇和2,4-二氯苯氧乙酸，目前主要 為反相液相色譜法和液相-質譜聯用法。對于所述的極性植物生長調節劑，特別是強極性 的可離子化植物生長調節劑(如，2,4-二氯苯氧乙酸)而言，常規反相色譜保留作用較弱，單 一色譜分配作用難以實現高分辨分離。結合質譜技術，采用分子碎片質譜信息二次分辨，有 助于提高分離檢測的準確性，但是儀器技術復雜、成本高。
[0004] 微流電色譜，包括分離功能柱，作為一種新興的色譜微分離技術。整體柱作為新興 的分離功能材料，固定相結構穩定，固定相擁有大量納米中孔和微米通孔構型，溶質洗脫傳 輸速率快，區帶擴散效應小；整體柱表面鍵合功能基團豐富、反相/親水作用、離子交換作 用強、生物兼容性良好，對極性植物生長調節劑在柱分離具有明顯優勢；同時，微流電色譜 綜合了高壓電場驅動和微流液相分配的雙重作用，溶質洗脫遷移不僅存在固定相和流動相 間的分配作用，而且受到電滲流的驅動作用，分離過程快速高效。
【發明內容】
[0005] 本發明目的在于提供一種高效植物生長調節劑的微流電色譜分離方法，基于親水 作用整體柱為分離柱，在柱施加高壓電場和微流液相分析模式，應用電滲流和流體壓力驅 動、電泳分離、親水_離子交換的多重作用，實現高效植物生長調節劑的快速分離。
[0006] 為實現上述目的，本發明采用如下技術方案： 一種高效植物生長調節劑的微流電色譜分離方法，以親水作用整體柱為分離柱，在分 離柱上同時施加高壓電場和微流液相分析模式，應用電滲流和流體壓力驅動、電泳分離、親 水-離子交換的多重作用模式，實現高效植物生長調節劑的快速分離。
[0007] 所述商風險植物生長調節劑為1- (2_氯_4_批陡基）_3_苯基脈、1-對氯苯 基-2-(1，2,4_三唑-1-基）-4, 4-二甲-3-戊醇和2, 4-二氯苯氧乙酸。
[0008] 所述分離柱是以甲基丙烯酰氧乙基三甲基銨甲基硫酸鹽為單體、季戊四醇三丙烯 酸酯為交聯劑的有機聚合整體柱。
[0009] 應用以甲基丙烯酰氧乙基三甲基銨甲基硫酸鹽為單體、季戊四醇三丙烯酸酯為交 聯劑的聚合整體柱進行分析的條件包括：以體積比80:20的乙腈與甲酸銨-氨水緩沖溶液 的混合液為流動相，分離電壓-15kV，液相泵壓力750psi，流速為0. 05mL/min; 所述甲酸銨-氨水緩沖溶液的pH值為3. 00,其中甲酸銨的濃度為2. 50mmol/L。
[0010] 所述以乙以甲基丙烯酰氧乙基三甲基銨甲基硫酸鹽為單體、季戊四醇三丙烯酸酯 為交聯劑的聚合整體柱中各組分質量百分數為：甲基丙烯酰氧乙基三甲基銨甲基硫酸鹽占 12%-18%，季戊四醇三丙烯酸酯占2%-8%，引發劑占1%，致孔劑占79% ; 所述引發劑為偶氮二異丁腈； 所述致孔劑為環己醇和乙二醇的混合物，其中環己醇占致孔劑重量的45%-65%。
[0011] 本發明的顯著優點在于： 本發明依靠微流電色譜系統，基于電滲流、電泳和液相色譜洗脫三者綜合作用，應用極 性離子單體（甲基丙烯酰氧乙基三甲基銨甲基硫酸鹽）和極性交聯劑(季戊四醇三丙烯酸 酯）聚合的整體柱，通過優化致孔劑(環己醇和乙二醇）比例，將會改善極性交聯劑和離子單 體在聚合混合物中的溶解度，整體柱表面可修飾上豐富的季銨離子、羧基，能夠提供強的反 向電滲流、親水作用、離子交換作用，可以實現不同電荷性質的植物生長調節劑的電滲流和 流體壓力混合驅動、電泳分離及親水-離子交換作用的多重作用，不僅可以加快分離速度， 同時可以基于強極性功能固定相，提高對極性較強的植物生長調節劑的保留作用，提高柱 效和響應信號強度，克服常規反相色譜柱出峰慢、對于強極性物質分離度不足的缺陷，滿足 不同電荷強度的植物生長調節劑的高效分離要求。
【附圖說明】
[0012] 圖1是植物生長調節劑的反相填充柱分離譜圖。
[0013] 圖2是植物生長調節劑的聚合整體柱分離譜圖。
[0014] 以上圖中1. 1-(2_氣_4_批陡基）_3_苯基脈；2. 1_對氣苯基_2_ (1，2, 4_二 唑-1-基）-4, 4-二甲-3-戊醇；3. 2, 4-二氯苯氧乙酸。
【具體實施方式】
[0015] 為了使本發明所述的內容更加便于理解，下面結合【具體實施方式】對本發明所述的 技術方案做進一步的說明，但是本發明不僅限于此。
[0016] 實施例1: 基于微流電色譜，應用十八烷基鍵合硅膠毛細管填充柱，對高效植物生長調節劑進行 離析，其方法具體為：在毛細管柱末端施加負電荷高壓電場和進樣端上施加液相泵輔助壓 力，進樣體積20iiL，以乙腈：甲酸銨-氨水緩沖溶液（2.50mmol/L，pH3.00)=80:20 (v/ v)為流動相，分離電壓-15kV，液相泵輔助壓力750psi，流速0.05mL/min, 植物生長調節劑的微流電色譜分離如圖1，整個流程約7min，洗脫峰依次為：峰1為 1- (2-氯-4-吡啶基）-3-苯基脲；峰2為1-對氯苯基-2- (1，2, 4-三唑-1-基）-4, 4-二 甲-3-戊醇；峰3為2, 4-二氯苯氧乙酸。
[0017] 實施例2: 以甲基丙烯酰氧乙基三甲基銨甲基硫酸鹽為單體、季戊四醇三丙烯酸酯為交聯劑，按 照以下配方組成，配制聚合反應液。整體柱A-E的具體配方如下：
【主權項】
1. 高效植物生長調節劑的微流電色譜分離方法，其特征在于：以親水作用整體柱為分 離柱，在分離柱上同時施加高壓電場和微流液相分析模式，應用電滲流和流體壓力驅動、電 泳分離、親水-離子交換的多重作用模式，實現高效植物生長調節劑的快速分離。
2. 根據權利要求1所述的方法，其特征在于，所述分離柱是以甲基丙烯酰氧乙基三甲 基銨甲基硫酸鹽為單體、季戊四醇三丙烯酸酯為交聯劑的有機聚合整體柱。
3. 根據權利要求1所述的方法，其特征在于，所述高風險植物生長調節劑為 1- (2-氯-4-吡啶基）-3-苯基脲、1-對氯苯基-2- (1，2, 4-三唑-1-基）-4, 4-二甲-3-戊 醇和2, 4-二氯苯氧乙酸。
4. 根據權利要求1所述的方法，其特征在于：進行分離的條件包括：以甲基丙烯酰氧 乙基三甲基銨甲基硫酸鹽為單體、季戊四醇三丙烯酸酯為交聯劑的聚合整體柱為分離柱， 以體積比80:20的乙腈與甲酸銨-氨水緩沖溶液的混合液為流動相，分離電壓為-15 kV，液 相泵壓力為750 psi，泵流速為0? 05 mL/min ; 所述甲酸銨-氨水緩沖溶液的pH值為3. 00,其中甲酸銨的濃度為2. 50 mmol/L。
5. 根據權利要求1所述的方法，其特征在于：按質量百分數之和為100%計，聚合整體 柱中各組分質量百分數為：甲基丙烯酰氧乙基三甲基銨甲基硫酸鹽占12%_18%，季戊四醇 三丙烯酸酯占2%-8%，引發劑占1%，致孔劑占79% ; 所述引發劑為偶氮二異丁腈； 所述致孔劑為環己醇和乙二醇的混合物，其中環己醇占致孔劑重量的45%-65%。
【專利摘要】本發明公開了一種高效植物生長調節劑的微流電色譜分離方法，應用以甲基丙烯酰氧乙基三甲基銨甲基硫酸鹽為單體、季戊四醇三丙烯酸酯為交聯劑的聚合整體柱作為分離柱，在柱施加高壓電場和微流液相分析模式，應用電滲流和流體壓力綜合驅動、電泳分離、親水-離子交換等多重作用模式，實現高效植物生長調節劑的連續分離。
【IPC分類】G01N30-06
【公開號】CN104614469
【申請號】CN201510058412
【發明人】林旭聰, 王緒培, 謝增鴻
【申請人】福州大學
【公開日】2015年5月13日
【申請日】2015年2月5日