專利名稱:用于熒光計的液池的制作方法
技術領域:
本實用新型涉及一種熒光測定裝置。
聚合酶鏈式反應(Polymerase Chain Reaction,PCR)是通過一對引物對基因組或克隆的靶序列進行外酶促擴增的系統。用PCR技術可以在3h內將靶序列放大109倍。經過10多年的發展,這一技術現已廣泛應用于基礎生物科學和臨床研究的諸多領域,如直接測序、基因克隆、DNA分型、點介導的突變、產前遺傳性疾病研究、等位基因變異分析、食品污染及環境微生物檢測等。PCR產物的傳統檢測法有凝膠電泳及核酸固相雜交法。這2種方法存在耗時、操作步驟繁瑣、可能由于先前擴增產物的傳遞污染而導致假陽性結果等缺點。近年來發展的PCR-ELISA技術將PCR擴增與ELISA檢測相結合,使檢測過程大為縮短,適合于大批樣品分析,但因污染而導致的假陽性問題仍是該法存在的主要問題。熒光分析法及熒光標記物由于具有選擇性好、靈敏度高、可選擇參數多、容易克服背景干擾等優點而在PCR產物的檢測中日益受到重視。這一方法尤其在實現PCR產物的均相封管測定從而解決污染問題方面具有獨到的優越性。但是現有商品化的熒光計(含熒光分光光度計)所用的液池一般呈方形筒狀,由玻璃或石英制成,不能直接用于PCR產物的檢測。這一缺陷極大地限制了PCR產物熒光檢測技術的推廣和普及。國外已開發了可用于PCR產物直接測定的熒光儀器(TshiguraT.Anl.Biochem.,(1995,229:207~213),采用耐熱的聚丙烯代替聚苯乙烯制成專用的PCR反應板用于PCR擴增,在用該系統進行微孔掃描測定。已商品化的這類儀器均為專用系統,功能單一,價格昂貴,且不能與現行廣泛使用的PCR反應管兼容,使這類儀器的推廣應用受到了很大的限制。因此,如何對現行的熒光分光光度計(或熒光計)進行適當改造,使其可與現用的PCR反應管兼容用于PCR產物的帶管測定,是一項具有很大現實意義的工作。
本實用新型的目的旨在提供一種可容納PCR反應管,在現有商品化的熒光計(含熒光分光光度計)上用于聚合酶鏈式反應(PCR)產物的直接檢測的熒光計液池。
本實用新型設有一由硬質材料制成的長方體池體,由池體的上方開設呈倒圓錐體狀的池槽,在池體下部一側開設激發光入射孔,在其余側面開設至少1個發射光出射孔。
所說的硬質材料為高分子材料,不銹鋼或有機玻璃等。所說的激發光入射孔和發射光出射孔為圓形,方形,梯形,三角形,多邊形或其他形狀。
使用時PCR反應管插入池槽。需要時池體底部可設池底座,以適用于不同入射方向的儀器。池體、池槽、激發光入身射孔與發射光出射孔的尺寸可依PCR反應管的體積而定。
由于在現有商品化的熒光計(含熒光分光光度計)配用本實用新型可解決PCR反應管與現有熒光計不能兼容的問題,從而實現PCR產物帶管直接熒光檢測,操作簡便,測定迅速,可最大程度地克服已有PCR技術存在的主要問題-污染。由于本實用新型可隨時裝卸,裝上時可進行PCR產物的檢測,不裝時,可按平常使用,適于水平入射或垂直入射以及不同PCR反應管容積,因此本實用新型拓寬了熒光計的功能。由于一般的熒光分光光度計均具有多種功能,可提供多種熒光測定參數,因此在使用本實用新型后,不僅可進行PCR產物的定性定量分析,還可利用原來儀器功能多樣的特點通過多種熒光參數的測量而獲得有關PCR產物的更多信息。另外,已有所用的PCR產物熒光檢測系統,其激發波長和發射波長都是固定的,因此使其在熒光試劑的選擇上受到很大的限制(僅限于熒光素-羅丹明這一對能量轉移體系)。但使用本實用新型后,由于測定是在熒光分光光度計、熒光計上進行,激發波長和發射波長可在寬廣的范圍內選擇,從而極大地拓寬了熒光試劑的選擇范圍,給使用者帶來很大方便。
圖1為本實用新型的結構圖。
如圖1所示,設有高分子材料制成的長方體池體1,從池體1的上方開設呈倒圓錐體狀的池槽2,在池體1的下部一側開設呈正方形的激發光入射孔3,在其余側面開設2個呈正方形的發射光出射孔4,5。在入射孔3的對面一側也可設發射光出射孔。作為實施例,池體的長、寬、高分別為12.5、12.5、30mm,池槽開口直徑為φ8mm,入射孔3和出射孔4,5的長為5mm。
權利要求1.用于熒光計的液池,其特征在于設有一由硬質材料制成的長方體池體,由池體的上方開設呈倒圓錐體狀的池槽,在池體下部一側開設激發光入射孔,在其余側面開設至少1個發射光出射孔。
2.如權利要求1所述的用于熒光計的液池,其特征在于所說的硬質材料為高分子材料,不銹鋼或有機玻璃。
3.如權利要求1所述的用于熒光計的液池,其特征在于所說的激發光入射孔和發射光出射孔為圓形,方形,三角形,多邊形或其他形狀。
專利摘要涉及一種熒光測定裝置,設硬質材料制成的長方體池體,上方設倒圓錐體狀的池槽,在池體下部一側設激發光入射孔,在其余側面開設至少1個發射光出射孔。解決PCR反應管與現有熒光計不能兼容的問題,實現PCR產物帶管直接熒光檢測,操作簡便,測定迅速,克服PCR技術的污染問題,拓寬熒光計的功能。
文檔編號G01N33/52GK2344777SQ9824341
公開日1999年10月20日 申請日期1998年9月16日 優先權日1998年9月16日
發明者李東輝, 許金鉤, 廖綿初 申請人:廈門大學