專利名稱：酶免疫測定用的條狀固相物及特制反應凹槽的制作方法
技術領域：
本實用新型涉及免疫學技術領域，屬化驗檢測用的儀器配件類。
目前，國內外采用酶聯免疫吸附技術進行抗原，抗體檢測時，大多以表面密排著若干小孔的聚苯乙烯塑料板作為固相載體，并制成各種商品化試劑盒出售，使用這種載體的塑料板因載體吸附能力差，反應表面積較大，尚存在難以微量化，且操作費時，檢測速度慢等缺點。近年，在實驗室建立了采用硝酸纖維素濾膜(NC)為固相載體的斑點酶免疫吸附測定法(DOt－ELISA)后，目前在國內雖也出現1－2種將NC加工處理的專供抗原、抗體進行DOt－ELISA檢測的商品化NC試劑盒，但這類試劑盒仍存在以下缺點1、試劑用量大；2、操作仍較繁瑣；3、不便于同時進行多份樣本的檢測；4、檢測的結果只適用于采用斑點法進行目測，難以在液態下顯色后，再用酶標儀以數字顯示光密度(OD)值。
本實用新型的目的是在于克服上述目前國內相近技術所存在的缺點和問題，提供一種用以進行酶免疫測定用的條狀固相物及特制的反應凹槽，使之能同時進行多樣本的抗原抗體檢測，操作簡便快速，試劑用量少，檢測結果不僅可采用斑點法進行目測，而且也可以在液態下顯色后，用酶標儀以數字顯示其光密度值。
實現本實用新型目的的技術方案是一種用于酶免疫測定用的條狀固相物及特制的反應凹槽，其特征在于(1)條狀固相物是由硝酸纖維素濾膜(NC)加工制成有固定長度與寬度，粘附在特制的反應凹槽里，其長度與凹槽長度相當，寬度略小于凹槽寬度，在靠近反應凹槽下方的條狀NC的頂端上面包被有微量的供檢測樣本用的已知抗原或抗體；(2)特制的反應凹槽是由多個呈上高下低以一定傾斜度并行整齊排列著，下端各有一相當于半個凹槽壁高度的開口，每個凹槽的長度、寬度相同，凹槽與凹槽之間都有橫隔隔開，凹槽上、下端開口處各與有一定寬度的上、下長槽相通，下長槽兩端中的一邊開有一個出水口，通向槽外。
圖1為條狀固相物及特制的反應凹槽立體示意圖
其中1－條狀固相物(NC) 2－包被抗原或抗體3－上長槽 4－下長槽 5－下長槽出水口6－反應凹槽 7－反應凹槽開口8－凹槽橫隔 9－塑料板現結合附圖通過實施例進一步說明本實用新型的結構和使用原理；實施例本實用新型采用模具壓制出塑料(9)的特制反應凹槽(如圖1)，將硝酸纖維素濾膜(NC)切割成條狀(1)其長度與寬度，按反應凹槽的長、寬尺寸預先設計好，然后將切割成條狀的NC粘附在反應凹槽里，在下方條狀NC的頂端上面包被上微量的專供檢測某種樣本用的已知抗原或抗體，檢測時可在微量的情況下使抗原抗體在凹槽中進行反應，由于反應凹槽是多個并行整齊排列著的，因而可同時進行多種抗原抗體檢測，由于反應凹槽彼此間有橫隔(8)隔開，可避免樣本在檢測時的相互混淆，每一個反應凹槽從上到下呈一定傾斜度，下方有一缺口(7)，這樣結構使得檢測時試劑和被檢樣本都能集中于凹槽下方，與條狀NC頂端的已知抗原或抗體(2)進行反應，使試劑用量大為節省，并為用流水沖洗創造了極方便的洗滌條件，在反應凹槽的上、下兩端均與一長槽相通，下長槽一邊開有一個出水口，通向槽外，以供洗滌時的進水和出水。根據檢測者的不同要求，對檢測結果也可選以不同方法，使用不同的顯色底物，如選用斑點目測，則使用二氨基聯苯胺(DAB)或氨基乙基咔唑(AEC)作為底物(其顯色產物為不溶性沉淀物)，如選用酶標儀測定光密度(OD)值，則使用四甲基聯苯胺(TMB)或鄰苯二胺(OPD)作為底物(其顯色產物為可溶性)待顯色后，將有色液體從凹槽中吸出移注于通用的塑料板中，置酶標儀下測定讀數。
應用本實用新型檢測的一個實例例如要知道某甲和某乙是否受到乙型肝炎病毒的感染，可利用本實用新型所制成之乙肝實驗診斷試劑盒，快速檢測待測人血清中有無乙肝病毒表面抗原(HBsAg)的存在，具體檢測操作如下在兩個特制的反應凹槽中的條狀NC上分別加入待測對象甲和乙的血清和酶標單克隆抗－HBs各10ul，同時在另外兩個凹槽中分別作已知陽性和陰性的血清對照，讓它們在37℃預熱的濕盒中作用反應30分鐘，取出在自來水下沖洗半分鐘，然后以相應底物顯色觀察結果，即可判定待測樣本為陽性或是陰性(陽性者顯色，表示血清中有HBsAg，陰性者不顯色，表示血清中未測到HBsAg)。
本實用新型與現有技術相比的優點是1、本實用新型可同時檢測多份樣本；2、檢測時間快速(僅30分鐘)；3、靈敏度高(如對乙肝病毒表面抗原可檢出0.5－1ug／ml的抗原)；4、操作方便又能避免樣本彼此之間的相互混淆；5、材料節省(1－10ul)，試劑用量少；6、便于免疫學快速檢測法的建立；7、有開發低成本商品化試劑盒的前景，社會經濟效益好。
權利要求1.一種用于酶免疫測定的條狀固相物及特制的反應凹槽，其特征在于(1)條狀固相物是由硝酯纖維素濾膜(NC)加工制成有固定長度與寬度，粘附在特制的反應凹槽里，其長度與凹槽長度相當，寬度略小于凹槽寬度，在靠近反應凹槽下方的條狀NC的頂端上面包被有微量的供檢測樣本用的已知抗原或抗體；(2)特制的反應凹槽是由多個呈上高下低以一定傾斜并行整齊排列著，下端各有一相當于半個凹槽壁高度的開口，每個凹槽的長度、寬度相同，凹槽與凹槽之間都有橫隔隔開，凹槽上、下端開口處各與有一定寬度的上、下長槽相通，下長槽兩端中的一邊開有一個出水口，通向槽外。
專利摘要酶免疫測定用的條狀固相物及特制反應凹槽，是以硝酸纖維素濾膜(NC)為載體，可在反應凹槽內進行各種抗原抗體的快速檢測。其特征是將NC制成條狀，粘附于反應凹槽內，在靠近反應凹槽下方的條狀NC頂端上面包覆有微量的供檢測樣本用的已知抗原或抗體。本品可同時用于多種抗原抗體的檢測，且檢測諸步驟均可在此凹槽內進行，操作簡便快速，試劑用量少，靈敏度高，對檢測結果可目測，也可用酶標儀讀數，可開發成商品化試劑盒，社會經濟效益好。
文檔編號G01N33/53GK2156511SQ9321178
公開日1994年2月16日 申請日期1993年5月3日 優先權日1993年5月3日
發明者戴金 申請人:戴金