專利名稱：口液收集器和配套裝置的制作方法
技術領域：
本發明涉及獲取口液以便進行試驗的設備和方法。
參考文獻Parry，J.V.，etal.，Lancet272-75(1987).
Thieme，T.，etal.，J.Clin.Microbiol.201076-1079(1992a).
Thieme，T.，etal.，"OralFluidSamplingforDeterminationofHIV-IAntibodySerostatus，"AbstractfromⅧInt′1.Conf.onAIDs，pg.C328(1992b).
一般用來檢驗體液以獲取有診斷價值的物質存在的分析方法和設備有許多種。血液和尿都是精選出來的體液。血液用作試驗液體的一個優點是分析物的濃度通常相當高，測定這些濃度通常可給出有關患者健康狀況的信息。當感當趣的血液成分(如低分子量的藥物或激素)在尿形成期間被濃縮時，尿對于診斷試驗就是很有用的了。但分析物在尿中的濃度經常反映不出血液中分析物的生理活動量。
盡管唾液在醫療診斷中通常不當作體液使用，但許多研究(Parry，etal.，Thieme，etal.，1992a，b)已經證實唾液和其它類型的口液能為診斷試驗提供可靠的試樣，其中包括對人或動物的各種病原特異的抗原或抗體。在測量天然激素的體內水平以及治療藥物和其它藥物的體內水平時，口液也被證實是有用的。
口液取樣優于血液和尿取樣的一個方面在于獲取試樣很方便。口液取樣不需要像血液那樣的訓練有素的抽血人員，也不像尿取樣那樣需要專用于樣品收集和保管的特殊器具。再有，收集口液試樣還可避免處理被血污染的針頭和針管之類的麻煩。
收集口液的設備已被描述過。美國專利4，418，702和4，580，577公開了一種吸收口液的吸墊，以及從吸墊提取口液的針筒-柱塞機構。
美國專利4，774，962描述了一種吸收唾液的吸墊，以及一個離心管和管插入物，用于通過離心作用從吸墊上取出口液。
美國專利5，056，521描述了一種用于監測口液中葡萄糖的設備。該設備包括一個針筒-柱塞機構，該機構有一個固定到柱塞上的非反應性吸收拭子。用針筒和柱塞將液體試樣從拭子擠入葡萄糖監測儀器中。
本發明一方面包括一種收集口液以便進行診斷的器械。該器械包括一個吸墊，用于從口液中提取試驗物質，還包括一個結構(裝置)，用于從吸墊上提取已吸收到吸墊上的口液。
具體地說，從吸墊提取已吸收的口液的結構包括具有一個針筒的注射器和一個附有吸墊的柱塞。
吸墊可包含各種添加劑，例如防腐劑、鹽、香料、以及保護劑，用于防止口液組分對吸墊的非特異的結合。在一個優選實施例中，用鹽的高滲溶液浸透吸墊，下面將對此作進一步描述。
在另一個優選實施例中，該注射器進一步還包括位于針筒出口端的一個液體通路，并且檢測試劑(一種或多種)包含在該通路中，當口液自針筒排出時，該試劑能有效地排入口液中。該通路可由一個試劑管確定，該試劑管按可拆卸的方式安裝在針筒上。
按本發明的一個相關方面，本發明包括一個測定裝置，用于測定口液中的試驗物質。該裝置包括上述的吸墊-注射器結構和一個用于接納從該結構排出的口液的檢測單元。該檢測單元包括一個固相載體和附著在該載體上的結合劑，當口液自針筒排入到該檢測單元時，該結合劑能有效地專門結合到口液中的試驗物質上。該檢測單元可連接到注射器的出口端，或可用作一個獨立的接納液體的結構。
該裝置進一步包括一個與檢測單元成液體連通的、和針筒相連的通路。該通路可包含檢測試劑(一種或多種)，當口液從針筒排出時，該試劑能有效地排入口液中。檢測試劑(一種或多種)最好能與口液中的實驗物質有效地進行反應，以便在載體上產生一個可檢測到的信號，該信號取決于口液中試驗物質的濃度。
在該裝置的一個優選的實施例中，固相載體是一個可滲透的膜，并且該檢測單元進一步包括一個吸收部件，該吸收部件可與膜接觸，從而可抽取穿過該膜載體的口液。
按一種結構，該試驗物質是一種抗體，該抗體是被已知病原感染的診斷。結合劑可以是一種抗原，該抗原可與該試驗抗體發生免疫反應，在這種情況下該裝置進一步還包括一個報告信息物標記的試劑，當該試劑結合到固相載體上時，該試劑能有效地結合到該試驗物質抗體上。
另外，該結合劑可以有選擇地結合人的抗體，在這種情況下該裝置可以進一步包括一種報告信息物標記的抗原，該抗原可與試驗物質抗體發生免疫反應。一種結合試驗物質抗體的典型結合劑是蛋白A。
按另一種結構，該試驗物質是一種抗原，該抗原是被已知病原感染的診斷。結合劑可以是一種抗體，該抗體可與試驗抗原發生免疫反應，在這種情況下該裝置可進一步包括一種報告信息物標記的試劑，該試劑當被結合到固相載體時，該試劑能有效地結合到該試驗物質抗原上。
按本發明的另一方面，包括一個固相載體表面，用于對一個口液試樣中的試驗物質和標記物質這兩者同時進行鑒定，標記物質即是能對被檢驗的口液給出可靠指示的物質。分別結合試驗物質和標記物質的第一和第二結合劑可以定位在該表面至少部分的不重疊區域。兩個結合區最好形成符號“+”的兩個長條。
當結合附圖閱讀本發明的下述詳細描述時，本發明的這些和其它目的及特征將更加清楚。
圖1A和1B是按本發明一個實施例的口液收集器的剖面側視圖，表示在該器械中柱塞與針筒接合之前(圖1A)和之后(圖1B)的情況圖2是圖1器械的柱塞和吸墊的組裝圖;
圖3A和3B表示另一個試劑管和針筒實施例;
圖4表示按本發明的試驗裝置的剖面側視圖;
圖5表示按本發明的試驗裝置的另一個實施例的剖面側視圖;
圖6A-6C表示用于按本發明檢測口液中試驗物質的典型的固相形式;
圖7表示一個固相載體表面的布局，用于對口液中的試驗物質和標記物質同時進行測定。
A.口液收集器圖1A和1B表示按本發明構造的一個口液收集器8。該收集器一般來說包括一個起收集口液作用的吸墊10、連附到吸墊10上的一個柱塞11、一個針筒12、以及一個在所示實施例中的可拆卸的試劑管13。柱塞11包括柱塞桿14、密封墊15(位于柱塞內端)、推板16(位于柱塞外端)。
圖2表示柱塞和吸墊的組裝圖。如圖2所示，柱塞桿按常規作法包括靠近柱塞桿內端的一對徑向擴展件18、20，其末端為指狀突出物22。按常規方式，最好通過注模適當的聚合物來形成柱塞桿和推板。
密封墊15是一種軟橡膠或柔性的聚合物材料，將它設計成能接納在柱塞上并能借助于擴展件18、20固定就位，顯然，突出物22要穿過密封墊的端部伸出去。墊的直徑要能和針筒12的內壁形成一個緊貼在一起的不漏液體的密封。
墊10通過常規的粘合劑(例如適于人類口腔使用的硅橡膠粘合劑之類的粘合劑)固定到柱塞11的內端。吸墊和柱塞桿的固定接觸表面包括墊15的內表面、以及容納在吸墊中的突出物22的那部分，如圖2所示。
吸墊可由一系列適于口腔使用的吸收材料中的任何一種材料制成。墊最好是一種厚的吸收性棉團或紙，例如牙科操作通常使用的那種。這種吸墊的一個實例是PattersonDentalCo.(Minneapolis，MN)發售的1.5英2中等棉團。也可以使用諸如纖維素、聚氨酯、聚酯、以及人造纖維之類的材料。
在本發明的一個實施例中，用鹽的高滲溶液浸透吸墊，溶液的量要對在口液中回收高濃度的試驗物質(例如免疫球蛋白)有效。如在美國專利5，103，836中詳細描述的那樣(在這里參考引入了該專利)，使用高滲溶液的結果是能從口腔中的其它來源恒定地產生免疫球蛋白，這些來源眼下尚不定全清楚。和使用蒸餾水相比，使用高滲溶液獲得的免疫球蛋白可能提高8-16倍之多。
高滲溶液是一種離子濃度超過血中的離子濃度的鹽溶液。一般而言，在制備本發明的高滲溶液中所用的鹽的數量從約1.5%到約5%(按重量計)，最好為3.5%(按重量計)。
在制備高滲溶液中可以使用的鹽包括堿金屬化合物，以及堿土金屬化合物。優選的鹽包括氯化鈉、氯化鉀、硫酸鎂、氯化鎂、以及氯化鈣。已發現，氯化鈉的毒性最小，價格最便宜，并且口感最好。
高滲溶液還可包括一種刺激唾液分泌的化合物或成分。我們發現，能夠刺激唾液分泌的化合物具有酸味。這些化合物包括弱有機酸。在弱有機酸當中優選的是檸檬酸、抗壞血酸、醋酸。使用檸檬酸和抗壞血酸的最佳濃度在約0.05%和0.5%(按重量計)之間。醋酸的最佳范圍在約0.5%和3.0%(按重量計)之間。
為了將收集到的試樣變質的可能性降至最小，高滲溶液中可以包括防腐劑。這樣一種防腐劑的作用是抑制蛋白分解酶的活動，這種酶的活動可能導致抗體分子破壞。期望用作防腐劑的化合物包括抗細菌劑、抗真菌劑、制菌劑、制真菌劑、以及酶抑制劑。在優選實施例中，用苯甲酸、山梨酸或它們的鹽作抗真菌劑。作為制菌劑，期望使用高濃度的鹽和在低pH值下能維持高滲溶液的化合物。這樣的鹽包括乙基汞硫代水楊酸鈉(或硫柳汞)、乙酸苯汞、硝酸苯汞、以及疊氮化鈉。其它的優選防腐劑包括在藥品中和漱口藥品中通常使用的那些防腐劑。例如乙醇和洗必太葡萄糖酸鹽。另一種類型的優選抗微生物和抗病毒劑是可以用作局部殺菌劑使用的或在漱口藥品中使用的去污劑，例如氯化芐烷銨。使用這些防腐劑的范圍最好為約0.01%到約0.2%(按重量計)。
通過現有的方法用高滲溶液將吸墊浸透。將本發明的高滲溶液加到吸墊上的方法可以是把吸墊浸漬入鹽的高滲溶液中，從而把溶液中的鹽吸收在吸墊中和吸墊上，將吸墊從溶液中取出并使其干燥。一般來說，如果將吸墊浸入高滲溶液中，能吸收大約1ml(毫升)該溶液。另外，可以將高滲溶液噴灑到吸墊上，直到吸墊吸收到足夠數量(最好1ml左右)的溶液時為止。將吸墊上的多余液體搖晃掉，然后將吸墊放入50℃的強制空氣對流烘箱中兩個小時，或者在沒有強制空氣存在的情況下，放入80℃的烘箱6-12小時。烘干后，即形成了一個包含鹽的高滲溶液的、經過特殊處理的吸墊。在墊的制備過程中最好使用下述的鹽作為防腐劑氯化芐烷銨、氯化乙酰吡啶、或洗必太葡萄糖酸鹽。
可以制作吸墊的大多數材料都可能以非特定的方式結合束縛住蛋白質。因此，免疫球蛋白就可能結合到吸墊上，這是不期望的;期望通過使用保護劑阻止蛋白質向吸墊的結合。由于血液包含它自己的保護劑(即，人血清白蛋白)，因此在血樣收集中的非特定結合一般不成問題。
為了在口液樣品收集中減少非特定的結合，可在高滲溶液中加入保護劑，從而即將保護劑加到吸墊內。保護劑一般是一種可溶性蛋白，用它來防止另一種蛋白對固體表面的非特定結合。可作為保護劑加入的化合物包括白蛋白和明膠，但任何一種可溶于水的無毒蛋白都可用作保護劑，條件是這種蛋白對要采用的測定沒有不利的影響。最好使用牛明膠。一般來說，加到本發明的高滲溶液的保護劑的濃度在約0.01%和0.2%(按重量)之間。然后按以上所述將高滲溶液中所含的組分加到吸墊上。
在制備吸墊時使用的優選溶液的組成如下組分濃度(%,按重量)氯化鈉3.5%檸檬酸0.3%苯甲酸鈉0.1%山梨酸鉀0.1%牛明膠0.1%蒸餾水加入0.1N氫氧化鈉將pH值增加到6.5左右現在再次參照圖1A和1B。針筒12確定了一個內壁24;內壁24在長度方向上能接納吸墊和柱塞墊(如圖2A所示)，并且在直徑方向上能緊湊地容納墊15，從而在它們之間形成一個不漏流體的密封。針筒12有一個凸出的或徑向加大的開口26，便于在收集口液后將吸墊放入針筒內。在針筒的相對的內端設置一個燒結板28，它的作用是一個可透過液體的過濾器，當迫使柱塞進入針筒時，允許吸墊中吸收的口液通過，從針筒排出。位于針筒端部的出口30提供接納試劑管13的插口。在不包括試劑管13的設備的實施例中，針筒的出口端像標準的注射器結構那樣，可以逐漸變細，形成一個窄細的出口。注射器在這里也指的是提取已吸收進吸墊中的口液的裝置。
按本發明的柱塞-吸墊機構以及針筒的典型尺寸是柱塞11的長度，包括密封墊15的長度在內，約為3英寸，直徑約為0.12英寸;吸墊10的長度約為1.5英寸，直徑約為0.375英寸。如果使用軟像膠密封墊，那么0.5英寸直徑和約0.25英寸長度的密封墊適于在內徑約為0.4375英寸的針筒內形成不漏液體的密封。
試劑管13包括一個環形接頭32，接頭32緊配合卡入針筒的插口內，從而把試劑管13牢固地固定在針筒上。為穿過該室的內部通道33提供一個試劑盤34，盤34用檢測試劑(一種或多種)浸透，當通過試劑管排出口液時，這些檢測試劑最好作為溶解物組分排入口液中。如下面將要討論的，試劑(一種或多種)用于檢測口液中選定的分析物(一種或多種)。此外，試劑(一種或多種)可以包括適用于某些類型的固相測定中的保護劑，例如明膠、奶酪蛋白、或牛血清白蛋白，對此，下面還要討論。在一個實施例中，報告信息標記物的抗體或抗原在含有0.5%明膠和30%蔗糖(當口液通過試劑管時，為了便利于溶解蛋白)的水溶液中溶解濃度為幾個mgs/ml。試劑管中的試劑盤夾在位于試劑管小室內的兩個可透過液體的燒結板35和36之間。
在圖3A和3B中表示出試劑管和針筒的另一些實施例。例如如圖3A所示，針孔出口38可以是一個插入(LuerTM)連接件39，用于連接試劑管42中的相應的承接連接件40。試劑管包括一個浸透檢測試劑(一種或多種)的剛性燒結板44。圖3B中表示出一個類似的裝置，只是針筒出口48的插入連接件46(LuerTM)直接凹入針筒的主體中。圖3B還表示出一個針筒結構，其中的針筒的內壁朝向它的出口端逐漸變細，以便在壓擠吸墊時減少針筒中剩余的口液數量。
試劑管中的條帶50是一個可以弄濕的試劑條，當它被通過針筒的口液弄濕時，在口液中存在分析物的情況下，條帶50產生可檢測出來的顏色變化。使用已知的酶可以檢測出分析物(例如葡萄糖)，這些酶例如是和過氧化物酶系統耦合在一起的葡萄糖氧化酶，它能在H2O2存在的情況下有效地產生可檢測到的顏色變化。在圖1-3所示的每一個試劑管實施例中，一個內部室確定一個通路，例如試劑室13中的內部通路33，該通路可以包含檢測試劑(一種或多種)或試劑裝置，當口液自針筒排出時檢測試劑被排入口液中(圖1和2)，或者與通過該通路的口液有效地進行混合(圖3)。
另一方面，可以把包含檢測試測的通路包含在針筒的出口端內，例如沿針筒出口的側壁，因此就不需要單獨的試劑管了。
為了用收集器(例如圖1A和1B所示的設備)收集口腔中的物質，將柱塞-吸墊機構放入患者口中，以便讓吸墊整體都處在口中。在下頰和牙齦之間放置吸墊便于吸附來源于齦淋巴組織的分泌物、以及來自粘膜下層淋巴組織和唾液腺淋巴組織的分泌物。在收集樣品時，最好在牙齦之間來回擦抹吸墊10秒鐘左右，然后吸墊定位不動約30秒到2分鐘。在吸墊浸透口液后，將吸墊從口中抽出，然后將柱塞-吸墊機構放入針筒內，先放吸墊端部，以便可以自吸墊提取口液。
可將口液貯存起來，晚些時間再來分析，口液最好貯存在適當的防腐液中。另外，口液可與檢測試劑(一種或多種)混合起來，或者直接排出(沒有經過試劑檢測)，或者在一個固相檢測設備上與檢測試劑混合后再排出，這將在下面的B段中進行描述。
另外，可以通過溶液均相測定法測定口液分析物來設計引入口液中的試劑。例如在檢測口液中存在的抗原-特異抗體中使用的測定可以依據各種均相測定格式，例如依據耦合的酶、熒光的猝滅、或EMIT結構(Gosling，J.，ClinChem，36(8)1408(1990))。另外，該測定可能涉及到口液中分析物的免疫沉淀作用，從而產生一種可檢測到的凝集產物，例如包有免疫沉淀素的彩色小球。
如前所述可以理解到本發明的各個目的和特征是如何滿足的。該器械對于醫院、診所、甚至家用都是很方便的，口液樣品的收集很容易，并且可立即測定。由于柱塞-吸墊機構在樣品收集后可插入針筒中，可以放在和包裹在針筒里。因此該設備可減少樣品接觸使用者的危險。
B.口液測定裝置按本發明另一方面，包括一個檢測口液中試驗物質的裝置。該裝置一般包括一個上述類型的吸墊針筒機構和一個適于接納吸墊排出的口液的檢測單元。該檢測單元有一個包含在檢測單元中的固相載體和一種附著到該載體上的結合劑，當口液自針筒排入該單元時，該結合劑能有效地專門結合到口液中的實驗物質上。然后通過結合到載體上的分析物的數量確定口液中的分析物如抗原、或免疫球蛋白濃度。在一個實施例中，該裝置如在上述A段中所述，包括一個通路，該通路包含檢測試劑(一種或多種)，(a)當口液自針筒排出時該試劑能有效地被排放，并且(b)該試劑包括一種或多種試劑組分，這些組分是產生可檢測到的固相結合反應所必須的，其中包括結合到固相表面的分析物。
測定形式的選擇取決于測定的試驗物質。這種試驗物質包括各種免疫反應分析物，例如藥和藥的代謝產物，如可卡因或尼古丁或它們的代謝產物，以及病毒和細菌抗原如乙型肝炎表面抗原、免疫球蛋白、特別是IgG和IgM、還有激素，如β-HCG。吸收或共價地結合選定的結合劑到固相載體上的方法是眾所周知的，該方法包括將生物微型(biotinylated)蛋白(例如卵白蛋白)吸附到膜上，隨后以抗生蛋白鏈菌素衍化形式附著結合劑，通過特定的例如抵抗將要結合的抗體的Fc部分的抗體將抗體附著到載體上，以及例如使用各種可得到的雙功能耦合試劑共價結合到膜上的表面可衍化基團上。
圖4和5表示按本發明的測定裝置的兩個實施例。在這兩個圖中都表示出注射器收集設備52的下部，其中包括注射器54和試劑管56。該收集設備的結構和上述A段中描述的結構相同。在圖4的實施例中，檢測單元(用60表示)可以連接到試劑管上，用于接納自試劑管排出的口液。試劑管可以包含檢測試劑(一種或多種)，例如報告信息物標記的分子，它們能和結合到固相載體上的分析物分子進行有效地競爭。
單元60一般包括具有入口63的外殼62，此入口可連接到試劑管的出口側并與該出口側液體連通，如圖所示。一個固相載體或膜64固定在該外殼內，其位置適于容納自注射器設備排出的口液。在手風琴狀的結構68中并在膜64的下方懸置一個吸墊66，以便在吸墊與膜的下側接觸時抽吸穿過膜的口液。
圖5表示具有膜72的檢測單元70，通過窗口74可以觀察到膜72，膜72和窗口74都固定在外套75中。位于膜72下方的吸墊76通過使外套底部變形可與膜的下側接觸以便抽取穿過膜72的口液。
雖然圖4和5所示的組合實施例中的檢測單元可以固定到注射器設備上直接接納來自注射器的口液，但本發明還期望有一種裝置，其中的檢測單元是一個獨立的結構，例如通過在該單元中的膜上涂上口液和其它檢測試劑的方式來接納口液。
在圖6A、6B和6C中表示出可以在該裝置中使用的各種測定結構。在圖6A中，一種試驗物質80(一種抗體)是通過免疫特異結合到載體結合的抗原84上而被俘獲在固相載體82上。然后俘獲的分析物又可通過報告信息物標記的非人體抗體86進行檢測。
圖6B表示檢測試驗抗體90的固相載體88。通過在固相載體上攜帶的結合劑92(如蛋白A和非人體免疫球蛋白)將分析物抗體結合到固相膜上。通過與試驗抗體發生免疫反應的標記報告信息的抗原94，可以對結合的分析物抗體進行檢測。
圖6C表示用于檢測口液中抗原分析物98的固相載體96。在該單元中的結合劑是一種抗原特異的抗體100。用一種包含報告信息物標記的抗體(它與分析物上的第二表位發生免疫反應)的檢測試劑可檢測結合到該載體上的抗原-分析物。另一方面，該檢測試劑可以是一種報告信息物標記的抗原，該抗原可與分析物抗原競爭，以便結合到固相載體的結合劑上。
按常規，上述檢驗試劑中的報告信息物是一種加入適當物質可檢測到的酶，或者是一種熒光報告信息物。
對口液中的試驗物質的測定可包括對一種標記物質的同時鑒定，下面對此將作進一步的描述。在使用本發明的固相載體表面對口液樣品進行的典型鑒定中，試驗物質是一種與HIV-1肽起免疫反應的抗體，標記物質是轉鐵蛋白。固相載體表面包括有附著到膜表面第一區的蛋白A，用于結合人的抗體，還包括有附著到膜表面第二區的抗轉鐵蛋白抗體，它對俘獲轉鐵蛋白是有效的。為了檢測HIV-1抗體和轉鐵蛋白，該測定包括HIV-1肽的辣根過氧化物共軛物，對它來說，試驗HIV-1抗體是特異的，以及抗轉鐵蛋白抗體的辣根過氧化物共軛物，它可結合轉鐵蛋白，而不管第一抗轉鐵蛋白抗體是否也已結合到同一個轉鐵蛋白分子上)。第二抗轉鐵蛋白抗體最好來自于雞，因為雞抗體不結合蛋白A。可將報告信息物標記的試劑以干燥形式浸入試劑盤里，然后將試劑盤放入試劑管里。之后，將試劑管固定到本發明的口液收集器上。使用該設備從病人口里收集口液樣品，從針筒并通過與其相接的試劑管擠出口液。當口液通過試劑管時，報告信息物標記的試劑被口液吸收，并被溶解在口液中，從而產生試劑與相應的試驗物質和標記物質的反應。試劑管出口的方向應使試劑/口液混合物供給到固相載體表面上。幾滴(約300μl)這種混合物就應該是足夠的了。讓該混合物在固相載體表面上停留一段時間(約5分鐘)，就足以讓試驗物質和標記物質結合到相應的檢測試劑上，并結合到固相載體表面上的對應的結合區。然后，從該表面上除去該混合物。
在另一個實施例中，試驗物質是一種“Helicobacterpylori”抗體，報告信息物標記的試劑是一種報告信息物標記的“Helicobacterpylori”抗原。
如果固相載體表面是上述本發明的測定裝置的檢測單元的一部分，那么去除該混合物的方法是讓一個吸墊與抽取口液的固相載體的下側接觸。最后，將包含過氧化氫和辣根過氧化物酶的色原物質(在本例中是N-四甲聯苯胺)的溶液送到該膜上。任何通過試驗物質或標記物質結合到固相載體上的辣根過氧化物酶都能在過氧化物酶已經結合的區域產生帶色的沉淀物。然后，從固相載體表面上產生的圖案來確定標記物質和/或試驗物質的存在。
按本發明的一個特殊方面，為了核實對試驗物質的測定結果，要對總是存在于口液樣品中的標記物質同時進行鑒定。檢測樣品中的這種標記物質能提供一種可靠的指示該樣品包含口液。適宜的標記物質例如包括轉鐵蛋白、白蛋白、血漿銅藍蛋白、和淀粉酶(參見“HumanSaliva”ClinicalChemstryandMicrobiology，vols.ⅠandⅡ，Tenovuo，J.O.，Ed.，CRCPress，BocaRaton，Florida(1989)]。當試驗物質也是由血液衍生時(例如IgG)，由血液衍生的標記物質(例如白蛋白和轉鐵蛋白)是非常有用的。
最好使用一個測定裝置來測定試驗物質和標記物質這兩者，在該裝置中固相載體包括一個平直表面。固相載體最好是一種微孔膜，制造該膜的材料例如可以是硝化纖維或聚碘乙烯二氟化物。將分別對應于試驗物質和標記物質的第一和第二結合劑定位在至少部分不同的(不重疊的)表面區域，從而即可區分結合到固相載體表面上的試驗物質和標記物質。通過共價的方式和非共價的方式結合這樣一些結合劑的方法在本領域中都是眾所周知的。最好形成這些區域時可產生出可識別的圖案，一看就能輕易取得測定結果。
盡管前述的實例描述了使用辣根過氧化物酶作為報告信息物的情況，但應認識到，還可以使用其它的酶以及非酶的報告信息物。雖然使用相同的報告信息物是方便的，但用來檢測試驗物質的報告信息物不必與用來檢測標記物質的報告信息物相同。此外，還可采用其它的結合方式。例如，在對口液中乙型肝炎表面抗原的鑒定中，在固相載體上的結合劑可以是與該抗原進行免疫反應的第一抗體，檢測試劑可以是報告信息物標記的第二抗體。
圖7表示出傳達測定結果的一個典型的固相載體的表面圖案。圖中的條形區104和106是固相載體108中由結合劑衍化或處理過的區域，這些結合劑與所選的口液標記物(例如轉鐵蛋白)和所選的口液分析物(例如抗原特異的分析物)分別是免疫特異性的或是說起反應的。如圖所示，兩個區域被排列成一個“+”形的符號。可以認識到，若在標記物區104中顯色但在分析物區106不顯色，則產生一個圖案“-”，這表明樣品液體中含有口液標記物但不含要試驗的分析物。當這樣的分析物存在時，可觀察到符號“+”。
雖然針對特殊實施例描述了本發明，但應該認識到，在不脫離本發明的情況下還可以進行各種變化和改進。
權利要求
1.一種用于獲得包含試驗物質在內的口液的器械，其特征是包括一個吸墊，用于從口液回收一種試驗物質；用于從吸墊提取已吸收到吸墊內的口液的機構，其中所說的機構包括一個由針筒和一個具有內端的柱塞組成的注射器，吸墊固定到該內端上。
2.如權利要求1所述的器械，其特征是所說的吸墊用鹽的高滲溶液浸透。
3.如權利要求2所述的器械，其特征是該試驗物質是一種抗體，該高滲溶液包括約3.5%氯化鈉、約0.3檸檬酸、約0.1%山梨酸鉀、約0.1%苯甲酸鈉、以及約0.1%牛明膠。
4.如權利要求1所述的器械，其特征是其中針筒有一個容納柱塞的徑向加大的開口。
5.如權利要求1所述的器械，其特征是進一步還包括位于針筒出口端的一個液體通路，并且進一步還包括包含在所說通路中的一個檢測試劑裝置，當口液自針筒排出時，該檢測試劑能有效地排放到口液內。
6.如權利要求5所述的器械，其特征是其中的液體通路由一個試劑管確定，該試劑管按可拆卸的方式安裝在針筒上。
7.如權利要求5所述的器械，其特征是其中的試劑裝置包含試劑，該試劑能與口液中的試驗物質進行有效的反應，產生可檢測到的顏色變化。
8.如權利要求5所述的器械，其特征是其中的檢測試劑裝置包含試劑，該試劑能與口液中的試驗物質進行有效反應，并能有效地凝集該試驗物質，產生可檢測到的沉淀物。
9.如權利要求5所述的器械，其特征是進一步包括與液體通路成液體連通的吸收條帶，所說條帶包含有檢測試劑，當口液中存在試驗物質并且該條帶被口液弄濕時，該條帶能有效地產生可檢測到的顏色變化。
10.一種檢測口液中試驗物質的裝置，其特征是包括一個吸墊，用于從口液中回收試驗物質，一個注射器，由針筒和柱塞組成，柱塞有一個內端，吸墊固定到該內端上，以便從吸墊上提取已經吸收在吸墊內的口液;以及一個檢測單元，適于接納從吸墊排出的口液，所說單元有一個固相載體，該固相載體包含在該檢測單元中，所說單元還有一種結合劑，結合劑附著到固相載體上，當口液自針筒排入該單元時，該結合劑能有效地專門結合到口液中的試驗物質上。
11.如權利要求10所述的裝置，其特征是所說吸墊用鹽的高滲溶液浸透，在吸墊中存在的所說鹽的數量應能從口液中回收高濃度的試驗物質。
12.如權利要求10所述的裝置，其特征是其中試驗物質是一種抗體，該抗體是一種被已知病原感染的診斷，該結合劑是一種能與這樣一種抗體發生免疫反應的抗原，該裝置進一步包括一種報告信息物標記的試劑，當試驗物質抗體結合到該固相載體上時，該試劑能有效地結合到該試驗物質抗體上。
13.如權利要求10所述的裝置，其特征是其中試驗物質是一種抗體，該抗體是一種被已知病原感染的診斷，結合劑對有選擇地結合人的抗體是有效的，并且該裝置進一步包括一個報告信息物標記的抗原，該抗原能與試驗物質抗體發生免疫反應。
14.如權利要求12所述的裝置，其特征是其中的結合劑是蛋白A。
15.如權利要求13所述的裝置，其特征是試驗物質是HIV-1抗體，報告信息物標記的試劑是報告信息物標記的HIV-1肽。
16.如權利要求13所述的裝置，其特征是試驗物質是Helicobactor抗體，報告信息物標記的試劑是報告信息物標記的Helicobacterpylori抗原。
17.如權利要求10所述的裝置，其特征是它包括一個通路連接著與檢測單元成液體連通的針筒，并且所說通路包含有檢測試劑裝置，當口液自針筒排出時，該檢測試劑能有效地排入口液中。
18.如權利要求17所述的裝置，其特征是所說的通路由一個試劑管確定，該試劑管按可拆卸方式連接到所說針筒和檢測單元上。
19.如權利要求17所述的裝置，其特征是檢測試劑裝置包含一種試劑，該試劑能有效地與口液中的試驗物質發生反應，從而產生一定水平的試驗物質與固相載體的結合，結合的水平取決于口液中試驗物質的濃度。
20.如權利要求10所述的裝置，其特征是其中的固相載體是一個可透過的膜，并且檢測單元進一步包括可與膜接觸的吸附材料。
21.如權利要求10所述的裝置，其特征是對口液樣品中的試驗物質和標記物質進行同時測定，其中的固相載體是一個膜，該膜包括一個第一膜區，一種第一結合劑附著到該第一膜區，第一結合劑能有效地專門結合到口液中的試驗物質上;一個第二膜區，一種第二結合劑附著到該第二膜區，第二結合劑能有效地專門地結合到口液中的標記物質上，該第二膜區與第一膜區至少部分地不重疊;用于觀察結合到所說第一膜區的試驗物質的裝置;以及用于觀察結合到所說第二膜區的標記物質的裝置;因此，包含標記物質但不包含試驗物質的口液將在固相載體表面上產生一種圖案，這種圖案和由包含標記物質并包含試驗物質的口液產生的圖案有所區別。
22.一種固相載體表面，用于對口液中的試驗物質和標記物質進行同時測定，其特征是它包括一個第一區，一種第一結合劑附著到該第一區，第一結合劑能有效地專門結合到口液中的試驗物質上;一個第二區，一種第二結合劑附著到該第二區，第二結合劑能有效地專門結合到口液中的標記物質上，該第二區與第一區至少部分地不重疊;用于觀察結合到所說第一區的試驗物質的裝置;以及用于觀察結合到所說第二區的標記物質的裝置;因此，包含標記物質但不包含試驗物質的口液將在固相載體表面上產生一種圖案，這種圖案和由包含標記物質并包含試驗物質的口液產生的圖案有所不同。
23.如權利要求22所述的固相載體表面，其特征是所說的第一和第二區是條形的，并且重疊起來形成符號“+”。
全文摘要
一種用于獲得包含試驗物質在內的口液的器械。在一個實施例中，該器械包括帶有柱塞的一個注射器，在柱塞的端部固定一個吸墊。還公開了一種包含該器械的試驗裝置。
文檔編號G01N33/50GK1084045SQ9310974
公開日1994年3月23日 申請日期1993年8月24日 優先權日1992年8月25日
發明者T·R·蒂米, A·S·戈斯坦恩, S·C·皮亞仙蒂尼 申請人:艾皮托普有限公司