專利名稱：血液組分的計數測量的制作方法
技術領域：
本發明涉及對透明試管中已離心分離的血液樣品進行血液組分計數測量，更具體地說，是涉及在自然光條件下作這種測量的設備。
已經發展了一種技術和隨身儀器，用來從透明試管中的已作離心分離的全血樣品里進行血液組分計數的測量，該試管內含有將血液組分顯得突出的著色劑以及一個漂浮在紅紅球層上的將離心分離后的血塊黃層組分層進行拉伸的拉伸漂浮體。上述的技術在美國專利No.4，027，660 Wardlaw et al;No.4，082，085 Wardlaw et al和No.4，137，755 Wardlaw et al中一般性地作了公開。如美國專利No.4，181，600 Wardlaw et al所說明的，此項技術也得益于使用草酸鉀作為抗凝血劑和紅血球稠化劑。在一專用儀器里測量血球區帶長度來獲得血球計數，該儀器使用一個機上的微處理器把區帶長度轉換成血球計數。這種儀器已在美國專利No.4，156，570Wardlaw;No.4，209，226Wardlaw et al以及No.4558947 Wardlaw中作了公開。在美國專利No.4，259，012 Waldlaw中還提出了一種不需要備有機上的微處理器而只用專門作過標定卡片的手動操作儀器。這種儀器，如同以前基準讀數儀器一樣，用電光照明源以增強離心試管中的著色劑的熒光。如美國專利No.4，190，328 Levin et al所說明的，該試管以及漂浮物附件在檢測附著在血液內的寄生物時也有用處。
與只用于實驗室恰成對照，尤其希望上述技術和隨身器具可用于野外實地，從而在現場，至少是一些潛在問題的實地診斷會變得可能。這一點在研究諸如瘧病這類附著在血液的寄生物蔓延尤為確切，這類疾病蔓延在一些很原始的區域十分流行，這些地方可能沒有電力供應，適用于上述儀器工具的實驗室專業設施也不合手。關于這種瘧疾的現場診斷，業已確定從事這種瘧疾診斷的醫務人員將受益于既能測出病人血液中的血球容積也能測出其血小板數，以及他們能確定血液樣品中瘧疾寄生物的存在與否。
本發明的一個實施例涉及到一個緊湊的袖珍型設備，它可以在現場用自然光辨清問題所在的區帶分界面以測定血細胞比容及血小板數。此設備可以從裝在毛細管或其他透明試管中的已作離心分離的血液樣品里獲取前述血液組分的信息。此設備的一側展示出一專門形式的諾模圖，并帶有將此試管以覆蓋方式合適地定位在此諾模圖上的設施。采用此諾模圖是考慮到試管內上述漂浮物的存在，以及血液樣品中草酸鉀造成的紅血球稠化，從而可以使用將試管合適地對準該諾模圖時所獲取的信息，來決定所尋求的血液組分的數值，即血沉棕黃層讀數和血小板計數。此設備上也展示有一刻度，用來測定血小板區帶的長度。通過安裝在此設備上成為一體的放大透鏡，最佳地提供了對血小板區帶刻度以及相鄰試管的光學放大。此設備本身最好是采取由塑料材料諸如聚丙烯或類似物所構成的平板形狀。諾模圖，即此平板的血小板刻度或讀數一側，要合適地描畫上等值線，以便對離心試管的封閉端提供一參考止動平面，并且此試管相對于此諾模圖的參考線將保持在合適位置上，相對于血小板刻度情況亦然。放大透鏡可以安置在位置與血小板刻度相鄰、與此平板構成一體的框架內。數字指示也印制在此平板的讀數一側。平板的背面印有將讀數轉換成血小板計數的轉換表。血細胞比容直接地從此諾模圖讀出。此設備也可以連同合適的轉換表用來確定白血球計數。
從而，本發明的一個目標是提供一種在使用自然光條件下能作出快速血細胞比容敏數和血沉棕層層組分計數的設備。
本發明另一個目的是提供一種具有所描述特性的設備，它包含著一個專用諾模圖，其設計旨在從已作離心分離的血液樣品來完成血球容積的讀數工作，該血液樣品置放在含有將組分拉伸的漂浮體的透明試管內。
本發明還有一個目的是提供一種具有所描述特性的設備，其間，試管是置放在設備的諾模圖上面來完成血細胞比容的讀數工作的。
本發明另一個目的是提供一種具有所描述特性的設備，它小得足以放在口袋內攜帶，并且在現場研究中尤其有用。
從以下對一最佳實施例所作的詳細描述，連同附圖一起，則本發明這些目的和其他目的以及其優點將變得更易于明瞭，在這些附圖中
圖1是本發明一最佳實施例的諾模圖的平面視圖或讀數面;
圖2是圖1這個設備背面的平面視圖;
圖3是從圖1的底部所見到的此設備的正視圖;
圖4是類似于圖1的視圖，但其中表出了帶有血液樣品的一離心試管，它被定位在諾模圖上以讀出血細胞比容的值;
圖5是類似于圖1的視圖，但其中表出了該試管定位在此設備上以測量特定的血沉棕黃層組分層的長度;
圖6是測定組分區帶長度時所看到的、業經放大的刻度和組分區帶的視圖;
圖7是類似于圖1的視圖，但其中表出了為測定組分白血球成分計數而標出的數字的本發明的一個實施例;以及圖8是圖7這個設備的背面的平面視圖。
現在參見圖1，圖中表出了此設備的一最佳實施例，此設備一般用數碼2作標記。設備2最好采用一般性的長方形平板并能很容易地用一支手拿起，其尺寸適于放入人們的口袋。因而設備2是緊湊的，尤其適于醫務人員在現場使用。凹槽4的構作位置是鄰近于此設備2的底部邊沿6，于是凹槽4形成了一參考止動平面8，在作總體積及血細胞比容讀數時，離心試管的底部定位在此止動平面上。當用陶制插入物或一整體包壁而非塑料插入物來封閉此試管的底部時，凹槽4內備有參考線5作為試管底部對準之用。設備2上在凹槽4的上方印有諾模圖10。諾模圖10的最上面的線12是一參考線，用來對準離心試管內的血漿層的頂部。血小板沉積值與裝入參考線12一起印在設備2上。在設裝2上，在凹槽4和裝入參考線12之間做成延伸的小槽或溝槽，旨在確保試管在讀取讀數時是垂直于止動平面8站立著。諾模圖10的下部16構成了若干血細胞比容參考線，它們具有協同的數碼指示，從中可以導得血細胞比容的讀數。設備2一側備有小縫18，在測量血沉深黃層組分的區帶長度時用以容納上述離心試管。一擴大的槽口20和此小縫18相聯，當使用該離心試管時用來容納底部的試管封閉插入物。設備2上還印有刻度22，它們與小縫18相鄰，從而能夠精確地測出組分區帶的長度，單位最好是用毫米。裝在支架26上的放大透鏡24和刻度22對齊使刻度使用變得方便。透鏡24最好是10倍的透鏡。
圖2表出了設備2的背面，其上印有一轉換表用以將測得的血沉深黃層組分區帶長度轉換成計數值，圖上所示的專用表是一張用來從血沉深黃層的血小板區帶的長度中獲取血小板計數的表格。參考數碼28是取自設備2正面全部的填入參考線12的數碼。使用規則印在設備2背面的下部30。
圖3示意表出了平板的厚度，透鏡24和透鏡支架26相對于小縫18和槽口20的位置。
圖4-6示意表出了設備2的使用方式。離心試管32放在此平板上并定位在其上，使樣品頂部填入的彎月面34覆蓋著全部填入參考線12。試管封閉插入物35的底平面密接著止動平面8，試管32通過嵌入到溝槽14的其中之一個槽合適地定位在此平板上。從參考線12上的數字可以確定血小板區帶計數的正確值血小板/毫米，同時，將紅血球層的頂部彎月面36與諾模圖10的那部分16中的血細胞比容值參考線其中之一條對齊，可以確定出血細胞比容讀數。上述內容在圖4中已示意表出。試管32放在小槽18內，其底部封閉插入物35放在槽口20內，這些如圖5所示。血小板區帶37，以其有差別的光散射和/或血液樣品內加入的染色劑所生成的顏色為區分特征，其位置與刻度22對齊，通過透鏡24在刻度22上可以測得區帶37的長度，這些如圖6所示。由參考線12所獲取的血小板沉積密度信息以及血小板區帶長度，那時便可利用此平板背面的轉換表，轉換成血小板的計數。
已確定的是野外工作的醫務人員在檢查病人有否瘧疾病時，如可能，是希望知道血球容積和血小板計數這兩者。人們意圖此諾模圖能提供一種簡單和不昂貴的方法，測定具有可變容積、已作離心分離血液樣品中的血球容積和血小板計數。它根據這樣一個假設即對給定血細胞比容所裝入的紅血球層，它占據的體積是隨毛細管的裝入高度作線性變化。這樣便可以組成一組血細胞比容等值線。技術人員只需將已作離心分離血液樣品的頂部彎月面(空氣-血漿)與諾模圖的裝入線對齊，并從肉眼很易看清的漂浮體-裝入的血球這分界面確定出正確的血細胞比容。而且，每一裝入高度都標有相應的、已擴展的血小板層變換因子的血小板/毫米值，它們可以用來確定出樣品的血小板計數。
此諾模圖是按如下方式構作的。要用到兩組血液樣品，一個樣品來自具有正常范圍的血球容積值(34.4-44.8)的病人，而另一個是用血漿把全血樣品稀釋而構成。對于后者，具有血細胞比容值40的樣品被稀釋以得到15.7至29.4的血細胞比容。對每一種樣品，都把血液吸入到兩個毛細管內，一個是大體積，另一個是小體積。在加入漂浮體之前測出裝入高度，旨在精確地計算出全體積(轉換因子-2.222微升/毫米)。加入漂浮體并將試管離心作用5分鐘。微血細胞比容試管也作離心分離，讀出沉積的紅血球長度和總高度以獲得最精確的血細胞比容值。在離心作用后，把每個毛細管放入到用以前技術制作的帶微處理器的儀器中，以tic為單位測出沉積的紅血球層的高度。這里用0.0127毫米/tic的轉換因子來把這些值轉換成毫米。
每般試管的樣品總高度用毫米為單位測定，乘以3后使成為諾模圖的水平刻度值。對每一條血細胞比容等值線，這些值提供兩個點(在低的總體積處提供一個，在高的總體積處提供另一個)。計算出每條線的斜率和與x軸的截交點。然后繪出血球容積隨斜率及x軸截交點的變化曲線。對每幅圖繪出回歸線，回歸線方程如下計算血細胞比容等值線的斜率隨血細胞比容的變化是Hct＝293.2(斜率)+0.45。x軸截交點下降規律則是Hct＝-3.2(x)+288.8。其具有20;25;直到65的相應的回歸線方程是從上述轉換函數計算而得，并繪出而構作此諾模圖。
雖然上面所用的毛細血液試管是用陶制塞塞住的，但塑料蓋也可以使用。這要求蓋的底部距血細胞比容零線(紅血球-陶土的分界面)下降2.4毫米。這是用來修正蓋底部和血液/塑料分界面之間的1.9毫米距離以及由于蓋底部塑料的伸出導致樣品高度所增加的0.5毫米。
圖7和8展示了此設備的一實施例，采用它獲得微分白血球計數。
很容易評估出，本發明的設備可以用來快速地從裝在透明試管的已作離心分離的血液樣品中獲取血液組分的信息。這些設備可以在自然光及野外使用，無需使用包括由微處理器操作的儀器。這里，只是聯系到血液計數的確定這個方面來對此設備的用途作了詳盡描述，但此設備也能用來確定其他多組分生物液體、諸如精液。
在不偏離本發明的設計思想下可以對本發明所公開的實施例作出多種修改和變化，本發明的范圍只根據權利要求書來限定。
權利要求
1.一種用來測定樣品中生物液體組分計數的設備，所用樣品是經離心分離作用后的液體，盛放在一透明離心試管內，試管內在液體樣品中有一個將組分層拉伸的漂浮體，上述設備包含(a)支持此離心試管的平板；(b)在該平板上用以將此離心試管一端作定位的設施；以及(c)印刷在此平板上、與上述定位設施相鄰的諾模圖的標記設施，可以操作此諾模圖標記設施以提供離心試管中的生物液體樣品的組分層讀數，此時試管置在該平板上；考慮到液體樣品中漂浮體的存在而調節此諾模圖標記的設施。
2.根據權利要求1的設備，其中所述諾模圖標記設施印制在所述平板的一個表面上，上述的定位設施是構成位于該平板一個表面上的止動面，此止動面可施加操作使之能裝入上述離心試管的一端。
3.根據權利要求2的設備，其中所述樣品是血液樣品，且可以操作所述諾模圖的標記設施以確定在擴展的血沉棕黃層組分中的血塊黃層組分裝入密度值(以組分計數/微升血液/毫米為單位)，其裝入密度值正比于該離心試管中的血液總體積。
4.根據權利要求3的設備，其中還包括拉在所述平板上的刻度設施，用以測量已作離心分離血液組分的區帶的軸向長度。
5.根據權利要求4的設備，其中還包括在所述平板上的轉換表設施，用以把所觀測到的組分區帶長度值和觀測到的血液組分沉積密度轉換成血液組分計數的讀數值。
6.根據權利要求4的設備，其中還包括在所述平板上的試管定位設施，它與刻度設施相鄰，用以在測量血液組分區帶長度時將試管合適地定位在該刻度設施的鄰近。
7.根據權利要求4的設備，其中還包括裝在所述平板上并聚焦于所述刻度設施上的放大透鏡。
8.根據權利要求1的設備，其中可以調節上述諾模圖以計及血液樣品中的紅血球稠化劑的存在。
9.根據權利要求1的設備，其中可以調節上述的諾模圖以計及血液樣品中將組分擴展的漂浮體的存在。
10.一種在自然光條件下用以測定已作離心分離的全血樣品的血液組分計數的設備，該樣品放在一透明離心試管中，試管中的血液樣品中具有將血液組分層拉伸的一漂浮體，該設備包括(a)支持著離心試管的設施;(b)在該支持設施上用以將一參考點定位在該離心試管上的設施;(c)在該支持設施上的諾模圖標記設施，可以操作該諾模圖標記設施以能對一予定血液組分提供一個沉積密度值，該組分的沉積密度值正比于離心試管內的血液總體積，此刻該離心試管定位在上述支持設施上，其定位設施與離心試管的參考點對齊。(d)在該支持設施上的刻度設施，用以測定已作離心分離的血液組分的區帶軸向長度。(e)將所觀測的組分區帶長度值和所觀測的血液組分沉積密度值轉換成血液組分計數的讀數值的轉換設備。
11.根據權利要求10的設備，其中所述諾模圖標記設施和轉換設施是可施加操作的，以測定血小板的計數。
12.根據權利要求10的設備，其中所述諾模圖標記設備和轉換設施是可施加操作的，以測定微分白血球計數。
13.根據權利要求10的設備，其中支持設備是一平板，它在該諾模圖標記設備上包含著眾多的表面溝槽，可施加操作，將一離心試管合適地定位在該諾模圖的標記設備上。
14.根據權利要求13的設備，其中還包括置在所述平板上與離心試管對齊的一參考設備，用以將離心試管與上述諾模圖標記設施對齊。
15.根據權利要求10的設備，其中還包括位于所述支持設備上的透鏡設備，在測定血液組分區帶的軸向長度時可施加操作以放大上述刻度設備和離心試管。
16.根據權利要求10的設備，其中轉換設備是印制在該支持設備上的一轉換表。
17.由已作離心分離的血液樣品中確定血液組成計數的一種方法，樣品是放在一透明離心試管內，試管含有將血液組分拉伸的一漂浮體;該方法包含以下步驟確定出作為試管內血液樣品的總裝入水平觀測值函數的所討論血液組分的沉積密度;在自然光條件下測定所討論的、已作拉伸的血液組分區帶的軸向長度;以及將所確定的沉積密度和測得的區帶長度轉換成組分計數。
18.由已作離心分離的血液樣品中確定血細胞比容讀數的方法，樣品放在一透明離心試管內，試管含有一個處在紅血球層內的、將血液組分作拉伸的漂浮體;該方法包含以下步驟在自然光條件下確定離心試管中紅血球層的高度;為紅血球層中該漂浮體的存在而作出修正;將紅血球層高度轉換成血細胞比容讀數。
19.根據權利要求18的方法，其中還包括將紅血球層高度換轉換成血球容積讀數之前對血液樣品中存在著紅血球稠化劑而作的修正步驟。
全文摘要
用離心作用將透明試管中的血液組分分離，試管中含有一漂浮體用于把某些組合進行物理拉伸，試管內的已離心分離樣品置放在一個層測量設備上，用該設備可以在自然光條件下測出紅血球和血沉棕黃層組分的區帶高度。血沉棕黃層的測定是通過光學放大來完成的。此測量設備帶有印制在其上的由數學上導得的紅血球層的線示圖(諾模圖)，以及用于測量血塊黃層組分區帶的單獨刻度。還備有將測得的血塊黃層組分區帶長度轉換成組分血球計數的轉換表。
文檔編號G01N15/05GK1051981SQ9010822
公開日1991年6月5日 申請日期1990年10月9日 優先權日1989年10月16日
發明者克里斯汀·L·馬尼歐恩, 斯蒂芬·C·沃德羅, 羅伯特·A·萊文寧 申請人:斯蒂芬·C·沃德羅, 羅伯特·A·萊文寧