一種測量辣椒風濕貼中辣椒堿含量的方法與流程

本發明涉及一種辣椒堿含量的快速檢測方法，特別涉及一種測量辣椒風濕貼中辣椒堿含量的方法。

背景技術：

辣椒性熱味辛,具有驅邪逐寒、溫中開胃、消食殺蟲等功效。辣椒中的辣椒堿,吸收后轉變成一種特殊的化合物,能抑制痛感神經纖維,在臨床上被長期作為理想的鎮痛藥物使用。以辣椒堿為主要原料制成的中藥橡膠膏劑辣椒風濕膏,在治療關節疼痛、腰酸背痛、扭傷淤腫及慢性關節炎等方面的臨床效果顯著。但部頒標準(中藥成方制劑)第9冊的辣椒風濕膏標準中僅收載了性狀、理化鑒別和一般檢查項作為質量控制指標,難以全面評價其質量。辣椒為辣椒風濕膏的君藥,控制其主要有效成分辣椒堿的含量有著重要意義。

目前關于辣椒風濕貼中痕量辣椒素的檢測，沒有國家標準方法，沒有標準物質，檢測結果的準確性無法保障。

技術實現要素：

為解決上述問題，本發明提供一種測量辣椒風濕貼中辣椒堿含量的方法，該方法可以很簡單及準確的對辣椒風濕貼中的辣椒堿進行定性和定量檢測。

為實現上述目的，本發明采用以下技術手段：

本發明提供一種測量辣椒風濕貼中辣椒堿含量的方法，包括以下步驟：

(1)取1ml丙酮，配置不同濃度的辣椒堿溶液分別為1mg/l、5mg/l、10mg/l、25mg/l、30mg/l、50mg/l；

(2)將(1)中配置好的辣椒堿溶液取2ul用移液槍滴加于銀納米棒陣列基底上；

(3)進行sers檢測，待基底上的溶液變干后，用拉曼光譜儀進行檢測，測得檢測液的sers光譜；

(4)測完一個濃度之后，繼續測另一個濃度；

(5)將測得的數據通過擬合軟件對辣椒堿特征峰1264cm-1的變化定量分析，確定出辣椒堿的檢出限以及分子光譜強度與濃度之間的關系。

(6)取辣椒風濕貼，除去蓋襯，用剪刀剪成碎屑；

(7)將(6)中的辣椒風濕貼碎屑置于離心管中，加入2ml甲醇；

(8)將(7)中樣品超聲處理10min；

(9)將步驟(8)中超聲處理的混合液在10000r/min的轉速下離心10分鐘，靜置10min；

(10)取步驟(9)中得的上清液2ul，滴加到銀納米棒陣列基底上，使溶液濃縮干燥；

(11)將步驟(10)中得到的檢測液進行表面增強拉曼散射檢測，測得檢測液的sers光譜；

(12)進行定性檢測，根據步驟中得到的檢測液的sers光譜，1264cm-1對應拉曼譜峰為辣椒堿的特征峰；

(13)進行定量檢測，根據步驟(11)中得到的檢測液的sers光譜，以1264cm-1應峰強度進行擬合定量表示辣椒堿含量

進一步的，進行sers光譜檢測時，使用proraman-l-785a2型拉曼光譜儀。

進一步的，步驟(2)和(10)中所述的銀納米棒陣列基底為傾斜排列的銀納米棒陣列基底。

進一步的，所述銀納米棒陣列基底的銀納米棒相對于玻璃片法線方向的傾斜角74.2±1.1度，長度約1030.7±53.4nm，直徑約66.8±5.2nm。

進一步的，步驟(6)和(11)中進行sers光譜檢測時，設置激光功率為30mw，積分時間為10s。

本發明的有益效果：

該方法采用sers光譜檢測技術，對辣椒風濕貼中的辣椒堿進行定性和定量分析，可以快速判斷被檢測辣椒風濕貼中辣椒堿的含量，而且采用傾斜排列的銀納米棒陣列基底，使得該檢測方法的靈敏度更高、更穩定，大大減少了外界溫度、樣品本身對檢測定性及定量的影響，使檢測更便捷，并且單次測量成本較低，極大節省了成本。

附圖說明

圖1為純辣椒堿的分子結構圖；

圖2為實施例1中的辣椒堿對照實驗的拉曼光譜示意圖；

圖3為辣椒堿對照實驗的拉曼位移1264cm^-1工作曲線；

圖4為辣椒風濕貼萃取液的光譜圖。

具體實施方式

下面結合附圖及具體實施例對本發明做進一步說明。

實施例1：如圖1所示為純辣椒堿的分子結構圖，本實施例提供本發明提供一種測量辣椒風濕貼中辣椒堿含量的方法，包括以下步驟：

(1)取1ml丙酮，配置不同濃度的辣椒堿溶液分別為1mg/l、5mg/l、10mg/l、25mg/l、30mg/l、50mg/l，制作不同濃度的混合液有利于更好的測試本方法對辣椒堿含量的檢測的準確性，避免單一濃度測試結果的偶然性；

(2)將(1)中配置好的辣椒堿溶液取2ul用移液槍滴加于銀納米棒陣列基底上，使溶液濃縮干燥，為光譜檢測做準備，提高光譜檢測的靈敏度與穩定性；

(3)進行sers檢測，所用拉曼光譜儀為proraman-l-785a2,enwaveoptronics,irvine,ca，待基底上的溶液變干后，設置激光功率為30mw，積分時間為10s，測得檢測液的sers光譜，可以使檢測的效果更好；

(4)測完一個濃度之后，繼續測另一個濃度如圖2所示，通過分析可知在1264cm^-1處出現一特征峰定性為辣椒堿特征峰；

(5)將測得的數據通過擬合軟件對辣椒堿特征峰1264cm^-1的變化定量分析如圖3所示，確定出辣椒堿的檢出限以及分子光譜強度與濃度之間的關系，濃度越大，1264cm^-1對應的特征峰光譜強度越強。

(6)取辣椒風濕貼，除去蓋襯，用剪刀剪成碎屑；

(7)將(6)中的辣椒風濕貼碎屑置于離心管中，加入2ml甲醇，用于溶解辣椒風濕貼；

(8)將(7)中樣品超聲處理10min，將辣椒風濕貼充分溶解；

(9)將步驟(8)中超聲處理的混合液在10000r/min的轉速下離心10分鐘，靜置10min，可以更快的將溶液分層，得到辣椒堿的上清液；

(10)取步驟(9)中得的上清液2ul，滴加到銀納米棒陣列基底上，使溶液濃縮干燥，為光譜檢測做準備，提高光譜檢測的靈敏度與穩定性；

(11)將步驟(10)中得到的檢測液進行表面增強拉曼散射檢測，設置激光功率為30mw，積分時間為10s，測得檢測液的sers光譜，可以使檢測的效果更好；

(12)進行定性檢測，根據步驟中得到的檢測液的sers光譜如圖4所示，1264cm^-1對應拉曼譜峰為辣椒堿的特征峰；

(13)進行定量檢測，根據步驟(11)中得到的檢測液的sers光譜，以1264cm^-1應峰強度進行擬合定量表示辣椒堿含量。

進一步的，步驟(2)和(10)中所述的銀納米棒陣列基底為傾斜排列的銀納米棒陣列基底，可以使檢測更靈敏、更穩定。

進一步的，所述銀納米棒陣列基底的銀納米棒相對于玻璃片法線方向的傾斜角74.2±1.1度，長度約1030.7±53.4nm，直徑約66.8±5.2nm，可以使溶液濃縮效果更好，光譜檢測效果更好。

技術特征：

技術總結
本發明公開了一種測量辣椒風濕貼中辣椒堿含量的方法，該方法采用SERS光譜檢測技術，對辣椒風濕貼中的辣椒堿進行定性和定量分析，可以快速判斷被檢測辣椒風濕貼中辣椒堿的含量，而且采用傾斜排列的銀納米棒陣列基底，使得該檢測方法的靈敏度更高、更穩定，大大減少了外界溫度、樣品本身對檢測定性及定量的影響，使檢測更便捷，并且單次測量成本較低，極大節省了成本。

技術研發人員：田康振;韓彩芹;聶新明
受保護的技術使用者：江蘇師范大學
技術研發日：2017.05.31
技術公布日：2017.10.03