本發明涉及抗原檢測技術領域,尤其涉及一種超導量點及其在免疫熒光快速定量檢測中的應用。
背景技術:
免疫熒光技術(immunofluorescencetechnique)又稱熒光抗體技術,它是根據抗原抗體反應的原理,先將已知的抗原或抗體標記上熒光基團,再用這種熒光抗體(或抗原)作為探針,與被測抗原或配體發生特異性結合,形成的熒光復合物在一定波長光的激發下可產生熒光,利用熒光分析儀可檢測未知抗原或相應配體的含量。免疫熒光技術是高度敏感的微量測定技術,可檢測的物質有:食品中有毒有害物質(如霉菌毒素)、違法添加物、腫瘤標志物、藥物(抗生素等)、病毒等病原體抗原和抗體、心臟標志物、激素(包括甾體激素等、興奮劑)、體液中的各種蛋白質及可用免疫(熒光)檢測的其它痕量物質。
常用的免疫熒光有機染料標記物有熒光素類以及羅丹明類染料。熒光素類常用的有異硫氰酸熒光素(fitc),羅丹明是一種鄰苯二酚類熒光染料。這些傳統有機熒光染料發光壽命較短,穩定性欠佳,容易出現光漂白現象,現有的微量有害物質免疫層析檢測技術無法同時滿足快速和定量的需求,并且樣品處理比較復雜、操作繁瑣。為此我們提出了一種超導量點及其在免疫熒光快速定量檢測中的應用,用來解決上述問題。
技術實現要素:
基于背景技術存在的技術問題,本發明提出了一種超導量點及其在免疫熒光快速定量檢測中的應用。
本發明提出的一種超導量點,包括超導量點,超導量點在檢測有害物質的免疫層析反應中用于標記抗原,其中超導量點是以氟化鈣(caf2)、氟化鋰(lif)或氟化鋇(baf2)包被核殼結構(cdse/zns)的納米粒子。
本發明還提出,一種超導量點在免疫熒光快速定量檢測中的應用,包括如下步驟:
1)、進行待測樣品的制備:將樣品進行處理,使其適用于免疫層析反應;
2)、加樣到試紙條上:進行免疫層析反應;樣品中的微量物質和加樣區超導量點標記的微量物質抗體結合,通過毛細作用向前層析;當達到檢測區后,檢測線t線上固定的微量物質抗原與剩余未結合的超導量點標記的微量物質抗體結合;
3)、用儀器讀取試紙條,記錄檢測結果:用儀器讀取t線和c線的熒光強度并計算t/c值,通過儀器內置的標準曲線可計算出樣品中微量物質的含量。
優選的,在步驟3)中,檢測線t線上結合的超導量點標記的微量物質抗體量和樣品中微量物質的濃度成反比。
本發明中,所提出的超導量點為無機熒光發光物,比化學發光免疫檢測技術的有機發光物更穩定,超導量點作為免疫熒光標記,靈敏度要遠高于這些有機熒光染料,解決了現有免疫檢測技術中抗原抗體的標記物熒光強度低、淬滅時間短的問題。
具體實施方式
下面結合具體實施例對本發明作進一步解說。
本發明提出的一種超導量點,包括超導量點,超導量點在檢測有害物質的免疫層析反應中用于標記抗原,其中超導量點是以氟化鈣caf2、氟化鋰lif或氟化鋇baf2包被核殼結構(cdse/zns)的納米粒子。
本發明提出一種超導量點在免疫熒光快速定量檢測中的應用,包括以下步驟:
1)、進行待測樣品的制備:將樣品進行處理,使其適用于免疫層析反應;
2)、加樣到試紙條上:進行免疫層析反應;樣品中的微量物質和加樣區超導量點標記的微量物質抗體結合,通過毛細作用向前層析;當達到檢測區后,檢測線t線上固定的微量物質抗原與剩余未結合的超導量點標記的微量物質抗體結合;
3)、用儀器讀取試紙條,記錄檢測結果:用儀器讀取t線和c線的熒光強度并計算t/c值,通過儀器內置的標準曲線可計算出樣品中微量物質的含量。
本發明中,在步驟3)中,檢測線t線上結合的超導量點標記的微量物質抗體量和樣品中微量物質的濃度成反比。
本發明中,超導量點粒徑小、尺寸可調,激發光譜寬、發射光譜窄;斯托克位移較大,即激發光和發射光波長距離較遠,光強度高;吸光系數和光量子產率高,可以提高檢測靈敏度,檢測下限低,便于產品微(痕)量殘留檢測;光、熱穩定性好,耐光漂白,可以經受反復多次的激發,熒光信號無干擾,淬滅時間較長,發光穩定,能提高檢測產品的穩定性,大幅放寬儲存運輸條件,不需要有機物熒光免疫檢測產品的苛刻低溫條件。超導量點熒光探針與有機熒光探針相比,物理、化學性質更穩定,對樣品的ph值、離子強度等理化性質要求更低,抗干擾能力更強,檢測結果更穩定;超導量點具備高親水性、低生物毒性、水溶性好;超導量點比有機熒光染料成本低、制備簡單,采用無磷合成工藝,綠色環保。
該超導量點為無機熒光發光物,比化學發光免疫檢測技術的有機發光物更穩定。超導量點作為免疫熒光標記,靈敏度要遠高于這些有機熒光染料;并且該超導量點可以結合多種化學基團,能結合抗原、抗體等多種生物分子。
超導量點技術利用免疫層析原理,可對食品中的有毒有害物質等多種微量物質進行快速定量檢測。該方法操作簡便,樣品處理時間短,檢測時無需接觸劇毒的標準品,標準曲線放在云端,避免每次檢測都要繪制標準曲線的繁瑣及標準曲線之間的偏差,能夠快速定量檢測多個樣品,可滿足現場和實驗室的檢測要求。
以上所述,僅為本發明較佳的具體實施方式,但本發明的保護范圍并不局限于此,任何熟悉本技術領域的技術人員在本發明揭露的技術范圍內,根據本發明的技術方案及其發明構思加以等。