一種預處理方法及果膠的檢測方法
【專利摘要】本發明公開了一種預處理方法及果膠的檢測方法。該預處理方法包括以下步驟：(1)將待測果膠樣品在堿性溶液中進行蛋白質沉淀，分離得濾液；(2)向將步驟(1)所得的濾液中加入乙醇的濃度至50％體積分數以上，進行沉淀處理，分離得沉淀；(3)將步驟(2)所得的沉淀溶于水得溶液A，加入乙醇的濃度至50％體積分數以上，進行二次沉淀處理，分離得沉淀；(4)將步驟(3)所得的沉淀溶于水，得溶液。本發明可以用于檢測乳飲料中的果膠含量，實驗的步驟簡單、準確度高、重現性好，且預處理過程在盡可能除去了中性糖和乳蛋白的同時，又減少了果膠的損失。
【專利說明】一種預處理方法及果膠的檢測方法
【技術領域】
[0001] 本發明涉及一種預處理方法及果膠的檢測方法。
【背景技術】
[0002] 果膠是一類高分子碳水化合物，其分子主鏈是由α -1，4-糖苷鍵連接起來的半乳 糖醛酸鏈構成的。因此，通常用半乳糖醛酸的含量計算樣品中的果膠含量。
[0003] 由于糖類物質大都不吸收紫外光，故在測定果膠中半乳糖醛酸含量時，必須將其 轉化衍生后方可進行測定。目前國內常用的測定糖醛酸含量的方法為硫酸咔唑法或間羥基 聯苯法。在實際工作中，往往發現測得的結果與實際情況不符，主要原因是乳飲料中的中性 己糖和戊糖對實驗結果的干擾，影響糖醛酸含量測定的準確性。
[0004] 間羥基聯苯法測定果膠含量步驟如下：首先糖醛酸與含四硼酸鈉的硫酸溶液在高 溫作用下水解，水解產物進一步與間羥基聯苯反應，生成粉紅色衍生物，產生紫外吸收，且 在一定濃度范圍內，該衍生物吸收值與糖醛酸含量呈線性關系，可通過比色法對糖醛酸含 量進行計算。
[0005] 與硫酸咔唑法相比較，間羥基聯苯法對糖醛酸顯色的專一性強，但是當中性糖含 量較多時，中性糖會與硫酸反應碳化生產褐色物質，導致吸光度的增加，嚴重影響實驗結 果。乳飲料中一般含有較高含量的葡萄糖、蔗糖、乳糖等中性糖，而起穩定劑作用的果膠的 添加量極少，因此中性糖的存在嚴重干擾果膠含量的測定，如牛奶中乳糖的含量45g/L左 右，調制乳中一般還會添加40g/L_80g/L的蔗糖，而起穩定劑作用的果膠的含量一般小于 5g/L，當采用間羥基聯苯法時，中性糖的存在對產品中果膠的檢測影響很大。所以采取間羥 基聯苯法測定乳飲料中果膠含量時，如何解決中性糖的干擾是十分重要的。
[0006] 現有技術一般檢測半乳糖醛酸的方法為液相的方法，實驗繁瑣，而且不一定適用 于乳飲料，只能夠檢測水溶液。如何檢測乳飲料的果膠的含量是亟待解決的問題。
【發明內容】
[0007] 本發明克服了現有技術中當采用間羥基聯苯法測定果膠含量時，預處理過程后中 性糖和乳蛋白含量相對較高，由于中性糖干擾導致準確性低、重現性差和果膠損失較多，以 及現有技術中檢測半乳糖醛酸的方法為液相，實驗繁瑣只能檢測水溶液，不一定適用于乳 飲料的缺陷，提供了一種預處理方法及果膠的檢測方法。本發明可以用于檢測乳飲料中的 果膠含量，實驗的步驟簡單、準確度高、重現性好，且預處理過程在盡可能除去了中性糖和 乳蛋白的同時，又減少了果膠的損失。
[0008] 本發明通過以下技術方案解決上述技術問題。
[0009] 本發明提供了一種預處理方法，其包括以下步驟：
[0010] (1)將待測果膠樣品在堿性溶液中進行蛋白質沉淀，分離得濾液；
[0011] (2)向將步驟（1)所得的濾液中加入乙醇的濃度至50%體積分數以上，進行沉淀 處理，分離得沉淀；
[0012] (3)將步驟（2)所得的沉淀溶于水得溶液A，加入乙醇的濃度至50%體積分數以 上，進行二次沉淀處理，分離得沉淀；
[0013] (4)將步驟（3)所得的沉淀溶于水，得溶液。
[0014] 步驟（1)中，所述的待測果膠樣品一般是指含有果膠的液體待測樣品，較佳地為 包含果膠的液態奶制品。
[0015] 步驟（1)中，所述的堿性溶液為本領域內常規的能使蛋白質沉淀的堿性溶液，較 佳地為碳酸鈉溶液，碳酸氫鈉溶液，氫氧化鉀溶液，碳酸鉀溶液，碳酸氫鉀溶液和氫氧化鈉 溶液中的一種或幾種，更佳地為氫氧化鈉溶液。所述的堿性溶液的溶度較佳地為〇. 5-lmol/ L。所述的堿性溶液與所述的待測果膠樣品的體積比較佳地為1:5-1:15,更佳地為1:10。
[0016] 步驟（1)中，所述的分離為本領域內常規，較佳地為離心。所述的離心較佳地轉速 為 5000-10000r/min，時間為 5-10 分鐘。
[0017] 步驟（2)中，所述的乙醇為本領域內常規的乙醇，所述的加入乙醇的濃度至50% 體積分數以上是通過加入95%體積分數的乙醇溶液實現的，所述的95%體積分數的乙醇 溶液與所述的濾液的體積比較佳地為1:1. 8-1: 4。
[0018] 步驟（2)中，所述的分離為本領域內常規，較佳地為離心。所述的離心較佳地轉速 為 5000-10000r/min，時間為 5-10 分鐘。
[0019] 步驟（3)中，所述的水為本領域內常規，較佳地為符合GB/T 6682要求的二級水。
[0020] 步驟（3)中，所述的乙醇為本領域內常規的乙醇,所述的加入乙醇的濃度至50% 體積分數以上是通過加入95%體積分數的乙醇溶液實現的；
[0021] 步驟（3)中，所述的二次沉淀處理較佳地為向所述溶液A中第一次加入乙醇離 心沉淀后，第二次再加入乙醇離心沉淀。其中，當所述的加入乙醇的濃度至50%體積分 數以上是通過加入95%體積分數的乙醇溶液實現時，第一次沉淀過程中，所述溶液A與所 述的95%體積分數的乙醇溶液的體積比較佳地為1:1-1:4 ;其中，所述離心較佳地轉速為 5000-10000r/min，時間為5-10分鐘。第二次沉淀過程中，所述溶液A與所述的95%體積 分數的乙醇溶液的體積比較佳地為1:2-1:4 ;其中，所述離心較佳地轉速為5000-10000r/ min，時間為 5-10min。
[0022] 步驟（4)中，所述的水為本領域內常規，較佳地為符合GB/T 6682要求的二級水。 所述的水的用量較佳地為步驟（1)中所述的待測果膠樣品的體積的2-20倍。
[0023] 本發明還提供了一種果膠的檢測方法，所述的檢測方法包括以下步驟：將上述預 處理方法得到的溶液，與四硼酸鈉-硫酸溶液混合保溫后，水浴冷卻，與間羥基聯苯氫氧化 鈉溶液反應后，525nm處測定吸光度，經標準曲線法測定，即可；
[0024] 其中，所述的吸光度落入0. 3-0. 8范圍內時，經標準曲線法測定，即可；若所述的 吸光度不在所述的范圍內，調節所述預處理中步驟（4)中水的用量，重復實驗，使所述的吸 光度值落入所述的范圍內，再經標準曲線法測定，即可。
[0025] 其中，所述的四硼酸鈉-硫酸溶液較佳地為每IOOmL濃硫酸中溶解有0. 478g四硼 酸鈉。所述的保溫的溫度較佳地為95°C，所述的保溫的時間較佳地為10分鐘。
[0026] 其中，所述的間羥基聯苯氫氧化鈉溶液中，間羥基聯苯的濃度為較佳地為I. 5g/L， 氫氧化鈉的濃度較佳地為5g/L。所述的間羥基聯苯氫氧化鈉溶液較佳地為將間羥基聯苯溶 液溶于氫氧化鈉溶液中形成。所述的反應的時間較佳地為15-20分鐘。
[0027] 其中，所述的標準曲線法測定的方法為本領域常規的標準曲線法計算的方法。較 佳的，所述的標準曲線法測定的方法包括以下步驟：用標準品配制標準溶液，標準溶液經上 述果膠檢測方法的步驟處理后，分別測定其吸光度，用吸光度對標準工作液中樣品的濃度 繪制標準曲線，再在相同的測量條件下測量待測果膠樣品的吸光度，根據待測果膠樣品的 吸光度和標準曲線計算待測果膠樣品的濃度，并計算其含量。更佳的，所述的標準曲線法測 定的方法包括以下步驟：將半乳糖醛酸配置六份濃度為C1_C6(較佳的C1-C6按照梯度變 化）的標準溶液，取相同體積的所述標準溶液分別與四硼酸鈉-硫酸溶液混合保溫后，水浴 冷卻，與間羥基聯苯氫氧化鈉溶液反應后，525nm處測定吸光度，記作A1-A6 ;根據C1-C6和 A1-A6繪制標準曲線，再在相同的測量條件下，測量待測果糖樣品的吸光度，根據待測果糖 樣品的吸光度和標準曲線計算待測果糖樣品的半乳糖醛酸濃度，并計算果糖的含量。
[0028] 在符合本領域常識的基礎上，上述各優選條件，可任意組合，即得本發明各較佳實 例。
[0029] 本發明所用試劑和原料均市售可得，所有試劑均為分析純。
[0030] 本發明的積極進步效果在于：
[0031] 1、采用本發明預處理方法后進行果膠的檢測，實驗的步驟簡單、準確度高、重現性 好，且前預理過程在盡可能除去了中性糖和乳蛋白的同時，又減少了果膠的損失。
[0032] 2、本發明預處理及果膠的檢測方法能夠檢測乳制品中的果膠的含量，且準確度 高、重現性好。
[0033] 3、本發明不僅能夠檢測果膠水溶液中果膠的含量，還能夠準確檢測乳飲料中果膠 的含量。
【專利附圖】
【附圖說明】
[0034] 圖1為實施例1的方法檢測得到的標準曲線。
【具體實施方式】
[0035] 下面通過實施例的方式進一步說明本發明，但并不因此將本發明限制在所述的實 施例范圍之中。下列實施例中未注明具體條件的實驗方法，按照常規方法和條件，或按照商 品說明書選擇。
[0036] 若在待測果膠樣品中，果膠中半乳糖醛酸的含量是可以直接獲得的，可以用本方 法直接測定；若果膠中半乳糖醛酸的含量不能夠直接獲得，可以根據國標果膠中半乳糖醛 酸含量為65%計算。本實驗中lg/L果膠原料中半乳糖醛酸含量為67. 2%。
[0037] 將0. 478g四硼酸鈉溶于IOOmL濃硫酸中形成四硼酸鈉-硫酸溶液；將間羥基聯 苯溶液溶于氫氧化鈉溶液中形成間羥基聯苯氫氧化鈉溶液，在間羥基聯苯氫氧化鈉溶液， 間羥基聯苯的濃度為I. 5g/L，氫氧化鈉的濃度為5g/L。下述實施例中均采用上述制備的溶 液。
[0038] 下述實施例中所述的水均為符合GB/T 6682要求的二級水。
[0039] 實施例1
[0040] 標準曲線的制備：
[0041] 半乳糖醛酸標準品購于Sigma公司。
[0042]將半乳糖醒酸配制為 10mg/L、20mg/L、40mg/L、60mg/L、80mg/L 和 lOOmg/L 的標準 溶液；取不同濃度的標準溶液ImL與5mL四硼酸鈉-硫酸溶液混合，95°C保溫IOmin后，水 浴冷卻，加入100 μ 1間輕基聯苯氫氧化鈉溶液反應20min后，525nm處測定吸光。
[0043] 以吸光度對半乳糖醛酸的濃度做標準曲線，標準曲線方程為：
[0044] Y = 0. 007X-0. 009, R2 = 0. 9994。其中：X表示半乳糖醛酸濃度，mg/mL ;Y表示吸 光度值。
[0045] 標準曲線如圖1所示。
[0046] 實施例2
[0047] 乳飲料中果膠的含量測定
[0048] 1、乳飲料的制備：
[0049] 將690g水預熱到60°C，加入蔗糖使其的濃度為50g/L，加入葡萄糖使其的濃度為 10g/L，加入果膠使其的含量為lg/L，攪拌20min，加入酸奶基料250g攪拌20min，并用檸檬 酸調節酸度致60° T，60°C均質，95°C滅菌lOmin，灌裝備用。
[0050] 2、檢測方法：
[0051] (1)將上述乳飲料10mL，加入ImL lmol/L的氫氧化鈉溶液，進行離心，轉速為 10000r/min，時間為IOmin取出蛋白質，得濾液；
[0052] (2)取2. 2mL步驟（1)所得的濾液，加入95%體積分數的乙醇溶液4mL，進行離心， 轉速為l〇〇〇〇r/min，時間為IOmin,分離得果膠沉淀；
[0053] (3)將步驟⑵所得的沉淀溶于4mL 7jC，加入95%體積分數的乙醇溶液4mL，進行 離心，轉速為l〇〇〇〇r/min，時間為lOmin，分離得果膠沉淀，再加入95%體積分數的乙醇溶 液8mL，進行離心，轉速為10000r/min，時間為IOmin,分離得果膠沉淀；
[0054] (4)將步驟⑶所得的沉淀溶于20mL 7K，得溶液；
[0055] (5)將步驟⑷所得的溶液ImL與5mL四硼酸鈉-硫酸溶液混合95°C保溫IOmin 后，水浴冷卻，加入100 μ 1間輕基聯苯氫氧化鈉溶液反應20min后，525nm處測定吸光度為 0. 4362±0. 01。
[0056] 根據實施例1制得的標準曲線方程Y = 0. 007X-0. 009, R2 = 0. 9994 (X表示半乳 糖醛酸濃度，mg/mL ;Y表示吸光度值），計算得到半乳糖醛酸的濃度為636mg/L。
[0057] 實施例3
[0058] 在實施例2乳飲料的制備過程中，加入果膠使其濃度為2g/L，其余工藝參數及測 試條件與實施例2相同。
[0059] 在525nm處測定吸光度值為0. 8493±0. 02,超出吸光度范圍0. 3-0. 8,為使實驗結 果較為準確，經過兩次稀釋后測定吸光度值為〇. 4311 ±0. 02。
[0060] 根據實施例1制得的標準曲線方程Y = 0. 007X-0. 009, R2 = 0. 9994 (X表示半乳 糖醛酸濃度，mg/mL ;Y表示吸光度值），計算得到半乳糖醛酸的濃度為1257mg/L。
[0061] 實施例4
[0062] 在實施例2乳飲料的制備過程中，加入果膠使其濃度為3g/L，其余工藝參數及測 試條件與實施例2相同。
[0063] 在525nm處測定吸光度值為1. 4750±0. 03,超出吸光度范圍0. 3-0. 8,為使實驗結 果較為準確，經過三次稀釋后測定吸光度值為〇. 4438 ±0. 02。
[0064] 在525nm處測定吸光度值，根據實施例1制得的標準曲線方程Y = 0. 007X-0. 009， R2 = 0. 9994 (X表示半乳糖醛酸濃度，mg/mL ;Y表示吸光度值），計算得到半乳糖醛酸的濃 度為 1940mg/L。
[0065] 實施例5
[0066] 本實施例為制備標準曲線，其操作中加入間羥基聯苯氫氧化鈉溶液反應時間為 15min，其余的操作條件與實施例1相同。制備得到相應的標準曲線。
[0067] 實施例6
[0068] 1、乳飲料的制備：
[0069] 具體制備如實施例2。
[0070] 2、檢測方法：
[0071] (1)將上述乳飲料15mL，加入ImL 0· 5mol/L的碳酸鈉溶液，進行離心，轉速為 5000r/min，時間為5min，取出蛋白質，得濾液；
[0072] (2)取2mL步驟⑴所得的濾液，加入95%體積分數的乙醇8mL，進行離心，轉速為 5000r/min，時間為5min，分離得果膠沉淀；
[0073] (3)將步驟⑵所得的沉淀溶于4mL水，加入95 %體積分數的乙醇16mL，進行離 心，轉速為5000r/min，時間為5min，分離得果膠沉淀，再加入95%體積分數的乙醇16mL，進 行離心，轉速為5000r/min，時間為5min，分離得果膠沉淀；
[0074] (4)將步驟⑶所得的沉淀溶于300mL 7K，得溶液；
[0075] (5)將步驟⑷所得的溶液ImL與5mL四硼酸鈉-硫酸溶液混合95°C保溫IOmin 后，水浴冷卻，加入100 μ 1間輕基聯苯氫氧化鈉溶液反應15min后，525nm處測定吸光度。
[0076] 根據實施例5制得的標準曲線方程計算得到半乳糖醛酸的濃度與實際值想符合。
[0077] 實施例7
[0078] 1、乳飲料的制備：
[0079] 具體制備如實施例2。
[0080] 2、檢測方法：
[0081] (1)將上述乳飲料IOmL,加入2mL 0. 8mol/L的碳酸氫鈉溶液，進行離心，轉速為 8000r/min，時間為8min，取出蛋白質，得濾液；
[0082] (2)取2mL步驟⑴所得的濾液，加入95%體積分數的乙醇6mL，進行離心，轉速為 8000r/min，時間為8min，分離得果膠沉淀；
[0083] (3)將步驟⑵所得的沉淀溶于4mL 7jC，加入95 %體積分數的乙醇12mL，進行離 心，轉速為8000r/min，時間為8min，分離得果膠沉淀，再加入95%體積分數的乙醇12mL，進 行離心，轉速為8000r/min，時間為8min，分離得果膠沉淀；
[0084] (4)將步驟（3)所得的沉淀溶于IOOmL 7K，得溶液；
[0085] (5)將步驟⑷所得的溶液ImL與5mL四硼酸鈉-硫酸溶液混合95°C保溫IOmin 后，水浴冷卻，加入100 μ 1間輕基聯苯氫氧化鈉溶液反應15min后，525nm處測定吸光度。
[0086] 根據實施例5制得的標準曲線方程計算得到半乳糖醛酸的濃度與實際值想符合。
[0087] 對比實施例1
[0088] 在實施例2的步驟2檢測方法中，步驟（1)中，不添加氫氧化鈉溶液，直接進行離 心去除蛋白，其它操作與實施例2相同。
[0089] 本實驗中，加入果膠使其濃度為lg/L，實際半乳糖醛酸的含量為672mg/L，根據實 施例1制得的標準曲線計算得到的半乳糖醛酸含量為476 ±25,準確率為67-75%。
[0090] 對比實施例2
[0091] 在實施例2的步驟2檢測方法中，步驟（3)中，僅用乙醇溶液沉淀處理一次，其它 操作與實施例2相同。
[0092] 在本實驗中，由于中性糖沒有去除完全，溶液由于中性糖碳化嚴重呈現深褐色，而 不是半乳糖醛酸與間羥基聯苯反應呈現的粉紅色。由此說明，僅用乙醇溶液沉淀處理一次， 嚴重影響實驗結果。
[0093] 對比實施例3
[0094] 在實施例2的步驟2檢測方法中，步驟（3)中，用乙醇溶液沉淀處理三次，其它操 作與實施例2相同。
[0095] 本實驗中，加入果膠使其濃度為lg/L，實際半乳糖醛酸的含量為672mg/L，根據實 施例1制得的標準曲線計算得到的半乳糖醛酸含量為532±30,準確率為74-83%。
[0096] 效果實施例1
[0097] 表1為實施例2-4中果膠的測定結果，表格中準確度的計算公式為：準確度=計算 半乳糖醛酸含量/實際半乳糖醛酸含量X 100%
[0098] 表 1
【權利要求】
1. 一種預處理方法，其包括以下步驟： (1) 將待測果膠樣品在堿性溶液中進行蛋白質沉淀，分離得濾液； (2) 向將步驟（1)所得的濾液中加入乙醇的濃度至50%體積分數以上，進行沉淀處理， 分離得沉淀； (3) 將步驟（2)所得的沉淀溶于水得溶液A，加入乙醇的濃度至50%體積分數以上，進 行二次沉淀處理，分離得沉淀； (4) 將步驟（3)所得的沉淀溶于水，得溶液。
2. 如權利要求1所述的預處理方法，其特征在于，步驟（1)中，所述的待測果膠樣品為 包含果膠的液態奶制品。
3. 如權利要求1所述的預處理方法，其特征在于，步驟（1)中，所述的堿性溶液為碳酸 鈉溶液，碳酸氫鈉溶液，氫氧化鉀溶液，碳酸鉀溶液，碳酸氫鉀溶液和氫氧化鈉溶液中的一 種或幾種；所述的堿性溶液的溶度為〇. 5-lmol/L ;所述的堿性溶液與所述的待測果膠樣品 的體積比為1:5-1:15 ; 步驟（1)中，所述的分離為離心，所述的離心的轉速為5000-10000r/min，時間為5-10 分鐘。
4. 如權利要求1所述的預處理方法，其特征在于，步驟（2)中，所述的加入乙醇的濃度 至50%體積分數以上是通過加入95%體積分數的乙醇溶液實現的，所述的95%體積分數 的乙醇溶液與所述的濾液的體積比為1:1. 8-1:4 ; 步驟（2)中，所述的分離為離心，所述的離心的轉速為5000-10000r/min，時間為5-10 分鐘。
5. 如權利要求1所述的預處理方法，其特征在于，步驟（3)中，所述的加入乙醇的濃度 至50%體積分數以上是通過加入95%體積分數的乙醇溶液實現的； 其中，第一次沉淀過程中，所述溶液A與所述的95%體積分數的乙醇溶液的體積比為 1:1-1:4 ;其中，所述離心轉速為5000-10000r/min，時間為5-10分鐘； 第二次沉淀過程中，所述溶液A與所述的95 %體積分數的乙醇溶液的體積比為 1:2-1:4 ;其中，所述離心轉速為5000-10000r/min，時間為5-10min。
6. 如權利要求1所述的預處理方法，其特征在于，步驟（4)中，所述的水的用量為步驟 (1)中所述的待測果膠樣品的體積的2-20倍。
7. -種果膠的檢測方法，所述的檢測方法包括以下步驟：將如權利要求1-6任一項所 述的預處理方法得到的溶液，與四硼酸鈉-硫酸溶液混合保溫后，水浴冷卻，與間羥基聯苯 氫氧化鈉溶液反應后，525nm處測定吸光度，經標準曲線法測定，即可； 其中，所述的吸光度落入0.3-0. 8范圍內時，經標準曲線法測定，即可；若所述的吸光 度不在所述的范圍內，調節所述的預處理方法中步驟（4)中水的用量，重復實驗，使所述的 吸光度值落入所述的范圍內，再經標準曲線法測定，即可。
8. 如權利要求7所述的檢測方法，其特征在于，所述的四硼酸鈉-硫酸溶液為每IOOmL 濃硫酸中溶解有〇. 478g四硼酸鈉； 所述的保溫的溫度為95°C，所述的保溫的時間為10分鐘； 所述的間羥基聯苯氫氧化鈉溶液中，間羥基聯苯的濃度為I. 5g/L，氫氧化鈉的濃度為 5g/L ； 所述的間羥基聯苯氫氧化鈉溶液為將間羥基聯苯溶液溶于氫氧化鈉溶液中所形成的 溶液； 所述的反應的時間為15-20分鐘。
9. 如權利要求7所述的檢測方法，其特征在于，所述的標準曲線法測定的方法包括以 下步驟：用標準品配制標準溶液，標準溶液經所述的果膠檢測方法的步驟處理后，分別測定 其吸光度，用吸光度對標準工作液中樣品的濃度繪制標準曲線，再在相同的測量條件下測 量待測果膠樣品的吸光度，根據待測果膠樣品的吸光度和標準曲線計算待測果膠樣品的濃 度，并計算其含量。
10. 如權利要求9所述的檢測方法，其特征在于，所述的標準曲線法測定的方法包括 以下步驟：將半乳糖醛酸配置六份濃度為C1-C6的標準溶液，取相同體積的所述標準溶液 分別與四硼酸鈉-硫酸溶液混合保溫后，水浴冷卻，與間羥基聯苯氫氧化鈉溶液反應后， 525nm處測定吸光度，記作A1-A6 ;根據C1-C6和A1-A6繪制標準曲線，再在相同的測量條件 下，測量待測果糖樣品的吸光度，根據待測果糖樣品的吸光度和標準曲線計算待測果糖樣 品的半乳糖醛酸濃度，并計算果糖的含量； 其中，所述的C1-C6的標準溶液的濃度較佳地按照階梯變化。
【文檔編號】G01N21/31GK104316382SQ201410640726
【公開日】2015年1月28日 申請日期:2014年11月13日 優先權日:2014年11月13日
【發明者】韓梅, 郭本恒, 董文琪, 徐致遠, 劉振民, 楊博崴 申請人:光明乳業股份有限公司