鑒定育發化妝品中側柏、何首烏和桑葉類功效成分的方法
【專利摘要】本發明公開了一種鑒定育發化妝品中側柏、何首烏和桑葉類功效成分的方法，步驟為：取樣品，甲醇溶解，加1.8-2.2％甲酸溶液，得A液；取PAX固相萃取柱甲醇、水活化平衡，上樣，4.5-5.5％氨水溶液和甲醇淋洗，1.8-2.2％甲酸甲醇溶液洗脫，收集洗脫液，吹干，復溶，過濾，將濾液用超高效液相色譜-四極桿串聯飛行時間質譜進行測定，其中，色譜柱：CSH C18；流動相：A為0.0015％-0.0025％甲酸水溶液，B為甲醇；梯度洗脫。該方法可對育發化妝品中側柏、何首烏和桑葉的功效成分(槲皮苷、何首烏苷和蘆丁)進行定性定量檢測，結果準確可靠。
【專利說明】鑒定育發化妝品中側柏、何首烏和桑葉類功效成分的方法
【技術領域】
[0001] 本發明涉及化妝品分析領域，特別是涉及一種鑒定育發化妝品中側柏、何首烏和 桑葉類功效成分的方法。
【背景技術】
[0002] 脫發是臨床常見疾病，雖然不屬嚴重疾病，但是有礙容顏，影響美觀，常給患者帶 來巨大的精神壓力和心理負擔。隨著人們對于脫發越來越重視，育發化妝品的市場需求急 劇增加，各類新型育發化妝品產品的層出不窮。據查詢，目前在我國國家食品藥品監督管理 局所登記育發化妝品特證備案的國產化妝品近450種，其中大部分產品以中草藥植物提取 液為主要功效成分。
[0003] 側柏、何首烏和桑葉是常見的中草藥植物，它們的育發作用已被大量研究所證實， 目前已被廣泛用于各種具有育發作用的化妝品中。依據中華人民共和國藥典第一部（2010 版），選擇槲皮苷、何首烏苷和蘆丁分別作為與側柏、何首烏和桑葉的藥材或提取液相對應 的功效成分。然而，雖然目前關于功效成分槲皮苷QR(式I )、何首烏苷THS-GLU(式II )和 蘆丁 RT (式III)的檢測技術研究報道眾多，主要采用高效液相色譜法和液相色譜質譜聯用 法等，但由于育發化妝品中三功效成分的含量較低，且育發化妝品基質復雜，特別是育發洗 發液類產品中含有大量的各類表面活性劑等基質，故現有的檢測方法不適于育發化妝品中 側柏、何首烏和桑葉的功效成分槲皮苷、何首烏苷和蘆丁的鑒定；而由于缺乏相關功效檢測 方法及鑒定技術，假冒偽劣、虛假宣傳等不良現象充斥著整個育發化妝品行業，嚴重影響消 費者對于中草藥植物育發化妝品的信心。因此，為了督促企業加強產品質量控制，提升育發 化妝品行業的質量水平，亟需建立相應的檢測方法標準對育發化妝品進行植物提取液功效 成分的鑒定。
[0004]
【權利要求】
1. 鑒定育發化妝品中側柏、何首烏和桑葉類功效成分的方法，其特征在于，包括如下步 驟： (1) 預處理：稱取0. 4-0. 6g樣品，甲醇溶解，定容至10ml，離心，取上清液，過濾，取 l-2ml濾液，加8-9ml體積分數為1. 8-2. 2%的甲酸水溶液，得A液； (2) 固相萃取：取PAX固相萃取柱用甲醇、水活化平衡，將A液通過PAX固相萃取柱，依 次用體積分數為4. 5-5. 5%的氨水溶液和甲醇淋洗，再用體積分數為1. 8-2. 2%的甲酸甲 醇溶液洗脫，收集洗脫液，氮吹至近干，加1-1. 5ml體積分數為48-52%的甲醇水溶液復溶， 過濾，得供試品溶液； (3) 測定：將供試品溶液用超高效液相色譜-四極桿串聯飛行時間質譜進行測定，條件 如下： 色譜條件： 色譜柱：CSH C18，規格為 2. 1 X 50mm，L 7 μ m ; 進樣體積：4-6 μ L ; 流速：〇· 3-0. 5ml/min ; 流動相A :體積分數為0. 0015% -0. 0025%的甲酸水溶液，流動相B :甲醇；梯度洗脫程 序：0-3min，20% -40% B，3-5min，20% B ; 質譜條件： 離子源：電噴霧離子源，負離子模式； 錐孔電壓：30-40V。
2. 根據權利要求1所述的鑒定育發化妝品中側柏、何首烏和桑葉類功效成分的方法， 其特征在于，步驟（3)所述的甲酸水溶液中甲酸的體積分數為0.002%。
3. 根據權利要求1或2所述的鑒定育發化妝品中側柏、何首烏和桑葉類功效成分的方 法，其特征在于，步驟（3)所述的錐孔電壓為35V。
4. 根據權利要求1或2所述的鑒定育發化妝品中側柏、何首烏和桑葉類功效成分的方 法，其特征在于，步驟（2)所述的PAX固相萃取柱的規格為500mg/6ml。
5. 根據權利要求1或2所述的鑒定育發化妝品中側柏、何首烏和桑葉類功效成分的方 法，其特征在于，將步驟（2)所述的洗脫液于40°C水浴條件下氮吹至近干。
6. 根據權利要求1或2所述的鑒定育發化妝品中側柏、何首烏和桑葉類功效成分的 方法，其特征在于，步驟（1)所述的預處理為：準確稱取0.4-0. 6g樣品，甲醇溶解，定容至 10ml，以轉速9000-11000r/min離心，取上清液，PVDF濾膜過濾，取lml濾液，加9ml體積分 數為2 %的甲酸水溶液，得A液。
7. 根據權利要求1或2所述的鑒定育發化妝品中側柏、何首烏和桑葉類功效成分的方 法，其特征在于，步驟（2)所述的固相萃取為：取500mg/6ml的PAX固相萃取柱用5-7mL甲 醇、5-7mL水活化平衡，將A液以不高于lml/min的流速通過PAX固相萃取柱，依次用6-8ml 體積分數為5 %的氨水溶液和10-12ml的甲醇淋洗，4 X 3ml體積分數為2 %的甲酸甲醇溶液 洗脫，收集洗脫液，氮吹至近干，加 lml體積分數為50%的甲醇水溶液復溶，過濾，得供試品 溶液。
8. 根據權利要求1或2所述的鑒定育發化妝品中側柏、何首烏和桑葉類功效成分的方 法，其特征在于，步驟（3)所述的色譜條件中：進樣體積：5μ L ;流速：0. 4ml/min ;流動相A 為體積分數0. 002 %的甲酸水溶液。
9. 根據權利要求1或2所述的鑒定育發化妝品中側柏、何首烏和桑葉類功效成分的 方法，其特征在于，步驟（3)所述的質譜條件中毛細管電壓：2. 4-2. 6KV;脫溶劑氣溫度： 445-455°C ;離子源溫度：95-105°C ;脫溶劑氣流速：590-610L/h ;錐孔氣流速：45-55L/h ;四 極桿采集質量數范圍：l〇〇-l〇〇〇u。
10. 根據權利要求9所述的鑒定育發化妝品中側柏、何首烏和桑葉類功效成分的方法， 其特征在于，所述的質譜條件中數據采集模式：棒狀；掃描采集時間：〇. 2s ;TOF運行模式： V模式。
【文檔編號】G01N30/88GK104267136SQ201410539422
【公開日】2015年1月7日 申請日期:2014年10月13日 優先權日:2014年10月13日
【發明者】譚建華, 李慧勇, 席紹峰, 郭長虹, 謝文緘, 王繼才, 熊小婷, 趙田甜, 張可冬 申請人:廣州質量監督檢測研究院