一種果蔬中農藥殘留的快速檢測方法
【專利摘要】本發明公開了一種果蔬中農藥殘留的快速檢測方法，涉及食品安全領域。該方法包括超聲提取、濃縮蒸干、凈化、GC-MS/MS測定四個步驟。本發明解決了常規農藥殘留檢測方法存在破壞樣品、前處理繁瑣、耗時長、成本高、對環境造成污染等不足的問題，具有操作簡單、快速、成本低、有機溶劑消耗少、富集效率高、靈敏度可靠、較好的回收率等優勢，且能滿足國際上對蔬菜中農藥殘留限量的檢測要求，具有一定的推廣價值。
【專利說明】一種果蔬中農藥殘留的快速檢測方法
【技術領域】
[0001]本發明涉及食品安全領域，尤其涉及一種果蔬中農藥殘留的快速檢測方法。
【背景技術】
[0002]隨著農業產業化的發展，農產品的生產越來越依賴于農藥、抗生素和激素等外源物質。我國農藥在糧食、蔬菜、水果、茶葉上的用量居高不下，而這些物質的不合理使用必將導致農產品中的農藥殘留超標，影響消費者使用安全，嚴重時會造成消費者治病、發育不正常、甚至直接導致中毒死亡，農藥殘留超標也會影響農產品的貿易。隨著人民生活水平的提高，消費者在強調果蔬營養品質的同時，對其食用安全性提出了越來越高的要求。近年來，國內外經常有農藥殘留超標引起的急性中毒事件的發生，這都是由于農藥的不當使用引起的。因此，國際上對水果中農藥殘留檢測的限量要求越來越嚴格，農藥的檢測項目也越來越多。目前，常規農藥殘留檢測方法存在破壞樣品、前處理繁瑣、耗時長、成本高、對環境造成污染等不足，國際上用于農藥殘留快速檢測方法種類繁多:農藥殘留速測法，只限于檢測蔬菜和水果中的有機磷和氨基甲酸酯類農藥殘毒；酶聯免疫法，具有專一性強、靈敏度高、快速、操作簡單等優點，但由于受到農藥種類繁多、抗體制備難度大、在不能肯定樣本中存在農藥殘留種類時檢測有一定的盲目性以及抗體以來國外進口影響，酶聯免疫法的應用范圍受到較大的限制，等等。因此，探索一種簡便、快速、綠色、環保的檢測方法具有重要的實際應用價值。這對于擴大我國果蔬貿易出口，增加農民的收入，提高我國蔬菜水果產業的國際競爭力有著重大的意義。
【發明內容】
[0003]本發明的目的在于:針對上述存在的問題，提供一種果蔬中農藥殘留的快速檢測方法，解決了常規農藥殘留檢測方法存在破壞樣品、前處理繁瑣、耗時長、成本高、對環境造成污染等不足的問題，具有操作簡單、快速、成本低、有機溶劑消耗少、富集效率高、靈敏度可靠、較好的回收率等優勢，且能滿足國際上對蔬菜中農藥殘留限量的檢測要求，具有一定的推廣價值。
[0004]本發明采用的技術方案為:
[0005]一種果蔬中農藥殘留的快速檢測方法，包括以下步驟:
[0006]1)超聲提取:將蔬菜或水果切碎或搗碎，稱取6?12g于離心管中，先加入2?3g的氯化鈉、5?10g無水硫酸鈉或無水乙酸鈉，再加入15?20mL有機溶劑，劇烈震蕩1?2min,超聲提取lOmin后,5000r/min離心lmin,有機上清液取出備用，殘洛再分別用10mL、5mL有機溶劑超聲提取2次，合并提取液；
[0007]2)濃縮蒸干:將上步所得提取液放置蒸餾瓶中，在35?50°C水浴中真空旋轉蒸干或用氮氣吹干；
[0008]3)凈化:將上步所得加入lmL丙酮溶解后，通過CARB0N/NH2柱進行洗脫，分別采用體積比為3:5的丙酮和正己烷混合溶劑、丙酮、乙酸乙酯、體積比為1:1的丙酮和甲醇混合溶劑各2mL進行梯度洗脫，合并得凈化液，濃縮蒸干，加入丙酮與水體積比1:1的混合液定容，過0.25?0.45 μ m微孔濾膜后待檢測；
[0009]4) GC-MS/MS測定:色譜柱為VF-5MS毛細管柱30m X 0.25mm X 0.25 μ m,柱溫箱升溫程序，采用多反應監測MRM模式串聯質譜儀進行測定。
[0010]作為本發明的優選方案，步驟1)中有機溶劑為丙酮、二氯甲烷和乙酸乙腈中至少一種。
[0011]進一步地，所述有機溶劑是由丙酮與二氯甲烷按1:1比例混合而成的混合溶劑。丙酮-二氯甲烷對不同濃度的農藥提取率高，且對高級性農藥和濃度低的農藥提取率同樣聞。
[0012]綜上所述，由于采用了上述技術方案，本發明的有益效果是:
[0013]1、本發明采用的有機溶劑萃取，尤其丙酮-二氯甲烷對不同濃度的農藥提取率高，且對高級性農藥和濃度低的農藥提取率同樣高。前處理簡便快速，有機溶劑消耗少，回收率提高。
[0014]2、采用CARB0N/NH2柱進行凈化，較傳統的固相萃取方式，凈化效果更好，回收率更高，保證了實驗結果的準確性和精密度，也有效防止了對儀器系統的污染，較活性炭凈化方法，沒有活性炭帶來對實驗結果的影響。
[0015]3、本發明方法具有操作簡單、快速、成本低、有機溶劑消耗少、富集效率高、靈敏度可靠、較好的回收率等優勢，且能滿足國際上對果蔬中農藥殘留限量的檢測要求，具有一定的推廣價值。
[0016]4、應用GC-MS/MS完成了多農藥殘留的定性定量分析，利用毛細管柱的強分離能力，以及使用合理的升溫程序，具有簡單、用時少、成本低、靈敏度可靠的特點，提高了檢測效率，滿足果蔬中農藥殘留日常檢測和風險評估的需求。
【具體實施方式】
[0017]下面結合【具體實施方式】對本發明的上述
【發明內容】
作進一步的詳細描述，但不應將此理解為本發明上述主題的范圍僅限于下述實施例。
[0018]實施例1
[0019]蘋果洗凈后切碎或搗碎，稱取10g于離心管中，先加入2g的氯化鈉、10g無水硫酸鈉，再加入15mL丙酮與二氯甲烷按1:1比例混合的混合溶劑，劇烈震蕩lmin，超聲提取lOmin后,5000r/min離心lmin,有機上清液取出備用，殘洛再分別用10mL、5mL有機溶劑超聲提取2次，合并提取液；將所得提取液放置蒸餾瓶中，在40°C水浴中真空旋轉蒸干或用氮氣吹干；加入lmL丙酮溶解后，通過CARB0N/NH2柱進行洗脫，分別采用體積比為3:5的丙酮和正己烷混合溶劑、丙酮、乙酸乙酯、體積比為1:1的丙酮和甲醇混合溶劑各2mL進行梯度洗脫，合并得凈化液，濃縮蒸干，加入丙酮與水體積比1:1的混合液定容，過0.42 μ m微孔濾膜后待檢測；通過GC-MS/MS測定:色譜柱為VF-5MS毛細管柱30mX0.25mmX0.25 μ m，柱溫箱升溫程序，采用多反應監測MRM模式串聯質譜儀進行測定。
[0020]實施例2
[0021]白菜葉洗凈切碎或搗碎，稱取12g于離心管中，先加入3g的氯化鈉、5g無水硫酸鈉，再加入15mL丙酮與二氯甲烷按1:1比例混合的混合溶劑，劇烈震蕩lmin，超聲提取lOmin后,5000r/min離心lmin,有機上清液取出備用，殘洛再分別用10mL、5mL有機溶劑超聲提取2次，合并提取液；將所得提取液放置蒸餾瓶中，在40°C水浴中真空旋轉蒸干或用氮氣吹干；加入lmL丙酮溶解后，通過CARBON/NH2柱進行洗脫，分別采用體積比為3:5的丙酮和正己烷混合溶劑、丙酮、乙酸乙酯、體積比為1:1的丙酮和甲醇混合溶劑各2mL進行梯度洗脫，合并得凈化液，濃縮蒸干，加入丙酮與水體積比1:1的混合液定容，過0.25 μ m微孔濾膜后待檢測；通過GC-MS/MS測定:色譜柱為VF-5MS毛細管柱30mX0.25mmX0.25 μ m，柱溫箱升溫程序，采用多反應監測MRM模式串聯質譜儀進行測定。
[0022]實施例3
[0023]去皮橘子切碎或搗碎，稱取6g于離心管中，先加入3g的氯化鈉、8g無水硫酸鈉，再加入16mL丙酮與二氯甲烷按1:1比例混合的混合溶劑，劇烈震蕩lmin，超聲提取lOmin后，5000r/min離心lmin，有機上清液取出備用，殘渣再分別用10mL、5mL有機溶劑超聲提取2次，合并提取液；將所得提取液放置蒸餾瓶中，在40°C水浴中真空旋轉蒸干或用氮氣吹干；加入lmL丙酮溶解后，通過CARB0N/NH2柱進行洗脫，分別采用體積比為3:5的丙酮和正己烷混合溶劑、丙酮、乙酸乙酯、體積比為1:1的丙酮和甲醇混合溶劑各2mL進行梯度洗脫，合并得凈化液，濃縮蒸干，加入丙酮與水體積比1:1的混合液定容，過0.35μπι微孔濾膜后待檢測；通過GC-MS/MS測定:色譜柱為VF-5MS毛細管柱30mX0.25mmX0.25 μ m，柱溫箱升溫程序，采用多反應監測MRM模式串聯質譜儀進行測定。
[0024]實施例4
[0025]與上述實施例不同之處在于:本實施例超聲提取采用的有機溶劑為乙酸乙腈，還可以為丙酮或者二氯甲烷。
[0026]實施例5
[0027]與上述實施例不同之處在于:本實施例超聲提取采用的有機溶劑為丙酮或者二氯甲烷中一種。
[0028]通過上述實施例檢測，可知本發明方法精密度、準確度好、檢出限低，對20種有機磷農藥、5種氨基甲酸酯類農藥和6種菊酯類農藥在特定色譜柱上得到較好分離，標準線線性良好，最低檢出含量Syg/kg?lOyg/kg，回收率達到78.5?121.7%，精密度RSD5.7%?25.3%，完全符合檢測標準。
[0029]因此，本發明方法具有操作簡單、快速、成本低、有機溶劑消耗少、富集效率高、靈敏度可靠、較好的回收率等優勢，且能滿足國際上對果蔬中農藥殘留限量的檢測要求，具有一定的推廣價值。
【權利要求】
1.一種果蔬中農藥殘留的快速檢測方法，其特征在于包括以下步驟: 1)超聲提取:將蔬菜或水果切碎或搗碎，稱取6?12g于離心管中，先加入2?3g的氯化鈉、5?1g無水硫酸鈉或無水乙酸鈉，再加入15?20mL有機溶劑，劇烈震蕩I?2min，超聲提取1min后，5000r/min離心lmin,有機上清液取出備用，殘洛再分別用10mL、5mL有機溶劑超聲提取2次，合并提取液； 2)濃縮蒸干:將上步所得提取液放置蒸餾瓶中，在35?50°C水浴中真空旋轉蒸干或用氮氣吹干； 3)凈化:將上步所得加入ImL丙酮溶解后，通過CARBON/NH2柱進行洗脫，分別采用體積比為3:5的丙酮和正己烷混合溶劑、丙酮、乙酸乙酯、體積比為1:1的丙酮和甲醇混合溶劑各2mL進行梯度洗脫，合并得凈化液，濃縮蒸干，加入丙酮與水體積比1:1的混合液定容，過0.25?0.45 μ m微孔濾膜后待檢測； 4)GC-MS/MS測定:色譜柱為VF-5MS毛細管柱30mX0.25mmX0.25 μ m,柱溫箱升溫程序，采用多反應監測MRM模式串聯質譜儀進行測定。
2.如權利要求1所述的一種果蔬中農藥殘留的快速檢測方法，其特征在于:步驟I)中有機溶劑為丙酮、二氯甲烷和乙酸乙腈中至少一種。
3.如權利要求2所述的一種果蔬中農藥殘留的快速檢測方法，其特征在于:所述有機溶劑是由丙酮與二氯甲烷按1:1比例混合而成的混合溶劑。
【文檔編號】G01N30/06GK104280471SQ201410522355
【公開日】2015年1月14日 申請日期:2014年9月30日 優先權日:2014年9月30日
【發明者】張艷梅 申請人:廣西大學