用于檢測呋喃妥因代謝物的免疫抗原和包被抗原的制備方法
【專利摘要】本發明公開一種用于檢測呋喃妥因代謝物的免疫抗原和包被抗原的制備，其特征在于：米用活潑硫酯法，將呋喃妥因代謝物半抗原與載體蛋白進行偶聯，制備呋喃妥因代謝物免疫抗原和包被抗原；所述呋喃妥因代謝物半抗原通過縮醛法為呋喃妥因代謝物引入間隔臂制備而成。本發明通過優化偶聯技術路線，以達到結構優化，提高抗體質量，從而進一步增加呋喃妥因代謝物免疫膠體金快速檢測的靈敏度和特異性的免疫抗原和包被抗原。
【專利說明】用于檢測映喃妥因代謝物的免疫抗原和包被抗原的制備
【技術領域】
[0001] 本發明涉及動物源性食品中呋喃妥因代謝物檢測【技術領域】，尤其是指用于檢測呋 喃妥因代謝物的免疫抗原和包被抗原的制備。
【背景技術】
[0002] 呋喃妥因（Nitrofurantoin)，是硝基呋喃類廣譜抗生素中的一種。該類藥物的基 本結構為一個呋喃環，位于第五個碳原子連接有一個硝基，具有較強的抗菌作用。呋喃妥因 價格便宜，療效確切，在畜禽及水產養殖上應用非常廣泛。呋喃妥因在生物體內代謝速率 很快，在很短時間內即代謝完全，研究證明呋喃妥因在動物體內可代謝為1-氨基乙內酰脲 (AHDhAHD可與體內細胞膜蛋白形成結合態，延緩了藥物在體內的消除速度，因而可在體內 殘留數周之久，甚至進入食物鏈中，在自然環境中長期殘留。近年來研究表明呋喃妥因及其 代謝物具有相當大的毒性和副作用，能誘導有機體基因突變、畸胎、癌癥，因而引起了人們 的高度重視。
[0003] 呋喃妥因及其代謝物的毒副作用導致各國禁止此類藥物在治療和飼料中使用。歐 盟、美國、中國等國家均將呋喃妥因列為禁用藥。盡管我國政府和相關組織對該類藥物的殘 留給予了高度重視，但其在動物源性食品中的殘留仍時有發生。
[0004] 國內外已經發表有關硝基呋喃類抗生素殘留檢測方法的文獻中，早期的文獻報道 多數是檢測原藥化合物。但研究表明原藥半衰期通常只有幾小時，而其代謝產物則長達數 周仍能在動物組織中殘留。因此各國已開始關注其代謝物的檢出。目前，對呋喃妥因代謝 物的檢測方法有色譜分析法、免疫檢測法（酶聯免疫分析方法）。色譜分析法（高效液相色 譜法、液相色譜-質譜聯用法）樣品前處理復雜，費用高；免疫分析法具有快速、靈敏度高、 高通量的特點。其中免疫分析方法有酶聯免疫法、膠體金免疫層析技術等。酶聯免疫分析 法操作相對繁瑣，對操作人員的專業知識要求較高，相比之下，膠體金免疫層析技術基于肉 眼水平的檢測，不需任何儀器設備和試劑，比酶聯免疫法省略了加顯色劑和終止液的步驟， 更簡化的操作，體積小，易攜帶，幾分鐘就可用肉眼觀察到顏色鮮明的實驗結果，并可保存 實驗結果。
[0005] 現有膠體金免疫層析技術在呋喃妥因代謝物檢測的靈敏度和特異性還是存在缺 陷，因而，有必要在現有技術上，從優化免疫抗原、包被抗原的結構及偶聯技術角度出發，提 高抗體的特異性、親和力，從而增加呋喃妥因代謝物免疫膠體金快速檢測的靈敏度和特異 性。
【發明內容】
[0006] 本發明要解決的技術問題是提供一種通過優化偶聯技術路線，以達到結構優化， 提高抗體質量，從而進一步增加呋喃妥因代謝物免疫膠體金快速檢測的靈敏度和特異性的 免疫抗原和包被抗原。
[0007] 為解決上述技術問題所采用的技術方案：一種用于檢測呋喃妥因代謝物的免疫抗 原和包被抗原的制備，其特征在于：采用活潑硫酯法，將呋喃妥因代謝物半抗原與載體蛋白 進行偶聯，制備呋喃妥因代謝物免疫抗原和包被抗原；所述呋喃妥因代謝物半抗原通過縮 醛法為呋喃妥因代謝物引入間隔臂制備而成，具有式（I)所示結構，
[0008]
【權利要求】
1. 一種用于檢測呋喃妥因代謝物的免疫抗原和包被抗原的制備，其特征在于：采用活 潑硫酯法，將呋喃妥因代謝物半抗原與載體蛋白進行偶聯，制備呋喃妥因代謝物免疫抗原 和包被抗原；所述呋喃妥因代謝物半抗原通過縮醛法為呋喃妥因代謝物引入間隔臂制備而 成，具有式（I)所示結構，
(I ) 所述呋喃妥因代謝物免疫抗原和包被抗原，具有式（II)所示結構，
(II)
2. 根據權利要求1所述的用于檢測呋喃妥因代謝物的免疫抗原和包被抗原的制備，其 特征在于：所述載體蛋白是指常規的可作為免疫載體使用的可溶性蛋白質。
3. 根據權利要求1所述的用于檢測呋喃妥因代謝物的免疫抗原和包被抗原的制備，其 特征在于：所述載體蛋白為牛血清白蛋白和/或卵清蛋白和/或血藍蛋白和/或人血清蛋 白。
【文檔編號】G01N33/577GK104215765SQ201410464964
【公開日】2014年12月17日 申請日期:2014年9月13日 優先權日:2014年9月13日
【發明者】潘嘉慧, 田峻, 沈國權, 趙亮亮, 楊輝, 朱海云 申請人:佛山市質量計量監督檢測中心