呼氣中的胃癌氣體標志物在制備胃癌診斷試劑中的用途
【專利摘要】本發明公開了一種呼氣中的胃癌氣體標志物在制備胃癌診斷試劑中的用途；所述標志物選擇以下組合中的多種或全部的組合物：異戊二烯、2，2-二甲基丙酸、正己醇、2-甲基戊烷、3-甲基戊烷、正己烷、3，3-二甲基戊烷、2-甲基己烷、3-甲基己烷、薄荷醇、乙酸苯酯、十六烷、十四烷、十二烷、丙酮；所述診斷試劑通過檢測被試者呼氣中的所述胃癌氣體標志物的含量，進而診斷胃癌，并能判斷胃癌處于早期階段還是進展期階段。本發明提供了多種存在于人的呼氣中的胃癌標志物用于診斷胃癌，并能區分處于早期與進展期的胃癌，有利于指導臨床治療。
【專利說明】 呼氣中的胃癌氣體標志物在制備胃癌診斷試劑中的用途
【技術領域】
[0001]本發明涉及胃癌的檢測【技術領域】；具體涉及一種呼氣中的胃癌氣體標志物在制備胃癌診斷試劑中的用途。
【背景技術】
[0002]在早期檢測到癌癥并得到治療時，癌癥患者的存活得到很大程度的提高。對于胃癌，診斷為晚期疾病患者大約10%的5年存活率，而診斷為早期疾病的患者具有90%的5年存活率。然而，目前的技術條件，大多數胃癌患者被確診時通常患有晚期疾病。
[0003]越早發現癌癥，就有利于癌癥的治療，而通過檢測生物樣品中特定癌癥相關標志物早期診斷癌癥是最有價值的方法。所述生物樣品包括呼氣和各種體液。對于許多主要的癌癥，體液中的標志物存在靈敏度和特異性不足的問題。例如，對于胃癌患者體液中最常用的蛋白類標志物cal9-9、ca72-4和癌胚抗原(CEA)只能檢測出約15-50%的任一階段的胃腫瘤，對于早期疾病，降至大約2-11%。雖然通過非常高頻率的檢測可以提高診斷的準確率，但體液的收集不方便，且前處理過程復雜，難以做過高頻率的檢測。如果能快速方便可重復檢測的標志物，將很好的解決這個問題。相比于體液，呼氣具有方便多次采集且更易于樣品前處理，因此，通過檢測呼氣中的特定癌癥標志物的方法特別適合用于監測疾病進展，能夠追蹤外科手術治療、放療和化療的療效。目前的呼氣中的胃癌標志物種類少，而且只能判斷是否患有胃癌。不同于晚期癌癥，早期與進展期時癌細胞未進行轉移，治愈率較高。如果能及時診斷胃癌處于早期或進展期，將有利確定臨床治療方法，對癥下藥，提高治愈率。然而，目前的呼氣中的胃癌標志物都無法區分兩個時期的癌癥。
【發明內容】
[0004]本發明的目的在于克服上述現有技術存在的不足，提供一種呼氣中的胃癌氣體標志物在制備胃癌診斷試劑中的用途。該胃癌氣體(診斷)標志物可用于通過對人的呼氣的檢測快速診斷胃癌并能用于診斷胃癌為處于早期或進展期。
[0005]本發明的發明原理在于:隨著胃癌組織會產生一些具有特異性的化合物，此類化合物在身體會移動到肺泡中，并由呼氣排，因此，通過這類在呼氣中的胃癌標志物可以直接診斷出胃癌。值得注意的是，隨著胃癌的生長，早期胃癌組織與晚期胃癌組織又會產生種類和濃度的化合物，并隨呼氣排出。因此，通過這類在呼氣中的胃癌標志物也可以用來診斷胃癌處于早期或進展期，有利于開展準確的臨床治療。
[0006]本發明的目的是通過以下技術方案來實現的:
[0007]第一方面，本發明涉及一種胃癌診斷標志物在制備用于胃癌診斷試劑中的用途，所述標志物選擇以下組合中的多種或全部的組合物:異戊二烯(CAS: 201-143-3)、2，2-二甲基丙酸(CAS: 200-922-5)、正己醇(111-27-3)、2_ 甲基戊烷(CAS: 107-83-5)、3_ 甲基戊烷(CAS: 96-14-0)、正己烷(CAS: 110-54-3)、3，3-二甲基戊烷(CAS: 562-49-2)、
2-甲基己烷(CAS: 591-76-4)、3-甲基己烷(CAS: 589-34-4)、薄荷醇(2216-51-5)、乙酸苯酯(CAS: 122-79-2)、十六烷(CAS: 544-76-3)、十四烷(629-59-4)、十二燒(112-40-3)、丙酮(CAS: 67-64-1);所述診斷試劑通過檢測被試者呼氣中的所述胃癌診斷(氣體)標志物的含量，進而診斷胃癌。
[0008]優選地，所述的檢測為通過質譜分析方法檢測被試者呼氣中的所述胃癌診斷標志物的含量。
[0009]優選地，所述用途包括如下步驟:以丙酮、2-甲基戊烷、3-甲基戊烷、正己烷、3，
3-二甲基戊烷、2-甲基己烷、3-甲基己烷、正己醇、乙酸苯酯、十六烷、十四烷、十二烷在呼氣中存在4種，并且未檢測出薄荷醇時，標志被試者患有胃癌，同時以2，2_ 二甲基丙酸的濃度明顯上升、而異戊二烯的濃度明顯降低時，輔助診斷為胃癌。
[0010]優選地，所述用途包括如下步驟:以2-甲基戊烷、3-甲基戊烷、正己烷、3，3-二甲基戊烷、2-甲基己燒、3-甲基己烷、正己醇、十六烷在呼氣中超過6種存在時，標志被試者的胃癌處于進展期。
[0011]優選地，所述用途包括如下步驟:以丙酮、2，2_ 二甲基丙酸在呼氣中存在，十四烷也大量存在時，同時2-甲基戊烷、3-甲基戊烷、正己烷、3，3-二甲基戊烷、2-甲基己烷、
3-甲基己烷、乙酸苯酯、十六烷不超過4種被檢測出，標志被試者的胃癌處于早期。
[0012]第二方面，本發明涉及一種組合作為胃癌診斷標志物的用途，所述組合包括異戊二稀、2, 2_ 二甲基丙酸、正己醇、2_甲基戍燒、3_甲基戍燒、正己燒、3, 3_ 二甲基戍燒、2_甲基己烷、3-甲基己烷、乙酸苯酯、十六烷、十四烷、十二烷、丙酮、薄荷醇。
[0013]第三方面，本發明涉及一種人體呼氣中用于胃癌診斷的標志物組合，所述標志物組合包括異戊二烯、2，2_二甲基丙酸、正己醇、2-甲基戊烷、3-甲基戊烷、正己烷、3，3_二甲基戊烷、2-甲基己烷、3-甲基己烷、乙酸苯酯、十六烷、十四烷、十二烷、丙酮、薄荷醇。
[0014]第四方面，本發明涉及一種用于檢測胃癌診斷標志物的檢測系統，包括呼氣收集裝置、固相微萃取裝置和氣相色譜-質譜儀，所述呼氣收集裝置收集到的呼氣樣本經固相微萃取裝置濃縮后遞送至氣相色譜-質譜儀檢測胃癌診斷標志物的含量；所述標志物包括異戊二烯、2，2_ 二甲基丙酸、正己醇、2-甲基戊烷、3-甲基戊烷、正己烷、3，3_ 二甲基戊烷、
2-甲基己烷、3-甲基己烷、乙酸苯酯、十六烷、十四烷、十二烷、丙酮、薄荷醇。
[0015]與現有技術相比，本發明具有如下有益效果:
[0016]1、檢測方法更方便、簡單、快速。呼氣樣品的采集過程對患者沒有任何不愉快的感覺，氣體收集和檢測過程無需復雜的操作，檢測過程不超過2個小時。
[0017]2、所篩選出呼氣中的胃癌標志物種類多，通過檢測多個胃癌標志物指標。
[0018]3、可以區別早期胃癌和進展期胃癌，有利于確定臨床治療方案，提高治愈率。
【專利附圖】
【附圖說明】
[0019]通過閱讀參照以下附圖對非限制性實施例所作的詳細描述，本發明的其它特征、目的和優點將會變得更明顯:
[0020]圖1早期胃癌患者與健康者呼氣樣品的色譜圖；
[0021]圖2早期胃癌患者與進展期胃癌患者呼氣樣品的色譜圖。
【具體實施方式】[0022]下面結合具體實施例對本發明進行詳細說明。以下實施例將有助于本領域的技術人員進一步理解本發明，但不以任何形式限制本發明。應當指出的是，對本領域的普通技術人員來說，在不脫離本發明構思的前提下，還可以做出若干變形和改進。這些都屬于本發明的保護范圍。
[0023]實施例1、呼氣樣本的采集
[0024]本發明通過分析早期胃癌患者、進展期胃癌患者及正常人的呼氣，篩選出呼氣中的胃癌標志物。呼氣樣本來自50個志愿者，包括12名早期胃癌患者，18名進展期胃癌患者，20名正常人作為對照組。胃癌患者使用各種診斷方法，包括活組織檢查、計算機斷層(CT)掃描和穿刺，對患者進行臨床診斷，同時胃癌患者中沒有任何人在呼氣樣品被收集之前接收過化學療法或其他治療。對每個受試者的呼出的呼氣進行至少2次分析。使用總共100個呼氣樣品。樣本收 收集前一晚需空腹過夜。晨起，保持安靜狀態下，在一凈化的房間，深吸氣，憋氣30秒，呼氣。前I / 3呼出氣體不收集，收集后2 / 3的呼出氣體，每份樣品采集1000毫升。
[0025]實施例2、呼氣樣本的檢測
[0026]呼氣樣本采用Tedlar氣袋4度保存，I小時內進行下一步操作。所取得的樣品，經75微米CAR / PDMS涂層的固相微萃取萃取頭，對樣本中的標志物進行預濃縮處理。樣本中VOCs進行預濃縮，濃縮時間分別為30分鐘。GC-MS分析:將萃取頭于GC-MS進樣口，高溫280度，瞬間解吸附I分鐘，無分流方式進樣。2分鐘后，打開分流閥。色譜分離用CD-1MS色譜柱，I微米X60米X0.25毫米。升溫程序:起始溫度40度，保留時間5分鐘，10度/分升溫至260度，保留10分鐘。質譜儀全范圍掃描42-400amu，電子轟擊能量70eV，四級桿質譜離子源溫度200度，載氣是高純氦氣，流速44.2厘米/秒。被檢出物質用質譜自帶NIST08圖庫進行初步定性，相似度90%以上的物質使用相對峰面積定量。圖1為早期胃癌患者與健康者呼氣的質譜圖；對應的早期胃癌患者與健康者呼氣中的胃癌標志物見表1。圖2為早期胃癌患者與進展期胃癌患者呼氣的質譜圖；早期胃癌患者與進展期胃癌患者呼氣中的胃癌標志物見表2。
[0027]由圖1和表1可知，在早期胃癌患者與健康者的呼氣發現丙酮，乙酸苯酯、2，2-二甲基丙酸只存在胃癌患者呼氣中，因此，這三種物質可以作為胃癌氣體標志物用來直接診斷胃癌。同時，胃癌患者呼出氣體中十四烷的含量明顯高于健康對照組，而異戊二烯，正己醇在胃癌患者呼出氣體中的濃度低于健康對照組，薄荷醇只存在健康者呼氣中。因此，這四種物質也可以作為呼氣中的胃癌氣體標志物，用于輔助診斷胃癌，提高診斷的準確率。
[0028]表1早期胃癌患者與健康者呼氣中的胃癌標志物。
[0029]
【權利要求】
1.一種胃癌診斷標志物在制備用于胃癌診斷試劑中的用途，其特征在于，所述標志物選擇以下組合中的多種或全部的組合物:異戊二烯、2，2_ 二甲基丙酸、正己醇、2-甲基戊烷、3-甲基戊烷、正己烷、3，3-二甲基戊烷、2-甲基己烷、3-甲基己烷、薄荷醇、乙酸苯酯、十六烷、十四烷、十二烷、丙酮；所述診斷試劑通過檢測被試者呼氣中的所述胃癌診斷標志物的含量，進而診斷胃癌。
2.如權利要求1所述的用途，其特征在于，所述的檢測為通過質譜分析方法檢測被試者呼氣中的所述胃癌診斷標志物的含量。
3.如權利要求1所述的用途，其特征在于，所述用途包括如下步驟:當檢測丙酮、2-甲基戊烷、3-甲基戊烷、正己烷、3，3-二甲基戊烷、2-甲基己燒、3-甲基己烷、乙酸苯酯、十六烷、十四烷、十二烷、2，2_ 二甲基丙酸在呼氣中存在9種而薄荷醇未被檢測出時，標志被試者患有胃癌；當異戊二烯、正己醇的濃度明顯降低時，輔助診斷為胃癌。
4.如權利要求3所述的用途，其特征在于，所述用途包括如下步驟:當檢測2-甲基戊烷、3-甲基戊烷、正己烷、3，3-二甲基戊烷、2-甲基己燒、3-甲基己烷、十二烷、十六烷在呼氣中超過5種存在時，標志被試者的胃癌處于進展期。
5.如權利要求3所述的用途，其特征在于，所述用途包括如下步驟:當檢測丙酮、2，2-二甲基丙酸在呼氣中存在，且十四醇大量存在時，同時2-甲基戊烷、3-甲基戊烷、正己烷、3，3- 二甲基戊烷、2-甲基己燒、3-甲基己烷、甲基乙酰胺、十六烷不超過2種被檢測出，標志被試者的胃癌處于早期。
6.一種組合作為胃癌診斷標志物的用途，所述組合包括異戊二烯、2，2_ 二甲基丙酸、正己醇、2-甲基戊烷、3-甲基戊烷、正己烷、3，3-二甲基戊烷、2-甲基己燒、3-甲基己烷、薄荷醇、乙酸苯酯、十六烷、十四烷、十二烷、丙酮。
7.一種人體呼氣中用于胃癌診斷的標志物組合，其特征在于，所述標志物組合包括異戊二烯、2，2-二甲基丙酸、正己醇、2-甲基戊烷、3-甲基戊烷、正己烷、3，3-二甲基戊烷、2-甲基己烷、3-甲基己烷、薄荷醇、乙酸苯酯、十六烷、十四烷、十二烷、丙酮。
8.一種用于檢測胃癌診斷標志物的檢測系統，其特征在于，包括呼氣收集裝置、固相微萃取裝置和氣相色譜-質譜儀，所述呼氣收集裝置收集到的呼氣樣本經固相微萃取裝置濃縮后遞送至氣相色譜-質譜儀檢測胃癌診斷標志物的含量；所述標志物包括異戊二烯、2，2-二甲基丙酸、正己醇、2-甲基戊烷、3-甲基戊烷、正己烷、3，3-二甲基戊烷、2-甲基己烷、3-甲基己烷、薄荷醇、乙酸苯酯、十六烷、十四烷、十二烷、丙酮。
【文檔編號】G01N30/02GK103940924SQ201410147854
【公開日】2014年7月23日 申請日期:2014年4月14日 優先權日:2014年4月14日
【發明者】崔大祥, 陳云生 申請人:上海交通大學