高級糖化終產物的去糖化的制作方法

高級糖化終產物的去糖化的制作方法
【專利摘要】本發明涉及高級糖化終產物的去糖化。具體涉及促進高級糖化終產物去糖化的至少一種物質作為活性成分用于制備組合物、尤其是用于限制組織中高級糖化終產物出現的組合物的用途。本發明尤其涉及這樣的物質用于制備下述組合物的用途，所述組合物通過促進組織中高級糖化終產物去糖化來預防和/或防止組織的柔性和/或可塑性和/或彈性和/或功能性的降低，和/或預防和/或防止組織的老化，所述組織優選為皮膚，或者為血管或器官的組織壁。
【專利說明】高級糖化終產物的去糖化
[0001]本申請為2008年7月9日提交的、發明名稱為“高級糖化終產物的去糖化”的PCT申請PCT/EP2008/058955的分案申請，所述PCT申請進入中國國家階段的日期為2010年I月29日，申請號為200880101123.7。
【技術領域】
[0002]本發明涉及藥學領域，更具體而言，本發明涉及用于促進糖化蛋白的去糖化、換言之用于促進美拉德反應(Maillard reaction)逆轉的活性成分的用途。
[0003]本發明尤其涉及可以局部或口服使用以作用于組織中糖化蛋白的物質，所述組織為例如皮膚中的組織、或者是血管或器官的組織壁中的組織，尤其是人體中的組織。
【背景技術】
[0004]在現有技術中，已知糖、尤其是聚糖形式的糖誘發了蛋白尤其是皮膚中蛋白的糖化(將糖結合到蛋白)。然而，當血糖水平升高時，例如，尤其是在糖尿病患者中、在老化過程中或者當食物富含糖時，該糖化是完全正常的。
[0005]現有技術中，已知非酶的糖基化或糖化是純化學且自發的反應，在該反應中，碳水化合物與肽鏈共價鍵合。 [0006]糖化是由游離糖附著到氨基酸或蛋白而引起的老化基礎機理。
[0007]糖化蛋白也被稱為高級糖化終產物，即高級糖化終產物。這些化合物尤其是可降低皮膚的柔性、彈性和功能性。
[0008]糖化過程包括三個步驟:
[0009]I 一形成席夫堿，這由還原糖(葡萄糖、核糖或果糖)或醛附著到主要是賴氨酸和N端胺部分的蛋白的氨基酸殘基而引起。
[0010]2 一被稱為Amadori重排的分子重排，這由席夫堿的異構化引起。這些Amadori產物的形成速率與糖濃度成比例。
[0011]3—糖化最終產物或美拉德產物的緩慢且不可逆的累積，這經由非常活潑的中間體的重排、氫轉移和形成。這一反應導致高級糖化終產物的形成，更常表述為美拉德產物。這些化合物的形成速率與介質的糖濃度無關，而是取決于高血糖癥的持續時間和蛋白周轉率。
[0012]最初兩個階段(席夫堿形成和Amadori重排)穩定在平臺期，并且可以根據血糖水平來逆轉。而另一方面，第三階段的發展與血糖水平無關。
[0013]體內的細胞外基質蛋白的壽命非常長，細胞外基質蛋白受糖化影響。糖化能夠改變這些蛋白的性質，使得它們更耐蛋白酶解并避免它們周轉。此外，高級糖化終產物誘導在膠原纖維之間形成分子橋，使它們更硬且更加不可溶。最后，高級糖化終產物可通過將其自身結合到巨噬細胞、內皮細胞和系膜細胞內存在的特定受體，通過誘導促炎性細胞因子或生長因子的分泌而具有其他作用。蛋白糖化的重要性已經由抑制糖化的藥物的作用效果強調，這通過實驗室動物的特定功能的老化過程的減緩所體現。在糖尿病期間也發生蛋白的過度糖化，這與血糖升高有關。
[0014]在現有技術中所建議的解決方案涉及了使得限制蛋白糖化并且還限制高級糖化終產物形成成為可能的活性物質。

【發明內容】

[0015]本發明的主要目的是解決以下技術問題:提供通過逆轉美拉德反應來使得限制特別是在組織中高級糖化終產物出現成為可能的活性物質，所述組織例如皮膚中的組織、或者是血管或器官中的組織壁中的組織，且尤其是皮膚中的組織。
[0016]本發明的一個具體目的是在提供化妝品組合物、皮膚病用組合物或藥物組合物的情況下解決這一技術問題，該組合物尤其是在組織的老化過程中或者在糖尿病期間預防或防止組織的彈性和塑性的降低，所述組織為例如皮膚中的組織、或者是血管或器官中的組織壁中的組織，且尤其是皮膚中的組織。
[0017]本發明的另一個目的是提供篩選具有上述性質的活性成分的方法。
[0018]本發明的一個具體目的是通過提供優選地可以局部施用的無毒活性物質，從而可以可靠的且可再現的方式來解決該技術問題，所述活性物質尤其用于化妝品行業、皮膚病學行業、皮膚藥物行業或制藥行業。
[0019]本發明的一個具體目的是提供具有低毒性且皮膚病學上可接受的物質。
[0020]本發明的另一個目的是提供活性成分，該活性成分的制備是不昂貴的且能夠以可靠且簡單的方式在工業規模上實施。
[0021]糖化涉及與老化有關的許多進行性疾病，所述進行性疾病諸如血管疾病(例如動脈粥樣硬化)、腎疾病、關節炎、糖尿病并發癥、瘢痕形成等。重要的是，由糖化引起的糖尿病并發癥可以甚至在平均血糖濃度比正常人高的糖尿病患者個體中較年輕的年齡發生。
[0022]大量文獻充分證明，在糖尿病過程中涉及自由基，在糖尿病中，氧化應激與高血糖癥有直接關系。然后，以太大的量存在于血液中的糖很容易被氧化。糖的這一氧化尤其導致了糖/蛋白接枝或糖化。在糖尿病的情況中糖化血紅蛋白水平升高是典型的例子。
[0023]糖化產物水平在很長時間段內與血糖水平成比例，糖化產物也是組織老化的部分原因，彈性和塑性的降低是組織老化的原因之一。
[0024]因此，本發明描述了促進高級糖化終產物去糖化或者促進關于高級糖化終產物的美拉德反應逆轉的活性物質的用途，其用于制備組合物，尤其用于限制組織中高級糖化終產物的出現。
[0025]有利地，這一組合物例如用于防止組織的柔性和/或彈性和/或可塑性和/或功能性的降低，所述組織為例如在皮膚中的組織、或在血管或器官的組織壁中的組織。
[0026]本發明還涉及用于通過皮膚組織中高級糖化終產物去糖化或通過皮膚組織中高級糖化終產物的美拉德反應逆轉來防止和/或預防皮膚的老化、預防和/或防止組織且尤其是皮膚中組織的彈性和塑性的降低的組合物，所述組合物包括作為活性物質的促進高級糖化終產物去糖化的物質。
[0027]本發明涉及促進高級糖化終產物去糖化或促進高級糖化終產物的美拉德反應逆轉的至少一種活性物質用于制備促進高級糖化終產物去糖化的組合物的用途，所述活性物質選自:3，5-二甲氧基-4-羥基肉桂酸(芥子酸)、反式_3，3’，4’，5，7-五羥基黃烷(兒茶素)、羥吲哚、3，4-二羥基苯乙酸(DOPAC)、1，3，5-三羥基苯(間苯三酚)、4_氨基苯酚、2-羥基苯甲酸(水楊酸)、6_羥基-2，5, 7, 8-四甲基色滿-2-甲酸(trolox)、去甲二氫愈創木酸、6-甲基-5，7a, 13，13b-四氮雜戊芬_8，14- 二酮、6-羥基-吲哚、氫溴酸豬毛菜酚、7-羥基-4，6- 二甲基苯酞、3，4- 二羥基肉桂酸(咖啡酸)、毒扁豆堿、2-羥基甲基-5-羥基-Y-批卩南酮(曲酸)；以及含有它們的植物提取物，選自至少一種下列植物的提取物:Awat1、胡椒屬槲寄生(piper mistletoe)、藍馬鞭草(blue vervain)、號角樹(Cecropia)、鹿蹄草(wintergreen)、樓樹(cherry tree)、肉桂(Cassia)和印度美人蕉(Indian shot)；及其混合物。
[0028]優選地，促進高級糖化終產物去糖化或促進高級糖化終產物的美拉德反應逆轉的活性物質為選自下列植物的植物提取物:
[0029]— awati (Maprounea guyanensis),且優選葉；
[0030]—假馬鞭(Stachytarphetajamaicensis)；
[0031]一號角樹(Cecropia obtusa),且優選葉和/或芽；以及
[0032]一鹿蹄草(傘形喜冬草(Chimaphila umbellata))。
[0033]根據一個可選擇的優選實施方案，促進高級糖化終產物去糖化或促進高級糖化終產物的美拉德反應逆轉的活性物質是選自下列的特征分子:
[0034]— 3，5- 二甲氧基-4-羥基肉桂酸(芥子酸)；
[0035]一反式-3，3’，4’，5，7_五羥基黃烷(兒茶素)；
[0036]—羥吲哚；
[0037]- 3，4- 二羥基苯乙酸(DOPAC)；
[0038]- 1,3, 5-三羥基苯(間苯三酚)；
[0039]及其混合物和也含有它們的植物提取物。
[0040]有利地，組合物是優選地可以被局部施用的化妝品組合物、皮膚病用組合物、皮膚藥物組合物或藥物組合物，或食物(營養)補充品。
[0041]本發明涉及活性物質用于制備防止與糖尿病期間血糖上升相關的尤其是皮膚組織中的糖化蛋白的糖化的組合物的用途。
[0042]本發明涉及活性物質用于制備防止神經纖維球中形成的高級糖化終產物且尤其是減少糖尿病患者中白蛋白排泄的組合物的用途。
[0043]活性物質可以通過冷凍干燥、噴霧干燥等來濃縮。
[0044]所述活性物質通常按總組合物重量計對于植物提取物而言以0.001~10%、優選地0.01~5%且更特別是以1%的濃度來使用，且對于特征分子而言以I X 10_7~1%、優選地I X 10_7~I X 104%、更優選地I X 10_5~I X 104%的濃度來使用，而這不會限制將被使用的濃度。
[0045]在所有的這些活性 物質中，優選參照由15mM氨基胍所產生的作用促進高級糖化終產物去糖化至少50%的那些活性物質。
[0046]本發明還涉及能夠被局部施用或作為食物補充品的化妝品組合物、或者藥物組合物，所述組合物尤其是通過促進皮膚中高級糖化終產物的美拉德反應逆轉來預防和/或防止皮膚的柔性和/或可塑性和/或彈性和/或功能性的降低、和/或預防和/或防止皮膚老化，所述組合物包括作為活性成分的促進皮膚中高級糖化終產物去糖化的至少一種物質，所述物質優選選自:3，5- 二甲氧基-4-羥基肉桂酸(芥子酸)、反式-3，3’，4’，5，7-五羥基黃烷(兒茶素)、羥吲哚、3，4-二羥基苯乙酸(DOPAC)、1，3，5-三羥基苯(間苯三酚)、4_氨基苯酚、2-羥基苯甲酸(水楊酸)、6_羥基-2，5，7，8-四甲基色滿-2-甲酸(trolox)、去甲二氫愈創木酸、6-甲基-5，7a, 13，13b-四氮雜戊芬_8，14- 二酮、6-羥基吲哚、氫溴酸豬毛菜酚、7-羥基-4，6-二甲基苯酞、毒扁豆堿及其任何混合物；或選自至少一種下列植物的提取物:awat1、胡椒屬槲寄生、假馬鞭、號角樹、鹿蹄草、櫻樹、肉桂和印度美人蕉；任選地作為與以下物質的混合物:抑制糖化尤其是通過礦化抑制糖化的化合物，如EDTA衍生物、肌醇六磷酸或壬二酸，或促進皮膚蛋白保護的化合物，如氨基胍、胍，或酶抑制劑如戊糖素，或減少可用于參加糖化反應的糖的量的物質，如肌肽、抗壞血酸或α-生育酚。
[0047]在根據本發明的一種優選的組合物中，促進高級糖化終產物去糖化或促進高級糖化終產物的美拉德反應逆轉的活性物質是選自下列植物的植物提取物:
[0048]— await (Maprounea guyanensis),且優選葉；
[0049]—假馬鞭(Stachytarphetajamaicensis)；
[0050]一號角樹(Cecropia obtusa),且優選葉和/或芽；以及[0051 ] 一鹿蹄草(傘形喜冬草)。
[0052]根據一個可選擇的優選實施方案，促進高級糖化終產物去糖化或促進高級糖化終產物的美拉德反應逆轉的活性物質是選自下列的特征分子:
[0053]— 3，5- 二甲氧基-4-羥基肉桂酸(芥子酸)；
[0054]一反式-3， 3’，4’，5，7_五羥基黃烷(兒茶素)；
[0055]—羥吲哚；
[0056]- 3，4- 二羥基苯乙酸(DOPAC)；
[0057]- 1,3, 5-三羥基苯(間苯三酚)。
[0058]根據植物的不同，優選以I~10%(w/w)的濃度使用在溶劑或溶劑混合物(優選極性質子溶劑)中，優選水、醇、二醇、多元醇、100/0到0/100(v/v)的水/醇、水/ 二醇或水/多元醇混合物(如，與乙醇、甘油、丁二醇或其他二醇如木糖醇等混合的水)中的整個植物或植物部分，所述植物部分選自根、根莖、莖、殼、花、果實、種子、胚芽和葉。然后，優選過濾或蒸餾所獲得的提取物，以便回收可溶部分，然后過濾該可溶部分。活性物質有利地是溶劑中的植物提取物，所述溶劑例如水、醇、多元醇、二醇或其混合物，優選將所述活性物質稀釋至0.01~10%(v/v)的濃度。
[0059]在抑制糖化(即減少高級糖化終產物形成)的化合物中，可以使用所提取的化合物，優選通過在溶劑或溶劑混合物中浸潰，如在水、醇、二醇、多元醇或這些溶劑的混合物且優選水中，(優選使用可溶于這些溶劑的化合物，優選在過濾之后)，化合物是選自以下植物的植物中的化合物:下述植物的提取物:瓜拉那(Paullinia cupana),優選種子；淫羊藿(Epimedium brevicornum),優選葉；皺葉酸模(Rumex crispus),優選殼；洋菝(Smilaxornata),優選根；本地葡萄藤(Davilla rugosa),優選葉；兒茶(優選木)，乳薊(優選果實)；松樹，優選松物種(Pinus species)(優選根)；中國大黃(Chinese rhubarb)(優選根)；山楂(hawthorn)(優選葉);無色花青素(Ieucocyanidins)(優選種子)；檳榔(areca)(優選種子)；越桔(bilberry)(優選果實)；接骨木(elder)(優選果實)；胡桃木(walnut)(優選葉)；柳樹(willow)(優選樹皮)；萵苣(lettuce)(優選葉)和胡枝子(Iespedeza)(優選葉)；和/或選自以下物質的化合物:赤蘚紅鈉、1，4_蒽醌、兒茶酹、4_輕基查耳酮、4-氨基苯酹、OPC(PCO原花青素低聚物(procyanidolic oligomer))如草莓植物0PC、櫻桃苷和1-氨基-2-羥甲基蒽醌、或這些物質的混合物。
[0060]最特別有利的是將通過逆轉美拉德反應來使限制高級糖化終產物出現成為可能的活性物質與抑制糖化的上述活性物質中的至少一種進行組合，活性物質優選選自單獨或組合獲得的以下物質的提取物:瓜拉那(Paullinia cupana),優選種子；淫羊藿(Epimedium brevicornum),優選葉；皺葉酸模(Rumex crispus),優選殼；洋菝(Smilaxornata),優選根；本地葡萄藤(Davilla rugosa),優選葉；或下列物質:3, 5_ 二甲氧基-4-羥基肉桂酸(芥子酸)；反式_3，3’，4’，5，7-五羥基黃烷(兒茶素)；羥吲哚；3，4-二羥基苯乙酸(DOPAC) ;1，3，5-三羥基苯(間苯三酚)。
[0061]因此，本發明涉及化妝護理方法，該方法包括局部施用組合物或作為食物(營養)補充品來施用組合物，所述組合物包括作為化妝品活性成分的上述活性成分或下面提及的活性成分中的至少一種。
[0062]本發明還涉及治療人體的方法，該方法包括施用，優選地通過局部施用前述藥物組合物或下面提及的藥物組合物來預防和/或防止組織中的蛋白糖化，尤其是當血糖水平升高和/或是高的時，例如在糖尿病期間。本發明尤其涉及減少糖尿病患者中白蛋白排泄的方法。
[0063]本發明還涉及篩選促進高級糖化終產物去糖化的活性成分的方法，該方法包括:
[0064]a)生產高級糖化終產物； [0065]b)使高級糖化 終產物與就其高級糖化終產物去糖化活性而待篩選的物質接觸；以及
[0066]c)選擇促進高級糖化終產物去糖化的至少一種活性成分。
[0067]有利地，步驟a)包括在糖(例如:葡萄糖、核糖、果糖等)的存在下，在允許形成高級糖化終產物的條件下，且優選地在40°C和60°C之間的溫度且更優選在約50°C的溫度下溫育皮膚或血管壁的至少一種類型的蛋白達I周和5周之間且優選3周的持續時間。
[0068]有利地，步驟b)包括在將待篩選的至少一種物質的存在下，在400C和600C之間的溫度，優選在約50°C的溫度下溫育高級糖化終產物。
[0069]通過將所測試的活性成分存在下所獲得的結果與對照存在下獲得的結果進行比較來進行活性成分的選擇。
[0070]可以將本發明的化合物制備為局部組合物、尤其是化妝品組合物、皮膚藥物組合物或藥物組合物的形式。因此，對于這些組合物來說，賦形劑包括例如選自下列的至少一種化合物:防腐劑、軟化劑、乳化劑、表面活化劑、補濕劑、稠化劑、調節劑、控油劑、穩定劑、抗氧化劑、調質劑、增白劑、成膜劑、增溶劑、顏料、染料、香料和遮光劑。
[0071]這些賦形劑優選選自:氨基酸及其衍生物、聚甘油、酯、聚合物及纖維素衍生物、羊毛脂衍生物、磷脂、乳鐵蛋白、乳過氧化物酶、基于蔗糖的穩定劑、維生素E及其衍生物、天然的和合成的臘、植物油、甘油三酸酯、不皂化物、植物留醇、植物酯、硅酮及其衍生物、蛋白水解物、荷荷芭油及其衍生物、脂溶性/水溶性的酯、甜菜堿、氨基氧化物、植物提取物、蔗糖酯、二氧化鈦、甘氨酸和尼泊金酯類，且更優選選自:丁二醇、硬脂醇聚醚_2、硬脂醇聚醚-21、二醇-15硬脂醚、鯨蠟硬脂醇、苯氧乙醇、尼泊金甲酯、尼泊金乙酯、尼泊金丙酯、尼泊金丁酯、丁二醇、天然的生育酚、甘油、二羥鯨蠟醇磷酸酯鈉、異丙基羥基鯨蠟醚、硬脂酸乙二醇酯、三異壬精、椰油酸辛酯、聚丙烯酰胺、異鏈烷烴、月桂醇聚醚-7、卡波姆、丙二醇、甘油、沒藥醇、二甲硅油、氫氧化鈉、PEG-30 二聚羥基硬脂酸酯、癸酸/辛酸甘油三酸酯、鯨蠟硬脂醇辛酸酯、己二酸二丁酯、葡萄籽油、荷荷芭油、硫酸鎂、EDTA、環甲硅脂、黃原膠、檸檬酸、十二烷基硫酸鈉、礦物油及臘、異硬脂酸異硬脂醇酯、二壬酸丙二醇酯、異硬脂酸丙二醇酯、PEG-8蜂臘、氫化棕櫚仁油的甘油酯、氫化棕櫚油的甘油酯、羊毛脂油、芝麻油、乳酸鯨蠟醇酯、羊毛脂醇、蓖麻油、二氧化鈦、乳糖、蔗糖、低密度聚乙烯和等滲鹽溶液。
[0072]特別有利的是將根據本發明的活性物質與具有補充性質的其他活性劑進行組合，以便進一步改善對抗皮膚老化、對抗皮膚的柔性和/或可塑性和/或彈性和/或功能性降低的功效。有利地，這些其他活性劑選自:
[0073]—刺激細胞增殖和/或分化的具有抗老化效果的活性物質，尤其是下列分子:NGF、α-MSH、β -內啡肽或其衍生物，尤其是專利申請FR2857874中所描述的那些活性物質；
[0074]一保護成纖維細胞生長因子(FGF)尤其是FGF2的活性物質，尤其是以 申請人:名義以第GB244036號公開的專利申請中所描述的那些活性物質，尤其是黃葵(Hibiscusabelmoschus)的提取物；
[0075]—刺激成纖維細胞的活性和/或增殖的活性物質，尤其是發酵大豆肽，尤其是由 申請人:以名稱Phytokine?出售的發酵大豆肽,有利地與黃葵提取物組合；
[0076]—刺激玻璃糖醒酸酵素合酶(hyaluronase synthase)尤其是HAS2的活性物質，尤其是在專利FR2893252中描述的那些活性物質； [0077]一刺激賴氨酰氧化酶尤其是LOX的活性和/或合成的活性物質，尤其是在專利申請FR2855968中描述的那些活性物質，且優選地為蒔蘿(dill)提取物；以及
[0078]一具有抗炎性的活性物質，諸如抑制PLA2的那些活性物質，尤其是葛(Pueraria
lobata)根的提取物，如專利FR2847267中所描述的(Illhipase?)。
[0079]有利地，將上述組合物配制為選自下列的形式:水溶液或油溶液、乳膏或含水凝膠或含油凝膠，尤其是在盒中或在管中的，尤其是洗浴凝膠或洗發劑；乳狀物；乳劑、微乳劑或納米乳劑，尤其是水包油或油包水的或多重的或硅酮基類型的；洗劑，尤其是在玻璃瓶或塑料瓶中或在量瓶中或在氣溶I父中的?’安首瓦;液體阜；皮膚用阜；軟骨；泡沫；優選為液體、膏狀或固體的無水產物，例如以棒的形式，尤其是以唇膏形式。
[0080]在此使用的表述“局部施用”意指將根據本發明的組合物施用或噴在皮膚表面上。
[0081]在此使用的表述“皮膚病學上可接受的”意指組合物或后者的組分適于與人的皮膚接觸使用而不會引起毒性、不相容性、不穩定性、過敏反應等。
[0082]表述“促進高級糖化終產物去糖化的”或“有利于高級糖化終產物的美拉德反應逆轉的”意指該物質使得可以從高級糖化終產物(高級糖化終產物)獲得比陰性對照(不存在活性成分)更多量的非糖化蛋白，例如，如通過根據實施例1在對照樣品(不存在活性成分)和含有促進高級糖化終產物去糖化的物質的樣品之間的熒光差異所評價的。優選地，用含有促進高級糖化終產物去糖化的物質的樣品獲得的熒光與在氨基胍的存在下評價所獲得的熒光進行比較。表述“促進高級糖化終產物去糖化的物質”尤其涉及這樣的物質:對于該物質來說，在該物質的存在下所獲得的熒光至少等于在15mM氨基胍的存在下且在不存在活性成分下所獲得的熒光的70%。表述“高級糖化終產物去糖化”意指美拉德反應的逆轉。
[0083]本領域的技術人員知道用于改善皮膚的健康和/或實際外表的許多化妝品用活性成分。本領域的技術人員知道如何配制化妝品組合物或皮膚病用組合物以獲得最好的效果。另一方面，當本發明中所描述的化合物相互組合的時候，它們可以具有協同效應。本發明也包括這些組合。CTFA Cosmetic Ingredient Handbook(CTFA化妝品成分手冊)第二版(1992)描述了通常用于化妝品行業和制藥行業的、尤其適于局部使用的各種化妝品成分和藥物成分。這些類別的成分的例子包括但不限于下列化合物:研磨劑、吸收劑、具有美學目的的化合物如香料、顏料、染料、精油、收斂劑等(例如:丁香油、薄荷醇、樟腦、桉樹油、丁香油酚、乳酸薄荷酯、金縷梅餾出物)、抗痤瘡劑、防絮凝劑、消泡劑、抗微生物劑(例如:丁基氨基甲酸碘代丙酯)、抗氧化劑、粘合劑、生物學添加劑、緩沖劑、溶脹劑、螫合劑、添加劑、殺蟲劑、變性劑、外用鎮痛劑、成膜材料、聚合物、不透明劑、PH調節劑、還原劑、脫色劑或淺色劑(lightening高級糖化終產物nt)(例如:氫醌、曲酸、抗壞血酸、抗壞血酸磷酸續(magnesium ascorbylphosphate)、抗壞血酸葡萄糖胺(ascorbylglucosamine))、調節劑(例如:保濕劑)、皮膚舒緩劑和/或創傷修復劑(例如:泛醇及其衍生物(例如:乙基泛醇)、蘆薈、泛酸及其衍生物、尿囊素、沒藥醇和甘草酸二鉀)、稠化劑、維生素、以及后者的衍生物或等價物。
[0084]本領域的技術人員在閱讀說明性描述后可以清楚地獲知本發明的其他目的、特征和優點，該說明性描述是指僅僅為了闡釋所給出的且決不應限制本發明范圍的實施例。
[0085]實施例是本發明的組成部分，且相對于任何現有技術，在包括實施例在內的描述中出現的任何新特征在功能上和總體上均是本發明的組成部分。
[0086]因此，每個實施例具有一般性范圍。
[0087]此外，在實施例中，除非另外指出`，所有的百分比均以按重量計給出，而且除非另外指出，溫度以攝氏度表示，而且除非另外指出，壓力是大氣壓。
[0088]具體的實施方式
實施例
[0089]實施例1:美拉德反應的逆轉
[0090]I 一高級糖化終產物的制備:
[0091]含有蛋白和還原糖的溶液的制備即時地如下進行:將1.5μΜ和1.5Μ之間、優選15μΜ和500μΜ之間的濃度的牛血清白蛋白(BSA)溶液與諸如葡萄糖、果糖等的還原糖的溶液一起溫育，優選與0.1M和10Μ之間且優選0.5Μ和5Μ之間的濃度的葡萄糖一起溫育。
[0092]牛血清白蛋白溶液可以用人膠原蛋白代替。
[0093]溫育進行I周一5周,優選3周。
[0094]溫育溫度維持在20 V和70 V之間，優選50 V。
[0095]2 一高級糖化終產物與潛在活性化合物一起溫育并檢測美拉德反應的逆轉現象:
[0096]在有或沒有(陰性對照)待測試其高級糖化終產物去糖化活性的化合物的存在下，在40°C和60°C之間、優選約50°C的溫度溫育含有在I中制備的高級糖化終產物的溶液達I周到5周、優選3周。以在總組合物重量計的0.001~10%、優選0.01~5%、且更優選1%的濃度測試化合物。所使用的陽性對照是在15 μ M和150mM之間濃度的氨基胍、優選在
1.5mM和15mM之間濃度的氨基胍。通過測量熒光來測定高級糖化終產物抑制(激發波長在350nm和375nm之間，優選為355nm ;發射波長在420nm和450nm之間，優選為430nm)。通過比較設定為100%(最大熒光)的高級糖化終產物的熒光與高級糖化終產物+所測試的活性試劑的熒光來計算美拉德反應的逆轉。
[0097]實施例2:特征分子的高級糖化終產物去糖化作用
[0098]根據在實施例1 (第I段)中所描述的方法來制備蛋白/還原糖溶液。以例如在水或DMSO中的I X IO-7~I X ΙΟΛ、優選I X 10-5~I X ιοΛ、且特別為I X 10-1%的濃度測試分子，如實施例1(第2段)所描述的。
[0099]在所描述的條件下，以至少相當于15mM濃度的氨基胍的方式促進高級糖化終產物去糖化的分子是:
[0100]表1
[0101]
【權利要求】
1.促進高級糖化終產物的美拉德反應逆轉的至少一種物質作為活性成分在制備用于限制人類皮膚組織中高級糖化終產物出現和/或促進去糖基化的經由局部施用的組合物中的用途，其中所述活性成分為植物肉桂的提取物。
2.根據權利要求1所述的用途，其中所述植物肉桂提取物為以水作為溶劑獲得的提取物。
3.根據權利要求1或2所述的用途，其中所述植物肉桂提取物為以水作為溶劑獲得的葉的提取物。
4.根據權利要求1一 3中任一項所述的用途，其特征在于，所述組合物是能夠局部施用的化妝品組合物。
5.根據權利要求1一 4中任一項所述的用途，其特征在于，所述組合物通過促進皮膚組織中高級糖化終產物去糖化來預防和/或防止組織的柔性和/或可塑性和/或彈性和/或功能性的降低、和/或預防和/或防止組織的老化。
6.根據權利要求1一 5中任一項所述的用途，其特征在于，所述物質按總組合物重量計對于植物提取物而言以0.0Ol~10%的濃度來使用。
7.篩選促進高級糖化終產物去糖化的活性成分的方法，該方法包括: a)生產高級糖化終產物； b)使所述高級糖化 終產物與就其高級糖化終產物去糖化活性而待篩選的物質接觸；以及 c)選擇促進所述高級糖化終產物去糖化的至少一種活性成分， 其特征在于，所述步驟a)包括在還原糖的存在下、在能夠形成高級糖化終產物的條件下溫育來自皮膚或來自血管壁的至少一種類型的蛋白，和/或 所述步驟b)包括在待篩選的至少一種物質的存在下，在40°C和60°C之間的溫度下溫育高級糖化終產物。
8.根據權利要求7的篩選方法，其特征在于，步驟a)中的還原糖為果糖、葡萄糖或核糖。
9.根據權利要求7或8的篩選方法，其特征在于，步驟a)在40°C和60°C之間的溫度下進行I 一 5周。
10.根據權利要求7— 9中任一項的篩選方法，其特征在于，皮膚的蛋白類型為人膠原蛋白或牛血清白蛋白溶液。
11.根據權利要求7— 10中任一項的篩選方法，其特征在于，通過將活性成分與15nM的氨基胍獲得的結果相比來選擇活性成分。
12.化妝品組合物，其能夠被局部施用或作為食物補充品，其特征在于，該組合物通過促進皮膚中高級糖化終產物去糖化來預防和/或防止皮膚的柔性和/或可塑性和/或彈性和/或功能性的降低、和/或預防或防止皮膚老化，所述組合物包括作為活性成分的促進皮膚中高級糖化終產物的美拉德反應逆轉的物質，所述物質為植物肉桂的提取物。
13.根據權利要求12的化妝品組合物，其中所述植物肉桂提取物為以水作為溶劑獲得的提取物。
14.根據權利要求12或13所述的化妝品組合物，其中所述植物肉桂提取物為以水作為溶劑獲得的葉的提取物。
15.藥物組合物，用于預防和/或防止皮膚的柔性和/或可塑性和/或彈性和/或功能性的降低，其特征在于，所述藥物組合物包括作為活性成分的促進皮膚中高級糖化終產物的美拉德反應的逆轉的物質，所述物質為植物肉桂的提取物。
16.根據權利要求15的藥物組合物，其中所述組合物能夠局部施用。
17.根據權利要求15或16的藥物組合物，其中所述植物肉桂提取物為以水作為溶劑獲得的提取物。
18.根據權利要求15- 17中任一項的藥物組合物，其中所述植物肉桂提取物為以水作為溶劑獲得的葉的提取物。`
【文檔編號】G01N33/68GK103816095SQ201410105347
【公開日】2014年5月28日 申請日期:2008年7月9日 優先權日:2007年7月9日
【發明者】N·阿布杜爾-麥拉克, C·阿爾托貝利, E·佩里爾 申請人:巴斯夫美容護理法國公司