一種檢測小活絡(luò)丸內(nèi)非法添加化學(xué)藥品的方法
【專利摘要】本發(fā)明涉及一種檢測小活絡(luò)丸內(nèi)非法添加化學(xué)藥品的方法。首先制備對照品和供試品溶液，然后分別吸取對照品溶液，供試品溶液，點(diǎn)于同一塊硅膠薄層板上，以展開劑上行展開，取出晾干，置紫外光燈下觀察薄層色譜，再噴上硫酸乙醇溶液，并置于烘箱中恒溫加熱至薄層板上的斑點(diǎn)顯色清晰，再分別置日光及紫外光燈下觀察薄層色譜，若與對照品相同比移值處有相同顏色的熒光淬滅斑點(diǎn)、熒光斑點(diǎn)或斑點(diǎn)同時出現(xiàn)，則可判定樣品結(jié)果為陽性。顯然，本發(fā)明操作簡便，快速，成本低，既解決了其中的假“陽性”干擾，也避免了傳統(tǒng)采用紅外光譜、HPLC-MS等測定所產(chǎn)生的昂貴費(fèi)用和大量時間，使有效監(jiān)控中成藥小活絡(luò)丸內(nèi)是否非法添加化學(xué)藥品成為可能。
【專利說明】一種檢測小活絡(luò)丸內(nèi)非法添加化學(xué)藥品的方法
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001]本發(fā)明涉及中藥質(zhì)量檢測領(lǐng)域，具體涉及一種檢測小活絡(luò)丸內(nèi)非法添加化學(xué)藥品的方法。
【背景技術(shù)】
[0002]小活絡(luò)丸是由膽南星、制川烏、制草烏、地龍、乳香(制)、沒藥(制)共6味中藥飲片組成的中藥制劑。主要功效是祛風(fēng)散寒，化痰除濕，活血止痛。用于風(fēng)寒濕邪閉阻、痰瘀阻絡(luò)所致的痹病，癥見肢體關(guān)節(jié)疼痛，或冷痛，或刺痛，或疼痛夜甚、關(guān)節(jié)屈伸不利、麻木拘攣。其制備方法是將膽南星、制川烏、制草烏、地龍、乳香(制)、沒藥(制)分別粉碎成細(xì)粉，過篩，混勻，每IOOg細(xì)粉加煉蜜120?130g制成大蜜丸。該中藥制劑成分復(fù)雜，臨床用于治療風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎、類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎及骨質(zhì)增生所致的腰痛、腿痛、頸痛、上肢痛等痹證，坐骨神經(jīng)痛，十二指腸壅積癥等。屬抗風(fēng)濕類中成藥。為了追求經(jīng)濟(jì)利益，一些不法分子在小活絡(luò)丸中非法添加具有解熱、抗炎、止痛作用的廉價化學(xué)藥品，以達(dá)到快速顯效的效果。而患者在不知情的情況下過多攝入這些化學(xué)藥品后，會對身體造成極大的危害。
[0003]抗風(fēng)濕類中成藥內(nèi)非法添加化學(xué)藥品主要有兩大類:解熱鎮(zhèn)痛類和糖皮質(zhì)激素類。目前，檢測抗風(fēng)濕類中成藥內(nèi)非法添加化學(xué)藥品的方法均為不限定中成藥具體種類的通用方法。該通用方法涉及所有抗風(fēng)濕類中成藥，范圍廣，但抗風(fēng)濕類中成藥種類繁多，而每一種中成藥的組方都各不相同，極易產(chǎn)生假“陽性”干擾，無法明確地判定結(jié)果，因此通用方法僅能做到粗篩。而且由于假“陽性”的干擾，所檢測的化學(xué)藥品僅限于解熱鎮(zhèn)痛類或糖皮質(zhì)激素類中有限的幾種。如張鶴等“關(guān)于抗風(fēng)濕類中藥制劑中非法添加化學(xué)藥品的檢測方法研究”(亞太傳統(tǒng)醫(yī)藥.2010.6 (6):31-32)先采用薄層色譜法進(jìn)行粗篩，而后必須再進(jìn)一步對其中的陽性樣品采用紅外光譜或高效液相色譜法進(jìn)行驗(yàn)證。但由于紅外光譜儀、HPLC-MS、GC-MS儀器昂貴，且必須由專業(yè)的技術(shù)人員操控，維護(hù)費(fèi)用也極高，無法實(shí)現(xiàn)快速篩查達(dá)到監(jiān)控的目的。顯然，完全針對小活絡(luò)丸內(nèi)非法添加多種化學(xué)藥品構(gòu)建起能進(jìn)行快速篩查的方法是非常必要的。因此，為了使在小活絡(luò)丸內(nèi)非法添加化學(xué)藥品的違法行為得到有效扼制，保障人民群眾用藥安全有效，亟需建立小活絡(luò)丸內(nèi)非法添加化學(xué)藥品的快速篩查方法。
【發(fā)明內(nèi)容】
[0004]本發(fā)明的目的是提供一種檢測小活絡(luò)丸內(nèi)非法添加化學(xué)藥品的方法，以克服現(xiàn)有技術(shù)的不足。
[0005]本發(fā)明的另一目的是排除小活絡(luò)丸和非法添加化學(xué)藥品的假“陽性”干擾，實(shí)現(xiàn)多種非法添加化學(xué)藥品的快速篩查，達(dá)到監(jiān)控的普及可行。
[0006]小活絡(luò)丸是一個中藥制劑，雖然組方藥味不多，但化學(xué)成分十分復(fù)雜，加之非法添加化學(xué)藥品，測定時極易出現(xiàn)假“陽性”干擾。通常假“陽性”干擾必須采用紅外光譜儀、HPLC-MS, GC-MS進(jìn)行成分確證。研究發(fā)現(xiàn)，由于小活絡(luò)丸中所需篩查的5種化學(xué)藥品成分均有溶于甲醇的性質(zhì)，且甲醇對大蜜丸中的煉蜜溶解度低，因此利用該性質(zhì)，選用甲醇作為提取溶劑?？紤]到小活絡(luò)丸是大蜜丸，如不進(jìn)行分散，該提取溶劑無法滲入到樣品中，不能充分提取待測的化學(xué)藥品。因此取小活絡(luò)丸一丸(3g)，剪碎后，加硅藻土研磨，即可將大蜜丸充分分散。再加入甲醇，將樣品全部浸泡，并采用超聲處理，以有效地將這5種成分提取出來。既可避免小活絡(luò)丸中煉蜜的溶出，便于點(diǎn)樣，又可大大減少小活絡(luò)丸中其他成分對測定的干擾。又因非法添加的化學(xué)藥品在薄層板上吸附能力上的不同，再以展開劑篩查出中成藥小活絡(luò)丸中是否非法添加了 5種化學(xué)藥品。
[0007]本發(fā)明的快速篩查方法如下
[0008](I)對照品溶液的制備:分別取對乙酰氨基酚、地塞米松、醋酸可的松、醋酸曲安奈德和保泰松對照品各10mg，用甲醇IOml溶解，制對照品溶液。
[0009](2)供試品溶液的制備:取小活絡(luò)丸3g，剪碎，加硅藻土 2g，研勻，加甲醇，超聲處理，濾過，取濾液作為供試品溶液。
[0010](3)進(jìn)行篩查測定:分別吸取對照品溶液lyl，供試品溶液5iU，點(diǎn)于同一塊硅膠GF254薄層板上，以展開劑上行展開，取出，晾干，置紫外光燈(波長254nm)下觀察薄層色譜，然后再噴以10%硫酸乙醇溶液，并置于105°C烘箱中恒溫加熱至薄層板上的斑點(diǎn)顯色清晰，再分別置日光及紫外光燈(波長365nm)下觀察薄層色譜。上述三種觀察方式的色譜中，與對照品相同比移值處如有相同顏色的熒光淬滅斑點(diǎn)、熒光斑點(diǎn)或斑點(diǎn)同時出現(xiàn)，則可判定樣品結(jié)果為陽性。
[0011]上述的展開劑為正己烷-乙酸乙酯-甲醇=32: 18: 5 (體積比)。
[0012]上述超聲處理的條件為30分鐘，功率250W，頻率50kHz。
[0013]該方法從對照品溶液的制備到對樣品結(jié)果進(jìn)行判定，全過程僅需I小時，而且能在同一塊硅膠GF254薄層板上篩查多個廠家的產(chǎn)品。顯然，本發(fā)明方法操作簡便，快速，成本低，既解決了小活絡(luò)丸成藥因成分復(fù)雜所導(dǎo)致的假“陽性”干擾的問題，也避免了采用紅外光譜、HPLC-MS、GC-MS測定所產(chǎn)生的昂貴費(fèi)用和大量時間，因此是有效監(jiān)控中成藥小活絡(luò)丸內(nèi)是否非法添加化學(xué)藥品成為可能。
【專利附圖】
【附圖說明】
[0014]圖1:本發(fā)明的小活絡(luò)丸和對乙酰氨基酚、地塞米松、醋酸可的松、醋酸曲安奈德、保泰松在紫外光燈(波長254nm)條件下的TLC色譜圖；其中的，1:小活絡(luò)丸陰性樣品的供試品溶液；2:小活絡(luò)丸陽性樣品的供試品溶液；3:對照品溶液(斑點(diǎn)a:對乙酰氨基酚；斑點(diǎn)b:地塞米松；斑點(diǎn)c:醋酸可的松；斑點(diǎn)d:醋酸曲安奈德；斑點(diǎn)e:保泰松)。
[0015]圖2:本發(fā)明的小活絡(luò)丸和對乙酰氨基酚、地塞米松、醋酸可的松、醋酸曲安奈德、保泰松在紫外光燈(波長365nm)條件下的TLC色譜圖；其中的，1:小活絡(luò)丸陰性樣品的供試品溶液；2:小活絡(luò)丸陽性樣品的供試品溶液；3:對照品溶液(斑點(diǎn)b:地塞米松；斑點(diǎn)c:醋酸可的松；斑點(diǎn)d:醋酸曲安奈德；斑點(diǎn)e:保泰松)。
[0016]圖3:本發(fā)明的小活絡(luò)丸和對乙酰氨基酚、地塞米松、醋酸可的松、醋酸曲安奈德、保泰松在日光條件下的TLC色譜圖；其中的，1:小活絡(luò)丸陰性樣品的供試品溶液；2:小活絡(luò)丸陽性樣品的供試品溶液；3:對照品溶液(斑點(diǎn)b:地塞米松；斑點(diǎn)c:醋酸可的松；斑點(diǎn)d:醋酸曲安奈德；斑點(diǎn)e:保泰松)。[0017]上述的圖1、圖2、圖3中的小活絡(luò)丸陰性樣品的供試品溶液為不含對乙酰氨基酚、地塞米松、醋酸可的松、醋酸曲安奈德、保泰松的小活絡(luò)丸樣品按照供試品溶液的制備方法制備的供試品溶液。小活絡(luò)丸陽性樣品的供試品溶液為含有對乙酰氨基酚、地塞米松、醋酸可的松、醋酸曲安奈德、保泰松的小活絡(luò)丸樣品按照供試品溶液的制備方法制備的供試品溶液。
【具體實(shí)施方式】
[0018]下面給出詳細(xì)的實(shí)施例。
[0019]本發(fā)明采用:儀器與試藥:SartorisBP211D 電子天平；AUTO SCIENCEAS10200BT型超聲波清洗器；P/G2007型恒溫烘箱；薄層板:硅膠GF254薄層板(德國MERCK批號:HX929689規(guī)格:20 X 20cm)；試劑均為分析純；對乙酰氨基酚對照品(批號:100018-200408)、地塞米松對照品(批號:100129_201105)、醋酸可的松對照品(批號:100123-200303)、醋酸曲安奈德對照品(批號:100125-201105)、保泰松對照品(批號:100481-200601),以上對照品均由中國食品藥品檢定研究院提供；小活絡(luò)丸(標(biāo)不批號:130110、20130715、130401、120801、20121201、120012、2111105)。
[0020]色譜條件:展開劑:正己烷-乙酸乙酯-甲醇=32: 18: 5(體積比)；展開條件:溫度:23°C ;相對濕度:59% ;展距:10cm。
[0021]對照品溶液的制備:分別取對乙酰氨基酚、地塞米松、醋酸可的松、醋酸曲安奈德和保泰松對照品各IOmg,用甲醇IOml溶解,制對照品溶液。
[0022]供試品溶液的制備:取小活絡(luò)丸成品3g，剪碎，加硅藻土 2g，研勻，加甲醇10ml，進(jìn)行超聲處理，濾過，取濾液作為供試品溶液。
[0023]上述的超聲處理?xiàng)l件為30分鐘，功率250W，頻率50kHz。
[0024]進(jìn)行篩查測定:分別吸取對照品溶液I Ul，供試品溶液5 yl，點(diǎn)于同一塊硅膠GF254薄層板上，以展開劑上行展開，取出，晾干，置紫外光燈(波長254nm)下觀察薄層色譜，然后再噴以10%硫酸乙醇溶液，并置于105°C烘箱中恒溫加熱至薄層板上的斑點(diǎn)顯色清晰，再分別置日光及紫外光燈(波長365nm)下觀察薄層色譜。上述三種觀察方式的色譜中，與對照品相同比移值處如有相同顏色的熒光淬滅斑點(diǎn)、熒光斑點(diǎn)或斑點(diǎn)同時出現(xiàn)，則可判定樣品結(jié)果為陽性。檢出了 5種化學(xué)藥品是對乙酰氨基酚、地塞米松、醋酸可的松、醋酸曲安奈德和保泰松。對應(yīng)的色譜圖如圖1、圖2、圖3。
[0025]結(jié)果表明，混合對照品分離效果良好，小活絡(luò)丸自身的所有成分對測定無干擾，即供試品在對照品相同比移值處無干擾成分存在。
[0026]綜上，本發(fā)明所建立的薄層色譜法可快速檢測中成藥小活絡(luò)丸中是否非法添加了對乙酰氨基酚、地塞米松、醋酸可的松、醋酸曲安奈德和保泰松這5種化學(xué)藥品，具有操作簡便，快速，低成本的特點(diǎn)，可以作為小活絡(luò)丸中成藥質(zhì)量監(jiān)控的普及方法。
【權(quán)利要求】
1.一種檢測小活絡(luò)丸內(nèi)非法添加化學(xué)藥品的方法，其特征是首先分別制備對照品溶液(I)和供試品溶液(2)，然后進(jìn)行篩查測定(3): (1)對照品溶液的制備:分別取對乙酰氨基酚、地塞米松、醋酸可的松、醋酸曲安奈德和保泰松對照品各IOmg,用甲醇IOml溶解,制對照品溶液； (2)供試品溶液的制備:取小活絡(luò)丸一丸，剪碎，加硅藻土，研勻，加甲醇，超聲處理，濾過，取濾液作為供試品溶液； (3)進(jìn)行篩查測定:分別吸取對照品溶液，供試品溶液，點(diǎn)樣于同一塊硅膠GF254薄層板上，以正己烷-乙酸乙酯-甲醇作為展開劑上行展開，取出，晾干，置紫外光燈254nm下觀察薄層色譜，再噴以10%硫酸乙醇溶液，并置于105°C烘箱中恒溫加熱至薄層板上的斑點(diǎn)顯色清晰，再分別置日光及紫外光燈365nm下觀察薄層色譜；若上述三種觀察方式的色譜中，與對照品相同比移值處有相同顏色的熒光淬滅斑點(diǎn)、熒光斑點(diǎn)或斑點(diǎn)同時出現(xiàn)，則可判定樣品結(jié)果為陽性，檢出了 5種化學(xué)藥品是對乙酰氨基酚、地塞米松、醋酸可的松、醋酸曲安奈德和保泰松。
2.如權(quán)利要求1所述的快速篩查方法，其特征是上述展開劑正己烷-乙酸乙酯-甲醇的體積比為32: 18: 5。
3.如權(quán)利要求1所述的快速篩查方法，其特征是上述硅藻土重量為2g。
4.如權(quán)利要求1所述的快速篩查方法，其特征是上述權(quán)利要求1中的(2)的甲醇體積為 10ml。
5.如權(quán)利要求1所述的快速篩查方法，其特征是上述對照品溶液的點(diǎn)樣體積為IUl。
6.如權(quán)利要求1所述的快速篩查方法，其特征是上述供試品溶液的點(diǎn)樣體積為5yl。
7.如權(quán)利要求1所述的快速篩查方法，其特征是上述超聲處理的條件為30分鐘，功率250W，頻率 50kHz。
【文檔編號】G01N30/90GK103760292SQ201410041793
【公開日】2014年4月30日 申請日期:2014年1月28日 優(yōu)先權(quán)日:2014年1月28日
【發(fā)明者】焦琦, 吳愛英, 張春輝 申請人:焦琦