金槍魚生魚片品質快速檢測方法

金槍魚生魚片品質快速檢測方法
【專利摘要】本發明公開了一種金槍魚生魚片品質快速檢測方法，金槍魚生魚片儲存溫度為0℃、4℃、8℃或-18℃，所述方法包括以下步驟：建立MTT化學傳感器測試體系：取緩沖液：90％乙醇-Tris-HCl；將MTT化學傳感器置于金槍魚生魚片的儲存溫度環境中，并根據不同的溫度確定MTT化學傳感器中黃嘌呤氧化酶XOD、次黃嘌呤Hx和噻唑藍MTT三種成分的含量；根據MTT化學傳感器的實時顏色判斷金槍魚生魚片的實時品質，MTT化學傳感器的顏色越深，金槍魚生魚片的品質越差。本發明通過將金槍魚生魚片的K值(魚類鮮度的一種指標)變化對應于MTT化學傳感器的顏色變化，只要在對應的儲存溫度中放置MTT化學傳感器，即能快速檢測金槍魚生魚片的實時品質。
【專利說明】金槍魚生魚片品質快速檢測方法
【技術領域】
[0001]本發明涉及一種金槍魚生魚片品質檢測方法，尤其涉及一種基于MTT化學傳感器的金槍魚生魚片品質快速檢測方法。
【背景技術】
[0002]金槍魚營養豐富，富含蛋白質、脂肪、維生素A、D、礦物質、DHA, EPA、牛磺酸及多種微量元素。營養組成結構具有低脂肪、低能量、高蛋白的特點，經常食用金槍魚，能有助于身體的營養平衡，是都市人不可多得的健康美食。中國金槍魚加工雖起步晚，但發展迅速，金槍魚生魚片已逐漸受國內消費者的喜愛，結合我國金槍魚產業，就金槍魚貿易、物流、加工、銷售、消費等環節開展研究，具有重要的理論和實踐意義。目前我國已有行業生食金槍魚肉標準，但缺乏針對生食金槍魚肉品質評價的系統研究，同時尚沒有建立有效的無損快速評價方法，供普通消費者評價金槍魚品質。
[0003]若采用水產品品質評價的傳統方法，則存在測試時間長、設備復雜、實驗程序繁瑣、受一定主觀性影響、對樣本有破壞性、檢測精確度和精密度不高的缺陷。所以，探索金槍魚生魚片品質快速檢測方法是非常必要的。

【發明內容】

[0004]本發明的目的就在于為了解決上述問題而提供一種基于MTT化學傳感器的金槍魚生魚片品質快速檢測方法。
[0005]為了達到上述目的，本發明采用了以下技術方案:
[0006]本發明所述金槍魚生魚片品質快速檢測方法中，所述金槍魚生魚片儲存溫度為0°C、4°C、8°C或-18°C，所述方法包括以下步驟:
[0007](I)建立MTT化學傳感器測試體系:取緩沖液:90%乙醇-Tris-HCl，在0°C、4°C和80C的溫度下選擇pH為8.2，在-18°C的溫度下選擇pH為7.8，吸收波長均為565nm ；
[0008](2)將MTT化學傳感器置于所述金槍魚生魚片的儲存溫度環境中，并按以下方法確定MTT化學傳感器的成分含量:0°C時，黃嘌呤氧化酶XOD添加量為0.48?0.52U，次黃嘌呤Hx含量為2.0?2.4mg,噻唑藍MTT的含量為2.5?2.9mg ;4°C時，黃嘌呤氧化酶XOD添加量為0.48?0.52U，次黃嘌呤Hx含量為2.2?2.6mg,噻唑藍MTT的含量為2.5?2.9mg ；8°C時，黃嘌呤氧化酶XOD添加量為0.38?0.42U，次黃嘌呤Hx含量為2.2?2.6mg,噻唑藍MTT的含量為2.0?2.4mg ;_18°C時，黃嘌呤氧化酶XOD添加量為0.46?0.50U，次黃嘌呤Hx含量為1.2?1.8mg,噻唑藍MTT的含量為2.0?2.4mg ；
[0009](3)根據MTT化學傳感器的實時顏色判斷金槍魚生魚片的實時品質，其方法為:MTT化學傳感器的顏色由黃色變為藍紫色的過程對應于金槍魚生魚片的品質由好變為不能食用的過程，MTT化學傳感器的顏色越深，金槍魚生魚片的品質越差。
[0010]噻唑藍MTT[3-(4,5-dimethylthiazo_12-yl)-2,5-diphenyltetrazoliumbromide]是一種四唑鹽,活細胞線粒體呼吸鏈上的脫氫酶，能將黃色的噻唑藍還原成藍紫色的甲臜(FMZ)，FMZ常用作于定量檢測活細胞量。
[0011]黃嘌呤氧化酶XOD (xanthine oxidase)廣泛存在于動物的組織中，它是一種氧化還原酶類，是生物體內核酸代謝過程中的重要酶類。黃嘌呤氧化酶可以把黃嘌呤、次黃嘌呤氧化成尿酸；把芳香族醛、脂肪族氧化成羧酸；還能氧化蝶啶類物質、嘧啶類及NADPH。
[0012]次黃嘌呤Hx(Hypoxamhine)是集生物發酵、化學合成核苷類的抗病毒藥品。
[0013]MTT化學傳感器是基于黃嘌呤氧化酶XOD的作用下有次黃嘌呤Hx和噻唑藍MTT進行反應，在生成尿酸的同時產生呼吸鏈上的脫氫酶，還原黃色噻唑藍，生成藍紫色的甲臜(FMZ)，通過測定吸光度來確定生成甲躦(FMZ)的含量，FMZ含量越高，傳感器顏色越深，FMZ含量隨時間溫度變化而發生改變。
[0014]90%乙醇-Tris-HCl是含有90%乙醇的Tris-HCl緩沖液，Tris-HCl緩沖液是三羥甲基氨基甲烷(Tris)溶液與鹽酸(HCl)混合的緩沖液。
[0015]K值是魚類鮮度的一種指標，為次黃嘌呤核苷和次黃嘌呤之和與腺苷三磷酸及其分解物總量之比的百分率。適合生食的金槍魚要求K值小于20%。
[0016]經試驗發現，MTT化學傳感器的顏色變化與相同條件下金槍魚生魚片的K值變化相對應，所以可以通過觀察MTT化學傳感器的顏色變化來確定金槍魚生魚片的品質變化。
[0017]作為優選，所述步驟(2)中，按以下方法確定MTT化學傳感器的成分含量:0°C時，黃嘌呤氧化酶XOD添加量為0.5U，次黃嘌呤Hx含量為2.2mg,噻唑藍MTT的含量為2.72mg ；4°C時，黃嘌呤氧化酶XOD添加量為0.5U，次黃嘌呤Hx含量為2.4mg,噻唑藍MTT的含量為2.77mg ;8°C時，黃嘌呤氧化酶XOD添加量為0.4U，次黃嘌呤Hx含量為2.4mg,噻唑藍MTT的含量為2.25mg ;_18°C時，黃嘌呤氧化酶XOD添加量為0.48U，次黃嘌呤Hx含量為1.5mg，噻唑藍MTT的含量為2.25mg。
[0018]本發明的有益效果在于:
[0019]本發明通過將金槍魚生魚片的K值(魚類鮮度的一種指標)變化對應于MTT化學傳感器的顏色變化，只要在對應的儲存溫度中放置MTT化學傳感器，即能快速檢測金槍魚生魚片的實時品質，具有測試迅速、設備簡單、測試過程簡單、主觀性影響小、無需破壞樣本、檢測精確度和精密度較高的優點。
【具體實施方式】
[0020]下面結合具體實施例對本發明作進一步具體描述:
[0021]實施例1:
[0022]金槍魚生魚片儲存溫度為0°C，按以下步驟檢測金槍魚生魚片品質:
[0023](I)建立MTT化學傳感器測試體系:取緩沖液:90%乙醇-Tris-HCl，選擇pH為8.2，吸收波長均為565nm;
[0024](2)將MTT化學傳感器置于所述金槍魚生魚片的儲存溫度環境中，并按以下方法確定MTT化學傳感器的成分含量:黃嘌呤氧化酶XOD添加量為0.5U，次黃嘌呤Hx含量為2.2mg，噻唑藍MTT的含量為2.72mg ；
[0025](3)根據MTT化學傳感器的實時顏色判斷金槍魚生魚片的實時品質，其方法為:MTT化學傳感器的顏色由黃色變為藍紫色的過程對應于金槍魚生魚片的品質由好變為不能食用的過程，MTT化學傳感器的顏色越深，金槍魚生魚片的品質越差。[0026]根據常規K值試驗驗證，上述方法的檢測結果與實際結果相近度在90 %以上，完全可以用于消費者快速檢測金槍魚生魚片品質。
[0027]實施例2:
[0028]金槍魚生魚片儲存溫度為4 C，按以下步驟檢測金槍魚生魚片品質:
[0029](I)建立MTT化學傳感器測試體系:取緩沖液:90%乙醇-Tris-HCl，選擇pH為8.2，吸收波長均為565nm;
[0030](2)將MTT化學傳感器置于所述金槍魚生魚片的儲存溫度環境中，并按以下方法確定MTT化學傳感器的成分含量:黃嘌呤氧化酶XOD添加量為0.5U，次黃嘌呤Hx含量為2.4mg,噻唑藍MTT的含量為2.77mg ；
[0031](3)根據MTT化學傳感器的實時顏色判斷金槍魚生魚片的實時品質，其方法為:MTT化學傳感器的顏色由黃色變為藍紫色的過程對應于金槍魚生魚片的品質由好變為不能食用的過程，MTT化學傳感器的顏色越深，金槍魚生魚片的品質越差。
[0032]根據常規K值試驗驗證，上述方法的檢測結果與實際結果相近度在90 %以上，完全可以用于消費者快速檢測金槍魚生魚片品質。
[0033]實施例3:
[0034]金槍魚生魚片儲存溫度為8°C，按以下步驟檢測金槍魚生魚片品質:
[0035](I)建立MTT化學傳感器測試體系:取緩沖液:90%乙醇-Tris-HCl，選擇pH為8.2，吸收波長均為565nm;
[0036](2)將MTT化學傳感器置于所述金槍魚生魚片的儲存溫度環境中，并按以下方法確定MTT化學傳感器的成分含量:黃嘌呤氧化酶XOD添加量為0.4U,次黃嘌呤Hx含量為2.4mg,噻唑藍MTT的含量為2.25mg ；
[0037](3)根據MTT化學傳感器的實時顏色判斷金槍魚生魚片的實時品質，其方法為:MTT化學傳感器的顏色由黃色變為藍紫色的過程對應于金槍魚生魚片的品質由好變為不能食用的過程，MTT化學傳感器的顏色越深，金槍魚生魚片的品質越差。
[0038]根據常規K值試驗驗證，上述方法的檢測結果與實際結果相近度在90 %以上，完全可以用于消費者快速檢測金槍魚生魚片品質。
[0039]實施例4:
[0040]金槍魚生魚片儲存溫度為_18°C，按以下步驟檢測金槍魚生魚片品質:
[0041](I)建立MTT化學傳感器測試體系:取緩沖液:90%乙醇-Tris-HCl，選擇pH為
7.8，吸收波長均為565nm;
[0042](2)將MTT化學傳感器置于所述金槍魚生魚片的儲存溫度環境中，并按以下方法確定MTT化學傳感器的成分含量:_18°C時，黃嘌呤氧化酶XOD添加量為0.48U，次黃嘌呤Hx含量為1.5mg,噻唑藍MTT的含量為2.25mg ；
[0043](3)根據MTT化學傳感器的實時顏色判斷金槍魚生魚片的實時品質，其方法為:MTT化學傳感器的顏色由黃色變為藍紫色的過程對應于金槍魚生魚片的品質由好變為不能食用的過程，MTT化學傳感器的顏色越深，金槍魚生魚片的品質越差。
[0044]根據常規K值試驗驗證，上述方法的檢測結果與實際結果相近度在90 %以上，完全可以用于消費者快速檢測金槍魚生魚片品質。
[0045]實施例5:[0046]金槍魚生魚片儲存溫度為O C，按以下步驟檢測金槍魚生魚片品質:
[0047](I)建立MTT化學傳感器測試體系:取緩沖液:90%乙醇-Tris-HCl，選擇pH為8.2，吸收波長均為565nm;
[0048](2)將MTT化學傳感器置于所述金槍魚生魚片的儲存溫度環境中，并按以下方法確定MTT化學傳感器的成分含量:黃嘌呤氧化酶XOD添加量為0.48U，次黃嘌呤Hx含量為2.0mg,噻唑藍MTT的含量為2.5mg ；
[0049](3)根據MTT化學傳感器的實時顏色判斷金槍魚生魚片的實時品質，其方法為:MTT化學傳感器的顏色由黃色變為藍紫色的過程對應于金槍魚生魚片的品質由好變為不能食用的過程，MTT化學傳感器的顏色越深，金槍魚生魚片的品質越差。
[0050]根據常規K值試驗驗證，上述方法的檢測結果與實際結果相近度在90 %以上，完全可以用于消費者快速檢測金槍魚生魚片品質。
[0051]實施例6:
[0052]金槍魚生魚片儲存溫度為0°C，按以下步驟檢測金槍魚生魚片品質:
[0053](I)建立MTT化學傳感器測試體系:取緩沖液:90%乙醇-Tris-HCl，選擇pH為8.2，吸收波長均為565nm;
[0054](2)將MTT化學傳感器置于所述金槍魚生魚片的儲存溫度環境中，并按以下方法確定MTT化學傳感器的成分含量:黃嘌呤氧化酶XOD添加量為0.52U，次黃嘌呤Hx含量為
2.4mg,噻唑藍MTT的含量為2.9mg ；
[0055](3)根據MTT化學傳感器的實時顏色判斷金槍魚生魚片的實時品質，其方法為:MTT化學傳感器的顏色由黃色變為藍紫色的過程對應于金槍魚生魚片的品質由好變為不能食用的過程，MTT化學傳感器的顏色越深，金槍魚生魚片的品質越差。
[0056]根據常規K值試驗驗證，上述方法的檢測結果與實際結果相近度在90 %以上，完全可以用于消費者快速檢測金槍魚生魚片品質。
[0057]實施例7:
[0058]金槍魚生魚片儲存溫度為8°C，按以下步驟檢測金槍魚生魚片品質:
[0059](I)建立MTT化學傳感器測試體系:取緩沖液:90%乙醇-Tris-HCl，選擇pH為
8.2，吸收波長均為565nm;
[0060](2)將MTT化學傳感器置于所述金槍魚生魚片的儲存溫度環境中，并按以下方法確定MTT化學傳感器的成分含量:8°C時，黃嘌呤氧化酶XOD添加量為0.38U，次黃嘌呤Hx含量為2.2mg,噻唑藍MTT的含量為2.0mg ；
[0061](3)根據MTT化學傳感器的實時顏色判斷金槍魚生魚片的實時品質，其方法為:MTT化學傳感器的顏色由黃色變為藍紫色的過程對應于金槍魚生魚片的品質由好變為不能食用的過程，MTT化學傳感器的顏色越深，金槍魚生魚片的品質越差。
[0062]根據常規K值試驗驗證，上述方法的檢測結果與實際結果相近度在90 %以上，完全可以用于消費者快速檢測金槍魚生魚片品質。
[0063]實施例8:
[0064]金槍魚生魚片儲存溫度為8°C，按以下步驟檢測金槍魚生魚片品質:
[0065](I)建立MTT化學傳感器測試體系:取緩沖液:90%乙醇-Tris-HCl，選擇pH為
8.2，吸收波長均為565nm;[0066](2)將MTT化學傳感器置于所述金槍魚生魚片的儲存溫度環境中，并按以下方法確定MTT化學傳感器的成分含量:8°C時，黃嘌呤氧化酶XOD添加量為0.42U，次黃嘌呤Hx含量為2.6mg,噻唑藍MTT的含量為2.4mg ；
[0067](3)根據MTT化學傳感器的實時顏色判斷金槍魚生魚片的實時品質，其方法為:MTT化學傳感器的顏色由黃色變為藍紫色的過程對應于金槍魚生魚片的品質由好變為不能食用的過程，MTT化學傳感器的顏色越深，金槍魚生魚片的品質越差。
[0068]根據常規K值試驗驗證，上述方法的檢測結果與實際結果相近度在90 %以上，完全可以用于消費者快速檢測金槍魚生魚片品質。
[0069]實施例9:
[0070]金槍魚生魚片儲存溫度為_18°C，按以下步驟檢測金槍魚生魚片品質:
[0071](I)建立MTT化學傳感器測試體系:取緩沖液:90%乙醇-Tris-HCl，選擇pH為
7.8，吸收波長均為565nm;
[0072](2)將MTT化學傳感器置于所述金槍魚生魚片的儲存溫度環境中，并按以下方法確定MTT化學傳感器的成分含量:_18°C時，黃嘌呤氧化酶XOD添加量為0.46U，次黃嘌呤Hx含量為1.2mg,噻唑藍MTT的含量為2.0mg ；
[0073](3)根據MTT化學傳感器的實時顏色判斷金槍魚生魚片的實時品質，其方法為:MTT化學傳感器的顏色由黃色變為藍紫色的過程對應于金槍魚生魚片的品質由好變為不能食用的過程，MTT化學傳感器的顏色越深，金槍魚生魚片的品質越差。
[0074]根據常規K值試驗驗證，上述方法的檢測結果與實際結果相近度在90 %以上，完全可以用于消費者快速檢測金槍魚生魚片品質。
【權利要求】
1.一種金槍魚生魚片品質快速檢測方法，所述金槍魚生魚片儲存溫度為0°C、4°C、8°C或-18°C，其特征在于:所述方法包括以下步驟: (1)建立MTT化學傳感器測試體系:取緩沖液:90%乙醇-Tris-HCl，在0°C、4°C和8°C的溫度下選擇pH為8.2，在-18°C的溫度下選擇pH為7.8，吸收波長均為565nm ； (2)將MTT化學傳感器置于所述金槍魚生魚片的儲存溫度環境中，并按以下方法確定MTT化學傳感器的成分含量:0°C時，黃嘌呤氧化酶XOD添加量為0.48?0.52U，次黃嘌呤Hx含量為2.0?2.4mg,噻唑藍MTT的含量為2.5?2.9mg ;4°C時，黃嘌呤氧化酶XOD添加量為0.48?0.52U，次黃嘌呤Hx含量為2.2?2.6mg,噻唑藍MTT的含量為2.5?2.9mg ；8°C時，黃嘌呤氧化酶XOD添加量為0.38?0.42U，次黃嘌呤Hx含量為2.2?2.6mg,噻唑藍MTT的含量為2.0?2.4mg ;_18°C時，黃嘌呤氧化酶XOD添加量為0.46?0.50U，次黃嘌呤Hx含量為1.2?1.8mg,噻唑藍MTT的含量為2.0?2.4mg ； (3)根據MTT化學傳感器的實時顏色判斷金槍魚生魚片的實時品質，其方法為:MTT化學傳感器的顏色由黃色變為藍紫色的過程對應于金槍魚生魚片的品質由好變為不能食用的過程，MTT化學傳感器的顏色越深，金槍魚生魚片的品質越差。
2.根據權利要求1所述的金槍魚生魚片品質快速檢測方法，其特征在于:所述步驟(2)中，按以下方法確定MTT化學傳感器的成分含量:0°C時，黃嘌呤氧化酶XOD添加量為0.5U，次黃嘌呤Hx含量為2.2mg,噻唑藍MTT的含量為2.72mg ;4°C時，黃嘌呤氧化酶XOD添加量為0.5U，次黃嘌呤Hx含量為2.4mg,噻唑藍MTT的含量為2.77mg ;8°C時，黃嘌呤氧化酶XOD添加量為0.4U，次黃嘌呤Hx含量為2.4mg,噻唑藍MTT的含量為2.25mg ;_18°C時，黃嘌呤氧化酶XOD添加量為0.48U，次黃嘌呤Hx含量為1.5mg,噻唑藍MTT的含量為2.25mg。
【文檔編號】G01N21/78GK103728295SQ201310712962
【公開日】2014年4月16日 申請日期:2013年12月23日 優先權日:2013年12月23日
【發明者】王錫昌, 包海蓉, 奚春蕊 申請人:上海海洋大學