一種中成藥、保健食品中甾體類抗炎藥的篩查方法
【專利摘要】本發明公開一種檢測中成藥、保健食品中甾體類抗炎藥的方法及其應用的試劑盒，旨在提供一種專屬、靈敏、簡便、現場可操作性強的快速檢驗方法；該方法由以下步驟組成：1）取1份量供試品置于具塞試管中，加提取有機溶劑3~4ml，振搖1min，得到供試品粗提液；（2）用有機系微孔濾膜，過濾出2份濾液，各約1ml，分別置于2個無色玻璃容器中；（3）向其中一份濾液中加入約0.2ml四氮唑試劑作為供試溶液，另一份作為對照溶液，并將2份溶液密封混勻；（4）將2份溶液放置2~3min后，在3min內進行比色觀察；（5）結果判斷：如果供試溶液顯色且比對照溶液顏色深，則判定為陽性，反之為陰性。
【專利說明】一種中成藥、保健食品中留體類抗炎藥的篩查方法
【技術領域】
[0001]本發明公開一種檢測方法，具體是一種利用化學試劑檢測中成藥、保健食品中甾體類抗炎藥的方法，屬于醫藥檢測【技術領域】。
【背景技術】
[0002]糖皮質激素(glucocorticoid, GCS)是由腎上腺皮質中束狀帶分泌的一類甾體激素，主要為皮質醇(cortisol)，具有調節糖、脂肪、和蛋白質的生物合成和代謝的作用，還具有抑制免疫應答、抗炎、抗毒、抗休克作用。稱其為“糖皮質激素”是因為其調節糖類代謝的活性最早為人們所認識，在臨床工作中，皮質激素因具有較強的抗炎抗變態反應作用而廣泛應用于支氣管哮喘和炎癥重癥治療中。
[0003]在支氣管哮喘的常規治療中，當抗生素應用、支氣管擴張劑使用、止咳化痰等對癥治療不能達到滿意療效時，在無絕對禁忌證時應用皮質激素進行沖擊治療。風濕及類風濕性關節炎為常見病，是骨關節的一種慢性炎癥性和破壞性疾病，屬于頑固性疾病，患者需要長期服藥以控制病情。藥物治療主要包括非留體類抗炎藥(NSAIDs)、腎上腺皮質激素和改善病情的抗風濕藥物。而皮質激素主要用于重癥治療，原則上也已小劑量短期治療為宜。
[0004]近年來保健食品、中藥中非法添加化學藥物的案件屢見不鮮。傳統中藥在我國有著幾千年的歷史，并以毒副作用小、安全性高深受百姓信賴，不法分子借此牟取暴利，向保健食品、中藥中加入化學藥物，以達到短期見效的目的。長期服用非法添加的保健食品、中成藥，危害巨大，不止延誤病情，且副作用明顯，尤其是腎上腺皮質激素類，這種即使在西醫治療下都需要謹慎使用的藥物，已被發現在止咳平喘類及抗風濕類保健食品、中成藥中有非法添加的案例。因此對皮質激素類藥物非法添加應加大打擊和監管力度。
[0005]皮質激素類藥物分子具有留體結構，與阿司匹林等非留體類抗炎藥相對應，成為甾體類抗炎藥；ci7位上的α -醇酮基具有還原性，代表藥物有醋酸潑尼松、潑尼松、醋酸氫化可的松、可的松、氫化可的松、醋酸地塞米松、地塞米松等。留體類皮質激素藥物，具有良好抗炎的作用，也兼有抗變態反應的療效，但使用這類藥物不良反應明顯，主要有脂質代謝和水鹽代謝紊亂，表現為滿月臉，向心性肥大、高血壓、骨質疏松等嚴重不良反應，甚至引起股骨壞死。這類藥物若非法摻雜在祛風濕、止咳平喘類中成藥和保健食品中，極易引起嚴重不良反應，給廣大患者造成嚴重危害。
[0006] 申請人:在專項打擊非法添加化學藥品活動中發現，部分祛風濕中成藥和保健食品中違法添加了留體類抗炎藥。查處在祛風濕類和止咳平喘類中成藥和保健食品中擅自添加皮質激素類化學藥品的違法行為，是一項長期的任務，涉及范圍廣，檢驗工作量大。
[0007]目前，檢驗中成藥和保健食品中留體類抗炎藥摻雜的方法主要有高效液相色譜法，液相色譜-質譜聯用法。高效液相色譜法和液相色譜-質譜聯用法靈敏度高，結果準確可靠，但不適合流動性大的現場檢驗，在廣大的農村地區和經濟欠發達的中小城市開展檢驗活動有一定的難度。
【發明內容】
[0008]針對上述問題，本發明旨在提供一種克服現有技術存在的缺點，分析成本低，不需要使用貴重分析儀器，專屬性強，靈敏度高，現象易于觀察，適用于現場檢驗中成藥、保健食品是否摻雜留體類抗炎藥的檢驗方法。
[0009]本發明的第二目的在于提供上述方法在制備留體類抗炎藥快速檢驗試劑盒的應用。
[0010]本發明的第三目的在于提供上述方法在檢驗祛風濕類和止咳平喘類中成藥、保健食品是否摻雜甾體類抗炎藥的篩查中的應用。
[0011]本發明的第一技術方案是這樣的一種中成藥、保健食品中留體類抗炎藥的篩查方法，依次由以下步驟組成:(I)取I份量供試品置于具塞試管中，加提取有機溶劑3?4ml，振搖lmin，得到供試品粗提液；(2)用有機系微孔濾膜，過濾出2份濾液，各約1ml，分別置于2個無色玻璃容器中；(3)向其中一份濾液中加入約0.2ml四氮唑試劑作為供試溶液，另一份作為對照溶液，并將2份溶液密封混勻；(4)將2份溶液放置2?3min后，在3min內進行比色觀察；(5)結果判斷:如果供試溶液顯紅色且比對照溶液顏色深，則判定為陽性，反之為陰性。
[0012]所述的I份量供試品為一次服用量的供試品。
[0013]上述中成藥、保健食品中留體類抗炎藥的篩查方法，其特征在于，所述的膠囊和軟膠囊取內容物置于具塞試管中，片劑和丸劑先研細，再置于具塞試管中。
[0014]上述中成藥、保健食品中留體類抗炎藥的篩查方法，其特征在于，所述中成藥、保健食品包括聲稱具有祛風濕、止咳平喘等可能添加皮質激素即留體類抗炎藥的中成藥、保健食品。
[0015]上述中成藥、保健食品中留體類抗炎藥的篩查方法，其特征在于，所述的留體類抗炎藥具有C17-C1-醇酮基，具有還原性能與四氮唑試液反應，包括醋酸潑尼松、潑尼松、醋酸氫化可的松、可的松、氫化可的松、醋酸地塞米松、地塞米松等。
【權利要求】
1.一種中成藥、保健食品中留體類抗炎藥的篩查方法，其特征在于，依次包括下述步驟:(I)取1份量供試品置于具塞試管中，加提取有機溶劑3~4ml，振搖lmin，得到供試品粗提液；(2)用有機系微孔濾膜，過濾出2份濾液，各約1ml，分別置于2個無色玻璃容器中；(3)向其中一份濾液中加入約0.2ml四氮唑試劑作為供試溶液，另一份作為對照溶液，并將2份溶液密封混勻；(4)將2份溶液放置2~3min后，在3min內進行比色觀察；(5)結果判斷:如果供試溶液顯紅色且比對照溶液顏色深，則判定為陽性，反之為陰性； 所述的1份量供試品為一次服用量的供試品。
2.根據權利要求1所述的方法，其特征在于，所述的留體類抗炎藥具有C17-α -醇酮基，具有還原性，能與四氮唑試液反應。
3.根據權利要求2所述的方法，其特征在于，所述的留體類抗炎藥為醋酸潑尼松，潑尼松，醋酸氫化可的松，可的松，氫化可的松，醋酸地塞米松，地塞米松中的一種或多種的混合。
4.根據權利要求1所述的方法，其特征在于，步驟(1)中所述的提取有機溶劑為堿性乙醇溶液，該堿性由氫氧化鈉、氫氧化鉀、或氫氧化四丁基銨中的一種或多種混合物提供。
5.根據權利要求4所述的方法，其特征在于，先將氫氧化鈉、氫氧化鉀、或氫氧化四丁基銨中的一種或多種混合物用無水甲醇配制堿性濃溶液，再與乙醇混合；所述乙醇為優級純無水乙醇或無醛乙醇。
6.根據權利要求5所述的方法，其特征在于，制得的堿性乙醇溶液的pH為13以上，且含水量在5%以下。
7.根據權利要求1所述的方法，其特征在于，步驟(3)所述的四氮唑試劑為氯化三苯四氮唑，藍四氮唑中的任一一種或兩者的混合；該四氮唑試劑用無水乙醇配制成0.2%~Ο.5%的顯色溶液，并在棕色試劑瓶中避光保存。
8.根據權利要求7所述的方法，其特征在于，四氮唑試劑為氯化三苯四氮唑。
9.應用權利要求1所述方法的留體類抗炎藥快速檢驗試劑盒，其特征在于，包括盒體，盒體內設有至少一個盛有4ml提取溶劑的具塞試管，至少一個盛有Iml四氮唑試劑的棕色試劑瓶，至少二個無色透明的反應瓶，至少一個5ml的一次性注射器，以及有機系微孔濾膜。
10.權利要求1所述的檢測方法在中成藥和保健食品中是否摻入留體類皮質激素的篩選檢驗中的應用。
【文檔編號】G01N21/78GK103616376SQ201310569766
【公開日】2014年3月5日 申請日期:2013年11月13日 優先權日:2013年11月13日
【發明者】孫晶, 馮有龍, 曹玲, 樊夏雷, 宮旭, 尚姝, 吳莉, 蘆麗, 張再平 申請人:江蘇省食品藥品檢驗所, 中國食品藥品檢定研究院, 宮旭