一種基于包絡面積與兩次補償的免疫層析結果識別方法
【專利摘要】本發明公開了一種基于包絡面積與兩次補償的免疫層析結果識別方法，首先對采集到的免疫層析熒光波形進行平滑濾波，使熒光波形更加清晰，接著對濾波后的波形進行背景閾值處理，去除波形中的背景信號，然后計算檢測線波形包絡面積與質控線波形包絡面積的比值，并進行波形寬度補償和溫度補償，最終得到免疫層析熒光的檢測結果。本發明采用計算包絡面積比值的方法實現了免疫層析熒光結果的自動精確檢測，同時采用波形寬度補償與溫度補償相結合的兩次補償方法進一步提高了免疫層析熒光檢測的準確性。
【專利說明】一種基于包絡面積與兩次補償的免疫層析結果識別方法
【技術領域】
[0001]本發明屬于免疫層析檢測領域，具體涉及一種基于包絡面積與兩次補償的免疫層析結果識別方法。
【背景技術】
[0002]免疫檢測方法是利用抗原抗體反應檢測標本中微量物質的方法。基于抗原抗體反應的特異性和敏感性，免疫檢測方法在醫學檢測和生物檢測等多個領域得到了廣泛的應用。任何物質只要能獲得相應的特異性抗體，均可采用免疫檢測方法進行檢測。
[0003]免疫層析檢測方法是免疫檢測方法和層析分析技術相結合的產物。該方法將特異性抗體噴涂在親水性的層析試紙條上，檢測時將待測樣品滴加在層析試紙的一端。在待測樣品沿著層析試紙前進時，相應的抗原會與特異性抗體發生反應。由于特異性抗體已經用顯色染料染色，或者已經用熒光素標記，因此在層析試紙條上抗原抗體的特異性反應往往伴隨著顯色反應或者熒光發光。最終，通過檢測顯色反應或熒光發光的強度，便可確定待測樣品中待測物的含量。免疫層析檢測方法具有操作簡單、操作過程標準化、試劑穩定、無污染等優點。
[0004]免疫層析檢測的結果是通過顯色反應或熒光發光的強度來表征的。目前對免疫層析檢測結果的分析往往采用的是定性的或者半定量的方法。定性的檢測方法是通過判斷檢測線顯色反應或熒光發光相對于質控線顯色反應或熒光發光的強度大小來實現的，前者強則反應呈陽性，待測物樣品中有待測物質，反之則呈陰性，待測物樣品中沒有待測物質。專利CN103245781A即是通過將免疫層析檢測時顯色區域的圖像轉化成灰度級圖像，然后計算灰度級圖像中每列像素的灰度和的值，接著從所有這些灰度和的值中找出滿足一定條件
的兩個最大值分別作為檢測線波形的單列峰值Jr和質控線波形的單列峰值,最
iIMl^ %?
后比較)?的大小來判斷免疫層析反應結果的陽性和陰性。可見，此種方法是通
過比較檢測線波形和質控線波形的單列峰值，即單列像素灰度和的最大值來實現免疫層析檢測結果識別的，所以只是一種定性的檢測方法。半定量的檢測方法是通過判斷檢測線顯色反應的顏色深淺來實現的，通過把檢測線的顏色與比色卡或已存顏色特征判定標準進行對比進而判斷免疫反應的強度。專利CN101403757A即是通過判斷呈色特征，把檢測線顏色與計算機系統內預存的顏色特征判定標準進行對比，輸出對比的判定結果。定性的或者半定量的分析方法不能精確的表征待測樣品中待測物的含量，而只能區分出待測樣品中待測物的有無。因此，需要一種定量的方法以實現待測物的精確測量。
[0005]針對免疫層 析檢測的顯色反應，專利CN102384972A提出了一種定量的分析方法，即采用機器視覺對免疫層析檢測結果進行自動識別，通過計算免疫層析測試區顯色特征區域包含顏色信息熵的大小，以量化形式反應出顯色的深淺程度。但是，針對免疫層析檢測的熒光發光，還少有定量的分析方法。
【發明內容】
[0006]本發明的目的在于克服現有免疫層析結果識別方法的不足，提供一種基于包絡面積與兩次補償的免疫層析結果識別方法。
[0007]為實現上述技術目的，達到上述技術效果，本發明通過以下技術方案實現:
一種基于包絡面積與兩次補償的免疫層析結果識別方法，包括以下步驟:
步驟I)采集原始波形
采集免疫層析熒光波形的原始波形；
步驟2)平滑濾波
采用三點均值濾波方法，對免疫層析熒光波形進行噪聲濾波，得到更加清晰的熒光波形。假設熒光波形的幅值序列為{/?},1 = 1,2,…,F，其中夏為熒光波形的采樣點數，則采用三點均值濾波進行平滑濾波，其公式為:
【權利要求】
1.一種基于包絡面積與兩次補償的免疫層析結果識別方法，其特征在于，包括以下步驟: 步驟I)采集原始波形 采集免疫層析熒光波形的原始波形； 步驟2)平滑濾波 采用三點均值濾波方法，對免疫層析熒光波形進行噪聲濾波，得到更加清晰的熒光波形； 步驟3)背景閾值處理 采用閾值檢測算子求取熒光波形的背景閾值，即通過檢測熒光波形中的波形突變點來選取合適的背景閾值，進而從熒光波形中去除背景信號； 步驟4)包絡面積比值 計算去除背景信號后的質控線波形包絡面積和檢測線波形包絡面積的比值，步驟5)波形寬度補償 把檢測線波形寬度與質控線波形寬度的比值作為包絡面積比值的波形寬度補償因子，對包絡面積比值進行補償； 步驟6)波形溫度補償 根據溫度變化對熒光檢測結果的影響關系式對包絡面積比值進行溫度補償，采用溫度補償因子
【文檔編號】G01N33/558GK103616522SQ201310512265
【公開日】2014年3月5日 申請日期:2013年10月28日 優先權日:2013年10月28日
【發明者】羅剛銀 申請人:中國科學院蘇州生物醫學工程技術研究所