一種麝香活血化瘀膏中三七含量的測定方法
【專利摘要】本發明涉及一種麝香活血化瘀膏中三七含量的測定方法。它是按照先用乙醚溶解藥膏,再加水溶解、萃取其中的Rg1、Rb1和R1,靜置,分液,水液用乙醚洗滌后,干濾紙濾過,濾液用高效液相色譜進行測定的。該測定方法準確度和精密度較高,操作簡便,專屬行強,耐用,可用于麝香活血化瘀膏的質量控制。
【專利說明】一種麝香活血化瘀膏中三七含量的測定方法
【技術領域】
[0001]本發明涉及麝香活血化瘀膏中三七含量的測定,尤其涉及一種麝香活血化瘀膏中三七含量的測定方法。
【背景技術】
[0002]麝香活血化瘀膏是一種中西藥結合的復方橡膠膏制劑,具有明顯的活血化瘀、消炎止痛的功能,主要用于治療關節扭傷,軟組織挫傷,急性腰扭傷,腰肌勞損,肩周炎及未潰凍瘡和結節性紅斑等疾病。該橡膠膏制劑中含有十一味藥物,其中三七藥材量占45%以上。三七為五加科人參屬植物,具有止血、止痛、散瘀、消腫等功效,在麝香活血化瘀膏中起著重要作用。皂苷類成分是三七主要的生理活性成分,也是衡量三七藥材質量的主要指標,在《中國藥典》2010版收載的三七藥材標準中,三七的含量就是以人參皂苷Rg1 (C42H72O14)、人參皂苷Rbi (C54H92O23)及三七皂苷R1 (C47H8tlO18)的總量計算的。因此,對麝香活血化瘀膏中三七的皂苷類成分進行準確的含量測定十分重要。但現有技術中,關于麝香活血化瘀膏以及其他橡膠膏制劑中三七含量的測定方法目前沒有報道。
[0003]在《中華人民共和國衛生部藥品標準》中藥成方制劑第八冊一九九三年版中,麝香活血化瘀膏中三七只用薄層色譜法進行了定性測定,而未作含量測定,不利于對麝香活血化瘀膏的質量控制。現有其他文獻資料中,均是關于其他中藥制劑中三七含量的測定及三七藥材中三七含量的測定,其方法也大多是用甲醇或一定濃度的甲醇溶液、乙醇或一定濃度的乙醇溶液作溶劑,以加熱回流或超聲的方式提取,再用液相色譜進行檢測;也有先在索氏提取器中用脂溶性溶劑脫脂,再用醇浸提,旋蒸濃縮,后用高效液相色譜法進行測定。關于三七藥材中的三七含量,是采用甲醇浸泡一夜后回流提取RgpRb1及R1,再用高效液相色譜法測定。但是因橡膠膏劑與其他制劑不同,它含有大量的橡膠基質,該橡膠基質由橡膠、氧化鋅、松香、羊毛脂、凡士林、液體石蠟等物質組成,用以上方式提取困難。通過大量實驗證明,用以上提取方法都不能將麝香活血化瘀膏中三七所含的Rgl、Rb1及R1有效提取出來。`
【發明內容】
[0004]本發明的目的在于提供一種麝香活血化瘀膏中三七含量的測定方法,該測定方法準確度和精密度較高,操作簡便,專屬性強,耐用,可用于麝香活血化瘀膏的質量控制。
[0005]本發明的目的是這樣實現的:
[0006]一種麝香活血化瘀膏中三七含量的測定方法,其特征在于,它是按照以下步驟進行測定的:
[0007]( I)供試品溶液的制備
[0008]取麝香活血化瘀膏數片,除去蓋襯、剪碎、混勻,精密稱取其中的4~IOg (相當于2~5片的質量)作為供試品,加入脂溶性有機溶劑浸泡,充分振搖使藥膏溶解,精密加入一定量水,充分振搖,靜置分液,取水液,用該脂溶性有機溶劑洗滌數次,靜置,棄去有機溶劑,水液用干燥濾紙濾過,取續濾液,即得供試品溶液;
[0009]( 2 )對照品溶液的制備
[0010]精密稱取人參皂苷Rg1對照品、人參皂苷Rb1對照品及三七皂苷R1對照品適量,加水制成每 Iml 分別含 Rg^l.33 ~211.3 μ g、Rb1I 08 ~181.6 μ g、^4.224 ~63.36 μ g 的混合溶液,即得對照品溶液;
[0011](3)采用高效液相色譜法測定
[0012]用具有紫外檢測器的高效液相色譜儀,以十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑;以乙腈與水的混合液為流動相進行梯度洗脫;檢測波長為203nm ;分別精密吸取所述對照品溶液與所述供試品溶液各20μ 1,注入液相色譜儀,進行測定,最后計算出供試品中三七含量(以RgpRb1和R1總量計)。
[0013]上述以乙腈與水的混合液為流動相進行梯度洗脫,是以乙腈為流動相Α,以水為流動相B,按下述體積比進行梯度洗脫:0~25分鐘,流動相A為19%,流動相B為81%,25~45分鐘,流動相A為26%,流動相B為74%,45~75分鐘,流動相A為38%,流動相B為62%。該流動相的洗脫比例能使三七中的Rgl、Rb1及R1與其相鄰雜質達基線分離,進而實現各組分含量的準確測定。
[0014]上述浸泡時間為10分鐘。根據檢測結果可知:浸泡時間低于10分鐘,提出的三七含量很少;浸泡10分鐘和20分鐘測得的含量,無顯著性差異,故將浸泡時間確定為10分鐘。
[0015]更為詳細地說,本發明公開的麝香活血化瘀膏中三七含量的測定方法,其特征在于,它具體是按照以下步驟`進行測定的:
[0016]( I)供試品溶液的制備
[0017]精密稱取規格為每片50cm2~150cm2的麝香活血化瘀膏數片,除去蓋襯、剪碎、混勻,精密稱取相當于其中3片的重量,加入乙醚50ml,浸泡至少10分鐘,充分振搖使藥膏溶解,精密加入水50ml,充分振搖,靜置,分取水液,用乙醚洗滌2次,每次15ml,棄去乙醚,水液用干燥濾紙濾過,取續濾液,即得供試品溶液;
[0018](2)對照品溶液的制備
[0019]精密稱取人參皂苷Rg1對照品、人參皂苷Rb1對照品及三七皂苷R1對照品適量,加水制成每Iml含Rgl85 μ g、RM5 μ g、R^O μ g的混合溶液,即得對照品溶液;
[0020]( 3)采用高效液相色譜法測定
[0021]采用具有紫外檢測器的高效液相色譜儀,以十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑;以乙腈為流動相A,以水為流動相B,按下述體積比進行梯度洗脫:0~25分鐘,流動相A為19%,流動相B為81%,25~45分鐘,流動相A為26%,流動相B為74%,45~75分鐘,流動相A為38%,流動相B為62% ;檢測波長為203nm ;柱溫為室溫;流速為1.0mL/min ;進樣量為20 μ 1:按照設置的所述色譜檢測條件,分別精密吸取所述對照品溶液與所述供試品溶液,注入液相色譜儀,進行測定;
[0022]4)結果計算
[0023]計算供試品中三七的含量,其中:
[0024]供試品中含有的Rg1的含量(mg):
[0025]
【權利要求】
1.ー種麝香活血化瘀膏中三七含量的測定方法,其特征在干,它是按照以下步驟進行測定的: (1)供試品溶液的制備 取麝香活血化瘀膏數片,除去蓋襯、剪碎、混勻,精密稱取其中的4~IOg作為供試品,加入脂溶性有機溶劑浸泡,充分振搖使藥膏溶解,精密加入一定量水,充分振搖,靜置分液,取水液,用該脂溶性有機溶劑洗滌數次,靜置,棄去有機溶剤,水液用干燥濾紙濾過,取續濾液,即得供試品溶液; (2)對照品溶液的制備 精密稱取人參皂苷Rg1對照品、人參皂苷Rb1對照品及三七皂苷R1對照品適量,加水制成每 Iml 分別含 Rgl21.33 ~211.3 ii g、Rb1I 08 ~181.6 u g, R^.224 ~63.36 u g 的混合溶液,即得對照品溶液; (3)采用高效液相色譜法測定 用具有紫外檢測器的高效液相色譜儀,以十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑;以こ腈與水的混合液為流動相進行梯度洗脫;檢測波長為203nm ;分別精密吸取所述對照品溶液與所述供試品溶液各20 yl,注入液相色譜儀,進行測定,最后計算出供試品中三七含量。
2.根據權利要求1所述的麝香活血化瘀膏中三七含量的測定方法,其特征在于:所述以こ腈與水的混合液為流動相進行梯度洗脫,是以こ腈為流動相A,以水為流動相B,按下述體積比進行梯度洗脫:0~25分鐘,流動相A為19%,流動相B為81%,25~45分鐘,流動相A為26%,流動相B為74%,45~75分鐘,流動相A為38%,流動相B為62%。
3.根據權利要求1或2所述的麝香活血化瘀膏中三七含量的測定方法,其特征在于:所述浸泡時間為10分鐘。`
4.根據權利要求1所述的麝香活血化瘀膏中三七含量的測定方法,其特征在于,它具體是按照以下步驟進行測定的: (1)供試品溶液的制備 精密稱取規格為每片50cm2~150cm2的麝香活血化瘀膏數片,除去蓋襯、剪碎、混勻,精密稱取相當于其中3片的重量,加入こ醚50ml,浸泡至少10分鐘,充分振搖使藥膏溶解,精密加入水50ml,充分振搖,靜置,分取水液,用こ醚洗漆2次,每次15ml,棄去こ醚,水液用干燥濾紙濾過,取續濾液,即得供試品溶液; (2)對照品溶液的制備 精密稱取人參皂苷Rg1對照品、人參皂苷Rb1對照品及三七皂苷R1對照品適量,加水制成每Iml含Rgl85 u g、Rbi45 u g、R^O u g的混合溶液,即得對照品溶液; (3)采用高效液相色譜法測定 采用具有紫外檢測器的高效液相色譜儀,以十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑;以こ腈為流動相A,以水為流動相B,按下述體積比進行梯度洗脫:0~25分鐘,流動相A為19%,流動相B為81%,25~45分鐘,流動相A為26%,流動相B為74%,45~75分鐘,流動相A為38%,流動相B為62% ;檢測波長為203nm ;柱溫為室溫;流速為1.0mL/min ;進樣量為20 y L ;按照設置的所述色譜檢測條件,分別精密吸取所述對照品溶液與所述供試品溶液,注入液相色譜儀,進行測定; 4)實驗結果計算計算供試品中三七的含量,其中:供試品中含有的Rg1的含量(mg):
【文檔編號】G01N30/02GK103499649SQ201310436910
【公開日】2014年1月8日 申請日期:2013年9月23日 優先權日:2013年9月23日
【發明者】羅延谷, 胡欣, 李文艷, 羅財勇, 何詠梅, 朱麗利 申請人:重慶紫光化工股份有限公司