專利名稱：一種含有提高胱抑素c膠乳包被抗體的穩定性的組合物、穩定劑及其制備方法和用途的制作方法
技術領域：
本發明屬生物技術領域，涉及了一種增強抗體穩定性的組合物，具體涉及一種含有提高胱抑素C膠乳包被抗體的穩定性的組合物、穩定劑及其制備方法和用途。
背景技術：
1983年Anastasi等首次在雞蛋清中分離純化得到高純度的半胱氨酸蛋白酶抑制劑(cysteine proteinase inhibitor, CPI)后被命名為胱抑素C,是一種半胱氨酸蛋白酶抑制劑，也被稱為Y-微量蛋白及Y-后球蛋白。胱抑素C廣泛存在于各種組織的有核細胞和體液中，是一種低分子量、堿性非糖化蛋白質，分子量為13.3KD，由122個氨基酸殘基組成，可由機體所有有核細胞產生，產生率恒定。循環中的胱抑素C，僅經腎小球濾過而被清除，是一種反映腎小球濾過率變化的內源性標志物，并在近曲小管重吸收，但重吸收后被完全代謝分解，不返回血液。因此，其血中濃度由腎小球濾過決定，而不依賴任何外來因素，如性別、年齡、飲食的影響，是一種反映腎小球濾過率變化的理想同源性標志物。現有的胱抑素C膠乳包被抗體在常規冷藏儲存條件下，保持期一般為12個月。
發明內容
胱抑素C試劑盒由兩個試劑組成，分別是試劑I和試劑2，試劑I的配方見后面的具體實施方式
；試劑2由胱抑素膠乳包被抗體及其穩定試劑組成。本發明的目的在于，提供一種含有胱抑素C膠乳包被抗體的穩定劑及其制備方法和用途，以克服現有技術所存在的上述缺點和不足，本發明用于試劑2的制備方法，可提高胱抑素C的生化檢測試劑的穩定性。本發明所需要解決的技術問題，可以通過以下技術方案來實現:
作為本發明的第一方面，一種含有提高胱抑素C膠乳包被抗體的穩定性的組合物，其特征在于:其配方包括以下物質:
(1)甘油含量4.8_5.2g/l，
(2)緩沖液18-22mmol/l，
(3)表面活性劑0.3g/廣l.0g/1，
(4)牛血清白蛋白0.7-1.3g/l，以及
(5)pH值調整劑。進一步，所述緩沖液為甘氨酸緩沖液或甘氨酸鹽緩沖液，所述甘氨酸或甘氨酸鹽的含量為18-22mmol/l。進一步，所述表面活性劑為非離子表面活性劑聚氧乙烯月桂醚和三乙醇胺，其中聚氧乙烯月桂醚含量為0.5g/l 1.0g/Ι，三乙醇胺含量為0.2g/l 0.5g/l。
優選聚氧乙烯月桂醚含量為0.8g/l，三乙醇胺含量為0.3g/l。進一步，胱抑素C膠乳包被抗體在組合物中的含量為10ml/l。
作為本發明的第二方面，一種含有所述的提高胱抑素C膠乳包被抗體的穩定性的組合物的穩定劑，其配方包括以下物質:
(1)甘油含量4.8-5.2g/l，
(2)緩沖液18-22mmol/l，
(3)表面活性劑0.3g/廣l.0g/1，
(4)牛血清白蛋白0.7-1.3g/l，以及
(5)pH值調整劑。進一步，所述緩沖液為甘氨酸緩沖液或甘氨酸鹽緩沖液，所述甘氨酸或甘氨酸鹽的含量為18-22mmol/l。進一步，所述表面活性劑為非離子表面活性劑聚氧乙烯月桂醚和三乙醇胺，其中聚氧乙烯月桂醚含量為0.5g/l 1.0g/Ι，三乙醇胺含量為0.2g/l 0.5g/l。優選聚氧乙烯月桂醚含量為0.8g/l，三乙醇胺含量為0.3g/l。進一步，所述穩定劑的劑型為液體劑型。進一步，胱抑素C膠乳包被抗體在組合物中的含量為10ml/l。進一步，所述pH值為5.8-6.2。
作為本發明的第三方面，一種胱抑素C膠乳包被抗體的穩定劑的制備方法，其特征在
于:
(一)原料的準備，按照配方稱取原料:
(1)甘油含量4.8-5.2g/l，
(2)緩沖液18-22mmol/l，
(3)表面活性劑0.3g/廣l.0g/1，
(4)牛血清白蛋白0.7-1.3g/l，以及
(5)pH值調整劑；
(二)混合,原料的添加順序為:甘油、緩沖液、表面活性劑、牛血清白蛋白，每種原料溶解后再添加另外一種物質；
(三)待上述原料溶解后，然后使用pH值調整劑調節pH；
(四)最后加入胱抑素C膠乳包被抗體。進一步，胱抑素C膠乳包被抗體在穩定劑中的含量為10ml/l。進一步，所述pH值調整劑為lmol/1氫氧化鈉或lmol/1 HCl。
作為本發明的第四方面，一種含有提高胱抑素C膠乳包被抗體的穩定性的組合物的用途，其特征在于:用于增加胱抑素C膠乳包被抗體的穩定性。
作為本發明的第五方面，一種胱抑素C膠乳包被抗體的穩定劑的用途，其特征在于:用于制備胱抑素C檢測試劑盒。所述穩定劑用于配制胱抑素C生化檢測試劑。本發明的有益效果:
未采用本穩定劑時，在相同儲存條件下保持期僅為為12個月。本發明通過將甘油、緩沖液、表面活性劑、牛血清白蛋白和PH值調整劑應用于提高胱抑素C膠乳包被抗體的穩定性，顯著提高了胱抑素生化試劑的穩定性，在常規冷藏儲存條件下保持期可達到20個月。
本發明的表面活性劑選用聚氧乙烯月桂醚和三乙醇胺，它們同屬于非離子表面活性劑，溶于水時不發生解離，其分子中的親油基團與離子型表面活性劑的非離子表面活性劑基團大致相同，其親水基團主要是由具有一定數量的含氧基團(如羥基和聚氧乙烯鏈)構成，所以能進一步增加穩定性。
具體實施方式
以下結合具體實施例，對本發明作進步說明。應理解，以下實施例僅用于說明本發明而非用于限定本發明的范圍。
本發明可用于胱抑素C試劑盒中試劑2的配制方法，與試劑I共同組成一個完整的試劑盒。其中，本發明涉及的胱抑素C試劑盒試劑I的配方為:PEG含量為3%，PIPES含量為 SOmmoI / I, proclin 300 2g/l,pH=7.9。
試劑2中存在的甘油為市售產品，分析純。
甘氨酸，市售產品，分析純。
表面活性劑:聚氧乙烯月桂醚、三乙醇胺，均為市售產品，化學純。
聚氧乙烯月桂醚和三乙醇胺，它們同屬于非離子表面活性劑，溶于水時不發生解離，其分子中的親油基團與離子型表面活性劑的非離子表面活性劑基團大致相同，其親水基團主要是由具有一定數量的含氧基團(如羥基和聚氧乙烯鏈)構成。
牛血清白蛋白，市售產品，蛋白含量不低于95%。
實施例1在胱抑素C試劑盒中的應用 1、胱抑素C膠乳包被抗體的穩定劑的制備: (I)準確稱量甘油lg，甘氨酸1.5g，聚氧乙烯月桂醚0.Sg，三乙醇胺0.3 g，牛血清白蛋白I g。
(2)然后按照以上稱量順序進行溶解，不可用力攪拌。
(3)然后使用lmol/1鹽酸或氫氧化鈉將其pH調至6.0。
(4)再加入IOml已經制備好的胱抑素C膠乳包被抗體(胱抑素C抗體和膠乳通過化學交聯反應制得)，使用前使用超聲波分散均勻。
2、保持期的檢測 在2 8°C保存，隔3個月檢測一次，采用透射比濁法在生化分析儀上進行測試。檢測結果與新制備的試劑，偏差在10%之內，保持期可達到二十個月。
實施例2在胱抑素C試劑盒中的應用 1、胱抑素C膠乳包被抗體的穩定劑的制備: (I)準確稱量甘油lg，甘油lg，甘氨酸1.5g，聚氧乙烯月桂醚0.5g，三乙醇胺0.2 g，牛血清白蛋白I g。
(2)然后按照以上稱量順序進行溶解，不可用力攪拌。
(3)然后使用lmol/1鹽酸或氫氧化鈉將其pH調至6.0。
(4)再加入IOml已經制備好的胱抑素C膠乳包被抗體(使用胱抑素C膠乳包被抗體前超聲波分散均勻)。
2保存期的檢測其余同實施例1。
對比例I 通過對比試驗，未加本發明制備的穩定劑的乳酸脫氫酶試劑盒在相同條件下僅可保持十二個月。
上述制備的胱抑素C試劑2可以和試劑I組成胱抑素C測定試劑盒，本試劑在2 8°C保持期，從未加穩定劑的胱抑素C試劑盒的十二個月提高到到20個月。
本發明制備的試劑盒的其他指標也能夠達到同類產品要求。如檢測誤差能夠達到10%以內。穩定期能夠保持到20個月。
以上對本發明的具體實施方式
進行了說明，但本發明并不以此為限，只要不脫離本發明的宗旨，本發明還可以有各種變化。
權利要求
1.一種含有提高胱抑素C膠乳包被抗體的穩定性的組合物，其特征在于:其配方包括以下物質: (1)甘油含量4.8-5.2g/l， (2)緩沖液18-22mmol/l， (3)表面活性劑0.3g/廣l.0g/1， (4)牛血清白蛋白0.7-1.3g/l，以及 (5)pH值調整劑。
2.根據權利要求1所述的組合物，其特征在于:所述緩沖液為甘氨酸緩沖液或甘氨酸鹽緩沖液，所述甘氨酸或甘氨酸鹽的含量為18-22mmol/l。
3.根據權利要求1所述的組合物，其特征在于:所述表面活性劑為非離子表面活性劑聚氧乙烯月桂醚和三乙醇胺，其中聚氧乙烯月桂醚含量為0.5g/l 1.0g/Ι，三乙醇胺含量為 0.2g/l 0.5g/l。
4.根據權利要求1所述的組合物，其特征在于:胱抑素C膠乳包被抗體在組合物中的含量為10ml/l。
5.一種含有如權利要求f 4任一項所述的提高胱抑素C膠乳包被抗體的穩定性的組合物的穩定劑，其配方包括以下物質: (1)甘油含量4.8-5.2g/l， (2)緩沖液18-22mmol/l， (3)表面活性劑0.3g/廣l.0g/1， (4)牛血清白蛋白0.7-1.3g/l，以及 (5)pH值調整劑。
6.根據權利要求5所述的穩定劑，其特征在于:所述表面活性劑為非離子表面活性劑聚氧乙烯月桂醚和三乙醇胺，其中聚氧乙烯月桂醚含量為0.5g/l 1.0g/Ι，三乙醇胺含量為 0.2g/l 0.5g/l。
7.—種如權利要求5所述的胱抑素C膠乳包被抗體的穩定劑的制備方法，其特征在于: (一)原料的準備，按照配方稱取原料: (1)甘油含量4.8-5.2g/l， (2)緩沖液18-22mmol/l， (3)表面活性劑0.3g/廣l.0g/1， (4)牛血清白蛋白0.7-1.3g/l，以及 (5)pH值調整劑； (二)混合,原料的添加順序為:甘油、緩沖液、表面活性劑、牛血清白蛋白，每種原料溶解后再添加另外一種物質； (三)待上述原料溶解后，然后使用pH值調整劑調節pH； (四)最后加入胱抑素C膠乳包被抗體。
8.根據權利要求7所述的制備方法，其特征在于:胱抑素C膠乳包被抗體在穩定劑中的含量為10ml/l。
9.根據權利要求7所述的制備方法，其特征在于:所述pH值調整劑為lmol/1氫氧化鈉或 lmol/1 HCl。
10.一種如 權利要求5所述的胱抑素C膠乳包被抗體的穩定劑的用途，其特征在于:用于制備胱抑素C檢測試劑盒。
全文摘要
本發明提供了一種含有提高胱抑素C膠乳包被抗體的穩定性的組合物、穩定劑。本發明通過使用包括牛血清白蛋白、甘油、緩沖液、表面活性劑的穩定劑而提高胱抑素C膠乳包被抗體穩定性。本發明還公開了其制備方法和用途，本發明可用于制備胱抑素C檢測試劑盒。采用本發明在常規冷藏儲存條件下保持期可達到20個月。
文檔編號G01N33/531GK103217525SQ201310092160
公開日2013年7月24日 申請日期2013年3月21日 優先權日2013年3月21日
發明者王軍峰, 王會, 常萍 申請人:上海執誠生物科技股份有限公司