一種高效高靈敏度的生物大分子轉膜、染色系統和設備的制作方法
【專利摘要】本發明公開一種高效高靈敏度的生物大分子轉膜、染色系統，包括工作單元，其設有至少一個通道用于檢測分析樣品；和與工作單元相關聯的操作部分，其創建至少一個的染色或轉膜通道參數，每個染色或轉膜通道參數包括至少一次的電場循環次數；本發明還公開一種基于高效高靈敏度的生物大分子轉膜、染色系統的設備，包括基座和殼體，殼體外部設有操作面板，基座和殼體內部設有工作區及與工作區相連的系統電源和工作電路板，所述工作區至少設置一個抽拉式獨立工作室，所述工作室內安裝有提供電場的正負電極板。本發明所公開的可以利用電場驅動生物帶電粒子的運動控制生物大分子的快速染色和轉膜的系統或設備，同時還能保證生物檢測的高靈敏度的要求。
【專利說明】一種高效高靈敏度的生物大分子轉膜、染色系統和設備
【技術領域】
[0001]本發明涉及一種生物檢測設備【技術領域】，特別是涉及一種利用電場驅動生物或者其他帶電粒子的運動實現高效高靈敏度的生物大分子轉膜、染色系統及設備。
【背景技術】
[0002]在直流電場中，帶電粒子向帶符號相反的電極移動的現象稱為電泳(electropho-resis)。1809年俄國物理學家Pe H ce首先發現了電泳現象，但直到1937年瑞典的Tiselius建立了分離蛋白質的界面電泳(boundary electrophoresis)之后，電泳技術才開始應用。本世紀60-70年代，當濾紙、聚丙烯酰胺凝膠等介質相繼引入電泳以來，電泳技術得以迅速發展。豐富多彩的電泳形式使其應用十分廣泛，除了用于小分子物質的分離分析外，最主要用于蛋白質、核酸、酶，甚至病毒與細胞的研究，由于電泳設備簡單，操作方便，具有高分辨率及選擇性特點，已成為醫學檢驗中常用的技術。
[0003]生物多聚物如肽、蛋白質、核酸、寡糖等，或者其混合物通過凝膠電泳分析，通常目的樣品被裝載在一個介質中，如聚丙烯酰胺凝膠，根據分子大小、電荷和其他物理性質的差異，在電場中遷移得到不同的帶，電泳后條帶通過生物大分子與染色試劑結合后被檢測或者將這些生物多聚物轉移到NC、PVDF或者尼龍膜上進行下一步的分析實驗。其中，在生物多聚物染色方面，大量染色方法和試劑被開發出來用于染色如凝膠這樣的介質中的生物大分子，這些試劑可以分為四種:第一種染色試劑包括結合到聚合物上的有機染料，如考馬斯亮藍染色試劑，使蛋白帶變成藍色從而可通過肉眼被觀察到；第二種染色試劑包括結合到聚合物上的熒光染料，如EB結合DNA或RNA，當紫外線照射時，使DNA或RNA呈紅色；第三種染色試劑包括銀染試劑；第四種是染色背景的試劑，即被稱為負染。這些染料大多亦帶有電荷，可在直流電場中移動。由于影響電泳遷移率的因素主要有電場強度、溶液的PH值及溶液的離子強度等有關，因此生物大分子與染料在施加電場的介質中的遷移率并不相同，生物大分子分子較大，在電場中移動緩慢，在限定的時間內不會從介質中移出，有機染料分子相對生物大分子分子來的小得多，未與生物大分子分子結合的染料分子可迅速從介質中移出，因此可以在同一電場中通過使染料從介質中移出而生物大分子(結合了染料)保留在介質中的方式實現生物大分子的顯色，從而可以在短時間內得到高分辨率、背景影響小甚至無背景的生物大分子的分析圖像，但若染料與生物大分子僅經過一次的相遇結合，對一些靈敏度要求比較高的實驗，則難以滿足要求，甚至在檢測中容易出現漏檢的情況。
[0004]隨著生物醫學等學科的快速發展，在生物大分子檢測技術方面也在迅速提升，但目前市場上尚未有一套系統或設備可利用電場驅動生物帶電粒子的運動控制生物大分子的快速染色和轉膜，并同時實現高靈敏度的要求。
【發明內容】
[0005]本發明所要解決的技術問題是針對現有技術的不足，提供一種可以利用電場驅動生物帶電粒子的運動控制生物大分子的快速染色和轉膜的系統，同時還能保證生物檢測的高靈敏度的要求。
[0006]本發明還提供了一種利用該系統的高效高靈敏度的生物大分子轉膜、染色設備。
[0007]本發明的目的可以通過下列技術方案來實現:
一種高效高靈敏度的生物大分子轉膜、染色系統，包括工作單元，其設有至少一個通道用于檢測分析樣品；和
與工作單元相關聯的操作部分，其創建至少一個的染色或轉膜通道參數，優選1-10個，更優選1-4個，每個染色或轉膜通道參數包括至少一次的電場循環次數，優選1-10次，更優選2-5次。
[0008]多通道參數的同時設置，可以實現不同樣品的生物大分子的染色或轉膜，電場循環次數的選擇，可以根據不同實驗的要求調整染料重復往返穿過待染色的生物大分子的次數，在保證實驗高效的同時亦保證染色的靈敏度。
[0009]所述的操作部分，設置至少一項下述相關的參數:通道標號、染色/轉膜、Gel數目、工作時間、工作電壓、工作電流、信息確認、啟動/暫停、輸入數據的分析/處理。
[0010]上述參數的設置，特別是工作時間、工作電壓、工作電流的設置，可以根據不同實驗的要求調整染料流動的速度，提高實驗效率；結合通道標號、染色/轉膜、Gel數目等參數的設置可以同時將染色以及轉膜功能整合到一套系統中，實現一套系統同時進行染色轉膜過程。
[0011]進一步的，所述的加速檢測生物大分子系統還包括用于記錄操作及檢測結果數據的存儲設備，進行數據與狀態的存儲/導出，最方便的給客戶解決實驗上的問題。
[0012]進一步的，所述的加速檢測生物大分子系統還包括用于監控操作的正常運行以及判斷工作是否結束的監控系統。
[0013]通過監控系統可以判斷機器的工作單元中有沒有放入待分析樣品，如果沒有放入或者放入錯誤，機器不工作，以避免機器空載運行對機器的損害或放入錯誤機器工作導致的樣本的破壞，造成昂貴的生物樣品的浪費；還可以判斷機器工作是否完成，主要包括:機器按照設定的時間工作，時間到后結束工作并且提示工作結束或機器通過檢測機器本身的工作電流變化，判斷工作是否結束，結束工作后提示。
[0014]一種基于高效高靈敏度的生物大分子轉膜、染色系統的設備，包括基座和殼體，用于提供機器內部和外部支撐，殼體外部設有操作面板，基座和殼體內部設有工作區及與工作區相連的系統電源和工作電路板，所述工作區至少設置一個抽拉式獨立工作室，優選1-10個，更優選1-4個，所述工作室內安裝有提供電場的正負電極板。
[0015]多個獨立工作室的設置，可以多個工作參數獨立運行并同時進行，實現同一臺儀器多個樣品的染色或轉膜的同時進行，且互不干擾。
[0016]所述工作室底部安裝有托臺，所述正電極固定安裝托臺上；工作室上方安裝可打開的蓋子，蓋子上設有負電極及可向電極板及待分析的三明治結構均勻施壓的壓蓋鎖緊裝置。
[0017]所述的壓力鎖緊裝置由位于蓋子表面的轉輪、與轉輪固定連接的偏心輪及與偏心輪相對的卡子組成，所述偏心輪底部為楔型滑臺結構，所述卡子固定連接一壓板，所述壓板下方設有負電極或與負電極直接固定連接。
[0018]當旋轉位于蓋子表面的轉輪時，轉輪帶動下部分的偏心輪，將工作室蓋子鎖定，繼續旋轉轉輪，轉輪帶動下部楔狀滑臺，與卡子配合，使壓板上下移動，從而可以根據染色或轉膜三明治結構的厚度來調節壓力大小，使電極板與其中的染色或轉膜三明治結構能夠平整均勻緊密的接觸，進一步提高染色或轉膜的靈敏度。
[0019]壓板通過四只套有彈簧的等高螺栓與蓋子螺接，使壓板能夠平穩并且能夠感知下方三明治結構的阻力來自動分配壓力，從而確保電流的均勻分布。
[0020]所述的基于高效高靈敏度的生物大分子轉膜、染色系統的設備還包括顯示面板、工作氣體排出口和凈化裝置，其中，所述的顯示面板為TFT液晶或觸摸液晶屏，所述的凈化裝置位于工作氣體排出口內測，里面裝有活性炭，
TFT液晶或觸摸液晶屏的顯示屏可清晰的顯示參數設置界面及實驗進行狀態，凈化裝置可以在廢氣排出之前對其進行凈化，減少環境污染和對操作人員的危害。
[0021]所述的操作面板為微動開關、觸摸按鍵、遙控、觸摸屏幕、薄膜按鍵中的任意一種。
[0022]所述的設備還包括染色耗材以及轉膜耗材，所述的染色耗材包括染色載體、染料和染色緩沖液，或已經侵含染料及染色緩沖液的染色載體；所述的轉膜耗材包括轉膜載體、膜和平衡緩沖液，或已經浸含平衡緩沖液的轉膜載體和膜。
[0023]所述的染色載體和轉膜載體為濾紙、凝膠或者就是純的液相；所述的染色緩沖液為一組，其中:與負電極相鄰的A部分主要包括(質量比)0.1%_3%的考馬斯亮藍R250(〇88-1?250)、(體積比)5%-50%的異丙醇和(體積比)1%_30%的乙酸，其余為水；優選為:0.1%的考馬斯亮藍R250 (CBB-R250)、20%的異丙醇、10%的乙酸和69.9%的水；與正電極相鄰的的B部分主要包括5-500 mmol/L的EDTA (乙二胺四乙酸)、5_500 mmol/L的Na2HPO4、5-500mmol/L的NaH2PO4和占溶液總體積1%_20%的醋酸，優選為:80mmol/L的EDTA,30mmol/L的Na2HP04、45mmol/L NaH2PO4和占溶液總體積10%醋酸；所述的平衡緩沖液主要包括:l-200mmol/L的三羥甲基氨基甲烷(Tris)和l-200mmol/L的N，N-二羥乙基甘氨酸(Bicine),優選 100mmol/L 的 Tris 和 100mmol/L 的 Bicine0
[0024]其中，染色緩沖液中A部分主要使得凝膠中的蛋白固定同時提供一個電離染料的液體環境，B部分主要提供適合的酸性環境；平衡緩沖液主要為了在蛋白質轉膜過程中提供一個恒定的電場。
[0025]本發明提供了一種高效高靈敏度的生物大分子轉膜、染色系統和設備，進一步說明，這個發明提供了一種高效高靈敏度的生物大分子轉膜、染色系統以及可以實現將PAGE中的生物大分子染色或者轉移的設備，使生物大分子的染色和轉膜過程在正負兩電極板之間在很短的時間內高靈敏度的完成，如介質中的多肽或蛋白，RNA，DNA，低聚糖或一個含有多肽，蛋白質，RNA，DNA，或低聚糖中一種或數種的復雜混合物，通過電場驅動染料分子進入介質來染色生物大分子，或者通過電場將其轉移到其他的載體上進行下一步的分析檢測。染色過程中，電場力驅動染料分子通過凝膠和生物大分子相互作用，從而使凝膠中的生物大分子被染色，一次電場循環次數就意味著染料與生物大分子的一次結合和分離，通過變動染色時的電場可以調整染料流動的速度和重復往返穿過待染色的生物大分子的次數，可針對不同的檢測目的實現不同的靈敏度，能夠高質量以及高速度的完成蛋白質染色，效果超過傳統以及目前市面上的產品以及方法；轉膜過程同樣在正負兩電極板之間完成，電場驅動蛋白質穿過凝膠到達膜上并且吸附在膜上，蛋白質的運動速度可以通過正負兩電極之間的電流大小進行調節，轉膜的時間可在10分鐘之內完成；本發明將染色以及轉膜功能整合到一臺設備中，實現一臺設備完成染色轉膜過程，可實現多通道同時進行，可以同時染色或轉膜或染色加轉膜的膠的數量大大增加，提高效率的同時節約了經費以及實驗室空間。另外，經實驗證明，本發明所提供的一種高效高靈敏度的生物大分子轉膜、染色系統和設備，其往復的電場循環可在同樣有限的載體上實現更優的生物大分子的分離效果。
[0026]綜上所述，本發明具有如下優點:
I)高效:應用電場驅動帶電離子的原理大大縮短染色和轉膜的時間，同時多通道同時進行染色、轉膜或二者同時進行，甚至還可同時進行生物大分子的分離，大大提高了實驗效率。
[0027]2) 靈敏:調整染料流動的速度和重復往返穿過待染色的生物大分子的次數，在保證實驗高效的同時亦保證染色的靈敏度或者生物大分子的良好的分離效果，另外，壓蓋縮緊裝置使電極板與其中的染色或轉膜三明治結構能夠平整均勻緊密的接觸，進一步提高染色或轉膜的靈敏度。
[0028]3) 經濟環保:將染色以及轉膜功能整合到一臺設備中，實現一臺設備完成染色轉膜過程，節約了經費以及實驗室空間，同時氣體凈化裝置可對廢氣進行凈化，減少環境污染和對操作人員的危害。
【專利附圖】
【附圖說明】
[0029]圖1為本發明所述的加速生物大分子染色和轉膜的系統的流程示意圖；
圖2為本發明所述的加速生物大分子染色和轉膜的設備的外部結構示意圖；
圖3為本發明所述的加速生物大分子染色和轉膜的設備的鎖定裝置示意圖；
圖4為本發明所述的加速生物大分子染色和轉膜的設備的鎖定裝置偏心輪底部結構示意圖；
圖5為本發明所述的加速生物大分子染色和轉膜的設備的鎖定裝置卡子與壓板結構示意圖；
圖6為本發明所述的加速生物大分子染色和轉膜的設備的壓蓋結構示意圖；
圖7為本發明所述的壓蓋結構中螺栓的結構示意圖；
圖8-12為操作面板操作時的顯示示意圖；
圖13為染色過程中位于電極之間的三明治結構的示意圖；
圖14為上下電極在時間方向上的交替電場分布圖；
圖15為轉膜過程中位于電極之間的三明治結構的示意圖；
圖16為傳統方法(濕法)轉膜后孵育曝光的結果；
圖17為本發明所述的系統和儀器快速轉膜后孵育曝光的結果；
圖18為用傳統染色方法進行染色的實驗結果；
圖19為本發明所述的系統和儀器快速染色的實驗結果；
附圖中:1基座，2殼體，3薄膜按鍵，4是TFT液晶，5工作區，6工作室，7凹槽，8數據輸出接口，9電路散熱口，10總電路開關，11蓋子，12壓蓋鎖緊裝置，13轉輪，14偏心輪，15楔形滑臺，16卡子，17壓板，18彈簧，19螺栓。
【具體實施方式】
[0030]下列實施例對本發明作進一步說明，必須指出的是，本發明不僅限于此:
實施例1
一種可以針對不同的檢測目的實現不同的靈敏度的高效高靈敏度的生物大分子轉膜、染色系統，包括工作單元，其設有2-6個通道用于檢測分析樣品；和與工作單元相關聯的操作部分，其相應的創建2-6個的染色或轉膜通道參數，每個染色或轉膜通道參數根據檢測目的的不同，所要求的靈敏度不同來設置不同的電場循環次數。
[0031]實施例2
如圖1所示的一種加速檢測生物大分子的系統，其包括工作單元，其設有4個通道用于檢測分析樣品；與工作單元相關聯的操作部分，其可同時創建4個的染色或轉膜通道參數，如:通道標號、染色/轉膜、Gel數目、工作時間、工作電壓、工作電流、電場循環次數、信息確認、啟動/暫停、輸入數據的分析/處理等；監控設備，用于監控操作的正常運行，當機器的工作單元中具體某個通道沒有放入待分析樣品，或者放入錯誤，機器不工作并進行提示，還可以判斷每個通道的工作是否完成，主要包括:機器工作按照設定的時間工作，時間到后結束工作并且提示工作結束或機器通過檢測機器本身的工作電流變化，判斷工作是否結束，結束工作后提示；存儲設備，記錄操作及檢測結果數據，該數據可被外部讀出器讀取，如:Time〈2012，04.20.，21:39:11>: start main, search Cell.Time〈2012，04.20.，21:39:11>: finded cell AjB Time<2012, 04.20., 21:39:11>: enter main funct1n.Time<2012, 04.20., 21:49:10>: cell A staining, one mini gel，7 min;
Time<2012, 04.20., 21:56:11>: running, waiting data.Time〈2012，04.20.，21:56:12>: finished
Time〈2012，0 4.20.，21:49:10>: start main, search Cell.Time〈2012，04.20.，21:49:10>: finded cell A，B.Time<2012, 04.20., 21:49:11>: enter main funct1n.Time<2012, 04.20.,21:50:11>: cell B transfer, one mini gel,9 min;
Time<2012, 04.20., 21:50:12>: running, waiting data.Time<2012, 04.20., 21:51:11>: Error, over current.實施例3
一種基于高效高靈敏度的生物大分子轉膜、染色系統的設備，包括基座和殼體，用于提供機器內部和外部支撐，殼體頂部設有觸摸按鍵，基座和殼體內部設有工作區及與工作區相連的系統電源和工作電路板；工作區內設置2-6個抽拉式獨立的工作室，工作室內安裝有提供電場的正負電極板。
[0032]實施例4
一種基于高效高靈敏度的生物大分子轉膜、染色系統的設備，包括基座和殼體，用于提供機器內部和外部支撐，殼體頂部設有觸摸按鍵，基座和殼體內部設有工作區及與工作區相連的系統電源和工作電路板；工作區內設置2-6個抽拉式獨立的工作室，工作室底部安裝有托臺，正電極固定安裝托臺上；工作室上方安裝可打開的蓋子，蓋子上設有負電極及可向電極板及待分析的三明治結構均勻施壓的壓蓋鎖緊裝置。
[0033]實施例5 如圖2-5所示的一種基于高效高靈敏度的生物大分子轉膜、染色系統的設備，包括基座I和殼體2，用于提供機器內部和外部支撐，殼體2上部右側設有薄膜按鍵3和TFT液晶4，基座I和殼體2內部設有工作區5及與工作區5相連的系統電源和工作電路板，工作區5設置4個抽拉式獨立的工作室6，可以同時染色或轉膜或染色加轉膜的膠的數量最大為:mini Gel，8片或midi Gel 4片，工作室6抽拉面設有凹槽7，便于手持抽拉，工作室底部安裝有托臺，正電極固定安裝托臺上；工作室上方安裝可打開的蓋子11，蓋子11上設有可向電極板及待分析的三明治結構均勻施壓的壓蓋鎖緊裝置12，壓力鎖緊裝置12由位于蓋子11表面的轉輪13、與轉輪13固定連接的偏心輪14及與偏心輪14相對的卡子16組成，偏心輪14底部為楔型滑臺15結構，卡子16固定于一塑料壓板17上，壓板17通過四只套有彈簧18的等高螺栓19與蓋子11螺接，使壓板17能夠平穩并且能夠感知下方三明治結構的阻力來自動分配壓力，從而確保電流的均勻分布。金屬負電極通過側邊的卡口與蓋子11的塑料壓板固定，塑料壓板17通過等高螺絲與蓋子11固定；設備左后方還設有工作氣體排出口和凈化裝置，凈化裝置位于工作氣體排出口內側，里面裝有活性炭，儀器右側還設有數據輸出接口 8及電路散熱口 9，右下方設有總電路開關10，底部設有四肢橡膠墊腳。
[0034]實施例6
參見實施例5所述的儀器，本實施例所述的儀器還配套有染色耗材以及轉膜耗材，其中染色耗材為已經侵含染料及染色緩沖液的濾紙或凝膠，轉膜耗材為已經浸含平衡緩沖液的濾紙或凝膠，及膜；其中，染色緩沖液為一組:與負電極相鄰的A部分主要包括0.1%的考馬斯亮藍R250 (CBB-R250)、20%的異丙醇、10%的乙酸和69.9%的水；與正電極相鄰的的B部分主要包括80mmol/L的EDTA、30mmol/L的Na2HP04、45mmol/L NaH2PO4和占溶液總體積10%的醋酸；平衡緩沖液主要包括:濃度均為lOOmmol/L的Tris和Bicine。
[0035]本實施例所述的儀器，其系統還設置有一套工作電壓、工作電流及電場循環次數等關鍵參數的默認設置，在使用配套染色耗材及轉膜耗材時，可直接使用此默認參數，更加方便快捷。
[0036]實施例7
實施例6所述的儀器其余參數設置流程及操作時操作面板的顯示內容:
I)如圖6所示，機器工作時會自動檢測儀器的工作室，有工作任務的工作室會在顯示面板上顯示Staining/Transfer,操作者可以選擇工作類型，沒有工作任務的接口會顯示None,在如圖6的情況下，Cell A的stainging為默認焦點，按下Enter鍵,進入下一個設置窗口。
[0037]2)Cell A顯示如圖7所示,操作者選擇需要對哪一種Gel處理,默認焦點是OneMini Gel,按下Enter鍵,進入下一個設置窗口。
[0038]3)Cell A顯示如圖8所示，操作者可以通過操作面板的上下左右鍵設置儀器工作時間，默認焦點為7min，按下Enter鍵，進入下一個設置窗口。
[0039]4)提示信息為步驟I) -3)所有操作設置的確認提示，如圖9所示，默認的焦點為Start,按下Enter鍵,該工作室開始工作，同時進入下一個界面。
[0040]5)工作時如圖10所示,顯示為工作種類+活動條+倒計時時間+暫停符號,在這種狀態下，暫停符號為焦點，按下Enter，該工作室暫停工作；同時通過上下鍵可以選擇設置其他的工作室。
[0041]實施例8
本發明所公開的基于高效高靈敏度的生物大分子轉膜、染色系統的設備的染色或轉膜過程操作流程:
1.染色過程
如圖11所示，在儀器工作室的上下電極之間依次放入下層濾紙、凝膠、上層濾紙，合上儀器工作室的蓋子并且推入工作區中，設置工作室的通道參數并啟動儀器運行。其中:
下層濾紙:下層濾紙主要提供特定的緩沖體系使得電場能在這個三明治結構中均勻穩定的分布，同時提供使得蛋白質帶正電荷的環境。其中的醇成分使得凝膠表面收縮，蛋白質或者核酸不能從凝膠中跑出來。
[0042]凝膠:凝膠是生物大分子的主要載體，主要有聚丙烯酰胺凝膠和瓊脂糖凝膠，生物大分子主要是蛋白質和核酸。
[0043]上層濾紙:主要提供特定的緩沖體系使得電場能在這個三明治結構中均勻穩定的分布，同時，其中的醇成分使得膠表面收縮，帶正電的蛋白質不能從凝膠中跑出來。其中也還有可以染色蛋白質或者核酸的負電荷染料。
[0044]如圖12所示，儀器工作時，上方電極提供電場的負極，下層電極提供電場的正極，負電性的染料分子從上而下從上層濾紙穿過凝膠到達下層濾紙；A:染料分子到達下層濾紙后，機器會提供一個反向電場，通過控制電場持續時間，使得染料分子從下層濾紙到達凝膠中隨后機器再提供一個正向電場，使得染料分子再次回到下層濾紙中。重復AB步驟3到10次，最后機器提供一個持續的正向電場使得多余染料全部落在下層濾紙中，這樣可以使得染色的靈敏度提高，同時不會使得時間過短而使染色靈敏度下降。
[0045]2.轉膜過程
如圖13所示，在儀器的上下電極之間依次放入下層濾紙、膜、凝膠、上層濾紙，合上儀器工作室的蓋子并且推入工作區中，按照實施例5所示的儀器的操作流程控制此工作單元。其中:
下層濾紙:下層濾紙主要提供特定的緩沖體系使得電場能在這個三明治結構中均勻穩定的分布，同時提供使得蛋白質帶負電荷的環境。
[0046]膜:主要為PVDF膜和NC膜，膜可以是蛋白質吸附在其表面，蛋白質等大分子不能穿過膜。
[0047]凝膠:凝膠是生物大分子的主要載體，主要有聚丙烯酰胺凝膠和瓊脂糖凝膠，生物大分子主要是蛋白質和核酸。
[0048]上層濾紙:主要提供特定的緩沖體系使得電場能在這個三明治結構中均勻穩定的分布。
[0049]儀器工作時，上層電極持續提供電場的負極，下層電極持續提供電場的正極，較大的電流使得蛋白質或者其他的帶負點的粒子從凝膠中快速的被轉移出來，同時與膜的表面結合。蛋白質或者其他的帶負電的生物分子與膜結合后可以進行下一步的實驗。
[0050]本發明進行蛋白質轉膜、染色及分離實驗的實驗結果如下:
1.轉膜實驗
實驗樣品為 HiS-蛋白，樣量為 I(A):5ul，2(B):4ul, 3(C):3ul, 4(D):2ul,5(E):lul, 6(F):0.5ul, 7(E):0.lul，相同條件電泳之后，分別用傳統方法(濕法)轉膜100分鐘，和用本發明所述的系統及儀器快速轉膜10分鐘，轉膜后兩片膜在一起以同樣的條件孵育1、2抗體，暗室曝光30秒，圖14為傳統方法(濕法)轉膜后孵育曝光的結果，圖15為本發明所述儀器快速轉膜后孵育曝光的結果。結果表明，用本發明所述的系統及儀器，在方便快捷提高轉膜效率的同時，轉膜靈敏度相對于傳統方法來說，亦有明顯改進。
[0051] 2.染色實驗
實驗樣品為牛血清白蛋白，上樣量為:l(A):1000ng，2(B):300ng, 3(C):100ng,4 (D): 30ng, 5 (E):1Ong, 6 (F): 3ng，圖16采用傳統染色方法進行染色的實驗結果:染色Ih,然后脫色3h (分三次，第一次0.5h，第二次Ih,第3次1.5h)，其中:染色液:0.1% R250，50%甲醇，10%乙酸，40%水；脫色液:50%甲醇，10%乙酸，40%水。圖17為用本發明所述的系統及儀器染色6min的結果。結果表明，用本發明所述的系統及儀器大大縮短了染色時間，且染色靈敏度亦比傳統染色法明顯提高，相同樣品傳統方法可檢測出上樣量為30ng，而采用本發明所述的系統及儀器可檢測至10ng，靈敏度可達傳統方法的三倍。
【權利要求】
1.一種高效高靈敏度的生物大分子轉膜、染色系統，包括工作單元，其設有至少一個通道用于檢測分析樣品；和 與工作單元相關聯的操作部分，其創建至少一個的染色或轉膜通道參數，每個染色或轉膜通道參數包括至少一次的電場循環次數。
2.根據權利要求1所述的高效高靈敏度的生物大分子轉膜、染色系統，其特征在于:所述的操作部分，設置至少一項下述相關的參數:通道標號、染色/轉膜、Gel數目、工作時間、工作電壓、工作電流、電場循環次數、信息確認、啟動/暫停、輸入數據的分析/處理。
3.根據權利要求1或2任一項所述的高效高靈敏度的生物大分子轉膜、染色系統，其特征在于:所述的加速檢測生物大分子系統還包括用于記錄操作及檢測結果數據的存儲設備。
4.根據權利要求1或2任 一項所述的高效高靈敏度的生物大分子轉膜、染色系統，其特征在于:所述的加速檢測生物大分子系統還包括用于監控操作的正常運行以及判斷工作是否結束的監控系統。
5.一種基于權利要求1所述的高效高靈敏度的生物大分子轉膜、染色系統的設備，包括用于提供機器內部和外部支撐的基座和殼體，殼體外部設有操作面板，基座和殼體內部設有工作區及與工作區相連的系統電源和工作電路板，所述工作區至少設置一個抽拉式獨立工作室，所述工作室內安裝有提供電場的正負電極板。
6.根據權利要求5所述的基于高效高靈敏度的生物大分子轉膜、染色系統的設備，其特征在于:所述工作室底部安裝有托臺，所述正電極固定安裝托臺上；工作室上方安裝可打開的蓋子，蓋子上設有負電極及可向電極板及待分析的三明治結構均勻施壓的壓蓋鎖緊裝置。
7.根據權利要求6所述的基于高效高靈敏度的生物大分子轉膜、染色系統的設備，其特征在于:所述的壓力鎖緊裝置由位于蓋子表面的轉輪、與轉輪固定連接的偏心輪及與偏心輪相對的卡子組成，所述偏心輪底部為楔型滑臺結構，所述卡子固定連接一壓板，所述壓板下方設有負電極或與負電極直接固定連接。
8.根據權利要求7所述的基于高效高靈敏度的生物大分子轉膜、染色系統的設備，其特征在于:所述壓板通過四只套有彈簧的等高螺栓與蓋子螺接。
9.根據權利要求5-8任一項所述的基于高效高靈敏度的生物大分子轉膜、染色系統的設備，其特征在于:所述的設備還包括顯示面板、工作氣體排出口和凈化裝置，其中，所述的顯示面板為TFT液晶或觸摸液晶屏，所述的凈化裝置位于工作氣體排出口內測，里面裝有活性炭。
10.根據權利要求5-8任一項所述的基于高效高靈敏度的生物大分子轉膜、染色系統的設備，其特征在于:所述的操作面板為微動開關、觸摸按鍵、遙控、觸摸屏幕、薄膜按鍵中的任意一種。
【文檔編號】G01N1/30GK104075916SQ201310025508
【公開日】2014年10月1日 申請日期:2013年1月22日 優先權日:2012年7月17日
【發明者】不公告發明人 申請人:南京金斯瑞生物科技有限公司