用于阻止衍射圖樣的流式細胞儀系統和方法
【專利摘要】本發明提供了具有中間角度散射檢測能力的流式細胞儀系統。在一些方面，提供了包括中間角度散射(IAS)光檢測器的系統，所述IAS光檢測器被定位成測量從流式細胞儀發射的中間角度散射。所述系統還包括掩模，所述掩模被安置在所述IAS光檢測器的一部分上且被定位在所述流動室和所述IAS光檢測器之間以至少覆蓋所述IAS光檢測器的中心部分，從而阻止在所述檢測器觀察到衍射圖樣。在一些實例中，所述衍射圖樣由照射所述樣品的扁平光束輪廓產生。也提供了用于配置流式細胞儀以阻止由以下產生的衍射圖樣的方法：(1)照射流式細胞儀液體樣品的扁平激光束輪廓，或(2)流式細胞儀中鞘液和液體樣品之間不匹配的折射指數。
【專利說明】用于阻止衍射圖樣的流式細胞儀系統和方法
[0001]相關申請的交叉參考
[0002]本申請請求2011年12月29日提交的美國臨時專利申請序列號61/581，462的優先權，所述申請的公開內容以引用的方式全部并入本文。
【背景技術】
[0003]提供一種流式細胞儀系統。所述系統包括使水動力聚焦的液體樣品流過詢問區域的流動室；被定位成用光束照射詢問區域的光源；和安置于光源和流動室之間的光束成型光學器件。光束成型光學器件操縱光束并創建在詢問區域照射液體樣品的水平扁平光束輪廓。系統包括被定位成當照射液體樣品時測量從液體樣品發射的中間角度散射的中間角度散射(IAS)光檢測器。系統還包括掩模，所述掩模被水平安置成在IAS光檢測器的一部分上，在流動室和IAS光檢測器之間，并至少覆蓋IAS光檢測器的中心部分，從而阻止由照射液體樣品的扁平光束輪廓產生的水平衍射圖樣。
發明概要
[0004]本公開一般提供一種流式細胞儀系統，所述流式細胞儀系統包括使水動力聚焦的液體樣品流過詢問區域的流動室；被定位成用光束照射詢問區域的光源；安置于光源和流動室之間的多個光束成型光學器件，其中光束成型光學器件操縱光束并創建在詢問區域照射液體樣品的水平扁平光束輪廓；被定位成當照射液體樣品時測量從液體樣品發射的中間角度散射的中間角度散射(IAS)光檢測器；和掩模，所述掩模被水平安置成在IAS光檢測器的一部分上并被定位在流動室和IAS光檢測器之間以至少覆蓋IAS光檢測器的中心部分，從而阻止由照射液體樣品的扁平光束輪廓產生的水平衍射圖樣。
[0005]在一些實施方案中，光源是激光。
[0006]在一些實施方案中，流式細胞儀還包括用于汲取用以水動力聚焦液體樣品的鞘液的鞘液源。
[0007]在一些實施方案中，鞘液是水。
[0008]在一些實施方案中，掩模選自由以下組成的組:帶、阻塞棒和光刻阻塞。
[0009]在一些實施方案中，IAS光檢測器包括兩個同心檢測器環。
[0010]在一些實施方案中，第一檢測器環測量約2-7度之間的中間角度散射。
[0011]在一些實施方案中，第二檢測器環測量約7-11度之間的中間角度散射。
[0012]在一些實施方案中，兩個同心檢測器環包括第一同心檢測器環和第二同心檢測器環，且IAS光檢測器包括同心安置在第一和第二同心檢測器環中的中心檢測器環。
[0013]在一些實施方案中,第一同心檢測器環具有大約4_的內徑和大約7.6mm的外徑，且第二同心檢測器環具有大約9.6mm的內徑和大約13_的外徑。
[0014]在一些實施方案中,掩模是阻塞棒。
[0015]在一些實施方案中，阻塞棒是有孔鏡，所述有孔鏡被定位成允許測量通過阻塞棒中的中心孔的軸向光損耗并把中間角度散射從流動室重定向到IAS光檢測器。[0016]在一些實施方案中，本公開提供一種流式細胞儀系統，所述流式細胞儀系統包括使水動力聚焦的液體樣品流過詢問區域的流動室；用于汲取用以水動力聚焦液體樣品的鞘液的鞘液源，其中鞘液是水；被定位成用光束照射詢問區域的光源；安置于光源和流動室之間的多個光束成型光學器件，其中光束成型光學器件操縱光束；被定位成當照射液體樣品時測量從液體樣品發射的中間角度散射的中間角度散射(IAS)光檢測器；和掩模，所述掩模被安置成在IAS光檢測器的一部分上并被定位在流動室和IAS光檢測器之間以至少覆蓋IAS光檢測器的中心部分，從而阻止當照射液體樣品時由鞘液產生的衍射圖樣。
[0017]在一些實施方案中，光源是激光。
[0018]在一些實施方案中，多個光束成型光學器件創建在詢問區域照射液體樣品的水平扁平光束輪廓。
[0019]在一些實施方案中,掩模是帶、阻塞棒，或光刻阻塞。
[0020]在一些實施方案中，IAS光檢測器包括兩個同心檢測器環。
[0021]在一些實施方案中，第一檢測器環測量約2-7度之間的中間角度散射。
[0022]在一些實施方案中，第二檢測器環測量約7-11度之間的中間角度散射。
[0023]在一些實施方案中，兩個同心檢測器環包括第一同心檢測器環和第二同心檢測器環，且IAS光檢測器包括同心安置在第一和第二同心檢測器環中的中心檢測器環。
[0024]在一些實施方案中,第一同心檢測器環具有大約4_的內徑和大約7.6mm的外徑，且第二同心檢測器環具有大約9.6mm的內徑和大約13_的外徑。
[0025]在一些實施方案中，掩模是阻塞棒。在一些實施方案中，阻塞棒是有孔鏡，所述有孔鏡被定位成允許測量通過阻塞棒中的中心孔的軸向光損耗并把中間角度散射從流動室重定向到IAS光檢測器。
[0026]在一些實施方案中，本公開提供一種用于阻止由照射流式細胞儀液體樣品的扁平激光束輪廓或流式細胞儀中鞘液和液體樣品之間不匹配的折射指數產生的衍射圖樣的系統，所述系統包括被定位成當照射液體樣品時測量從液體樣品發射的中間角度散射的中間角度散射(IAS)光檢測器；和掩模，所述掩模安置成在IAS光檢測器的一部分上并至少覆蓋IAS光檢測器的中心部分，從而阻止衍射圖樣。
[0027]在一些實施方案中，掩模被水平安置在IAS光檢測器上。在一些實施方案中,掩模是帶、阻塞棒，或光刻阻塞。
[0028]在一些實施方案中，IAS光檢測器還包括兩個同心檢測器環。在一些實施方案中，第一檢測器環測量約2-7度之間的中間角度散射。在一些實施方案中，第二檢測器環測量約7-11度之間的中間角度散射。在一些實施方案中，兩個同心檢測器環包括第一同心檢測器環和第二同心檢測器環，且IAS光檢測器包括同心安置在第一和第二同心檢測器環中的中心檢測器環。在一些實施方案中，第一同心檢測器環具有大約4mm的內徑和大約7.6_的外徑，且第二同心檢測器環具有大約9.6mm的內徑和大約13_的外徑。
[0029]在一些實施方案中，掩模是阻塞棒。在一些實施方案中，阻塞棒是有孔鏡，所述有孔鏡被定位成允許測量通過阻塞棒中的中心孔的軸向光損耗并把中間角度散射重定向到IAS光檢測器。
[0030]在一些實施方案中，本公開提供一種用于配置流式細胞儀以阻止由照射流式細胞儀液體樣品的扁平激光束輪廓或流式細胞儀中鞘液和液體樣品之間不匹配的折射指數產生的衍射圖樣的方法，所述方法包括:把掩模設置在中間角度散射(IAS)光檢測器的一部分上，所述IAS光檢測器被定位成當照射液體樣品時測量從液體樣品發射的中間角度散射，其中掩模至少覆蓋IAS光檢測器的中心部分，從而阻止衍射圖樣。
【專利附圖】
【附圖說明】
[0031]并入本文的附圖構成本說明書的一部分。與本書面描述一起，附圖進一步用于解釋所提供的系統和方法的原理并使相關領域技術人員能夠制造和使用所提供的系統和方法。在附圖中，相同的標號表示相同或功能相似的元件。
[0032]圖1示出根據一個實施方案的流式細胞儀系統的系統框圖。
[0033]圖2不出根據一個實施方案的垂直和水平方向上的散射光信號的圖。
[0034]圖3示出根據一個實施方案的安置在IAS檢測器上的掩模的圖。
[0035]圖4示出根據一個實施方案的帶槽的檢測器。
【具體實施方式】
[0036]在描述本公開的實施方案之前，應理解，本公開并不限于所述特定實施方案，因為所述實施方案當然可變化。也應理解，本文使用的術語僅用于描述特定實施方案的目的，而不旨在進行限制，因為本公開的實施方案的范圍僅由所附權利要求來限定。
[0037]本公開一般涉及血液學儀器和檢測流式細胞儀中的前向散射。在某些實施方案中，所提供的流式細胞儀系統通常包括:使水動力聚焦的液體樣品流過詢問區域的流動室；被定位成用光束照射詢問區域的光源；和安置于光源和流動室之間的光束成型光學器件。光束成型光學器件操縱光束并創建在詢問區域照射液體樣品的水平扁平光束輪廓。系統可包括被定位成當照射液體樣品時測量從液體樣品發射的中間角度散射的中間角度散射(IAS)光檢測器。例如液體樣品和鞘液之間的折射指數的差異的因素可在IAS檢測器產生衍射圖樣或波紋。平頂光束輪廓(本文也稱為“扁平光束輪廓”)也可在IAS檢測器創建衍射圖樣。衍射圖樣污染散射信號并提供不準確的中間角度散射測量。因此，系統還可包括掩模，所述掩模被水平安置在IAS光檢測器的一部分上(across a portion of the IAS lightdetector)，在流動室和IAS光檢測器之間，并至少覆蓋IAS光檢測器的中心部分，從而阻止由照射液體樣品的扁平光束輪廓產生的水平衍射圖樣。
[0038]本公開包括關于“水平”平頂光束輪廓的實施方案和描述一例如，其中“水平”光束輪廓是平頂輪廓且“垂直”光束輪廓是高斯曲線。應理解，術語“水平”和“垂直”通常用以提供相對軸方向并有助于理解。應理解，本公開的基本概念和原理也適用于其它實施方案，其中“垂直”光束輪廓是平頂輪廓且“水平”光束輪廓是高斯曲線。
[0039]圖1示出根據一個實施方案的流式細胞儀系統的系統框圖。系統100包括:光源101、光束成型光學器件102、聚焦透鏡103、流動室104、透鏡105、反射鏡106、軸向光損失(ALL)檢測器107，和IAS檢測器108。光源101例如可為激光，并提供進入光束成型光學器件102的激光束，光束成型光學器件102被設置于光源101和流動室104之間。激光束由光束成型光學器件102操縱以提供成形的光束，然后被聚焦透鏡103聚焦以命中流動室104的詢問區域109。在其它實施方案中，并不包括聚焦透鏡103，且光束成型光學器件102單獨提供適當成形的光束輪廓到詢問區域109上。[0040]在一個實施方案中，光束成型光學器件102操縱光束以創建在詢問區域109照射液體樣品的水平平頂光束輪廓。光束成型光學器件102例如可包括被配置以在與詢問區域109的交叉點產生平頂光束輪廓的透鏡的組合。光束成型光學器件102例如可創建具有形狀為高斯曲線的垂直光束輪廓和形狀為相對扁平輪廓的水平光束輪廓的光束。例如，在一個實施方案中，光束成型光學器件102可包括彼此垂直偏移的圓柱形透鏡和非圓柱形透鏡，使得產生水平平頂光束輪廓。在另一實施方案中，水平平頂輪廓由光束成型光學器件產生，所述光束成型光學器件包括創建期望輪廓的狹縫/阻塞。水平平頂光束輪廓例如在某些應用中可能是期望的，以提供更寬的流體流。
[0041]透鏡105和反射鏡106被提供在ALL檢測器107和IAS檢測器108之間。在示出的實施方案中，反射鏡106被設置或另外成形(例如，中心具有孔或洞以在ALL檢測器107進行軸向光損失檢測)，以垂直于IAS檢測器107反射IAS光，IAS檢測器107被定位成接收反射光。應理解，在其它實施方案中，不存在反射鏡106且IAS檢測器被設置為靠近ALL檢測器107 (即，并不垂直設置)。
[0042]樣品流體在流體鞘中被水動力聚焦(例如，注入流體鞘的中心)通過流動室104中的詢問區域109。例如，鞘液源可汲取用以水動力聚焦液體樣品的鞘液。在一個實施方案中，鞘液是水。來自光束成型光學器件102的聚焦光束以詢問區域109為目標并在詢問區域109照射液體樣品。當感興趣的樣品細胞或粒子攔截光源時，光被散射。散射光進入透鏡105并被反射鏡106 (例如，有孔鏡)反射，且被IAS檢測器108接收。因此，IAS檢測器108可用以當照射液體樣品時測量從液體樣品發射的中間角度散射。未被感興趣的細胞或粒子攔截的光通過透鏡105到達ALL檢測器107。ALL檢測器107例如可用以測量軸向光損失。
[0043]IAS檢測器108用以檢測并測量中間角度散射。在一個實施方案中，IAS檢測器108包括用以檢測中間角度散射的單個檢測器。在另一實施方案中，IAS檢測器108被分段且包括用作檢測各種散射角度的檢測端子的多個檢測器。散射光的示例性范圍是I度到15度，或縮小到2-10度，或3-7度。例如，IAS檢測器108可包括多于一個同心安置的檢測器環。應理解，在其它實施方案中，多個檢測器中的一個或多個檢測器可具有環以外的形狀。
[0044]在一個實施方案中，IAS檢測器包括兩個同心檢測器環。例如，第一同心檢測器環可測量2-7度之間的中間角度散射。例如，第二同心檢測器環可測量7-11度之間的中間角度散射。應理解，在其它實施方案中，角度范圍可變化。
[0045]也應理解，也可實施另外的檢測器。例如，在一個實施方案中，IAS檢測器108包括同心安置在兩個或三個同心檢測器環(例如上述兩個檢測器環)的中心中的中心檢測器。在一個實施方案中，中心檢測器也是同心檢測器環。應理解，在其它實施方案中，中心檢測器可具有環以外的形狀。例如，中心檢測器可為圓形、方形、矩形，或其它規則或不規則形狀，且可優選為足夠大以在流動室中無細胞的情況下容納整個束斑。在一個實施方案中，中心同心檢測器環測量大約2-5度之間的中間角度散射，另一同心檢測器環測量大約5-7度之間的中間角度散射，且又一同心檢測器環測量大約7-11度之間的中間角度散射。
[0046]應理解，在一些實施方案中，檢測器的角度范圍可重疊。例如，中心同心檢測器環可測量大約2-6度之間的中間角度散射，第二同心檢測器環可測量大約5-7度之間的中間角度散射，且第三同心檢測器環可測量大約6-11度之間的中間角度散射。[0047]在一個實施方案中，圖1示出的系統包括掩模110，掩模110被安置成在IAS光檢測器108的一部分上，在流動室104和IAS檢測器108之間。掩模110被定位在流動室104和IAS光檢測器108之間并至少覆蓋IAS檢測器的中心部分，從而阻止衍射圖樣。
[0048]圖2不出根據一個實施方案的垂直和水平方向上的散射光信號的圖。在檢測器108垂直方向上的散射信號181是高斯曲線且示出為在IAS檢測器108的右側。在檢測器108水平方向上的散射信號182示出為在IAS檢測器108的底部。水平平頂光束輪廓產生的檢測器108處的水平散射信號182被損壞/變形，且包括信號中的水平衍射(或波紋)190。
[0049]衍射圖樣(或波紋)190例如可由鞘液和液體樣品之間不匹配的折射指數產生。因此，本公開中提供的系統和方法允許鞘液和液體樣品之間存在折射指數的差異，而不會用水平衍射圖樣損壞中間角度散射的測量。這樣，水可用作鞘液，盡管其折射指數與樣品流體有差異。樣品流體例如可包括血液，血液具有與水不同的折射指數。例如，血液可包括各種細胞，例如紅血細胞、白血細胞等，和檢測到的其它粒子。在一些實例中，例如，血液可用另一種液體(例如水或稀釋劑)來稀釋，但仍具有與鞘液的足夠的折射指數差異，所述鞘液在散射光的強度輪廓中創建衍射或波紋。
[0050]衍射圖樣也可由光束的扁平光束輪廓產生。例如，光束成型光學器件可包括被配置以在與詢問區域的交叉點產生水平平頂光束輪廓的透鏡的組合(例如，一個圓柱形透鏡和一個非圓柱形透鏡)。用以形成扁平光束輪廓的透鏡可在IAS檢測器處的散射信號中創建水平衍射圖樣。在一些實例中，平頂光束輪廓可由被設置于激光和詢問區域之間的狹縫形成，使得只有光通過狹縫。在所述情況下，衍射圖樣也從狹縫照明創建且存在于IAS檢測器處的散射信號中。
[0051]在一個實施方案中，如圖3示出，掩模110被水平安置在IAS檢測器108的一部分上，從而阻止由水平平頂光束輪廓和鞘液和液體樣品之間不匹配的折射指數產生的水平衍射圖樣。例如，掩模110可被成形為大約矩形，其中縱向軸線水平延伸。
[0052]在一個實施方案中，掩模110被安置在IAS檢測器108上。應理解，在其它實施方案中，掩模110可不必被安置在IAS檢測器上，但足夠靠近IAS檢測器以準確地阻止預期角度范圍的散射光。
[0053]掩模110可為足以阻止光被IAS檢測器108檢測到的任何類型的材料。在一個實施方案中，掩模110是帶。在另一實施方案中，掩模110是阻塞棒。阻塞棒可由阻止光的任何各種材料(例如聚合物材料)制成。在又一實施方案中，掩模110是光刻阻塞。在一些實例中，掩模110由反射光并且阻止光的材料制成——例如，鏡像或反射材料。
[0054]在掩模110被安置在IAS檢測器108上的實施方案中，應理解，掩模不應由導電材料制成，以致掩模110將使IAS檢測器108的各種檢測器短路。
[0055]在一個實施方案中，掩模110是呈有孔鏡形式的阻塞棒，所述有孔鏡被定位成允許測量通過阻塞棒中的中心孔的軸向光損耗，并把中間角度散射從流動室104重定向到IAS檢測器108。
[0056]在一個實施方案中，阻塞棒被結合有孔鏡來實施，所述有孔鏡被定位成允許測量通過中心孔的軸向光損耗并重定向中間角度散射。阻塞棒被設置為緊挨有孔鏡，在有孔鏡和IAS檢測器之間，使得反射的中間角度散射的一部分被阻止在IAS檢測器的一部分上(例如，在IAS檢測器的同心環水平方向上)。[0057]在一個實施方案中，阻塞棒呈帶槽鏡的形式，所述帶槽鏡包括反射材料以反射中間角度散射，然而，被開槽以包括沒有反射材料的情況，以便不將水平衍射反射到IAS檢測器。例如，鏡可被成形為具有槽形式的孔或切口，所述孔或切口不在與存在水平衍射的位置相對應的檢測器的一部分上反射光。孔或切口可呈矩形槽的形式，例如，延伸穿過通常圓形的鏡面(或者通常圓形的鏡面的兩側)，因此反射中間角度散射，而不在IAS檢測器的水平部分(對應于存在水平衍射的位置)上反射光。
[0058]圖3示出根據一個實施方案的安置在IAS檢測器上的掩模的圖。如圖所示，掩模110被安置在IAS檢測器108上。IAS檢測器108包括三個同心安置的檢測器環201、202和203。在示出的實施方案中，第一同心檢測器環201的外徑小于4mm;第二同心檢測器環的內徑和外徑分別為大約4mm和7.6mm ;且第三同心檢測器環的內徑和外徑分別為大約9.6mm和 13mm。
[0059]掩模110被水平安置在IAS檢測器108的所有三個同心檢測器環201、202和203的部分上。這樣，水平衍射圖樣被掩模110阻止而不被三個同心檢測器環201、202和203中的任一個檢測到。掩模110的尺寸可變化，但應被適當地調整大小以充分阻止水平衍射圖樣。在一個實施方案中，掩模的寬度約為2mm。在另一實施方案中，掩模的寬度范圍是1-5mmη
[0060]在本發明的一些方面，提供被成形并被調整大小以接收不包括水平衍射的中間散射范圍的IAS檢測器。例如，IAS檢測器可為帶槽的檢測器或包括彼此間隔開的兩個部分。圖4示出根據一個實施方案的帶槽的檢測器。IAS檢測器108被開槽以包括由槽或間隙180隔開的第一半圓形的一半108a和第二半圓形的一半108b。示出的槽或間隙180被在IAS檢測器108的中心上水平成形并被調整大小。在IAS檢測器108垂直方向上的散射信號181是示出為在IAS檢測器108右側的高斯曲線，且在IAS檢測器108水平方向上的散射信號182示出為在IAS檢測器108的底部。水平散射信號182被損壞并包括在信號中示出為波紋的水平衍射190。圖4的IAS檢測器108的配置(其中因為水平衍射落入IAS檢測器108的槽180中，所以未檢測到水平衍射)因此避免/忽略在IAS檢測器108檢測水平變形的散射信號。
[0061]流式細胞儀系統100可包括未示出的其它光學組件。例如，系統可包括用于檢測熒光、偏振側向散射，和/或去極化側向散射的透鏡和檢測器。圖1主要示出用于展示前向散射和中間角度散射的組件，且因此不應當被解釋為限制性的。
[0062]以下段落提供了本公開的系統和方法的另外的示例性實施方案。
[0063]如上文所述，在本公開的一些方面中，提供流式細胞儀系統。系統包括使水動力聚焦的液體樣品流過詢問區域的流動室；被定位成用光束照射詢問區域的光源；和安置于光源和流動室之間的光束成型光學器件。光束成型光學器件操縱光束并創建在詢問區域照射液體樣品的水平扁平光束輪廓。系統包括被定位成當照射液體樣品時測量從液體樣品發射的中間角度散射的中間角度散射(IAS)光檢測器，且還包括掩模，所述掩模被水平安置在IAS光檢測器的一部分上，在流動室和IAS光檢測器之間，并至少覆蓋IAS光檢測器的中心部分，從而阻止由照射液體樣品的扁平光束輪廓產生的水平衍射圖樣。
[0064]在一個實施方案中，其中光源是激光。在一個實施方案中，系統包括用于汲取用以水動力聚焦液體樣品的鞘液的鞘液源。在一些實例中，鞘液是水。在一個實施方案中，掩模選自由以下組成的組:帶、阻塞棒和光刻阻塞。在一個實施方案中，掩模是阻塞棒。在一個實施方案中，阻塞棒是有孔鏡，所述有孔鏡被定位成允許測量通過阻塞棒中的中心孔的軸向光損耗并把中間角度散射從流動室重定向到IAS光檢測器。
[0065]在一個實施方案中，IAS光檢測器還包括兩個同心檢測器環。在一些實例中，第一檢測器環測量約2-7度之間的中間角度散射。在一些實例中，第二檢測器環測量約7-11度之間的中間角度散射。
[0066]在一個實施方案中，兩個同心檢測器環包括第一同心檢測器環和第二同心檢測器環，且IAS光檢測器還包括同心安置在第一和第二同心檢測器環中的中心檢測器環。在一些實例中，第一同心檢測器環具有大約4_的內徑和大約7.6_的外徑，且其中第二同心檢測器環具有大約9.6mm的內徑和大約13_的外徑。
[0067]如上文所述，在本公開的一些方面中，提供流式細胞儀系統。系統包括使水動力聚焦的液體樣品流過詢問區域的流動室；用于汲取用以水動力聚焦液體樣品的鞘液的鞘液源；被定位成用光束照射詢問區域的光源；和安置于光源和流動室之間的光束成型光學器件。鞘液是水，且光束成型光學器件操縱光束。另外，系統包括被定位成當照射液體樣品時測量從液體樣品發射的中間角度散射的中間角度散射(IAS)光檢測器。此外，系統包括掩模，所述掩模被安置在IAS光檢測器的一部分上，在流動室和IAS光檢測器之間，并至少覆蓋IAS光檢測器的中心部分，從而阻止當照射液體樣品時由鞘液產生的衍射圖樣。
[0068]在一個實施方案中，光源是激光。在一個實施方案中，光束成型光學器件創建在詢問區域照射液體樣品的水平扁平光束輪廓。在一個實施方案中，掩模選自由以下組成的組:帶、阻塞棒和光刻阻塞。在一個實施方案中，掩模是阻塞棒。在一個實施方案中，阻塞棒是有孔鏡，所述有孔鏡被定位成允許測量通過阻塞棒中的中心孔的軸向光損耗并把中間角度散射從流動室重定向到IAS光檢測器。
[0069]在一個實施方案中，IAS光檢測器還包括兩個同心檢測器環。在一些實例中，第一檢測器環測量約2-7度之間的中間角度散射。在一些實例中，第二檢測器環測量約7-11度之間的中間角度散射。
[0070]在一個實施方案中，兩個同心檢測器環包括第一同心檢測器環和第二同心檢測器環，且IAS光檢測器還包括同心安置在第一和第二同心檢測器環中的中心檢測器環。在一些實例中，第一同心檢測器環具有大約4_的內徑和大約7.6_的外徑，且其中第二同心檢測器環具有大約9.6mm的內徑和大約13_的外徑。
[0071]如上文所述，在本公開的一些方面中，提供了用于阻止由以下產生的衍射圖樣的系統:(1)照射流式細胞儀液體樣品的扁平激光束輪廓或(2)流式細胞儀中鞘液和液體樣品之間不匹配的折射指數。系統包括被定位成當照射液體樣品時測量從液體樣品發射的中間角度散射的中間角度散射(IAS)光檢測器,和掩模,所述掩模被安置在IAS光檢測器的一部分上并至少覆蓋IAS光檢測器的中心部分，從而阻止衍射圖樣。
[0072]在一個實施方案中，掩模被水平安置在IAS光檢測器上。在一個實施方案中，掩模選自由以下組成的組:帶、阻塞棒和光刻阻塞。在一個實施方案中，掩模是阻塞棒。在一個實施方案中，阻塞棒是有孔鏡，所述有孔鏡被定位成允許測量通過阻塞棒中的中心孔的軸向光損耗并把中間角度散射從流動室重定向到IAS光檢測器。
[0073]在一個實施方案中，IAS光檢測器還包括兩個同心檢測器環。在一些實例中，第一檢測器環測量約2-7度之間的中間角度散射。在一些實例中，第二檢測器環測量約7-11度之間的中間角度散射。
[0074]在一個實施方案中，兩個同心檢測器環包括第一同心檢測器環和第二同心檢測器環，且IAS光檢測器還包括同心安置在第一和第二同心檢測器環中的中心檢測器環。在一些實例中，第一同心檢測器環具有大約4_的內徑和大約7.6_的外徑，且其中第二同心檢測器環具有大約9.6mm的內徑和大約13_的外徑。
[0075]在一個實施方案中，提供了流式細胞儀，所述流式細胞儀具有使水動力聚焦的液體樣品流過詢問區域的流動室；用于汲取用以水動力聚焦液體樣品的鞘液的鞘液源；被定位成用光束照射詢問區域的光源；和安置于光源和流動室之間的光束成型光學器件。鞘液是水，且光束成型光學器件操縱光束。另外，系統包括被定位成當照射液體樣品時測量從液體樣品發射的中間角度散射的中間角度散射(IAS)光檢測器。此外，系統包括掩模，所述掩模被安置在IAS光檢測器的一部分上，在流動室和IAS光檢測器之間，并至少覆蓋IAS光檢測器的中心部分，從而阻止當照射液體樣品時由鞘液產生的衍射圖樣。
[0076]在另一實施方案中，提供了用于阻止由以下產生的衍射圖樣的系統:(I)照射流式細胞儀液體樣品的扁平激光束輪廓或(2)流式細胞儀中鞘液和液體樣品之間不匹配的折射指數。系統包括被定位成當照射液體樣品時測量從液體樣品發射的中間角度散射的中間角度散射(IAS)光檢測器；和掩模，所述掩模被安置在IAS光檢測器的一部分上并至少覆蓋IAS光檢測器的中心部分，從而阻止衍射圖樣。
[0077]如上文所述，在本公開的一些方面中，提供了用于配置流式細胞儀以阻止由以下產生的衍射圖樣的方法:(1)照射流式細胞儀液體樣品的扁平激光束輪廓，或(2)流式細胞儀中鞘液和液體樣品之間不匹配的折射指數。方法包括:把掩模設置在中間角度散射(IAS)光檢測器的一部分上，所述IAS光檢測器被定位成當照射液體樣品時測量從液體樣品發射的中間角度散射。掩模至少覆蓋IAS光檢測器的中心部分，從而阻止衍射圖樣。
[0078]在又一實施方案中，提供了用于配置流式細胞儀以阻止由以下產生的衍射圖樣的方法:(1)照射流式細胞儀液體樣品的扁平激光束輪廓，或(2)流式細胞儀中鞘液和液體樣品之間不匹配的折射指數。方法包括:把掩模設置在中間角度散射(IAS)光檢測器的一部分上，所述IAS光檢測器被定位成當照射液體樣品時測量從液體樣品發射的中間角度散射。掩模至少覆蓋IAS光檢測器的中心部分，從而阻止衍射圖樣。
[0079]相關領域技術人員將顯而易見本公開范圍內的其它實施方案和修改。本公開所針對的本領域技術人員在閱覽本說明書之后將易于理解本公開的實施方案可適用的各種修改、流程以及眾多結構。本公開的各種方面和特征可能已關于理解、看法、理論、基本假設和/或操作或前瞻性實例進行解釋或描述，但應理解，本公開并不受限于任何特定的理解、看法、理論、基本假設和/或操作或前瞻性實例。
[0080]應理解，上文介紹的一些技術可由軟件和/或固件編程或配置的可編程電路來實施，或者所述技術可完全由專用“硬連線”電路來實施，或由所述形式的組合來實施。所述專用電路(若存在)例如可呈一個或多個專用集成電路(ASICS)、可編程邏輯器件(PLD)、現場可編程門陣列(FPGA)等的形式。
[0081]實施本文介紹的技術的軟件或固件可被存儲在機器可讀存儲介質上，且可由一個或多個通用或專用的可編程微處理器執行。本文使用的術語“機器可讀介質”包括可存儲機器可訪問形式的信息的任何機制(機器例如可為計算機、網絡設備、蜂窩電話、個人數字助理(PDA)、制造工具、具有一個或多個處理器的任何設備等)。例如，機器可訪問介質包括可記錄/不可記錄介質(例如，只讀儲存器(ROM);隨機存取儲存器(RAM);磁盤存儲介質；光存儲介質；閃存設備等)等。
[0082]提出以上實例以向本領域普通技術人員提供怎樣制造并使用本發明的實施方案的完整的公開內容和描述，且非旨在限制發明人認為是其發明的范圍，也不旨在表示以下實驗是所有執行的實驗或只是執行的實驗。已努力確保所用數字(例如，數量、溫度等)的準確性，但一些實驗誤差和偏差應予以考慮。除非另有說明，否則份數是重量份數，分子量是重量平均分子量，溫度是攝氏度，且壓力是大氣壓或接近大氣壓。
[0083]在提供數值范圍的情況下，應理解，除非上下文另有明確說明，否則也具體公開在所述范圍的上限和下限之間的每個居間值(至下限單位的十分之一)。本公開中包括所述范圍中的任何所述值或居間值和所述范圍中的任何其它所述值或居間值之間的每個更小的范圍。這些較小范圍的上限和下限可被獨立地包括在范圍內或被排除在范圍之外，且其中上限和下限中任一個、無任何一個或兩者被包括在較小范圍中的每個范圍也被包括在本公開中，受限于所述范圍中任何具體排除的限制。在所述范圍包括上限和下限中一者或兩者的情況下，不包括這些包括的上限和下限中一者或兩者的范圍也被包括在本公開中。
[0084]在本公開的描述中，應理解，單數形式的詞語包含其復數對應物，而復數形式的詞語包含其單數對應物，除非另外隱含或明確地理解或說明。另外，應理解，對于本文所述的任何給定組件，列出作為所述組件的任何可能的候選物或替代物可通常單獨使用或彼此組合使用，除非另外隱含或明確地理解或說明。另外，應理解，所述候選物或替代物的任何列表僅是說明性的，而非限制性的，除非另外隱含或明確地理解或說明。
[0085]下文描述了各種術語以有助于理解本公開。應理解，這些各種術語的對應描述適用于這些各種術語的對應的語言或語法變體或形式。也應理解，本公開不限于用于描述特定實施方案的本文使用的術語或其描述。本文所討論的公開案僅為在申請的申請日之前公開而提供。本文中任何內容不應被理解為承認本公開的實施方案無權由于在先發明而先于所述公開案。另外，所提供的公開案的日期可能與可能需要單獨確認的實際的
【公開日】期不同。
【權利要求】
1.一種流式細胞儀系統，其包括: 流動室，其使水動力聚焦的液體樣品流過詢問區域； 光源，其被定位成用光束照射所述詢問區域； 多個光束成型光學器件，其被安置于所述光源和所述流動室之間，其中所述光束成型光學器件操縱所述光束并創建在所述詢問區域照射所述液體樣品的水平扁平光束輪廓； 中間角度散射(IAS)光檢測器，其被定位成當照射所述液體樣品時測量從所述液體樣品發射的中間角度散射；和 掩模，其被水平安置在所述IAS光檢測器的一部分上且被定位于所述流動室和所述IAS光檢測器之間以至少覆蓋所述IAS光檢測器的中心部分，從而阻止由照射所述液體樣品的所述扁平光束輪廓產生的水平衍射圖樣。
2.如權利要求1所述的流式細胞儀，其中所述光源是激光。
3.如前述權利要求中任一項所述的流式細胞儀，其還包括鞘液源，所述鞘液源用于汲取用以水動力聚焦所述液體樣品的鞘液。
4.如前述權利要求中任一項所述的流式細胞儀，其中所述鞘液是水。
5.如前述權利 要求中任一項所述的流式細胞儀，其中所述掩模選自由以下組成的組:帶、阻塞棒和光刻阻塞。
6.如前述權利要求中任一項所述的流式細胞儀，其中所述IAS光檢測器還包括兩個同心檢測器環。
7.如前述權利要求中任一項所述的流式細胞儀，其中所述第一檢測器環測量約2-7度之間的中間角度散射。
8.如前述權利要求中任一項所述的流式細胞儀，其中所述第二檢測器環測量約7-11度之間的中間角度散射。
9.如前述權利要求中任一項所述的流式細胞儀，其中所述兩個同心檢測器環包括第一同心檢測器環和第二同心檢測器環，且其中所述IAS光檢測器還包括同心安置在所述第一和第二同心檢測器環中的中心檢測器環。
10.如前述權利要求中任一項所述的流式細胞儀，其中所述第一同心檢測器環具有大約4mm的內徑和大約7.6mm的外徑，且其中所述第二同心檢測器環具有大約9.6mm的內徑和大約13mm的外徑。
11.如前述權利要求中任一項所述的流式細胞儀，其中所述掩模是阻塞棒。
12.如前述權利要求中任一項所述的流式細胞儀，其中所述阻塞棒是有孔鏡，所述有孔鏡被定位成允許測量通過所述阻塞棒中的中心孔的軸向光損耗并把中間角度散射從所述流動室重定向到所述IAS光檢測器。
13.一種流式細胞儀系統，其包括: 流動室，其使水動力聚焦的液體樣品流過詢問區域； 鞘液源，其用于汲取用以水動力聚焦所述液體樣品的鞘液，其中所述鞘液是水； 光源，其被定位成用光束照射所述詢問區域； 多個光束成型光學器件，其被安置于所述光源和所述流動室之間，其中所述光束成型光學器件操縱所述光束； 中間角度散射(IAS)光檢測器，其被定位成當照射所述液體樣品時測量從所述液體樣品發射的中間角度散射；和 掩模，其被安置在所述IAS光檢測器的一部分上且被定位在所述流動室和所述IAS光檢測器之間以至少覆蓋所述IAS光檢測器的中心部分，從而阻止當照射所述液體樣品時由所述鞘液產生的衍射圖樣。
14.如權利要求13所述的流式細胞儀，其中所述光源是激光。
15.如權利要求13-14中任一項所述的流式細胞儀，其中所述多個光束成型光學器件創建在所述詢問區域照射所述液體樣品的水平扁平光束輪廓。
16.如權利要求13-15中任一項所述的流式細胞儀，其中所述掩模選自由以下組成的組:帶、阻塞棒和光刻阻塞。
17.如權利要求13-16中任一項所述的流式細胞儀，其中所述IAS光檢測器還包括兩個同心檢測器環。
18.如權利要求13-17中任一項所述的流式細胞儀，其中所述第一檢測器環測量約2-7度之間的中間角度散射。
19.如權利要求13-18中任一項所述的流式細胞儀，其中所述第二檢測器環測量約7-11度之間的中間角度散射。
20.如權利要求 13-19中任一項所述的流式細胞儀，其中所述兩個同心檢測器環包括第一同心檢測器環和第二同心檢測器環，且其中所述IAS光檢測器還包括同心安置在所述第一和第二同心檢測器環中的中心檢測器環。
21.如權利要求13-20中任一項所述的流式細胞儀，其中所述第一同心檢測器環具有大約4mm的內徑和大約7.6mm的外徑，且其中所述第二同心檢測器環具有大約9.6mm的內徑和大約13mm的外徑。
22.如權利要求13-21中任一項所述的流式細胞儀，其中所述掩模是阻塞棒。
23.如權利要求13-22中任一項所述的流式細胞儀，其中所述阻塞棒是有孔鏡，所述有孔鏡被定位成允許測量通過所述阻塞棒中的中心孔的軸向光損耗并把中間角度散射從所述流動室重定向到所述IAS光檢測器。
24.一種用于阻止由以下產生的衍射圖樣的系統:(1)照射流式細胞儀液體樣品的扁平激光束輪廓，或(2)流式細胞儀中鞘液和液體樣品之間不匹配的折射指數，所述系統包括: 中間角度散射(IAS)光檢測器，其被定位成當照射所述液體樣品時測量從所述液體樣品發射的中間角度散射；和 掩模，其被安置在所述IAS光檢測器的一部分上并至少覆蓋所述IAS光檢測器的中心部分，從而阻止衍射圖樣。
25.如權利要求24所述的系統，其中所述掩模被水平安置在所述IAS光檢測器上。
26.如權利要求24-25中任一項所述的系統，其中所述掩模選自由以下組成的組:帶、阻塞棒和光刻阻塞。
27.如權利要求24-26中任一項所述的系統，其中所述IAS光檢測器還包括兩個同心檢測器環。
28.如權利要求24-27中任一項所述的系統，其中所述第一檢測器環測量約2-7度之間的中間角度散射。
29.如權利要求24-28中任一項所述的系統，其中所述第二檢測器環測量約7-11度之間的中間角度散射。
30.如權利要求24-29中任一項所述的系統，其中所述兩個同心檢測器環包括第一同心檢測器環和第二同心檢測器環，且其中所述IAS光檢測器還包括同心安置在所述第一和第二同心檢測器環中的中心檢測器環。
31.如權利要求24-30中任一項所述的系統，其中所述第一同心檢測器環具有大約4mm的內徑和大約7.6mm的外徑，且其中所述第二同心檢測器環具有大約9.6mm的內徑和大約13mm的外徑。
32.如權利要求24-31中任一項所述的系統，其中所述掩模是阻塞棒。
33.如權利要求24-32中任一項所述的系統，其中所述阻塞棒是有孔鏡，所述有孔鏡被定位成允許測量通過所述阻塞棒中的中心孔的軸向光損耗并把中間角度散射重定向到所述IAS光檢測器。
34.一種用于配置流式細胞儀以阻止由以下產生的衍射圖樣的方法:(1)照射流式細胞儀液體樣品的扁平激光束輪廓，或(2)流式細胞儀中鞘液和液體樣品之間不匹配的折射指數，所述方法包括: 把掩模定位成在中間角度散射(IAS)光檢測器的一部分上,所述IAS光檢測器被定位成當照射所述液體樣品時測量從所述液體樣品發射的中間角度散射，其中所述掩模至少覆蓋所述IAS光檢測器的中 心部分，從而阻止衍射圖樣。
【文檔編號】G01N21/53GK104024831SQ201280064833
【公開日】2014年9月3日 申請日期:2012年12月20日 優先權日:2011年12月29日
【發明者】馬赫什·R.·朱納卡 申請人:雅培制藥有限公司