用于膜和生物結(jié)構(gòu)的染料的制作方法
【專利摘要】本發(fā)明涉及單獨(dú)或與其他染料組合使用的一種或多種天然染料在制備用于染色膜和生物結(jié)構(gòu)以促進(jìn)手術(shù)操作期間它們的鑒定的組合物中的用途。本發(fā)明涉及單獨(dú)或與其他染料組合使用的一種或多種天然染料用于染色膜和生物結(jié)構(gòu)以促進(jìn)手術(shù)操作期間它們的鑒定的用途。
【專利說明】用于膜和生物結(jié)構(gòu)的染料
[0001] 相關(guān)申請的交叉引用
[0002]本申請要求于2011年3月29日提交的第61/468，838號美國專利申請的優(yōu)先權(quán)，該申請整體援引加入本文。
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0003]本發(fā)明涉及單獨(dú)或與其他染料組合使用的一種或多種天然染料在制備用于染色膜和生物結(jié)構(gòu)以促進(jìn)手術(shù)操作期間它們的鑒定的組合物中的用途，并且涉及單獨(dú)或與其他染料組合使用的一種或多種天然染料染色膜和生物結(jié)構(gòu)以促進(jìn)手術(shù)操作期間它們的鑒定的用途以及它們的組合物。本發(fā)明還涉及在手術(shù)操作期間保護(hù)暴露的組織和細(xì)胞免于光損傷的一種或多種天然染料組合物的用途。本發(fā)明還涉及單獨(dú)或與合成染料組合使用的一種或多種天然染料用于體外和眼睛表面的組織病理學(xué)染色的用途。本發(fā)明進(jìn)一步涉及一種或多種天然組合物在眼睛中的局部使用。
【背景技術(shù)】
[0004]各種醫(yī)藥領(lǐng)域的手術(shù)通常要求觀察以及在某些情況下除去易損的膜，其在大部分情況下是薄且半透明的。在一些手術(shù)操作中，需要除去這些膜。考慮到充分地鑒定每種膜的難度，這一步驟在技術(shù)上非常復(fù)雜。
[0005]手術(shù)中使用活體染料來染色人組織已經(jīng)進(jìn)行了超過30年。眼科學(xué)中使用活體染料來染色視網(wǎng)膜組織可以追溯到上個世紀(jì)35。眼科醫(yī)師Sorsby在1939年36以及較晚些時候 Gifford 在 1940 年 37 開始靜脈內(nèi)注射 Kiton-fast-green V、Xylene_Fast-green B 和突光素。在1969年，Kutschera開始玻璃體內(nèi)注射專利藍(lán)以染色視網(wǎng)膜組織并確定視網(wǎng)膜脫落中的視網(wǎng)膜斷裂38。
[0006]玻璃體視網(wǎng)膜手術(shù)，玻璃體切除術(shù)的引入使得能治療視網(wǎng)膜的嚴(yán)重疾病，如糖尿病視網(wǎng)膜病、黃斑裂孔和視網(wǎng)膜脫落。玻璃體切除術(shù)手術(shù)技術(shù)涉及除去眼內(nèi)玻璃體凝膠、取出所有視網(wǎng)膜前膜并且用平衡鹽溶液、氣體或硅油恢復(fù)眼容量。由于組織的薄且半透明的性質(zhì)，例如在治療由視網(wǎng)膜脫落所引起的增殖性玻璃體視網(wǎng)膜病變、纖維膠質(zhì)視網(wǎng)膜外層膜和內(nèi)界膜(ILM)中，除去視網(wǎng)膜前膜由技術(shù)上困難的手術(shù)步驟組成U。一些研究已經(jīng)證實(shí)了除去這些微結(jié)構(gòu)的作用而醫(yī)源性引起的視網(wǎng)膜并發(fā)癥。
[0007]在染色玻璃體切除術(shù)中使用手術(shù)中染料是玻璃體視網(wǎng)膜手術(shù)中最新的進(jìn)展之一3O這種技術(shù)首先由Burk et al.在2000年描述。在這一工作中，活體染料吲哚菁綠(ICG)證實(shí)了對細(xì)微ILM的高親和力4。玻璃體視網(wǎng)膜手術(shù)中之前難以進(jìn)行的除去ILM和視網(wǎng)膜外層膜變得容易很多，這增加了解剖和功能上成功的比例5_6。然而，最初的熱情被臨床實(shí)驗(yàn)后的顧慮所代替證實(shí)了與ICG的使用相關(guān)的臨床手術(shù)后并發(fā)癥，例如視野和視網(wǎng)膜色素上皮改變7_12。體外和諸如小鼠、兔和豬的不同動物模型中的體內(nèi)研究確定了視網(wǎng)膜細(xì)胞中的劑量依賴性ICG毒性13_16。染色玻璃體切除術(shù)中ICG的有害效應(yīng)促使科學(xué)界研究毒性較低的活體染料。染色玻璃體切除術(shù)的研究和臨床中首先使用的染料有臺盼藍(lán)(AT)和專利藍(lán)(AP)。然而，這些染料的可接受性是有限的，因?yàn)樗鼈儗LM和其他視網(wǎng)膜前膜化學(xué)親和力較低，并且對于它們的生物安全性也沒有明確的指標(biāo)17_21。
[0008]自那之后，全世界的一些研究人員意圖對此進(jìn)行進(jìn)一步研究以發(fā)現(xiàn)具有高性能且染色眼內(nèi)結(jié)構(gòu)對視網(wǎng)膜安全的染料。在對理想染料的研究中，本發(fā)明提出使用天然染料，包括使用為視網(wǎng)膜的組成型結(jié)構(gòu)的色素，作為用于染色玻璃體切除術(shù)或需要或有助于限定層或邊界以在操作或過程期間指導(dǎo)健康護(hù)理提供者的其他手術(shù)或程序中的新替代性染料。
[0009]文獻(xiàn)P10311609-3公開了包含葉黃素和玉米黃素的組合物及該組合物作為嬰兒營養(yǎng)來源的用途，其目的以及組合物、劑量、制劑、給藥模式、使用情況和制備方法與本申請完全不同。
[0010]文獻(xiàn)JP2008138158涉及提取自蠶繭的黃色色素以及黃色染料、人工著色劑(color)、UV過濾劑和抗氧化劑。
[0011]文獻(xiàn)EP1075284B1涉及在玻璃體視網(wǎng)膜手術(shù)中使用活體染料來促進(jìn)手術(shù)操作。
[0012]本發(fā)明的不同之處在于以下方面:(i)本發(fā)明中所用的活體染料為單獨(dú)或與其他染料組合使用的天然染料，而上述文獻(xiàn)中所述的染料均為合成的；(ii)本發(fā)明不僅適用于染色玻璃體切除術(shù)領(lǐng)域，還適用于手術(shù)或治療的其他醫(yī)療領(lǐng)域，包括眼、腦、腹部、關(guān)節(jié)、整形(plastic)、婦產(chǎn)科和腫瘤學(xué)；以及(iii)鑒定的膜不僅僅是眼內(nèi)的，而且還是大腦內(nèi)、腹內(nèi)、骨盆內(nèi)和關(guān)節(jié)內(nèi)的等等。
[0013]本發(fā)明還提供一種或多種天然組合物，其可以用于在手術(shù)操作期間保護(hù)暴露的組織和細(xì)胞免于手術(shù)區(qū)域存在的光所引起的損傷。所述組合物包含葉黃素和玉米黃素，其吸收光并提供保護(hù)效果，特別是針對光波長中最具有傷害的部分。
[0014]本發(fā)明還提供一種或多種天然組合物，其可以通過局部施用于眼或注射入眼來保護(hù)眼內(nèi)組織和細(xì)胞。所述組合物包含葉黃素和玉米黃素，其已知為眼內(nèi)組織提供保護(hù)效果，特別是針對黃斑變性。
【發(fā)明內(nèi)容】
[0015]本發(fā)明涉及單獨(dú)或與其他染料組合使用的一種或多種天然染料用于染色膜和生物結(jié)構(gòu)的用途，并且一般地涉及這樣的化合物在制備用于染色膜和生物結(jié)構(gòu)的組合物中的用途，目的是在手術(shù)或醫(yī)療操作期間促進(jìn)鑒定這些膜和生物結(jié)構(gòu)。
[0016]本發(fā)明還涉及組合物，其包含單獨(dú)或與其他染料組合使用的一種或多種天然染料以及藥學(xué)上可接受的載體和結(jié)構(gòu)，以在手術(shù)或醫(yī)療操作期間鑒定生物膜。
[0017]本發(fā)明還涉及制備組合物的方法，所述組合物包含單獨(dú)或與其他染料組合使用的天然染料，用于手術(shù)或醫(yī)療操作。
[0018]在另一實(shí)施方案中，本發(fā)明涉及用本文所限定的染料鑒定膜和生物結(jié)構(gòu)的方法。[0019]本發(fā)明的目的是通過給藥包含吸收光的葉黃素和玉米黃素的一種或多種染料來在手術(shù)操作期間保護(hù)暴露的組織和細(xì)胞免于手術(shù)區(qū)域中存在的光所引起的損傷。
[0020]本發(fā)明的另一目的是通過將包含天然物質(zhì)如葉黃素和玉米黃素的一種或多種染料局部施用于眼(外部或內(nèi)部)或注射入眼(外部或內(nèi)部)來保護(hù)眼內(nèi)組織和細(xì)胞。
【專利附圖】
【附圖說明】[0021]圖1是示出本發(fā)明的各種染料和染料組合的定位的比色圖。
【具體實(shí)施方式】
[0022]本發(fā)明涉及組合物，其包含單獨(dú)或與其他染料組合使用的一種或多種天然染料，以及藥學(xué)上可接受的載體，用于在手術(shù)或醫(yī)療操作期間鑒定膜和生物結(jié)構(gòu)。
[0023]在本發(fā)明的方法中，生物膜或結(jié)構(gòu)被選擇性地染色，從而所選生物膜或結(jié)構(gòu)附近的生物組織與所選染色的生物膜或結(jié)構(gòu)相比基本上未被染色，或者至少程度明顯較低，無害的程度。因此，在手術(shù)操作期間，所選生物膜或結(jié)構(gòu)明顯區(qū)分于附近的組織，從而促進(jìn)手術(shù)操作并且減少損傷附近組織的風(fēng)險。
[0024]使用本發(fā)明的染料，沒有觀察到或觀察到很少的對附近組織的有害影響。進(jìn)一步地，手術(shù)區(qū)域中任何剩余的染料在操作后被很快地除去，從而減少染料的不良副作用的可能性。
[0025]本發(fā)明的染料在生理學(xué)和毒理學(xué)可接受的濃度下產(chǎn)生令人滿意的染色水平。優(yōu)選地，所用染料的最小量仍然會提供所選生物膜或結(jié)構(gòu)與附近組織之間可見的差異。
[0026]本發(fā)明的染料選自包括以下物質(zhì)的成分、部分或提取物的組:葉黃素、玉米黃素、胭脂樹紅(urucum)、番茄紅素、蝦青素、β -胡蘿卜素和β -隱黃素，所述物質(zhì)單獨(dú)或互相組合使用。這些染料可以與選自包括以下物質(zhì)的成分、部分或提取物的組的染料組合使用:亮藍(lán)、Π引哚菁綠、無碘H引哚菁綠(infracyanine green)、臺盼藍(lán)、專利藍(lán)、溴酹藍(lán)、固綠、靛胭月旨、伊文思藍(lán)、亮綠、曲安西龍、結(jié)晶紫、突光素、醋酸氟米龍(fluormetolone acetate)和剛果紅。在更優(yōu)選的實(shí)施方案中，所述組合物包含單獨(dú)或與臺盼藍(lán)或亮藍(lán)組合使用的葉黃素和玉米黃素。
[0027]藥學(xué)上可接受的載體可以選自包括以下物質(zhì)的組:磷酸鹽緩沖液、平衡鹽溶液(BSS)、聚乙烯醇、苯甲醇、凈化水、磷酸鈉、氯化鈉、氯化鈣、氯化鎂、氯化鉀、檸檬酸鈉、乙酸鈉、硼酸、硼砂、甲基纖維素及衍生物、透明質(zhì)酸、葡聚糖聚山梨酸鈉、吐溫、硫酸軟骨素、依地酸鈉、丙二醇、聚乙二醇、苯基磷酸鹽、鄰苯二甲酸鈉、磷酸鉀、檸檬酸、卡波姆934、卡波普、偏磷酸、甘膽酸和乙酸。
[0028]本發(fā)明的組合物可以包含約0.001%-約20%、優(yōu)選約0.01%-約5%的染料，并且包括這些限定之間所有的比例。
[0029]本發(fā)明所指的眼內(nèi)膜優(yōu)選自包括以下的組:前囊和后囊、角膜上皮和內(nèi)皮、視網(wǎng)膜外層膜、內(nèi)界膜、玻璃體、玻璃樣后膜和其他眼部膜。
[0030]在本發(fā)明中，生物膜指在手術(shù)或醫(yī)療護(hù)理中需要鑒定的任何及所有的膜，特別是在眼手術(shù)、腦手術(shù)、關(guān)節(jié)手術(shù)、腹部手術(shù)、整形手術(shù)、婦產(chǎn)科手術(shù)和腫瘤學(xué)手術(shù)中。
[0031]本發(fā)明的組合物可以在一般手術(shù)或醫(yī)療操作中鑒定膜或結(jié)構(gòu)。其中需要鑒定結(jié)構(gòu)和膜的通常手術(shù)操作包括眼手術(shù)、腦手術(shù)、關(guān)節(jié)矯形手術(shù)、腹部手術(shù)、整形手術(shù)、關(guān)節(jié)手術(shù)、婦產(chǎn)科手術(shù)和腫瘤學(xué)手術(shù)。本發(fā)明特別地用于在包括染色玻璃體切除術(shù)在內(nèi)的眼部手術(shù)中鑒定眼內(nèi)膜和生物結(jié)構(gòu)。優(yōu)選地，本發(fā)明中所用的染料為葉黃素和玉米黃素及它們的組合。
[0032]葉黃素和玉米黃素，除了是類胡蘿卜素以外，更特別地是葉黃素(xanthophyll)，是已知的并研究其與預(yù)防年齡相關(guān)的黃斑病變的關(guān)系。本發(fā)明涉及葉黃素和/或玉米黃素作為用于諸如染色玻璃體切除術(shù)的手術(shù)操作的安全且有效的染料或染色劑(stain)的用途，其使得能容易地鑒定膜和生物結(jié)構(gòu)如視網(wǎng)膜外層膜、ILM、前囊和后囊、角膜上皮和內(nèi)皮、玻璃體和玻璃樣后膜，以及必要時由眼外科醫(yī)師完全除去。
[0033]鑒于現(xiàn)有技術(shù)中所示的除去這些微結(jié)構(gòu)的操作導(dǎo)致的視網(wǎng)膜并發(fā)癥，使用單獨(dú)或與其他染料組合使用的天然著色劑來染色眼內(nèi)膜和其他結(jié)構(gòu)使得在手術(shù)技術(shù)和毒性特征譜中取得突破性進(jìn)展，并且明顯改善手術(shù)結(jié)果。
[0034]葉黃素(具有以下結(jié)構(gòu))和玉米黃素(具有以下結(jié)構(gòu))為屬于類胡蘿卜素的親脂性色素，并且傳統(tǒng)上在水果和植物中發(fā)現(xiàn):
[0035]
【權(quán)利要求】
1.一種處理生物組織、膜或其他結(jié)構(gòu)的方法，其包括選擇選自以下的天然染料:葉黃素、玉米黃素、胭脂樹紅、番茄紅素、蝦青素、β-胡蘿卜素和β-隱黃素，所述天然染料單獨(dú)或互相組合或與其他合成染料組合使用；并將所述染料施用于所述生物組織、膜或其他結(jié)構(gòu)。
2.權(quán)利要求1的方法，其中向所述生物組織、膜或其他結(jié)構(gòu)施用所述染料導(dǎo)致所述生物組織、膜或其他結(jié)構(gòu)的染色。
3.權(quán)利要求2的方法，其還包括從周圍組織分離染色的生物組織、膜或其他結(jié)構(gòu)的步驟。
4.權(quán)利要求3的方法，其中所述分離步驟選自眼手術(shù)、腦手術(shù)、腹部手術(shù)、關(guān)節(jié)矯形手術(shù)、整形手術(shù)、婦產(chǎn)科手術(shù)和癌癥手術(shù)。
5.權(quán)利要求1的方法，其還包括加入選自以下的第二染料的步驟:亮藍(lán)、吲哚菁綠、無碘吲哚菁綠、臺盼藍(lán)、專利藍(lán)、溴酚藍(lán)、固綠、靛胭脂、伊文思藍(lán)、亮綠、曲安西龍、結(jié)晶紫、熒光素、醋酸氟米龍和剛果紅及其組合。
6.權(quán)利要求1的方法，其中向所述生物組織、膜或其他結(jié)構(gòu)施用所述染料以保護(hù)其免于醫(yī)療操作期間暴露于光所引起的損傷。
7.權(quán)利要求6的方法，其中所述染料基本上由葉黃素和玉米黃素組成。
8.權(quán)利要求1的方法， 其中所述生物組織、膜或其他結(jié)構(gòu)由眼的生物組織、膜或其他結(jié)構(gòu)組成，而所述染料通過注射向所述眼的生物組織、膜或其他結(jié)構(gòu)施用。
9.權(quán)利要求8的方法，其中將包含葉黃素和玉米黃素的眼植入物插入眼組織(外表面或眼內(nèi))以提供針對黃斑變性的保護(hù)或延緩黃斑變性的發(fā)展。
10.權(quán)利要求8的方法，其中所述染料包括置于眼中的基本上由葉黃素和玉米黃素組成的組合的緩釋形式。
11.一種用于染色生物組織、膜或其他結(jié)構(gòu)的組合物，其包含藥學(xué)上可接受的載體以及單獨(dú)或互相組合使用的選自以下的天然染料:葉黃素、玉米黃素、胭脂樹紅、番茄紅素、蝦青素、β-胡蘿卜素和β-隱黃素。
12.權(quán)利要求11的組合物，其還包含選自以下的染料:亮藍(lán)、吲哚菁綠、無碘吲哚菁綠、臺盼藍(lán)、專利藍(lán)、溴酚藍(lán)、固綠、靛胭脂、伊文思藍(lán)、亮綠、曲安西龍、結(jié)晶紫、熒光素、醋酸氟米龍和剛果紅及其組合。
13.權(quán)利要求12的組合物，其中所述染料以0.001%-20%的濃度存在。
14.權(quán)利要求11的組合物，其中所述天然染料基本上由單獨(dú)或組合的葉黃素和玉米黃素組成。
15.權(quán)利要求11的組合物，其中所述載體選自磷酸鹽緩沖液、平衡鹽溶液、聚乙烯醇、苯甲醇、凈化水、磷酸鈉、氯化鈉、氯化鈣、氯化鎂、氯化鉀、檸檬酸鈉、乙酸鈉、硼酸、硼酸鈉、甲基纖維素及其衍生物、透明質(zhì)酸、葡聚糖、聚山梨酸鈉、吐溫、硫酸軟骨素、依地酸鈉、丙二醇、聚乙二醇、苯基鈉、鄰苯二甲酸鉀、磷酸鉀、檸檬酸、卡波姆934、卡波普、偏磷酸、甘膽酸、乙酸及其組合。
16.權(quán)利要求12的組合物，其中所述組合物包含0.001%-20%范圍的比率的第一染料和第二染料。
17.一種用于染色生物組織、膜或其他結(jié)構(gòu)的組合物，其包含:(a)選自下表前三行中所列以及所示范圍的一種或多種染料； (b)任選存在的選自下表的剩下的“活性”行中所列以及所示范圍的一種或多種染料；以及 (C)選自下表的“載體”行中所列以及所示范圍的一種或多種載體:
【文檔編號】G01N1/30GK103974725SQ201280023468
【公開日】2014年8月6日 申請日期:2012年3月29日 優(yōu)先權(quán)日:2011年3月29日
【發(fā)明者】D·德索薩馬丁斯, B·小魯賓斯, A·A·德索薩菲略, M·瑪雅 申請人:凱敏工業(yè)公司