專利名稱：一種測定食品或蔬菜中草酸含量的方法
技術領域：
本發明涉及一種草酸含量測定方法，具體說是一種利用頂空氣相色譜測定食品和蔬菜中草酸含量的方法，屬于食品分析檢測領域。
背景技術：
草酸也稱為乙二酸，是最簡單的有機二元酸之一。它廣泛存在于自然界中，特別是動植物組織中，主要是以游離態(草酸鉀和草酸鈉)和草酸鈣結晶的形式存在。在我們日常食用的很多食品和蔬菜中富含草酸，例如菠菜、莧菜、芹菜、豆類、巧克力、草莓、葡萄及茶等。從環境毒理學和食品營養學的角度看，草酸是一種環境毒素和抗營養因子。草酸在人體內不容易被氧化分解，經代謝作用后形成的產物屬于酸性物質，可導致人體內酸堿度失去平衡，過多食用還會中毒。長期食用草酸含量高的蔬菜容易引發關節炎、低血鈣、膀 胱結石和腎結石等疾病。鑒于草酸能對人體產生一定的危害，不少研究者試圖建立快速、準確、低成本測定食品和蔬菜中草酸含量的方法。目前草酸的測定方法主要有滴定法、比色法、色譜分析法和酶法等，這些方法各有利弊。其中，滴定法至今仍是食品分析中的一種經典方法，但其靈敏度較低、操作較繁瑣且耗時。比色法靈敏度高且廉價，但操作繁瑣且重復性較差。色譜分析法包括高效液相色譜和離子色譜兩種，其操作簡便、快捷、靈敏度高且重復性好，但測定過程中其它物質干擾較嚴重。酶法檢測草酸簡便快速，靈敏度高，選擇性好，但檢測成本較高。因此建立一種更為簡便、成本低廉、快速、準確測定食品和蔬菜中草酸含量的方法具有現實意義。
發明內容
本發明的目的在于提供一種測定食品和蔬菜中草酸含量的方法，克服目前分析食品和蔬菜中草酸含量的方法所存在的弊端。本發明的測定原理是基于在酸性條件下草酸根與溴酸鈉發生化學反應產生二氧化碳，然后采用頂空-氣相色譜法測定產生的二氧化碳量，從而計算得到樣品中草酸的含量。根據該方法可以實現快速測定，操作簡單且易掌握，其分析結果準確度高，具有一定的實用性。本發明是通過以下技術方案實現的，具體包括以下步驟
一種測定食品或蔬菜中草酸含量的方法，包括如下步驟
(1)配制標準溶液稱取適量的草酸鈉于容量瓶中，加去離子水定容至容量瓶刻度得到草酸鈉標準溶液；
(2)建立標準曲線采用頂空進樣器，在多個不同頂空樣品瓶中均分別加入相同體積的溴酸鈉水溶液和相同體積的硫酸水溶液，并密封樣品瓶，然后依次往不同頂空樣品瓶中加入不同量的所述草酸鈉標準溶液，將準備好的頂空樣品瓶放置于樣品臺上，然后進行頂空-氣相色譜檢測，根據氣相色譜信號峰面積與加入草酸根的量之間的對應關系得到一條標準曲線；
(3)樣品預處理將待測樣品研磨成均漿或粉末，然后加入鹽酸在加熱條件下進行抽提，冷卻后用去離子水定容，取適量定容后的溶液進行離心，其上層澄清液用O. 22 μ m濾膜過濾得到預處理后樣品；
(4)樣品檢測取適量預處理后樣品，將其用頂空進樣器加入至已密封的且裝有溴酸鈉溶液和硫酸溶液的頂空樣品瓶中，將準備好的頂空樣品瓶放置于樣品臺上，然后進行頂空-氣相色譜檢測，記錄下樣品的氣相色譜峰面積；
(5)結果計算將步驟(4)所得氣相色譜峰面積與步驟(2)標準曲線進行比較，通過計算得到樣品中草酸的含量。進一步優化的，所述容量瓶為IOOOmL容量瓶。進一步優化的，步驟(I)中所述草酸鈉標準溶液的濃度為O. 0Γ0. 05mol/L。進一步優化的，步驟(2)中所述加入的溴酸鈉水溶液濃度為O. 5^1. 5mol/L,體積為1. 0 3. OmL，硫酸水溶液濃度為1. 0 2. Omol/L，體積為1. 0 2. OmL。進一步優化的，步驟(2)中所述加入的草酸標準溶液的體積為0. (To. 6mL。進一步優化的，步驟(2)和(4)中所述的頂空進樣器的操作條件為進樣器加熱爐溫度5(T80°C ;頂空瓶在烘箱中的平衡時間5. (Γ20. Omin。進一步優化的，步驟(2)和(4)中氣相色譜的操作條件為柱溫為4(T70°C ;載氣為高純氮氣，其流速為3. (Γ3. 5mL/min ;檢測器為熱導檢測器(T⑶)，檢測器溫度為200 250。。。進一步優化的，步驟(3)中所述鹽酸濃度為1. (Γ3. Omol/L，預處理溫度為8(Tl00°C，反應時間為2(T60min，離心轉速為500(Tl0000r/min，離心時間為l(T30min。進一步優化的，步驟(4)中所述適量預處理后樣品的體積為0. 5^2. OmL。進一步優化的，上述測定食品或蔬菜中草酸含量的方法具體包括步驟
Cl)配制標準溶液準確稱取6. 7 g (精確至0. OOOlg)草酸鈉于IOOOmL容量瓶中，力口去離子水定容至刻度得到草酸鈉標準溶液；
(2)建立標準曲線在一系列的頂空樣品瓶分別加入ImL濃度為0.5mol/L的溴酸鈉溶液和ImL濃度為lmol/L硫酸溶液，并密封樣品瓶，然后往不同頂空樣品瓶中依次加入O、
0.1、0. 2、0. 3、0. 4、0. 5、0. 6mL的草酸鈉標準溶液,將準備好的頂空樣品瓶放置于樣品臺上，然后進行頂空-氣相色譜檢測，所得氣相色譜信號峰面積與加入草酸根的量之間能得到一條標準曲線；
(3)樣品預處理準確稱取樣品，將其研磨成均漿或粉末，然后加入濃度為2mol/L的鹽酸溶液在8(Tl00°C下抽提2(T30min，冷卻后用去離子水定容至IOOmL,取20mL定容后的溶液經500(T8000r/min離心l(T20min，其上層澄清液用0. 22 μ m濾膜過濾得到預處理樣品。(4)樣品檢測準確量取0. 5^2. OmL預處理樣品，將其用進樣器加入至已密封的，且裝有ImL濃度為0. 5mol/L的溴酸鈉溶液和ImL濃度為lmol/L硫酸溶液的頂空樣品瓶中，將準備好的頂空樣品瓶放置于樣品臺上，然后進行頂空-氣相色譜檢測，記錄下樣品的氣相色譜峰面積。(5)結果計算將步驟(4)所得峰面積與步驟(2)標準曲線進行比較，通過計算得到樣品中草酸的含量。進一步優化的，步驟(5)中所述草酸含量的計算公式為
權利要求
1.一種測定食品或蔬菜中草酸含量的方法，其特征在于，包括如下步驟 (1)配制標準溶液稱取適量的草酸鈉于容量瓶中，加去離子水定容至容量瓶刻度得到草酸鈉標準溶液； (2)建立標準曲線采用頂空進樣器，在多個不同頂空樣品瓶中均分別加入相同體積的溴酸鈉水溶液和相同體積的硫酸水溶液，并密封樣品瓶，然后依次往不同頂空樣品瓶中加入不同量的所述草酸鈉標準溶液，將準備好的頂空樣品瓶放置于樣品臺上，然后進行頂空-氣相色譜檢測，根據氣相色譜信號峰面積與加入草酸根的量之間的對應關系得到一條標準曲線； (3)樣品預處理將待測樣品研磨成均漿或粉末，然后加入鹽酸在加熱條件下進行抽提，冷卻后用去離子水定容，取適量定容后的溶液進行離心，其上層澄清液用O. 22 μ m濾膜過濾得到預處理后樣品； (4)樣品檢測取適量預處理后樣品，將其用頂空進樣器加入至已密封的且裝有溴酸鈉溶液和硫酸溶液的頂空樣品瓶中，將準備好的頂空樣品瓶放置于樣品臺上，然后進行頂空-氣相色譜檢測，記錄下樣品的氣相色譜峰面積； (5)結果計算將步驟(4)所得氣相色譜峰面積與步驟(2)標準曲線進行比較，通過計算得到樣品中草酸的含量。
2.根據權利要求1所述的測定食品或蔬菜中草酸含量的方法，其特征在于所述容量瓶為IOOOmL容量瓶。
3.根據權利要求1所述的測定食品或蔬菜中草酸含量的方法，其特征在于步驟(I)中所述草酸鈉標準溶液的濃度為O. 0Γ0. 05mol/L。
4.根據權利要求1所述的測定食品或蔬菜中草酸含量的方法，其特征在于步驟(2)中所述加入的溴酸鈉水溶液濃度為O. 5^1. 5mol/L，體積為1. (Γ3. OmL，硫酸水溶液濃度為1.0 2. OmoI/L,體積為1. 0 2. OmL。
5.根據權利要求1所述的測定分析方法，其特征在于步驟(2)中所述加入的草酸標準溶液的體積為O. (TO. 6mL。
6.根據權利要求1所述的測定食品或蔬菜中草酸含量的方法，其特征在于步驟(2)和(4)中所述的頂空進樣器的操作條件為進樣器加熱爐溫度5(T80°C ;頂空瓶在烘箱中的平衡時間5. 0 20· Omin。
7.根據權利要求1所述的測定食品或蔬菜中草酸含量的方法，其特征在于步驟(2)和(4)中氣相色譜的操作條件為柱溫為4(T70°C ;載氣為高純氮氣，其流速為3. (Γ3. 5mL/min ;檢測器為熱導檢測器(T⑶)，檢測器溫度為20(T25(TC。
8.根據權利要求1所述的測定食品或蔬菜中草酸含量的方法，其特征在于步驟(3)中所述鹽酸濃度為1. (Γ3. OmoI/L,預處理溫度為8(Tl00°C，反應時間為2(T60min，離心轉速為 500(Tl0000r/min，離心時間為 10 30min。
9.根據權利要求1所述的測定食品或蔬菜中草酸含量的方法，其特征在于步驟(4)中所述適量預處理后樣品的體積為O. 5^2. OmL。
10.根據權利要求1所述的測定食品或蔬菜中草酸含量的方法，其特征在于步驟(5)中所述草酸含量的計算公式為
全文摘要
本發明涉及一種測定食品或蔬菜中草酸含量的方法，具體涉及一種利用頂空氣相色譜法快速測定食品或蔬菜中草酸含量的方法。其步驟為(1)配制標準溶液；(2)建立標準曲線；(3)進行樣品預處理；(4)采用頂空-氣相色譜進行檢測；(5)結果計算。本方法的有益效果在于，采用了上述方法測定食品或蔬菜中草酸的含量，具有操作簡便快捷，檢測靈敏度高，測定結果準確，抗干擾能力強等優點。
文檔編號G01N30/02GK103018359SQ20121050274
公開日2013年4月3日 申請日期2012年11月30日 優先權日2012年11月30日
發明者李海龍 申請人:華南理工大學