專利名稱：基于穩定同位素比值鑒別葡萄酒產地的方法
技術領域：
本發明涉及基于穩定同位素比值鑒別產地葡萄酒真實性(例如產地來源真實性)的方法。本發明屬于葡萄酒產品真實性識別技術領域。
背景技術：
葡萄酒產品質量與產地、品種和年份密切相關。在葡萄酒的發展進程中，產地逐漸成為其品質的標志性特征。產地葡萄酒是以產地葡萄原料、釀造工藝技術和微生物共同作用的產物，具有獨特的風格和典型特征。世界上著名的葡萄酒都是來自優良的葡萄酒產地，產地逐漸作為葡萄酒品質的標志性特征，以防止假冒偽劣產品。
近幾年來，隨著葡萄酒產業的不斷壯大，我國釀酒葡萄生產也正在朝著“區域化、基地化、良種化”方向發展。國家標準GB 15037《葡萄酒》中定義了產地葡萄酒的概念，規定“用所標注的產地葡萄釀制的酒所占比例不低于酒含量的80%(體積分數)”才能成為產地葡萄酒，但我國尚缺乏產地葡萄酒的有效鑒別技術手段和方法，僅僅依靠企業自律和現有的標準管理體系無法有效規范市場，極少部分企業受到利益驅動，利用假冒偽劣產品冒充優質產地葡萄酒在市場上銷售，獲取高額利潤，對葡萄酒市場造成較大沖擊，不利于我國葡萄酒工業的良性發展和有序競爭，同時也損害了消費者的利益和知情權。因此開發一種能夠有效鑒別產地葡萄酒的技術方法對于規范市場行為，促進我國葡萄酒行業健康發展，維護合法企業和消費者利益具有十分重要的現實意義。
發明內容
本領域急需準確鑒定酒精飲料，尤其是葡萄酒的產地真實性的方法，促進我國飲料酒，例如葡萄酒行業的健康發展，維護合法企業和消費者利益為解決現有技術中存在的上述問題，本發明的發明人經過長期的不懈努力發現，不同地域的植物在生長過程中不斷與外界環境進行物質交換，植物體內同位素(例如，O)組成受氣候、環境、等因素影響而發生自然分餾效應，導致不同產地的植物體內的同位素自然豐度產生差異；而植物體的同位素豐度在一定程度上能夠反映其所處環境的同位素特征，葡萄酒在發酵過程中將糖類轉化為乙醇，保留了產地特征信息。因此利用穩定同位素比值質譜檢測葡萄酒中乙醇的氧穩定性同位素比值的差異可鑒別區分不同產地的葡萄酒。本發明采用穩定同位素比值質譜儀對來自真實的不同產地的葡萄酒中乙醇中氧同位素比值進行測定，以及對待測樣品(例如待測葡萄酒)的乙醇中氧同位素比值進行測定，然后將待測樣品中乙醇成分的氧同位素比值與參考的真實產地葡萄酒中乙醇氧同位素比值進行顯著性差異性分析，若不存在顯著差異，則表明待測樣品與真實樣品來自同一產地；反之則表明待測樣品與真實樣品來自不同的產地。優選的，在實施本發明的過程中，可構建產地葡萄酒中乙醇的氧同位素信息數據庫，從而在使用本發明的方法鑒定葡萄酒時，不需要每次都測定來自真實的同一產地或不同產地的葡萄酒中乙醇中氧同位素比值，而是使用已經建立起來的產地葡萄酒中氧同位素信息數據庫。本發明的方法包括測定待測樣品(例如待測葡萄酒)中乙醇的δ 180，然后將其與已經建立的參考的真實產地葡萄酒中乙醇的S18O進行顯著性差異性分析，若不存在顯著差異，則表明待測樣品與真實樣品來自同一產地；反之則表明待測樣品與真實樣品來自不同的產地。可選擇的，本發明的方法包括測定待測樣品(例如待測葡萄酒)中乙醇的δ 180，然后將其與已經建立的參考的真實產地葡萄酒中乙醇的S18O區間值進行比較，如果待測樣品的S18O落入所述區間，則表明待測樣品與真實樣品來自同一產地；反之則表明待測樣品與真實樣品來自不同的產地。當然，本領域技術人員可以選擇在同一個試驗周期中，既測定參考的真實產地葡萄酒中乙醇的δ180，又測定待測樣品中乙醇的δ180。優選的，本發明的真實產地葡萄酒樣品是從葡萄酒主要產區生產企業獲得以當地 葡萄為原料生產的產地葡萄酒的真實樣品(符合GB 15037產地葡萄酒定義要求)。本發明的待測樣品可以是從市場購買標注特定產地的葡萄酒樣品。本發明的真實產地葡萄酒樣品的乙醇δ 18O數據庫可通過如下方法構建采集樣品，其中某一產地葡萄酒的樣品選擇至少20批次以上，然后測定乙醇中δ180，建立產地葡萄酒乙醇δ 18O數據庫，其中采用統計方法分析原產地乙醇中δ 18O數值范圍與產地的相關性。本發明中乙醇中δ 18O測定方法可為將樣品和丙酮按照一定比例混勻，取混合溶液于2mL進樣瓶，按如下方法測定樣品的乙醇中和δ 180，色譜條件如下分子篩毛細色譜柱(例如規格為50mX0. 32mmX0. 45mm);載氣為高純氦氣(例如為99. 999%);采取恒流模式(例如，I. 2mL/min);柱溫采用程序升溫:初始溫度110°C,保持Imin,以5°C /min升溫至145°C，保持7min ;燃燒管溫度1030°C;裂解管溫度為1280°C;進樣量LOyL ;質譜參數 離子源真空I. 8X 10_6mBar，電壓3. 06KV ;其中，優選的，在樣品測定前，用標準樣品校準儀器。本發明的方法無需復雜的前處理，操作簡單，成本低，解決了葡萄酒的產地真實性鑒別的技術問題，有利于促進我國葡萄酒行業健康發展，維護合法企業和消費者的利益。在本發明中，氧同位素比值可為δ180。
附圖I :氣相色譜-同位素質譜(GC-IRMS)測定葡萄酒中乙醇的氧同位素28，29，30離子流圖。附圖2 :不同產地葡萄酒樣品δ 18O測定描述統計。
具體實施例方式下面結合具體實施例對本發明進一步說明。實施例一葡萄酒中乙醇δ 18O測定a)取已知δ 18O的乙醇用丙酮稀釋后混勻，待進樣；b)取待測葡萄酒用丙酮稀釋，混勻待進樣；
c)按如下方法分別測定步驟a)和b)溶液中乙醇δ 18O色譜條件如下分子篩毛細色譜柱(50mX0.32mmX0.45mm);載氣為高純氦氣(99. 999%);采取恒流模式(I. 2mL/min);柱溫采用程序升溫初始溫度110°C，保持lmin，以5°C /min升溫至145°C，保持7min ;燃燒管溫度1030°C ;裂解管溫度為1280°C ;進樣量l.OyL ;質譜參數離子源真空I. 8X10_6mBar，電壓3. 06KV ;在樣品測定前，用標準樣品校準儀器；c)采用已知δ 18O的乙醇進行標定同位素質譜參考氣CO2的δ 18O ；d)將待測樣品注入GC-P-IRMS得到葡萄酒中乙醇δ 180，見附圖I。實施例二 產地葡萄酒鑒別實例a)分別從新疆、山東、云南等企業征集標注產地信息真實的葡萄酒樣品，其中山東產地葡萄酒樣品21個，新疆產地葡萄酒樣品20個，云南產地葡萄酒樣品20個；b)從市場上所購買標注產地為新疆、山東、云南等地的葡萄酒樣品5個；c)葡萄酒中乙醇δ 18O測定吸取待測葡萄酒樣品于進樣小瓶中，加入丙酮溶液稀釋混勻，按如下方法測定樣品中乙醇的s18o，色譜條件如下色譜條件如下分子篩毛細色譜柱(50mX(X32mmX(X45mm);載氣為高純氦氣(99.999%);采取恒流模式(I. 2mL/min);柱溫采用程序升溫初始溫度110°C，保持lmin，以5°C/min升溫至145°C，保持7min ;燃燒管溫度10300C ;裂解管溫度為1280°C ;進樣量I. Oy L ;質譜參數離子源真空I. 8X 10_6mBar，電壓3. 06KV ;在樣品測定前，用標準樣品校準儀器。不同產地葡萄酒樣品乙醇δ 18O范圍見下表I。表I不同產地葡萄酒樣品δ 18O測定描述統計
權利要求
1.基于氧穩定同位素比值鑒別葡萄酒的產地的方法，其特征在于，所述方法包括以下步驟 1)測定待測葡萄酒中乙醇的S18O; 2)將待測葡萄酒樣品中乙醇成分S18O與參考的真實產地葡萄酒中乙醇S 18O進行顯著性差異性分析，若不存在顯著差異，則表明待測樣品與真實樣品來自同一產地；反之則表明待測樣品與真實樣品來自不同的產地。
2.根據權利要求I所述的方法，其特征在于，其中所述真實產地葡萄酒符合GB15037葡 萄酒標準。
3.根據權利要求1-2中任一項所述的方法，其中采用氣相色譜/同位素質譜聯用技術(GC/IRMS)測定葡萄酒中乙醇的5 180。
4.根據權利要求3所述的方法，其中在測定葡萄酒中乙醇的S18O時，利用丙酮對葡萄酒進行稀釋。
5.根據權利要求4所述的方法，其中，當測定葡萄酒中乙醇的S18O時，色譜條件如下采用分子篩填料色譜柱；載氣為高純氦氣；采取恒流模式；柱溫采用程序升溫初始溫度110°c，保持lmin，以5°C /min升溫至145°C，保持7min ;燃燒管溫度1030°C ;裂解管溫度為1280 0C ;進樣量LOuL ;質譜參數離子源真空I. 8X10_6mBar，電壓3. 06KV。
6.根據權利要求5所述的方法，其中高純氦氣的純度為至少99.999%。
7.根據權利要求5所述的方法，其中恒流模式為I.2mL/min。
8.根據權利要求5所述的方法，其中所述的分子篩填料色譜柱為毛細色譜柱。
全文摘要
本發明涉及一種基于穩定同位素比值鑒別產地葡萄酒的方法，屬葡萄酒真實性識別技術領域。主要步驟如下(1)采用氣相色譜/穩定同位素質譜聯用技術測定真實產地葡萄酒樣品中乙醇的δ18O，構建真實產地葡萄酒樣品δ18O數據庫；(2)測定待測葡萄酒樣品中乙醇的δ18O；(3)將待測樣品中乙醇成分δ18O與真實產地葡萄酒中乙醇δ18O進行顯著性差異分析，若無顯著差異，則表明待測樣品與真實樣品來自同一產地，反之則表明來自不同的產地。本發明利用穩定同位素質譜技術建立了一種能夠準確鑒別產地葡萄酒的方法，解決我國產地葡萄酒在市場監管存在的技術難題，利于規范市場行為，保護消費者和合法企業利益，促進葡萄酒行業健康有序發展。
文檔編號G01N30/02GK102967668SQ201210472459
公開日2013年3月13日 申請日期2012年11月20日 優先權日2012年11月20日
發明者鐘其頂, 王道兵, 熊正河 申請人:中國食品發酵工業研究院