專利名稱：一種測定化妝品中性激素含量的方法
技術領域：
本發明涉及一種測定化妝品中性激素的方法，具體地說，涉及一種使液相色譜一質譜聯用技術測定化妝品中的性激素含量的方法。
背景技術：
性激素是由動物體的性腺以及胎盤，腎上腺皮質網狀帶等組織合成的留體激素，具有促進性器官成熟，副性征發育及維持性功能等作用。化妝品中添加雌激素、雄激素、孕激素等性激素，在短時間內能促進毛發生長，防止皮膚老化，有除皺、增加皮膚彈性等作用，因此，性激素在化妝品工藝中常被違規添加在抗皺、生發、抗衰老等化妝品中。但長久使用會導致色素沉積，皮膚萎縮變薄，對肝功能、心血管系統等均有不良影響，甚至具有致癌性，引發細胞癌、乳腺癌、卵巢癌等疾病，給消費者帶來健康損害。現有測定化妝品中性激素的《化妝品衛生規范》采用高效液相色譜一二級管陣列檢測器法、高效液相色譜一紫外檢測器/熒光檢測器法以及氣相色譜一質譜法。氣相色譜法一質譜法需要將樣品先衍生化才能上機分析，與液相色譜法比較，步驟相對復雜。而單純的高效液相色譜法的檢出限相對較高，選擇性也略差。
發明內容
(一)要解決的技術問題本發明要解決的技術問題是降低傳統液相色譜法的檢出限，解決傳統液相色譜法定性不準、氣相色譜法樣品前處理過程復雜的問題。(二)技術方案為了解決上述技術問題，本發明提供一種測定化妝品中性激素的方法，包括如下步驟將待測化妝品利用固相萃取的方法進行前處理制樣；將已知濃度的性激素標準溶液分別通過液相色譜一質譜儀測試，得到相應的響應值，按照各激素響應值與標準溶液濃度的線性關系，得到標準曲線；取進行前處理的待測化妝品，將待測化妝品通過液相色譜質譜儀測得待測樣品的響應值；根據待測樣品的響應值，利用標準曲線計算待測化妝品中性激素的濃度。(三)有益效果上述技術方案具有如下優點本發明采用液相色譜一質譜聯用的方法測定化妝品中性激素含量，結合了液相色譜儀有效分離熱不穩性及高沸點化合物的分離能力與質譜儀很強的組分鑒定能力。用于定量分析檢出限更低。是一種分離分析復雜有機混合物的有效手段。采用本發明的方法檢測化妝品中性激素的含量，快速有效，RSD小于10%，雌激素最低檢出限小于O. 5mg/L，雄激素和孕激素最低檢出限小于O. 04mg/L。本發明采用液相色譜一質譜聯用儀測定化妝品中性激素含量，前處理過程優于傳統氣質聯用的方法，定性能力優于傳統的液相色譜法，定量分析檢出限更低。為化妝品中性激素的檢測提供了一種可靠的便于實施的方法。
圖I本發明一種實施例的流程圖；圖2是雌激素已烯雌酚、已烷雌酚、雌二醇、雌酮、雌三醇、炔雌醇的分離色譜圖；圖3是雄激素和孕激素孕酮、睪酮、甲基睪酮、醋酸甲地孕酮和甲羥孕酮乙酸酯的分離色譜圖。
具體實施方式
下面結合附圖和實施例，對本發明的具體實施方式
作進一步詳細描述。以下實施例用于說明本發明，但不用來限制本發明的范圍。如圖I所示，為本發明的一種實施例的流程圖，包括如下步驟步驟S101:樣品的前處理I. I待處理的化妝品包括化妝水,精油，乳液,膏霜,具體處理過程如下化妝水準確稱取化妝水O. 5g,用水定容至5mL。精油準確稱取精油樣品O. 5g,加入甲醇5mL,混合均勻后,8000轉離心5min,提取甲醇層，重復提取兩次，合并甲醇層，在水浴上蒸去甲醇至2mL左右，加水至25mL。乳液、膏霜準確稱取樣品O. 5g，加標。加入5mL甲醇，在超聲波振蕩器中超聲萃取15min,樣品在甲醇中均勻分散。用高速離心機8000轉/min離心5min。吸取上層溶液，加水至25mL。I. 2分別用甲醇和水淋洗C8SPE小柱，將樣品上柱，用甲醇水=20:80淋洗樣品，再用Iml甲醇水=80:20溶液洗脫得到樣品。步驟S102 :標準曲線的制備將已知濃度的性激素標準溶液分別通過液相色譜一質譜儀測試，得到相應的響應值，按照各性激素響應值與標準溶液濃度的線性關系，得到標準曲線。取標準物質β —雌二醇、雌三醇、雌酮、已烯雌酚、已烷雌酚、炔雌醇、睪酮、甲基睪酮、孕酮、醋酸甲地孕酮和甲羥孕酮乙酸酯，用乙睛溶解，配制成1000mg/L的標準儲備液。分別取雌激素標準儲備液配制成各組分含量分別是0、1、2. 5、5、10mg/L的混合標準使用溶液。其中六種雌激素可以同時測定，得到線性關系。另外五種孕激素和雌激素可以同時測定，得到線性關系。也就是說，這十一種激素因性質不同分成兩次測試。取雄激素和孕激素標準儲備液配制成各激素含量分別是0、0. 25,0. 5、I. 0,2. 5mg/L的混合標準使用溶液。通過液相色譜一質譜儀測試，得到各待測激素的響應值。得到各激素的標準曲線及相關系數如表I所示。儀器條件步驟103。表I標準曲線及相關系數
權利要求
1.一種測定化妝品中性激素含量的方法，其特征在于，包括如下步驟 將待測化妝品利用固相萃取的方法進行前處理制樣； 將已知濃度的性激素標準溶液分別通過液相色譜-質譜儀測試，得到相應的響應值，按照各激素響應值與標準溶液濃度的線性關系，得到標準曲線； 將處理后化妝品待測溶液通過液相色譜質譜儀測得樣品中待測物質的響應值； 根據樣品中待測物質的響應值，利用標準曲線計算待測化妝品中性激素的濃度。
2.根據權利要求I所述的測定化妝品中性激素含量的方法，其特征在于，將待測化妝品利用固相萃取的方法進行前處理制樣，包括 化妝水或貼膜稱取化妝水或貼膜擠出的液體，用水定容； 精油稱取精油樣品，加入甲醇，混合后，離心處理，提取甲醇層，在水浴上蒸去甲醇，再加水； 乳液，膏霜、啫喱稱取樣品，加入甲醇，在超聲波振蕩器中超聲萃取，樣品在甲醇中均勻分散，離心處理，吸取上層溶液，再加水。
3.根據權利要求I所述的測定化妝品中性激素含量的方法，其特征在于，將待測化妝品利用固相萃取的方法進行前處理制樣，包括分別用甲醇和水淋洗CS固相萃取小柱，將待測樣品處理溶液上柱，用甲醇水=20:80淋洗樣品，再用甲醇水=85:15溶液洗脫得到待測樣品溶液。
4.根據權利要求I所述的測定化妝品中性激素含量的方法，其特征在于，測定的性激素包括β —雌二醇、雌三醇、雌酮、已烯雌酚、已烷雌酚、炔雌醇、睪酮、甲基睪酮、孕酮、醋酸甲地孕酮和甲羥孕酮乙酸酯。
5.根據權利要求I所述的測定化妝品中性激素含量的方法，其特征在于，根據待測樣品的響應值，利用標準曲線計算待測化妝品中性激素的濃度，包括依據待測樣品的響應值和標準曲線，得到待測樣品中的激素濃度C，根據如下計算公式得到樣品中激素的濃度 m 其中Χ-樣品中待測激素的濃度；ν-樣品前處理后定容體積，；m-樣品質量。
全文摘要
本發明提供了一種測定化妝品中性激素含量的方法，包括如下步驟將待測化妝品利用固相萃取的方法進行前處理制樣；將已知濃度的性激素標準溶液分別通過液相色譜－質譜儀測試，得到相應的響應值，按照各激素響應值與標準溶液濃度的線性關系，得到標準曲線；將處理過的化妝品待測溶液通過液相色譜質譜儀測得樣品中待測物質的響應值；根據待測樣品的響應值，利用標準曲線計算待測化妝品中性激素的濃度。本發明采用液相色譜－質譜聯用儀測定化妝品中性激素含量，前處理過程優于傳統氣質聯用的方法，定性能力優于傳統的液相色譜法，定量分析檢出限更低。為化妝品中性激素的檢測提供了一種可靠的便于實施的方法。
文檔編號G01N30/02GK102944617SQ20121041900
公開日2013年2月27日 申請日期2012年10月26日 優先權日2012年10月26日
發明者姜曉輝 申請人:廣東省珠海市質量計量監督檢測所