專利名稱：一種水基膠中硼酸的高效液相色譜定量測定方法
技術領域：
本發明涉及一種水基膠中硼酸的高效液相色譜定量測定方法。
背景技術：
硼酸為白色結晶性粉末或無色微帶珍珠狀光澤的鱗片，有刺激性，可以用作化學試劑和生產蟑螂、甲蟲殺蟲劑，在醫藥上用作止血和防腐劑。硼砂經由食品攝取后可與胃酸作用產生硼酸。硼酸未被允許作為食品添加劑，但民間常有將硼砂或硼酸摻入糧食中作為殺蟲防腐劑使用的現象，早年也有將硼酸用作食品防腐劑和膨松劑的的問題。對于膠乳中硼酸，膠乳的保存一般采取兩種方式，一種是高氨保存，一種是低氨配合在O. 2-0. 25%之間含量的硼酸來保存的。
高效液相色譜法是20世紀60年代末在經典液相色譜的基礎上發展起來的一種現代色譜分析方法，歷史上曾出現過不同的叫法，如高壓液相色譜、高速液相色譜和高分辨液相色譜。就分離原理而言，高效液相色譜采用了高壓輸液泵、高效微粒固定相和高靈敏度檢測器，高效液相色譜具有分析速度快、分離效率好、檢測靈敏度高、分析速度快、樣品回收方便和操作自動化程度高等優點。該方法在生物工程、制藥工業、食品工業、環境監測和石油化工等領域獲得了廣泛的應用。目前國內關于硼酸的高效液相色譜方法的測定有部分報道。2002年隋迎軍等人報道了高效液相色譜法測定冰硼散中硼砂的含量。建立高效液相色譜法測定冰硼散中硼砂的含量。結果硼砂在進樣量O. 14 O. 71 μ g .m]-1范圍內有良好的線性關系，r = O. 9992。結論建立含量測定方法簡便，準確，重現性好。2007年陳艷等人報道了食品中硼砂的反相高效液相色譜測定法。建立反相高效液相色譜(RP-HPLC)測定食品中硼砂的方法，方法的檢出限為6. 4ng/kg，RSD為2. 3%，回收率為90. 63% 96. 88%，線性范圍為O. 032-0. 32μ g/L，相關系數為O. 9992。1995年胡奇志等人報道了硼-姜黃素絡合物的高效液相色譜研究及應用。研究了在非水體系中硼與質子化的姜黃素形成的絡合物以無水甲醇為溶劑，在C18色譜柱上用甲醇-水(80 20V/V)作流動相(1.00mL/min)分離并檢測.硼的校正曲線線性范圍為
O.4 3. 2μ g/25mL，硼的校測限為O. 08ng.此法用于復合硼肥的分析，結果令人滿意。這些方法的前處理方法多采用濃硫酸混酸質子化的方法處理后進高效液相色譜儀測定的，然而。濃硫酸對操作者有一定的危險性，并且易于對儀器設備造成腐蝕，目前，關于水基膠中硼酸的測定方法，文獻鮮有報道，而本測定方法安全、易行并且對儀器設備不會造成損傷。對于測定水基膠中硼酸含量具有重現性好、可操作型強等優點。
發明內容
本發明公開了一種用高效液相色譜法測定水基膠中硼酸的方法。其特征在于，該方法包括以下步驟
(I)稱取水基膠樣品，加入水溶解于三角瓶中得到溶液，然后超聲振蕩，離心；(2)取上述溶液的上層清液加入三角瓶中，在三角瓶中加入顯色劑溶液，混合均勻后在水浴鍋上蒸干；加入溶劑轉移至容量瓶中，用溶劑稀釋至刻度，混勻；(3)溶液液體采用高效液相色譜儀進行分析；(4)采用峰面積與濃度正比的關系用外標法定量。所述步驟(I)的水基膠樣品的稱樣量為O. l-2g ;加入水的體積為lO-lOOOmL，超聲振蕩時間10-30min ;離心機轉速4000-12000轉；離心時間為5_30min。所述步驟(2)中溶液上層清液取O. l-2mL ;顯色劑溶液為姜黃素草酸溶液，顯色劑 的用量為2-8mL。所述步驟(2)水浴鍋溫度為30-60度，容量瓶體積為20_100mL。所述步驟(2)中溶劑為甲醇、95%乙醇或無水乙醇中任意一種。所述步驟⑶色譜柱采用反相色譜柱,流動相比例甲醇水=10-90 90-10，色譜柱柱溫20-35°C ;高效液相色譜控制流速在O. 2 lmL/min ;采用紫外檢測器檢測，檢測波長500-600nm。與現有技術相比，本發明的有益效果為該方法的測定步驟是經過稀釋、超聲，離心后的試樣中加入姜黃素-草酸顯色劑在水浴鍋上恒溫水浴。蒸干后得到的固體用溶劑溶解定容于容量瓶中。采用高效液相色譜法測定硼-姜黃素絡合物的峰面積，對照標準曲線從而計算硼酸的含量。此方法快速可靠，簡單易行。
具體實施例方式為便于理解本發明，本發明列舉實施例如下。所述實施例僅僅是幫助理解本發明，而不應視為對本發明的具體限制。(I)樣品的前處理準確稱取Ig水基膠樣品，加入50mL水溶解于IOOmL三角瓶中，超聲振蕩lOmin，離心lOmin。取3mL上層清液加入三角瓶中，(2)溶液配制將上述清液稀釋五倍后，在三角瓶中加入顯色劑溶液，混合均勻后，在55度水浴鍋上蒸干，加入乙醇轉移至25mL容量瓶中，用乙醇稀釋至刻度，混勻。(2)溶液液體采用高效液相色譜儀進行分析。按照本發明所確定的方法，將上述溶液，經0. 45 μ m微孔濾膜過濾后注入液相色譜儀，選擇色譜條件測定，即可得到水基膠中硼酸的含量。實施例I按照上述所述方法配制硼酸標準溶液，將上述得到的標準溶液經0. 45 μ m微孔濾膜過濾后注入液相色譜儀，按照本發明所確定的方法，在如下所述的色譜條件下進行測定。結果顯示出峰良好，硼酸的色譜峰與其他組分色譜峰完全分離。其中，色譜柱Extend-C18 ;流動相甲醇水(90 10體積比);色譜柱溫25°C；進樣量5μ L ;流速lmL/min ;檢測器紫外檢測器；檢測波長550nm。實施例2按照上述所述方法配制水基膠樣品溶液，將上述得到的標準溶液經0. 45 μ m微孔濾膜過濾后注入液相色譜儀，按照本發明所確定的方法，在如下所述的色譜條件下進行測定。結果顯示出峰良好，硼酸的色譜峰與其他組分色譜峰完全分離。其中，色譜柱Rx-C18 ;流動相甲醇水(80 20體積比);色譜柱溫35°C ;進樣量=IOyL ;流速0. 8mL/min ;檢測器紫外檢測器；檢測波長:550nm。實施例3稱取O. 5g水基膠樣品,加入5OmL水溶解于IOOmL三角瓶中，超聲5min,經離心機離心5min。取2mL上層清液加入三角瓶中，將上述得到的溶液經O. 45 μ m微孔濾膜過濾后注入液相色譜儀，按照本發明所確定的方法，在如下所述的色譜條件下進行測定。結果顯示出峰良好，硼酸的色譜峰與其他組分色譜峰完全分離。 其中，色譜柱Ecl ipse XDB ;流動相甲醇水(85 15體積比)；色譜柱溫300C ;進樣量:20μ L ;流速0. 7mL/min ;檢測器紫外檢測器；檢測波長:550nm。實施例4稱取Ig水基膠樣品，加入IOOmL水溶解于250mL三角瓶中，振蕩15min，經離心機離心15min。取O. 5mL上層清液加入三角瓶中，將上述得到的溶液經O. 45 μ m微孔濾膜過濾后注入液相色譜儀，按照本發明所確定的方法，在如下所述的色譜條件下進行測定。結果顯示出峰良好，硼酸的色譜峰與其他組分色譜峰完全分離。其中，色譜柱Ecl ipse Plus ;流動相甲醇水(75 15體積比)；色譜柱溫30 0C ;進樣量=IOyL ;流速0. 85mL/min ;檢測器紫外檢測器；檢測波長:550nm。實施例5稱取2g水基膠樣品，加入150mL水溶解于250mL三角瓶中，超聲15min，經離心機離心20min。取ImL上層清液加入三角瓶中，按照上述所述方法配制水基膠樣品溶液，將上述得到的標準溶液經O. 45 μ m微孔濾膜過濾后注入液相色譜儀，按照本發明所確定的方法，在如下所述的色譜條件下進行測定。結果顯示出峰良好，硼酸的色譜峰與其他組分色譜峰完全分離。其中，色譜柱Z0RBAX ODS ;流動相甲醇水(50 50體積比)；色譜柱溫25°C;進樣量15 μ L ;流速0. 2mL/min ;檢測器紫外檢測器；檢測波長550nm。
權利要求
1.一種水基膠中硼酸的高效液相色譜定量測定方法，其特征在于，該方法包括以下步驟 (1)稱取水基膠樣品，加入水溶解于三角瓶中得到溶液，然后超聲或振蕩、離心； (2)取上述溶液的上層清液加入三角瓶中，在三角瓶中加入顯色劑溶液，混合均勻后在水浴鍋上蒸干；加入溶劑轉移至容量瓶中，用溶劑稀釋至刻度，混勻； (3)溶液液體采用高效液相色譜儀進行分析； (4)采用峰面積與濃度正比的關系用外標法定量。
2.根據權利要求I所述的水基膠中硼酸的高效液相色譜定量測定方法，其特征在于所述步驟(I)的水基膠樣品的稱樣量為O. l-2g ;加入水的體積為lO-lOOOmL，超聲或振蕩時間10-30min ;離心機轉速4000-12000轉；離心時間為5_30min。
3.根據權利要求I所述的水基膠中硼酸的高效液相色譜定量測定方法，其特征在于，所述步驟(2)中溶液中上層清液取O. l-2mL ;顯色劑溶液為姜黃素草酸溶液，顯色劑的用量為 2_8mL。
4.根據權利要求I所述的水基膠中硼酸的高效液相色譜定量測定方法，其特征在于，所述步驟(2)水浴鍋溫度為30-60度，容量瓶體積為20-100mL。
5.根據權利要求I所述的水基膠中硼酸的高效液相色譜定量測定方法，其特征在于，所述步驟(2)中溶劑為甲醇、95%乙醇或無水乙醇中任意一種。
6.根據權利要求I所述的水基膠中硼酸的高效液相色譜定量測定方法，其特征在于，所述步驟(3)色譜柱采用反相色譜柱，流動相比例甲醇水=10-90 90 —10，色譜柱柱溫20— 35°C ;高效液相色譜控制流速在O. 2 lmL/min ;采用紫外檢測器檢測，檢測波長500_600nmo
全文摘要
本發明公開了一種水基膠中硼酸的高效液相色譜定量測定方法。該方法包括以下步驟(1)稱取水基膠樣品，加入水溶解于三角瓶中得到溶液，然后超聲振蕩，離心；(2)取上述溶液的上層清液加入三角瓶中，在三角瓶中加入顯色劑溶液，混合均勻后在水浴鍋上蒸干；加入溶劑轉移至容量瓶中，用溶劑稀釋至刻度，混勻；(3)溶液液體采用高效液相色譜儀進行分析；(4)采用峰面積與濃度正比的關系用外標法定量。該方法在經過稀釋、超聲，離心后的試樣中加入姜黃素-草酸顯色劑在水浴鍋上恒溫水浴。蒸干后得到的固體用溶劑溶解定容于容量瓶中。采用高效液相色譜法測定硼-姜黃素絡合物的峰面積，對照標準曲線從而計算硼酸的含量。此方法快速可靠，簡單易行。
文檔編號G01N30/06GK102879494SQ20121036297
公開日2013年1月16日 申請日期2012年9月26日 優先權日2012年9月26日
發明者吳晶晶, 黃泰松, 李小蘭, 陳志燕, 周蕓, 韓云輝, 胡斌, 范忠, 黃世杰, 孟冬玲, 蔣錦峰, 葉長文 申請人:廣西中煙工業有限責任公司