專利名稱：乳粉中核苷酸高效液相色譜測定方法
技術領域：
本發明涉及一種乳粉中核苷酸高效液相色譜測定方法，屬于食品添加劑檢測技術領域。
背景技術：
核苷酸是一種營養素，對嬰幼兒生長發育有重要作用，所以核苷酸可用于乳品添加劑。但是，人體對核苷酸的需求是有一定限度的，并非越多越好，乳品中核苷酸的含量必須加以控制。乳制品生產企業的乳粉標準中，把核苷酸的含量列為重要指標，所以對乳品中核苷酸的含量控制極為重要，這就需要相應的技術支持。目前報道的檢測方法主要有微生物法、毛細管電泳法、高效液相色譜法等。其中高效液相色譜法分析速度快、效率高、靈敏度高，其應用最為廣泛。高效液相色譜法檢測乳粉中核苷酸，測定前對試樣必須進行處理，其中試樣中蛋白質的分離至關重要。相關資料報導，試樣處理時，普遍采用在試樣溶液中加入一定量的醋酸或高氯酸使蛋白質沉淀，再分離除去，該方法經多次試驗證明效果并不理想。試樣溶液加入醋酸或高氯酸使蛋白質沉淀，但是蛋白質沉淀粘稠，溶液分層不清，有乳化層出現，難于過濾和洗滌，嚴重影響高效液相色譜法對核苷酸的測定，該分離方法不但干擾核苷酸組分中色譜峰的分離，而且嚴重影響核苷酸測定準確度。因此采用高效液相色譜法測定乳品中核苷酸時，如何使乳品中的蛋白質有效分離且不影響核苷酸含量測定的準確度，成為必須解決的技術難題。
發明內容
本發明的目的是提供一種乳粉中核苷酸高效液相色譜測定方法，其方法簡單、操作方便、精確度高，蛋白質分離完全，排除了對核苷酸測定的干擾，為試樣中核苷酸的測定提供了良好的條件。本發明所述的乳粉中核苷酸高效液相色譜測定方法，包括如下步驟(I)用核苷酸標準品配制對照品溶液；(2)稱取乳粉試樣，加蒸餾水于超聲器中震蕩溶解處理，使試樣中核苷酸溶于蒸餾水；(3)用硝酸調節試樣溶液pH值為:T4，使試樣溶液中蛋白質形成沉淀，過濾除去，濾液用水定容，作為供試品溶液；(4)用高效液相色譜測定供試品溶液和對照品溶液核苷酸色譜峰面積；(5)根據對照品溶液核苷酸濃度及其色譜峰面積，供試品溶液核苷酸色譜峰面積及試樣質量，用外標法計算試樣中核苷酸的含量。步驟(2)所述的溶解處理時間為1(T12分鐘。核苷酸含量計算公式如下所示
權利要求
1.一種乳粉中核苷酸高效液相色譜測定方法，其特征在于包括如下步驟 (1)用核苷酸標準品配制對照品溶液； (2)稱取乳粉試樣，加蒸餾水于超聲器中震蕩溶解處理，使試樣中核苷酸溶于蒸餾水； (3)用硝酸調節試樣溶液pH值為3 4，使試樣溶液中蛋白質形成沉淀，過濾除去，濾液用水定容，作為供試品溶液； (4)用高效液相色譜測定供試品溶液和對照品溶液核苷酸色譜峰面積； (5)根據對照品溶液核苷酸濃度及其色譜峰面積，供試品溶液核苷酸色譜峰面積及試樣質量，用外標法計算試樣中核苷酸的含量。
2.根據權利要求I所述的乳粉中核苷酸高效液相色譜測定方法，其特征在于步驟(2)所述的溶解處理時間為1(Γ12分鐘。
全文摘要
本發明涉及一種乳粉中核苷酸高效液相色譜測定方法，屬于食品添加劑檢測技術領域。本發明所述的乳粉中核苷酸高效液相色譜測定方法，先用核苷酸標準品配制對照品溶液；再稱取試樣，加蒸餾水經超聲震蕩溶解，使乳粉試樣中核苷酸溶于蒸餾水；用硝酸調節試樣溶液pH值為3~4，使蛋白質形成沉淀，過濾除去，濾液用水定容，作為供試品溶液；用高效液相色譜測定供試品溶液和對照品溶液核苷酸色譜峰面積；根據對照品溶液核苷酸濃度及色譜峰面積，供試品溶液核苷酸色譜峰面積及試樣質量，用外標法計算試樣中核苷酸的含量。本發明方法簡單、操作方便、精確度高，蛋白質分離完全，排除了對核苷酸測定的干擾，為試樣中核苷酸的測定提供了良好的條件。
文檔編號G01N30/14GK102680601SQ20121015788
公開日2012年9月19日 申請日期2012年5月21日 優先權日2011年12月20日
發明者及漢俊, 孫豐春, 張振霞, 李云龍, 李文娟, 李雪艷, 畢義霞 申請人:山東凱盛新材料股份有限公司