專利名稱：一種分散固相萃取方法測定茶葉中二十種農藥殘留量的制作方法
技術領域：
本發明涉及茶葉農藥殘留分析樣品的前處理方法，是一種分散固相萃取方法，應用于茶葉農藥殘留分析中。
背景技術：
茶葉是我國重要的經濟作物，也是全國人民的生活必需品。隨著人們對食品安全質量要求日益提高，茶葉的安全質量問題已越來越為人們所重視。特別是近年來，發達國家和地區以保護健康為由，持續增加茶葉中農藥殘留的檢測種類，并且不斷降低檢測物質的檢出限量。這已成為當前我國茶葉出口最主要的技術性貿易壁壘。我國是茶葉消費大國，同時也是農藥生產和使用大國，農藥用量居世界首位，因飲用被農藥污染的茶葉而發生農藥急性中毒的事件已有發生。因此，茶葉中農藥殘留的正確檢出，是確保我國農產品國際貿易和食品安全的迫切需要，同時也是實現農業強國和涌現一批世界明星級的農產品的需要。茶葉由許多不同屬性物質組成，分析中所要檢測的農藥殘留組分往往在樣品中含量極低，可能還有多種組分共存，所以，如何進行有效的樣品前處理，從茶葉中富集痕量目標組分往往成為能否對茶葉安全性進行有效檢測的關鍵，它也是目前分析測試工作的瓶頸和國內外研究的薄弱環節。因此，需要針對樣品前處理這一制約性難題開展攻關，特別是茶葉中超微量農藥殘留分析中的提取、凈化、萃取、純化或預分離。茶葉農藥殘留分析中，經典的樣品前處理方法如索氏提取和液液萃取都存在一定的不足。這些方法步驟繁瑣，不僅花費大量時間，而且有機溶劑用量大，萃取效率較低。同樣的，現行國標方法中的茶葉提取凈化過程使用了固相萃取的方法，這種方法也存在一些問題，如I、前處理過程復雜，耗時較長(I. 5-2小時)；2、凈化過程所使用的固相萃取柱價格昂貴(120-150元/支)，且一次性使用，造成分析成本大幅提高；3、前處理過程中溶劑消耗量大(40-50暈升),對環境和分析操作者造成危害。本發明采用分散固相萃取法用于茶葉中痕量農藥殘留的前處理。方法原理是選擇對不同種類的農藥具有良好溶解性能的溶劑作為提取劑，凈化吸附劑直接分散于待凈化的提取液中，吸附基質中的干擾成分。這種方法的優點是不必進行固相萃取小柱的清洗活化平衡，以及樣品的轉移和旋轉蒸發濃縮等步驟，操作簡便，萃取效率高，回收率高，溶劑消耗量小，分析成本低，是一種綠色環保的樣品前處理方法。本發明將這種前處理方法與液相色譜-質譜聯用，應用到茶葉農藥殘留分析中。既發揮了色譜的高分離能力，又發揮了質譜的高鑒別能力，非常適用于多組分混合物的定性和定量分析。
發明內容
本發明目的就是針對茶葉樣品前處理，提出了一種簡單、易操作、重現性較好、靈敏度較高的分散固相萃取方法，用于茶葉中二十種農藥殘留量的快速檢測。本發明的技術方案如下
一種茶葉中農藥殘留量測定的前處理方法，其特征是分散固相萃取法，方法步驟包括
1)、將碾細的茶葉試樣置于10毫升具塞的聚丙烯離心管中，加入乙腈提取，振蕩并離心，移取上清液至另一個離心管中，重復以上提取步驟，合并兩次提取液，40攝氏度氮吹至干;
2)、向離心管中加入乙腈復溶，加入ODS試劑與PSA試劑，渦旋并離心，收集上清液；
3)、取上清液過O.22微米濾膜后，供液相色譜-質譜聯用儀測定。本方法的優點
1、處理過程比較簡單，大大縮短了萃取分析時間(2分鐘)；
2、吸附劑只使用了少量的ODS與PSA，對目標物的凈化效果較好，分析成本低(5-10元/次)，經濟、實用；
3、相對于國標方法，本方法所消耗的溶劑量大大降低(7-10毫升)，對環境更加友好；
4、方法的萃取效率高，回收率高，減少了目標化合物的損失。因此，本方法簡單、快速，大大降低了實驗成本，適合于茶葉樣品基質中痕量組分的測定，具有較強的應用價值。
20種農藥標準溶液的多反應監測(MRM)色譜圖(10微克/千克)如圖I-圖20 :
圖I.西瑪津標準溶液的多反應監測色譜圖 圖2.阿特拉津標準溶液的多反應監測色譜圖 圖3.莠滅津標準溶液的多反應監測色譜圖 圖4.特丁津標準溶液的多反應監測色譜圖 圖5.撲滅津標準溶液的多反應監測色譜圖 圖6.睛菌唑標準溶液的多反應監測色譜圖 圖7.三唑酮標準溶液的多反應監測色譜圖 圖8.戊唑醇標準溶液的多反應監測色譜圖 圖9.三唑磷標準溶液的多反應監測色譜圖 圖10.丙環唑標準溶液的多反應監測色譜圖 圖11.苯醚甲環唑標準溶液的多反應監測色譜圖 圖12.滅多威標準溶液的多反應監測色譜圖 圖13.異丙威標準溶液的多反應監測色譜圖 圖14.西維因標準溶液的多反應監測色譜圖 圖15.克百威標準溶液的多反應監測色譜圖 圖16.速滅磷標準溶液的多反應監測色譜圖 圖17.甲硫威標準溶液的多反應監測色譜圖 圖18.百治磷標準溶液的多反應監測色譜圖 圖19.抗蚜威標準溶液的多反應監測色譜圖 圖20.敵百蟲標準溶液的多反應監測色譜圖。
具體實施例方式利用本方法測定茶葉中的20種農藥殘留物。
稱取I克碾細的茶葉試樣，精確至O. 01克，至于10毫升具塞的聚丙烯離心管中，加入3毫升乙腈，振蕩3分鐘，以4000轉/分鐘離心3分鐘，移取上清液至另一個離心管中，再向殘渣中加入3毫升乙腈，重復以上提取步驟，合并兩次提取液；40攝氏度氮吹至干，準確移取I毫升乙腈復溶，加入150毫克ODS試劑與50毫克PSA試劑，于渦旋混合器上渦旋90秒，4000轉/分鐘離心3分鐘，取上清液過O. 22微米濾膜后，供液相色譜-質譜聯用儀測定。色譜條件色譜柱Waterssymmetry C8 column (150 X 2· I 毫米)；柱溫40 攝
氏度；流速0. 2毫升/分鐘；進樣量10微升；流動相Α相水(含O. 1%甲酸)；Β相甲醇
(含O. 1%甲酸)。梯度洗脫條件見表I :
表I液相色譜梯度洗脫條件
權利要求
1.茶葉中農藥殘留量測定的前處理方法，其特征是基質分散固相微萃取法，方法步驟為稱取I克試樣，精確至O. Ol克，置于10毫升具塞的聚丙烯離心管中，加入3毫升乙腈，振蕩3分鐘，以4000轉/分鐘離心3分鐘，移取上清液至另一個離心管中，再向殘渣中加入3毫升乙腈，重復以上步驟，合并兩次提取液；40攝氏度氮吹至干，準確移取I. 00毫升乙腈復溶，加入150毫克ODS試劑與50毫克PSA試劑，于渦旋混合器上渦旋90秒，4000轉/分鐘離心3分鐘，取上清液過O. 22微米濾膜后，供液相色譜-質譜聯用儀測定。
全文摘要
本發明提出了一種分散固相萃取方法測定茶葉中二十種農藥殘留量。茶葉樣品前處理方法為分散固相萃取法，操作步驟包括稱取1克試樣，精確至0.01克，置于10毫升具塞的聚丙烯離心管中，加入3毫升乙腈，振蕩3分鐘，以4000轉/分鐘離心3分鐘，移取上清液至另一個離心管中，再向殘渣中加入3毫升乙腈，重復以上步驟，合并兩次提取液；40攝氏度氮吹至干，準確移取1.00毫升乙腈復溶，加入150毫克ODS試劑與50毫克PSA試劑，于渦旋混合器上渦旋90秒，4000轉/分鐘離心3分鐘，取上清液過0.22微米濾膜后，供液相色譜-質譜聯用儀測定。本方法大大縮短了前處理時間，減少了試劑消耗量，降低了分析成本，提高了分析靈敏度，可應用于茶葉農藥殘留檢測。
文檔編號G01N30/06GK102636593SQ20121010055
公開日2012年8月15日 申請日期2012年4月9日 優先權日2012年4月9日
發明者張玉, 徐暉, 王帥, 薛渭宏 申請人:華中師范大學