專利名稱：一種瓜拉那果粉中天然咖啡因的高效液相色譜(hplc)定量測定方法
技術領域：
本發明涉及一種咖啡因含量的測定方法，具體涉及一種瓜拉那果粉中天然咖啡因的高效液相色譜(HPLC)定量測定方法。
背景技術：
瓜拉那是亞馬遜地區特產的一種野莓，內含天然綠色咖啡因、維生素，以及豐富的生物堿、單寧酸、蛋白質等。利用其所制成的飲料風味獨特，也是一種健康飲料。瓜拉那是英文名guarana的音譯，是無患子科的木質藤本植物，藥用部分為種子。其產于巴西亞馬孫河流域的熱帶森林，是亞馬孫地區特有的一種經濟作物。它所含的天然咖啡因是咖啡豆的 2-4. 5倍，能夠逐漸而緩慢地刺激神經，刺激維持的有效期長，而且刺激比較溫和，對人體沒有危害，而其他咖啡因來源的植物如咖啡豆、茶葉的對神經的刺激作用通常起效快，但持續時間短。瓜拉納在主產地巴西已被廣泛用于食品、飲料和制藥工業中，但在國內鮮有報道， 開發前景無限。咖啡因(Caffeine)，又稱咖啡堿，是一種白色生物堿，學名“1，2，3_三甲基黃嘌呤”，其結構為C18HltlN4O2H2O,分子量為194. 19，通常得自咖啡和茶，在藥品中主要作為溫和興奮劑及治療特定的頭痛病。因此，對其含量的測定是非常重要的。純的咖啡因是白色的，具有強烈苦狀的粉狀物，熔點238°C，升華溫度178°C，易溶于水、乙醇、丙酮及氯仿等有機溶
劑，其分子結構式如下所述
權利要求
1.一種瓜拉那果粉中天然咖啡因的高效液相色譜(HPLC)定量測定方法，其特征在于， 采用外標法測定瓜拉那果粉中的天然咖啡因含量。
2.如權利要求1所述的方法，其特征在于，所述外標法的液相色譜條件為C18、C8、C12 或苯基色譜柱，流動相為乙酸、甲醇、DMF和水組成的混合溶劑，乙酸、甲醇、DMF和水的體積比為1 3 2 4 30 38 150 170，檢測波長為^Onm。
3.如權利要求2所述的方法，其特征在于，所述色譜柱優選C18色譜柱，進一步優選 Kromasil C18 色譜柱。
4.如權利要求1-3任一項所述的方法，其特征在于，所述色譜柱柱溫為25 50°C，優選 25°C。
5.如權利要求1-4任一項所述的方法，其特征在于，所述乙酸、甲醇、DMF和水的體積比優選 1 2 2 3 30 ；35 160 170，進一步優選 2 3 35 160。
6.如權利要求1-5任一項所述的方法，其特征在于，進樣量為1 50μ 1，優選5 20 μ 1，進一步優選5 μ 1。
7.如權利要求1-6任一項所述的方法，其特征在于，所述流動相的流速為0.5 1. 5mg/ml，優選 0. 5 1. Omg/ml，進一步優選 0. 9mg/ml。
全文摘要
本發明涉及一種瓜拉那果粉中天然咖啡因的高效液相色譜(HPLC)定量測定方法。本發明采用外標法測定瓜拉那果粉中的咖啡因含量。液相色譜條件為采用C18、C8、C12或苯基色譜柱，流動相為乙酸、甲醇、DMF和水組成的混合溶劑，乙酸、甲醇、DMF和水的體積比為1～3∶2～4∶30～38∶150～170，檢測波長為280nm。所述方法定量測定咖啡因線性范圍為0.57～11.4μg，線性相關系數r＝0.9996，樣品加標平均回收率為100.36％，RSD為0.39％。本方法操作簡便、重復性好、快速、靈敏、準確、可信，可直接用于生產過程中瓜拉那果粉中天然咖啡因的含量的測定。
文檔編號G01N30/89GK102539612SQ20121000134
公開日2012年7月4日 申請日期2012年1月4日 優先權日2012年1月4日
發明者劉楓, 李楠, 李育強, 許文舫, 黃冀東 申請人:北京知蜂堂蜂產品有限公司