將抗體固定到自組裝膜上的方法
【專利摘要】本發明的目的在于使自組裝膜上所固定的抗體的量增加。本發明方法的特征在于進入了自組裝膜與抗體之間的1分子氨基酸。例如一種將抗體固定到自組裝膜上的方法,其依次具備以下的工序(a)~(b),工序(a):準備具備1分子氨基酸及所述自組裝膜的基材;工序(b):將抗體供給至所述基材上,作為所述1分子氨基酸的羧基與所述白蛋白的氨基反應的結果形成由規定化學式表示的肽鍵。
【專利說明】將抗體固定到自組裝膜上的方法
【技術領域】
[0001]本發明涉及將抗體固定到自組裝膜上的方法。
【背景技術】
[0002]為了對試樣中所含的抗原進行檢測或定量,使用生物傳感器。抗原與抗體之間的高親和性可被用到生物傳感器中。具體而言,將抗體固定到該生物傳感器上。當將抗原供給至生物傳感器時,由于抗原與抗體之間的高親和性,抗原被固定到生物傳感器上。
[0003]專利文獻I公開了具備抗體的現有的生物傳感器。該專利文獻I與日本特表2002-520618號公報對應(參照專利文獻I的第24頁第23行?26行、第25頁第3行?第20行、第25頁第27行?第26頁第13行、及第26頁第14行?第22行、第28頁第21行?第 23 行、或對應公報的第 0080、0082、0084、0085、0095、0109、0118 及 0119 段)。圖 2 表示專利文獻I的圖7所公開的生物傳感器。
[0004]根據專利文獻I的圖7有關的描述,該生物傳感器用于對生物體分子的活性進行篩選。該生物傳感器具備單層7、親和性標記物8、銜接子分子9及蛋白10。單層7由化學式X-R-Y表示的自組裝膜構成(參照專利文獻I中的第24頁第23行?26行、第25頁第3行?第20行、第25頁第27行?第26頁第13行及第26頁第14行?第22行。或者,參照對應公報的第0080、0082、0084、0085段)。X、R及Y的一個例子分別是HS-、鏈烷基及羧基(參照專利文獻I中的第25頁第3行?第20行、第25頁第27?第26頁第13行及第28頁第21行?第23行。或者參照對應公報的第0084、0085及0095段)。
[0005]現有技術文獻
[0006]專利文獻
[0007]專利文獻1:國際公開第00/04382號公報
【發明內容】
[0008]發明欲解決的課題
[0009]為了提高抗原的檢測靈敏度或定量精度,需要增加固定在該生物傳感器上的抗體的量。
[0010]本
【發明者】發現,通過使自組裝膜與I分子氨基酸鍵合、然后將抗體固定,能夠顯著增加每單位面積所固定的抗體的量。基于該認識完成了本發明。
[0011]本發明的目的在于提供使自組裝膜上所固定的抗體的量增加的方法及具有通過該方法固定的抗體的傳感器。
[0012]用于解決課題的手段
[0013]以下的第I?21項解決了上述課題。
[0014](I) 一種將抗體固定到自組裝膜上的方法,其具備以下工序:
[0015]工序(a):準備具備I分子氨基酸及自組裝膜的基材,其中,
[0016]所述I分子氨基酸通過以下的化學式(I)所示的肽鍵鍵合于所述自組裝膜,[0017]
【權利要求】
1.ー種將抗體固定到自組裝膜上的方法,其具備以下エ序: エ序(a):準備具備I分子氨基酸及自組裝膜的基材,其中, 所述I分子氨基酸通過以下的化學式(I)所示的肽鍵鍵合于所述自組裝膜,
2.根據權利要求1所述的方法,其中, 所述エ序(a)具備以下的エ序(al)及(a2): エ序(al):準備表面上具備自組裝膜的基材,其中,所述自組裝膜在一端具有羧基,エ序(a2):將所述I分子氨基酸供給至所述基材,在所述化學式(I)所示的所述自組裝膜的一端的所述羧基與所述I分子氨基酸的氨基之間形成肽鍵。
3.根據權利要求1所述的方法,其中, 在所述エ序(a)及所述エ序(b)之間還具備所述エ序(ab): エ序(ab):將所述I分子氨基酸的羧基用N-羥基琥珀酰亞胺及1-乙基-3- (3- 二甲基氨基丙基)碳二亞胺鹽酸鹽的混合液活化。
4.根據權利要求2所述的方法,其中, 在所述エ序(al)及所述エ序(a2)之間還具備所述エ序(ala): エ序(alb):將所述自組裝膜的羧基用N-羥基琥珀酰亞胺及1-乙基-3- (3- 二甲基氨基丙基)碳二亞胺鹽酸鹽的混合液活化。
5.根據權利要求1所述的方法,其中, 所述化學式(II)如以下的化學式(III)所示:
6.根據權利要求1所述的方法,其中, 所述I分子氨基酸選自由組氨酸、半胱氨酸、賴氨酸、苯丙氨酸、甘氨酸、色氨酸、蛋氨酸、絲氨酸、天冬酰胺、酪氨酸、丙氨酸、谷氨酸、蘇氨酸、亮氨酸、纈氨酸及異亮氨酸組成的組。
7.根據權利要求1所述的方法,其中, 所述I分子氨基酸選自由組氨酸、半胱氨酸、賴氨酸、苯丙氨酸、甘氨酸、色氨酸、蛋氨酸、絲氨酸、天冬酰胺、酪氨酸、丙氨酸、谷氨酸及蘇氨酸組成的組。
8.根據權利要求1所述的方法,其中, 所述I分子氨基酸選自由組氨酸、半胱氨酸、賴氨酸、苯丙氨酸、甘氨酸、色氨酸、蛋氨酸、絲氨酸、天冬酰胺、酪氨酸、丙氨酸及谷氨酸組成的組。
9.根據權利要求1所述的方法,其中, 所述I分子氨基酸選自由組氨酸、半胱氨酸、賴氨酸、苯丙氨酸、甘氨酸、色氨酸、蛋氨酸、絲氨酸、天冬酰胺及酪氨酸組成的組。
10.一種傳感器,其具備自組裝膜、I分子氨基酸及抗體,其中, 所述自組裝膜及所述抗體之間夾有所述I分子氨基酸, 所述抗體通過以下的化學式(II)所示的2個肽鍵鍵合于自組裝膜,
11.根據權利要求10所述的傳感器,其中, 所述化學式(II)如以下的化學式(III)所示:
12.根據權利要求10所述的傳感器,其中, 所述I分子氨基酸選自由組氨酸、半胱氨酸、賴氨酸、苯丙氨酸、甘氨酸、色氨酸、蛋氨酸、絲氨酸、天冬酰胺、酪氨酸、丙氨酸、谷氨酸、蘇氨酸、亮氨酸、纈氨酸及異亮氨酸組成的組。
13.根據權利要求10所述的傳感器,其中, 所述I分子氨基酸選自由組氨酸、半胱氨酸、賴氨酸、苯丙氨酸、甘氨酸、色氨酸、蛋氨酸、絲氨酸、天冬酰胺、酪氨酸、丙氨酸、谷氨酸及蘇氨酸組成的組。
14.根據權利要求10所述的傳感器,其中, 所述I分子氨基酸選自由組氨酸、半胱氨酸、賴氨酸、苯丙氨酸、甘氨酸、色氨酸、蛋氨酸、絲氨酸、天冬酰胺、酪氨酸、丙氨酸及谷氨酸組成的組。
15.根據權利要求10所述的傳感器,其中, 所述I分子氨基酸選自由組氨酸、半胱氨酸、賴氨酸、苯丙氨酸、甘氨酸、色氨酸、蛋氨酸、絲氨酸、天冬酰胺及酪氨酸組成的組。
16.ー種使用傳感器對試樣所含的抗原進行檢測或定量的方法,其具備以下エ序: エ序(a):準備具備自組裝膜、I分子氨基酸及抗體的傳感器,其中, 所述自組裝膜及所述抗體之間夾有所述I分子氨基酸, 所述抗體通過以下的化學式(II)所示的2個肽鍵鍵合于自組裝膜,
自組裝膜I分子氨基酸的殘基
17.根據權利要求16所述的方法,其中, 所述化學式(II)如以下的化學式(III)所示:
18.根據權利要求16所述的方法,其中, 所述I分子氨基酸選自由組氨酸、半胱氨酸、賴氨酸、苯丙氨酸、甘氨酸、色氨酸、蛋氨酸、絲氨酸、天冬酰胺、酪氨酸、丙氨酸、谷氨酸、蘇氨酸、亮氨酸、纈氨酸及異亮氨酸組成的組。
19.根據權利要求16所述的方法,其中, 所述I分子氨基酸選自由組氨酸、半胱氨酸、賴氨酸、苯丙氨酸、甘氨酸、色氨酸、蛋氨酸、絲氨酸、天冬酰胺、酪氨酸、丙氨酸、谷氨酸及蘇氨酸組成的組。
20.根據權利要求16所述的方法,其中, 所述I分子氨基酸選自由組氨酸、半胱氨酸、賴氨酸、苯丙氨酸、甘氨酸、色氨酸、蛋氨酸、絲氨酸、天冬酰胺、酪氨酸、丙氨酸及谷氨酸組成的組。
21.根據權利要求16所述的方法,其中, 所述I分子氨基酸選自由組氨酸、半胱氨酸、賴氨酸、苯丙氨酸、甘氨酸、色氨酸、蛋氨酸、絲氨酸、天冬酰胺及酪氨酸組成的組。
【文檔編號】G01N33/543GK103492879SQ201180070414
【公開日】2014年1月1日 申請日期:2011年9月7日 優先權日:2011年6月10日
【發明者】畠岡由香利 申請人:松下電器產業株式會社