專利名稱：生物傳感器的制作方法
技術領域：
本發明涉及對試樣液中的特定成分進行檢測的生物傳感器、特別是檢測試劑的構成。
背景技術：
以往研究出了對樣品的血糖值等進行測定的生物傳感器及其制造方法(例如，參見專利文獻1 專利文獻4)。圖1示出了現有通常的生物傳感器(傳感器芯片)1。該生物傳感器1如下制造在電極絕緣基板2上平行靠近地設置工作電極3和對電極4，在電極絕緣基板2、工作電極3和對電極4上熱粘接具有反應部孔室(cell) 5的掩片6，在反應部孔室5內的工作電極3和對電極4上涂布含有氧化還原酶的反應部用涂布液并進行干燥， 形成含有試劑層的反應部7，由此來制造生物傳感器1。需要說明的是，掩片6上層積有電絕緣性的墊片8和透明的保護片9。利用該生物傳感器1，通過將其安裝于血糖值測量顯示器并放入樣品，則血糖值測量顯示器對血糖值進行測量顯示，從而能夠檢測血糖值。此處，一般來說，生物傳感器會由于吸濕而導致試劑層所含有的介質還原，實際經過反應而被還原的介質量會增多，因而背景值會上升，產生誤差。因此，對生物傳感器實行在鋁單獨包裝內或樹脂制造的瓶內加入干燥劑以保持低濕度等的對策。但是，特別是在瓶內裝有多個芯片的情況下，受到反復開封所致吸濕的影響，輸出可能會發生變化。另外，鋁單獨包裝會增大制造成本。因此，希望有一種抑制吸濕所致的輸出變化、且無性能變化的生物傳感器。根據日本特開2002-207022中的記載，發現在熱或水分的存在下，試劑層所含有的酶蛋白或親水性高分子的一部分等與電子傳遞體發生還原反應，因而產生背景電流(噪音電流)，背景電流值經時性上升，從而導致傳感器性能變差這樣的問題變得顯著，作為該問題的對策想出了添加糖醇或金屬鹽的手段。另外，在日本特開2008-261653中公開了，為了使目的蛋白質水溶液的溶液狀態穩定化，除了該蛋白質外，在水溶液中還共存有絲膠蛋白和/或其水解物或者其同等物，從而能夠抑制渾濁的發生。另外，在日本特開2008-239512中公開了一種抗體的穩定化方法，該方法的特征在于，使抗體與絲膠蛋白和/或其水解物、或者其同等物共存。進一步地，在日本特開2008-143790中公開了一種蛋白質的溶解性改善方法，該方法的特征在于，使蛋白質與絲膠蛋白和/或其水解物或者其同等物在水溶液中共存。進一步地，在日本特開2007-151M6中還公開了下述方法為了進行生物體分子、 特別是臨床診斷藥中所用的酶或標記抗體的穩定化，使(a)生物體分子和(b)絲膠蛋白和 /或其水解物或其同等物共存，使生物體分子穩定化。但是，即使將這些方法直接應用于對血糖值等進行測定的上述生物傳感器中，也不一定會在針對吸濕的穩定化方面得到所期望的改善效果。另一方面，日本專利3867959中記載了一種葡萄糖傳感器，其具備電氣絕緣性基板；設于上述基板上的至少具有工作電極和反電極的電極系；以及與上述電極系相接或在其附近形成的、至少含有吡咯喹啉醌作為輔酶的葡萄糖脫氫酶的反應層，其中，上述反應層含有選自由葡糖酸及其鹽組成的組中的至少一種添加劑。 但是，即使將這些方法直接應用于測定血糖值等的上述生物傳感器中，也不一定會在針對吸濕的穩定化方面得到所期望的改善效果。
現有技術文獻專利文獻專利文獻1 專利文獻2 專利文獻3 專利文獻4
國際公開第2004/017057號小冊子日本特公平7-114705號公報日本專利第3063442號公報日本專利第3483314號公報
專利文獻5 日本特開2002-207022號公報專利文獻6 日本特開2008-239512號公報專利文獻7 日本特開2008-143790號公報專利文獻8 日本特開2007-151546號公報專利文獻9 日本專利第3867959號公報
發明內容
發明所要解決的課題本發明的目的在于提供一種抑制吸濕所致的輸出變化、且無性能變化的生物傳感
ο用于解決課題的手段本發明的要點在于一種生物傳感器，其特征在于該生物傳感器具備基板，其由絕緣體形成；一對電極，該一對電極彼此空出一定間隔，設于所述基板上；反應部，其以與所述電極電連接的方式形成，具有與特定成分反應的試劑層；和供給口，其用于將樣品導入至該反應部中，所述反應部與由所述供給口導入的樣品中的特定成分反應，對該特定成分進行定量分析，所述試劑層中含有(a)酶、(b)親水性高分子、和(c)選自絲膠蛋白水解物、葡糖酸鉀、絲膠蛋白水解物與葡糖酸鉀的混合物這三者中的任意之一的化合物。上述親水性高分子可以為羧基甲基纖維素的鈉鹽。上述試劑層可以含有酶和電子傳遞體。上述試劑層可以由含有酶的反應層與含有電子傳遞體的層構成。并且，本發明的特征在于，上述生物傳感器中，上述酶為葡萄糖氧化酶。另外，本發明的特征在于，上述生物傳感器中，上述酶為葡萄糖脫氫酶。
發明效果根據本發明，可以提供一種生物傳感器，其抑制吸濕所致的輸出變化，且無性能變化。
圖1為表示通常的生物傳感器的圖，圖1 (a)為俯視圖，圖1 (b)為A-A線切斷部截面圖。圖2為表示本發明實驗例中所用的生物傳感器的要部的圖，圖2(a)為俯視圖，圖 2(b)為A-A線切斷部截面圖。圖3為用于對制作本發明實驗例中所用的其他生物傳感器的方法進行說明的圖， 圖3 (a)為形成第1層時的俯視圖，圖3(b)為形成第1層時的截面圖，圖3(c)為形成第2 層時的俯視圖，圖3(d)為形成第2層時的截面圖。圖4為表示本發明實驗例中的葡萄糖濃度與電流積分值的關系的曲線圖。圖5為表示本發明實驗例中的葡萄糖濃度與電流積分值的關系的曲線圖。圖6為表示本發明實驗例中的葡萄糖濃度與電流積分值的關系的曲線圖。圖7為表示本發明的實驗例中在30°C、65%下的暴露時間與電流積分值的關系的曲線圖。圖8為表示本發明實驗例中的谷氨酸鈉添加量與電流積分值的關系的曲線圖。圖9為表示本發明實驗例中的谷氨酸鉀添加量與電流積分值的關系的曲線圖。圖10為表示本發明實驗例中的葡糖酸鉀添加量與變化量的關系的曲線圖。圖11為表示本發明實驗例中的CMC 1%+葡糖酸鉀添加量與變化量的關系的曲線圖。圖12為表示本發明實驗例中的絲膠蛋白添加量與變化量的關系的曲線圖。圖13為表示本發明實驗例中的CMC 1%+絲膠蛋白添加量與變化量的關系的曲線圖。圖14為表示本發明實驗例中的葡糖酸鉀添加量與變化量的關系的曲線圖。圖15為表示本發明實驗例中的絲膠蛋白添加量與變化量的關系的曲線圖。圖16為表示本發明實驗例中的葡萄糖濃度與電流積分值的關系的曲線圖，其為表示初期特性的曲線圖。圖17為表示本發明實驗例的經過天數與電流積分值的變化的關系的曲線圖，其為表示葡萄糖濃度為Omg/dl的情況的曲線圖。圖18為表示本發明實驗例的經過天數與電流積分值的變化的關系的曲線圖，其為表示葡萄糖濃度為100mg/dl的情況的曲線圖。圖19為表示本發明實驗例的經過天數與電流積分值的變化的關系的曲線圖，其為表示葡萄糖濃度為100mg/dl的情況的曲線圖。圖20為表示本發明實驗例的經過天數與電流積分值的變化的關系的曲線圖，其為表示葡萄糖濃度為300mg/dl的情況的曲線圖。圖21為表示本發明實驗例的經過天數與電流積分值的變化的關系的曲線圖，其為表示葡萄糖濃度為300mg/dl的情況的曲線圖。
圖22為表示本發明實驗例的經過天數與電流積分值的變化的關系的曲線圖，其為表示葡萄糖濃度為500mg/dl的情況的曲線圖。圖23為表示本發明實驗例的經過天數與電流積分值的變化的關系的曲線圖，其為表示葡萄糖濃度為500mg/dl的情況的曲線圖。
具體實施例方式本發明人發現，若不向試劑層中添加為了維持酶活性而添加的酶穩定化劑，則不會有吸濕所致的背景值的上升，從而明確了酶蛋白不是背景值上升的原因。但是，在沒有酶穩定化劑的情況下，高溫或者長期保存時的酶失活會引起輸出降低。此處，本發明人進一步對于在酶穩定化方面有效且不使背景值上升的添加劑進行了各種研究，結果發現，含有親水性高分子與絲膠蛋白水解物、或含有親水性高分子與葡糖酸鉀、或含有親水性高分子與絲膠蛋白水解物和葡糖酸鉀是有效的。下面示出實驗例對其進行說明。另外，只要沒有限定，本說明書中的濃度或者某種物質相對于其他物質的％表示是指重量基準的比例(重量％ )。傳感器芯片的制作使用圖2所示構成的傳感器芯片。在圖2中，符號10為本實驗例中所用的傳感器芯片。該傳感器芯片10的制造方法包括下述步驟在電氣絕緣基板12上平行靠近地設置工作電極14和對電極16的電極部形成步驟；將具有反應部孔室18的掩片20熱粘接的遮掩步驟；在反應部孔室18內的工作電極14和對電極16上形成具有氧化還原酶的反應部22 的反應部形成步驟；以及在掩片20上層積電氣絕緣性的墊片M和透明的保護片沈的層積步驟。需要說明的是，對于工作電極14和對電極16，在聚酰亞胺膜一側的面進行鉬的濺射，在另一側的面涂布熱粘材料(乙烯乙酸乙烯酯)，將所得物品細切成帶狀，使用該帶狀物。通過將該帶狀物熱粘接在電氣絕緣基板12上來形成電極部。反應部形成步驟包括第一層形成步驟和第二層形成步驟，在第一層形成步驟中， 在工作電極14和對電極16上涂布具有氧化還原酶的第一反應部用涂布液，進行干燥，來形成第一層觀；在第二層形成步驟中，在第一層觀上涂布具有親水性高分子化合物和電子受體的第二反應部用涂布液，進行干燥，來形成第二層30。在第一層形成步驟中，例如，將氧化還原酶溶解于水中進行涂布。在第二層形成步驟中，為了不使第一層觀溶解，利用不會溶解第一層觀的溶劑來溶解親水性高分子化合物。作為該溶劑，在本實驗例中使用乙基溶纖劑。通過這樣的反應部形成步驟，如圖2所示，形成了由作為試劑層的第一層觀和第二層 30構成的反應部22。傳感器的評價方法使用葡萄糖水溶液，求出葡萄糖濃度與電流積分值的關系。此處，所謂電流積分值為如下得到的值吸入測定樣品后使電極間的電位以50mV/sec的速度進行 OV — -0. 2V — OV — +0. 2V的變化，將-0. IV — +0. 2V電壓掃描時在電極間流經的電流變換為電壓，每隔0. Isec進行A/D轉換將60次的結果進行積分，所得值為電流積分值。耐熱性的評價方法將傳感器芯片連同干燥劑一起單獨包裝在鋁袋中，以在溫度50°C保持7天后的葡萄糖濃度300mg/dl下的輸出降低為指標。具體使用以下數學式。50°C保存7天后的濃度降低Δ 300 =初期的濃度300mg/dl積分值-加熱后的300mg/dl積分值降低量(mg/dl)= Δ 300/ 靈敏度 a※靈敏度a 葡萄糖濃度0mg/dl、100mg/dl、300mg/dl的輸出值近似直線時的斜率該降低量越少，耐熱性越好。耐濕性的評價方法不對傳感器芯片進行獨立包裝，以在溫度30°C濕度65%保持16小時后的葡萄糖濃度Omg/dl下的輸出上升為指標。具體使用以下數學式。溫度30°C濕度65%保持后的濃度降低Δ O =加濕后的Omg/dl積分值-初期的濃度Omg/dl積分值增加量(mg/dl) = AO/靈敏度a※靈敏度a 葡萄糖濃度Omg/dl、100mg/dl、300mg/dl的輸出值近似直線時的斜率該增加量為背景值的增加，增加量越少，耐濕性越好。反應層的形成方法將0. 78 μ 1的含有GOD (葡萄糖氧化酶)1. 8%和添加劑的水溶液滴加在電極上后， 在40°C進行6分鐘干燥，形成第1層。進一步地，將微粒化的鐵氰化鉀(中位直徑3.9μπι) 分散在PVP (聚乙烯吡咯烷酮)1. 3%的乙基溶纖劑溶液中達到27. 6%的濃度，將0. 76μ 1 所得到的溶液滴加在第1層18上，形成第2層。圖4表示由添加劑的有無所致的葡萄糖濃度-電流積分值的關系的差異。作為添加劑，添加與酶量相同的1.8%的谷氨酸鈉。在有添加劑的情況下，直至葡萄糖濃度達到 500mg/dl仍具有線性，但在無添加劑的情況下線性低。對于此時的酶活性，在傳感器每一芯片中，在有添加劑時為4. 2U/芯片、在無添加劑時為1. OU/芯片。在無添加劑時，由于酶活性降低，因而對葡萄糖濃度的靈敏度會降低。接下來，在圖5、圖6中表示對這些傳感器在50°C進行7天加熱后的特性。在有添加劑(圖5)時，50°C加熱后的特性與初期相比也大致沒有變化；在濃度300mg/dl時，變化量為9. 8mg/dl。在無添加劑(圖6)時，降低量較大，為61. :3mg/dl，保存時的加熱使得輸出大大減少。進一步地，圖7表示對這些傳感器在30°C、65% RH進行加濕時的輸出的經時變化。在有添加劑時，輸出隨著時間經過上升，在16小時的時刻為37. Omg/dl。在沒有添加劑時幾乎沒有上升，在16小時的時刻為0. 5mg/dl。由以上結果判明，吸濕所致的背景值上升不是由酶所致的，而是由酶所含有的穩定化劑等添加劑所致的。下面示出改變添加劑的種類、濃度來進行上述評價的結果。谷氨酸鈉添加量依存性圖8表示添加1.8%的GOD (葡萄糖氧化酶)和0 1. 8%的范圍的谷氨酸鈉時的耐熱性與耐濕性的評價結果。添加量越多，則耐熱性越好，但耐濕性非常差。谷氨酸鉀的添加量依存性圖9表示添加1.8%的GOD (葡萄糖氧化酶)和0 1. 8%的范圍的谷氨酸鉀時的耐熱性和耐濕性的評價結果。添加量越多，則耐熱性越好，但耐濕性非常差。結果與谷氨酸鈉大致同樣。葡糖酸鉀的添加量依存性圖10表示1.8%的GOD (葡萄糖氧化酶)與0 1. 8%的范圍的葡糖酸鉀時的耐熱性和耐濕性的評價結果。相比于谷氨酸鈉、谷氨酸鉀，對耐濕性的影響小。CMC (羧甲基纖維素)與葡糖酸鉀的添加量依存性圖11表示添加GOD(葡萄糖氧化酶)1. 8%與葡糖酸鉀時的耐熱性和耐濕性的評價結果。CMC 單獨添加時耐熱性上升至40mg/dl (葡糖酸鉀添加為0%的點)。通過進一步添加葡糖酸鉀，即使葡糖酸鉀的添加量少，耐熱性也有改善，可減少對耐濕性的影響。絲膠蛋白水解物的添加量依存性圖12表示添加GOD(葡萄糖氧化酶)1. 8%與絲膠蛋白水解物時的耐熱性與耐濕性的評價結果。盡管對耐熱性的效果小，但添加不會使耐濕性變差。CMCl %與絲膠蛋白水解物的添加量依存性圖13表示添加GOD (葡萄糖氧化酶)1. 8%和CMC 1 %與絲膠蛋白水解物時的耐熱性與耐濕性的評價結果。CMC 單獨添加時，耐熱性上升至40mg/dl。進一步添加少量絲膠蛋白水解物時，對耐濕性無影響，耐熱性提高。同時添加CMC和葡糖酸鉀與絲膠蛋白水解物的情況這種情況下，作為傳感器的評價方法，與上述同樣地使用葡萄糖水溶液，求出葡萄糖濃度與電流積分值的關系。其中，此處，作為電流積分值，使用如下得到的值吸入測定樣品后使電極間的電位以200mV/sec的速度進行OV — -0. 2V — OV — +0. 2V的變化， 將-0. IV — +0. 2V電壓掃描時在電極間流經的電流變換為電壓，每隔0. 025sec進行A/D轉換將60次的結果進行積分，得到電流積分值。并且，作為反應層的形成方法，使用圖3所示構成的傳感器芯片。制作工作電極 114、對電極116時，在電極絕緣基板110上直接濺射鎳，對所得到的部件通過照相平版印刷進行圖案化。將含有GOD (葡萄糖氧化酶)3. 0 %和CMC (羧甲基纖維素)0. 8 %的水溶液 0. 15μ 1滴加在工作電極114、對電極116上，在40°C進行6分鐘干燥，從而如圖3(a)和(b) 所示形成第1層118。進一步地，將微粒化的鐵氰化鉀(中位直徑3.9μπι)分散在HPC(羥基丙基纖維素)1. 13%的乙基溶纖劑溶液中達到12. 5%的濃度，將0. 20 μ 1所得到的溶液滴加在第1層118上，如圖3(c)和(d)所示形成第2層120。如此形成由第1層118和第 2層120構成的反應部122。在該方式中，向添加劑中添加CMC(0. 8% )和葡糖酸鉀與絲膠蛋白水解物，將該情況的特性示于圖14。在絲膠蛋白水解物為1. 8%時，即使添加葡糖酸鉀，耐熱性和耐濕性也均為良好。葡糖酸鉀為0. 3%、改變絲膠蛋白水解物的添加量的情況在上述方法中，在添加劑中添加CMC 0.8%和葡糖酸鉀與絲膠蛋白水解物，改變絲膠蛋白水解物的添加量，將該情況的特性示于圖15。不管絲膠蛋白水解物的添加量如何，特性均良好。下面對本發明的生物傳感器在高溫長期保存情況下的性能變化進行說明。作為評價方法，在將本發明的生物傳感器在高溫下長期保存的情況下求出經過天數與電流積分值的關系。作為電流積分值，使用如下得到的值吸入測定樣品后使電極間的電位以200mV/ sec的速度進行OV — -0. 2V — OV — +0. 2V的變化，將-0. IV — +0. 2V電壓掃描時在電極間流經的電流變換為電壓，每隔0. 025sec進行A/D轉換將60次的結果進行積分，得到電流積分值。在下述情況下，向可以在低濕度下保持生物傳感器1的瓶內加入芯片，在70°C 進行保存，測定相對于葡萄糖水溶液的輸出，對相對于初期輸出的比例進行作圖；所述情況為酶使用GOD (葡萄糖氧化酶)，同時添加葡糖酸鉀和絲膠蛋白水解物的情況；酶使用 GDH(葡萄糖脫氫酶)，同時添加葡糖酸鉀和絲膠蛋白水解物的情況；酶使用GDH(葡萄糖脫氫酶)，添加葡糖酸鉀但不添加絲膠蛋白水解物的情況；酶使用GDH(葡萄糖脫氫酶)，添加絲膠蛋白水解物但不添加葡糖酸鉀的情況。在酶使用G0D(葡萄糖氧化酶)、同時添加葡糖酸鉀和絲膠蛋白水解物的情況下， 將含有GOD (葡萄糖氧化酶)3. 0 %和CMC (羧甲基纖維素)0. 8 %、葡糖酸鉀0.3%、絲膠蛋白水解物1. 8%的水溶液0. 15 μ 1滴加在工作電極114、對電極116上，在40°C進行6分鐘干燥，從而如圖3(a)和(b)所示形成第1層118。第2層120利用與圖3的第2層120相同的方法來形成。在酶使用GDH(葡萄糖脫氫酶)、同時添加葡糖酸鉀和絲膠蛋白水解物的情況下， 將含有GDH (葡萄糖脫氫酶)3. 0 %和CMC (羧甲基纖維素)0. 8 %、葡糖酸鉀0. 3 %、絲膠蛋白水解物1. 8%的水溶液0. 15 μ 1滴加在工作電極114、對電極116上，在40°C進行6分鐘干燥，從而如圖3(a)和(b)所示形成第1層118。第2層120利用與圖3的第2層120相同的方法來形成。在酶使用GDH(葡萄糖脫氫酶)、添加葡糖酸鉀但不添加絲膠蛋白水解物的情況下，將含有GDH (葡萄糖脫氫酶)3. 0 %和CMC (羧甲基纖維素)0. 8 %、葡糖酸鉀0. 3 %的水溶液0. 15μ 1滴加在工作電極114、對電極116上，在40°C進行6分鐘干燥，從而如圖3(a)和 (b)所示形成第1層118。第2層120利用與圖3的第2層120相同的方法來形成。在酶使用GDH(葡萄糖脫氫酶)、添加絲膠蛋白水解物但不添加葡糖酸鉀的情況下，將含有GDH(葡萄糖脫氫酶)3.0%和CMC(羧甲基纖維素)0. 8%、絲膠蛋白水解物1.8% 的水溶液0. 15μ 1滴加在工作電極114、對電極116上，在40°C進行6分鐘干燥，從而如圖 3 (a)和(b)所示形成第1層118。第2層120利用與圖3的第2層120相同的方法來形成。在葡萄糖濃度為Omg/dl的情況下，如圖17所示，特性相同而與GOD、⑶H無關。在僅添加絲膠蛋白水解物的情況下，輸出的變化小。在僅添加葡糖酸鉀時，觀察到輸出的上升，但通過與絲膠蛋白水解物同時添加，輸出的上升得到抑制。在葡萄糖濃度為100mg/dl、300mg/dl、500mg/dl的情況下，如圖18 圖23所示， 特性相同而與G0D、GDH無關。在僅添加葡糖酸鉀的情況下，初期維持特性良好，但無法長期保存。在僅添加絲膠蛋白水解物的情況下，初期輸出的降低較大。可知，通過同時添加葡糖酸鉀和絲膠蛋白水解物，可在抑制初期降低的同時確保長期穩定性。工業實用性根據本發明，可以提供一種抑制吸濕所致的輸出變化、且無性能變化的生物傳感器。因此，本發明可以廣泛用于各種生物傳感器的制造。
符號說明1 生物傳感器2、12、110 電極絕緣基板3、14、114 工作電極4、16、116:對電極5、18:反應部孔室6、20:掩片7、22、122:反應部8、24:墊片9、26:保護片10:傳感器芯片28、118:第一層30、120:第二層
權利要求
1.一種生物傳感器，其特征在于， 該生物傳感器具備基板，其由絕緣體形成；一對電極，該一對電極彼此空出一定間隔，設于所述基板上；反應部，其以與所述電極電連接的方式形成，具有與特定成分反應的試劑層；和供給口，其用于將樣品導入至該反應部中，所述反應部與由所述供給口導入的樣品中的特定成分反應，對該特定成分進行定量分析，所述試劑層中含有(a)酶、(b)親水性高分子、和(c)選自絲膠蛋白水解物、葡糖酸鉀、絲膠蛋白水解物與葡糖酸鉀的混合物這三者中的任意之一的化合物。
2.如權利要求1所述的生物傳感器，其特征在于，所述親水性高分子為羧基甲基纖維ο
3.如權利要求1或2所述的生物傳感器，其特征在于，所述試劑層含有酶和電子傳遞體。
4.如權利要求1 3的任一項所述的生物傳感器，其中，所述試劑層由含有酶的反應層和含有電子傳遞體的層構成。
5.如權利要求1 4的任一項所述的生物傳感器，其中，所述酶為葡萄糖氧化酶。
6.如權利要求1 4的任一項所述的生物傳感器，其中，所述酶為葡萄糖脫氫酶。
全文摘要
本發明提供一種生物傳感器，其抑制吸濕所致的輸出變化，且無性能變化。本發明的生物傳感器具備由絕緣體形成的基板(12)、彼此空出一定間隔地設于該基板上的一對電極(14，16)、以與該電極電連接的方式形成且具有與特定成分反應的試劑層(28，30)的反應部(22)、以及將樣品導入至該反應部中的供給口；所述反應部與由所述供給口導入的樣品中的特定成分反應，對該特定成分進行定量分析；所述試劑層中含有(a)酶；(b)親水性高分子；(c)選自絲膠蛋白水解物、葡糖酸鉀、絲膠蛋白水解物與葡糖酸鉀的混合物這三者中的任意之一的化合物。
文檔編號G01N27/48GK102576001SQ201180004235
公開日2012年7月11日 申請日期2011年1月13日 優先權日2010年1月14日
發明者佐藤秀樹, 田中秀樹, 田中貴文 申請人:郡是株式會社