專利名稱:一種水質分析方法和裝置的制作方法
技術領域:
本發明涉及一種水質分析方法和裝置,尤其是一種在不進行樣品預處理時能夠扣除背景干擾的水質分析方法和裝置。
背景技術:
微生物檢測是環境或食品安全評估的重要內容,其中,細菌總數、大腸菌和致病微生物等作為國際公認的衛生檢測指標,是判定環境或食品是否安全的重要科學依據。通過微生物檢測可以正確評價環境或食品的微生物污染程度,為各項衛生管理工作提供科學依據,為相關疾病的針對性防治提供重要的科學指導,以確保人們的身體健康;同時,微生物檢測對提高環境或食品質量、避免經濟損失、保證出口等方面具有重要的意義。傳統的微生物檢測方法為培養法,采用液體培養或膜過濾后固體培養的細菌擴增模式,在細菌濃度達到較高水平時進行形態觀察或顯微鏡檢;此類方法需要較長的培養時間,且步驟繁瑣、工作量大,導致耗時較長,往往需要M-72小時甚至更久才能得到檢測結果。目前,酶底物法已成為微生物檢測的重要手段,此方法是利用微生物代謝產生的特異指示酶和相應發光底物水解反應后產生的光信號變化實現定性分析,再結合MPN計數法實現定量分析,可于18-24小時內獲得檢測結果,然而該方法的檢測速度仍顯滯后,檢測結果也還不夠準確。為解決傳統的酶底物法用時較長的問題,二十世紀初期,研究人員在自動化連續檢測技術的基礎上,利用酶底物反應信號與微生物濃度的關聯性,結合閾值分析模式,展開了快速定性定量分析的研究。如圖1所示,該方法主要是根據微生物生長曲線,即微生物生長產生的信號與檢測時間的關系曲線的特點,選擇微生物指數增長期顯著抬升段的酶底物反應的光信號絕對值或變化值作為閾值,并以此閾值作為檢測終點的判斷依據;然后依據微生物的檢測信號和檢測時間建立微生物濃度與檢測時間的標準曲線,如圖,2所示;最后結合待測微生物的檢測時間和標準曲線可得待測微生物的濃度。該方法的檢測時間由微生物的濃度決定,濃度越大,檢測時間越短;與傳統的微生物檢測方法相比,可將檢測時間縮短至4-18小時。但是,在實際水樣應用中,由于分析水樣組成成分復雜,可能存在大量游離酶以及非待測微生物源酶,會隨著檢測任務的啟動快速催化底物分解反應,持續產生背景信號,表現為檢測信號在微生物生長延遲期的快速抬升,導致檢測終點判定前即達到信號飽和,如圖3所示,從而無法實現檢測時間的有效分析。此外,由于不同樣品可能存在不同的背景信號抬升幅度,導致閾值參數需要針對不同樣品予以調整,這對操作人員的技術要求較高,并且需要經常改變閾值參數設置,為儀器的應用推廣帶來了許多不便。針對這一問題,實驗室常采用水樣過濾處理措施分離待測微生物和游離酶,并對濾膜一側截留的微生物進行反沖洗收集,再在檢測容器內加入培養基和反應底物進行酶底物檢測分析。但由于上述方式存在微生物殘留、操作繁瑣、濾膜使用壽命短和難以實現自動化等問題,在在線式儀表中難以有效應用。故此,目前存在的同類檢測設備還缺乏有效的在線式背景酶干擾克服措施,同時更缺乏針對不同背景樣品的閾值參數穩定設置方法。
發明內容
為了解決現有技術中的上述不足,本發明提供了一種無需特殊預處理的、廣泛適用的簡單、高效的水質分析方法和裝置。為實現上述發明目的,本發明采用如下技術方案一種水質分析方法,包括以下步驟A、加入待測樣品;B、設定目標菌對應的預判期,所述預判期在延遲期內;C、對預判期內采集的信號進行擬合,得到擬合線;D、啟動測量,在測量過程中,根據擬合線和生長曲線得到目標曲線,目標曲線結合已設定的閾值檢出時間,得出目標菌初始量。作為優選,所述目標曲線經過擬合線和生長曲線相減或相除得到。作為優選,所述預判期和延遲期的時間起算點相同。進一步,在步驟B中,根據延遲期及設定的預判期選擇底物添加方式并添加相應目標物,其中,方式一特異底物,方式二含特異底物的培養基;在步驟D中,若步驟B中為方式一,則需加入培養基后再啟動測量;若步驟B中為方式二,則直接啟動測量。進一步,所述預判期的時間與延遲期的比值小于M時,底物添加方式為方式一,反之為方式二。作為優選,M小于1/3。 進一步,在步驟C中,還包括增益調整步驟,所述增益調整步驟為若預判期內的信號超過儀器量程上限值,則進行增益調整后得到預判期內信號的擬合線。作為優選,所述增益調整步驟為將擬合線的斜率調整至目標菌標準斜率值以下, 所述目標菌標準斜率值是儀器量程上限值與目標菌延遲期時間比值。本發明還提供了一種水質分析裝置,包括檢測單元和分析單元,其特點是所述分析單元包括預判模塊、擬合模塊和背景扣除模塊;所述預判模塊用于設定目標菌對應的預判期,所述預判期在延遲期內;所述擬合模塊對檢測單元測得的添加特異底物的待測樣品在預判期內的信號進行擬合,得到擬合線;所述背景扣除模塊用于在測量過程中,根據擬合線和檢測單元測得的待測樣品的生長曲線得到目標曲線,目標曲線結合已設定的閾值檢出時間,得出目標菌初始量。作為優選,所述背景扣除模塊將擬合線和生長曲線相減或相除后得到目標曲線。作為優選,所述預判期和延遲期的時間起算點相同。進一步,所述預判模塊還根據延遲期及設定的預判期提示底物添加方式,并在擬合模塊得到擬合線后、啟動測量前提示是否需要加入培養基;其中,方式一特異底物,方式二含特異底物的培養基。進一步,所述預判期與延遲期的比值小于M時,獲得擬合曲線之前,所述預判模塊指示底物添加方式為方式一,獲得擬合曲線之后,指示添加培養基后再進行測量;
反之獲得擬合曲線之前,所述預判模塊提示底物添加方式為方式二,獲得擬合曲線之后,指示直接進行測量。作為優選,M小于1/3。進一步,所述分析單元還包括增益模塊,所述增益模塊用于在檢測單元測得的預判期內的信號超過儀器量程上限值時,將預判期內的信號進行增益調整;所述擬合模塊根據增益調整后的信號得到擬合線。作為優選,所述增益模塊將擬合線的斜率調整至目標菌標準斜率值以下,所述目標菌標準斜率值是儀器量程上限值與目標菌延遲期時間比值。進一步,所述檢測單元包括蠕動泵和多通道選向閥,所述待測樣品、底物和用于裝待測樣品的測量池分別與所述多通道選向閥連通。本發明與現有技術相比具有以下有益效果1、相比傳統的培養檢測方法,增加水樣預分析過程。在短時間內分析水樣背景干擾信號,調整量程,即能實現高背景樣品的檢測分析, 又可避免對水樣進行特殊前處理,使操作簡單高效。2、結合信號增益調節,實現背景扣除方法,使延遲期信號歸于平穩,并可在原測量區間予以完整顯示。對于分析同一樣品不同目標菌的情況,將擬合曲線與生長曲線做差,得到基于零線的閾值轉換,使得閾值參數設定統一化;對于不同樣品,同樣得到基于零線的閾值轉換, 也使得閾值參數設定統一化;對于不同樣品及相同樣品不同目標菌的繁瑣參數設置步驟, 降低了對操作人員的技術要求,增強分析準確性和比較分析能力。3、根據待測目標微生物的特點,可以采用特異底物單獨添加方式。避免傳統方法直接加入含底物培養基分析時,可能由于微生物生長而影響背景趨勢預判斷。4、針對不同目標微生物,可以通過切換不同底物來實現酶底物檢測分析,無需更換營養培養基,提高多種不同樣品的檢測效率。
圖1為背景技術中微生物的生長曲線;圖2為背景技術中微生物的標準曲線;圖3為高背景樣品的微生物響應信號曲線;圖4為微生物生長曲線;圖5為實施例2中糞大腸菌群各曲線示意圖。
具體實施例方式實施例1一種水質分析裝置,包括檢測單元和分析單元,所述檢測單元包括采樣模塊和檢測模塊,所述分析單元包括預判模塊、擬合模塊和背景扣除模塊;1、檢測單元所述檢測單元用于采集待測樣品并將檢測到的待測樣品和培養基的混合液的反應信號轉換為電信號,并傳送到分析單元,所述電信號與檢測時間相對應;
作為優選,所述采樣模塊包括蠕動泵、多通道選向閥、檢測模塊,所述待測樣品、底物、培養基和用于裝待測樣品的測量池分別與所述多通道選向閥的通道連通,所述檢測模塊檢測待測樣品信號并將其出遞給分析單元。所述底物可與微生物特異指示物反應并直接或者間接地發出可測量信號;所述培養基適用于待測樣品中的待測菌群。2、分析單元2. 1、預判模塊請參閱圖4,微生物生長周期內生長曲線對應區間分別為1延遲期,II對數期, III穩定期,IV衰亡期;在延遲期I內,目標菌未增殖,不會大量分泌指示酶,故,在此段時間對待測樣品進行檢測,信號的抬升是樣品中游離酶分解造成的。在該段時間內,樣品中的游離酶的量相對固定,在熒光底物充足、催化溫度恒定的條件下,酶促分解底物速率會保持恒定。所以此段時間內的信號變化可近似認為是線性的,在延遲期內可以充分得到背景信號的信息。若不加培養基則細菌不會進入生長周期,即沒有開始延遲期。所述預判模塊用于設定目標菌對應的預判期,所述預判期在延遲期內。預判期的時間起算點可以與延遲期時間起算點相同,也可以不同。作為優選,預判期與延遲期時間起算點相同。進一步,所述預判模塊還根據延遲期及設定的預判期提示底物添加方式,并在擬合模塊得到擬合線后、啟動測量前提示是否需要加入培養基;其中,方式一特異底物,方式二含特異底物的培養基。進一步,所述預判期與延遲期的比值小于M時,獲得擬合曲線之前,所述預判模塊指示底物添加方式為方式一,獲得擬合曲線之后,指示添加培養基后再進行測量;反之獲得擬合曲線之前,所述預判模塊提示底物添加方式為方式一,獲得擬合曲線之后,指示直接進行測量。作為優選,M小于1/3。根據待測目標微生物的特點,采用不同系的底物添加方式,其中包括特異底物單獨添加方式。這就避免了傳統方法直接加入含底物培養基分析時,可能由于微生物生長而影響背景趨勢的預判斷。針對不同目標菌,可以通過切換不同底物來實現酶底物檢測分析,無需更換營養培養基,提高多種不同樣品的檢測效率。2. 2、擬合模塊所述擬合模塊對檢測單元測得的添加特異底物的待測樣品在預判期內的信號進行擬合,得到擬合線;由于待測樣品中的游離酶對檢測信號有貢獻,故在檢測過程中,若待測樣品中的菌量過大時,會使得檢測信號超出儀器量程上限。進一步,所述分析單元還包括增益模塊,所述增益模塊用于在檢測單元測得的預判期內的信號超過儀器量程上限值時,將預判期內的信號進行增益調整;所述擬合模塊根據增益調整后的信號得到擬合線。經過增益調整之后,儀器量程范圍內均可顯示檢測信號。
作為優選,所述增益模塊將擬合線的斜率調整至目標菌標準斜率值以下,所述目標菌標準斜率值是儀器量程上限值與目標菌延遲期時間比值。2. 3、背景扣除模塊所述背景扣除模塊用于在測量過程中,根據擬合線和檢測單元測得的待測樣品的生長曲線得到目標曲線,目標曲線結合已設定的閾值檢出時間,得出目標菌初始量。作為優選,所述背景扣除模塊將擬合線和生長曲線相減或相除得到目標曲線。目標曲線的獲得,可以將生長曲線變化特征由接近飽和狀態拉低至儀器可顯示范圍內,同時仍保留生長曲線變化特征。這種操作方式,對于分析同一樣品不同目標菌的情況,將擬合曲線與生長曲線做差,得到基于零線的閾值轉換,使得閾值參數設定統一化;對于不同樣品,同樣得到基于零線的閾值轉換,也使得閾值參數設定統一化;對于不同樣品及相同樣品不同目標菌的繁瑣參數設置步驟,降低了對操作人員的技術要求,增強分析準確性和比較分析能力。本實施例還提供了一種水質分析方法,包括以下步驟A、向樣品池中加入待測樣品;B、設定目標菌對應的預判期,所述預判期在延遲期內;C、對預判期內采集的信號進行擬合,得到擬合線;D、啟動測量,在測量過程中,根據擬合線和生長曲線得到目標曲線,目標曲線結合已設定的閾值檢出時間,得出目標菌初始量。作為優選,所述目標曲線經過擬合線和生長曲線相減或相除得到。結合設定的閾值檢出時間,通過事先建立的標準分析模型,計算目標菌的初始數量。標準模型的建立為本領域的現有技術,在此不再贅述。作為優選,所述預判期與延遲期的時間起算點相同。進一步,所述預判模塊還根據延遲期及設定的預判期提示底物添加方式,并在擬合模塊得到擬合線后、啟動測量前提示是否需要加入培養基;其中,方式一特異底物,方式二含特異底物的培養基。進一步,所述預判期與延遲期的比值小于M時,獲得擬合曲線之前,所述預判模塊指示底物添加方式為方式一,獲得擬合曲線之后,指示添加培養基后再進行測量;反之獲得擬合曲線之前,所述預判模塊提示底物添加方式為方式二,獲得擬合曲線之后,指示直接進行測量。作為優選,M小于1/3。進一步,在步驟C中,還包括增益調整步驟,所述增益調整為若預判期內的信號超過儀器量程上限值,則將預判期內的信號調整增益后得到擬合線。作為優選,所述增益調整步驟為將擬合線的斜率調整至目標菌標準斜率值以下, 所述目標菌標準斜率值是儀器量程上限值與目標菌延遲期時間比值。相比傳統的培養檢測,引入預判期內樣品的信號擬合,并結合擬合信號調整量程, 扣除背景干擾,能實現高背景樣品的檢測分析,又可避免對水樣進行特殊前處理,使操作簡單高效。實施例2一種水質分析裝置,包括檢測單元和分析單元,所述檢測單元包括采樣模塊和檢測模塊,所述分析單元包括預判模塊、擬合模塊和背景扣除模塊;待測樣品為含有目標菌為糞大腸菌群的水樣;特異底物為4-甲基傘形酮-β-D半乳糖苷酸(MUGal)溶液;MUGal與糞大腸菌群生長產生的代謝指示物β -D-半乳糖苷酶發生特異性反應, 產生熒光信號(激發波長為365nm,發射波長為450nm)。所述采樣模塊包括蠕動泵和多通道選向閥,所述待測樣品、底物和用于裝待測樣品的測量池分別與所述多通道選向閥連通。因糞大腸菌群延遲期通常在2小時左右,本實施例中預判期在延遲期內,且預判期與延遲期的時間起算點相同,預判期與延遲期比值M設定為1/5,則本實施例的預判模塊設定的目標菌對應的預判期對應的時間為30min,其與延遲期時間的比值為1/4,大于M, 則,在獲得擬合曲線之前,所述預判模塊提示底物添加方式為方式一,僅添加特異底物,獲得擬合曲線之后,還要提示加入培養基再進行測量。檢測模塊用于檢測樣品的熒光信號,并將其傳遞給分析單元。檢測模塊數據采集頻率為每分鐘一次。擬合模塊對檢測模塊檢測的待測樣品加入底物后產生的熒光信號獲得的測量值進行擬合,獲得擬合曲線斜率值k。通常IOOmL體積水樣的單個糞大腸菌群檢出時間為14小時左右,儀器熒光信號采集范圍在0-35000imit,則預判斷標準斜率值K =量程上限/延遲期時間 42unit/分鐘;若實際水樣預判期背景變化趨勢曲線的斜率值即擬合曲線的斜率值k小于K,則加入無底物的培養基后開啟測量;若k大于等于K,則調整信號增益倍數,調整比例以K/k 值為準。調整增益后,加入無底物的培養基并開啟測量。背景扣除模塊將擬合線和生長曲線相減,結合已設定的閾值檢出時間,通過定量模型計算糞大腸菌群的初始數量。本實施例還提供了一種水質分析方法,包括以下步驟A、采用本實施例的水質分析裝置;Al、建立定量分析模型通過采樣模塊將含有糞大腸菌群的標準樣品輸送至樣品池中,加入特異底物 4-甲基傘形酮- β -D半乳糖苷酸(MUGal)溶液和培養基溶液;MUGal與糞大腸菌群生長產生的代謝指示物β -D-半乳糖苷酶發生特異性反應, 產生熒光信號(激發波長為365nm,發射波長為450nm);檢測樣品熒光信號,結合閾值獲得樣品檢測終止時間,得到初始細菌濃度對檢測終止時間的定量分析模型;定量分析模型所對應的函數表達式T = -94. 471gC+857. 62A2、采樣模塊將含有糞大腸菌群的待測樣品送至樣品池中;B、采用方式一先加入特異底物MUGal溶液,MUGal與水樣中存在的游離β -D-半乳糖苷酶發生反應,檢測單元以每分鐘采集數據一次的頻率連續監測30分鐘作為預判期;C、對預判期內采集的信號進行擬合,得到擬合線,請參閱圖5,擬合線a為Y = 13336. 15+67. 13X,線性系數為0. 999 ;獲得的擬合線的斜率值k為67. 13,K為42unit/分鐘,則k >與K,需要進行增益調整;D、需加入培養基后啟動測量將擬合線a和生長曲線b相減后得到目標曲線c,結合已設定的閾值檢出時間得出糞大腸菌群初始數量。實施例3一種水質分析裝置,與實施例2中的水質分析裝置不同的是1、待測樣品為含有目標菌為大腸桿菌的水樣;特異底物4-甲基傘形酮-β-D葡萄糖苷酸(MUG)溶液;MUG與大腸桿菌生長產生的代謝指示物β -D-葡糖醛酸糖苷酶發生特異性反應, 產生熒光信號(激發波長為365nm,發射波長為450nm)。2、因大腸桿菌延遲期通常在2小時左右,本實施例中預判期與延遲期時間比M設定為1/3,則本實施例的預判模塊設定的目標菌對應的預判時間為lOmin,其與延遲期的比值為1/12,小于M,則,在獲得擬合曲線之前,所述預判模塊提示底物添加方式為方式二,添加特異底物與培養基,獲得擬合曲線之后,直接進行測量。3、背景扣除模塊將擬合線和生長曲線相除,結合已設定的閾值檢出時間,通過定量模型計算糞大腸菌群的初始數量。本實施例還提供了一種水質分析方法,包括以下步驟A、采用本實施例的水質分析裝置;Al、建立定量分析模型通過采樣模塊將含有大腸桿菌的標準樣品輸送至樣品池中,加入特異底物4-甲基傘形酮- β -D葡萄糖苷酸(MUG)溶液和培養基溶液;MUG與大腸桿菌生長產生的代謝指示物β -D-葡糖醛酸糖苷酶發生特異性反應, 產生熒光信號(激發波長為365nm,發射波長為450nm);檢測樣品熒光信號,結合閾值獲得樣品檢測終止時間,得到初始細菌濃度對檢測終止時間的定量分析模型;所述分析模型為 T = -100. 901gC+1040. 75A2、采樣模塊將含有大腸桿菌的待測樣品送至樣品池中;B、采用方式二加入特異底物MUG溶液和培養基,MUG與樣品中存在的游離β _D_葡糖醛酸糖苷酶發生反應,檢測單元以每分鐘采集數據一次的頻率連續監測10分鐘作為預判期;C、對預判期內采集的信號進行擬合,得到擬合線,擬合線a為Y = 10276. 75+27. 33X,線性系數為0. 999 ;獲得擬合線的斜率值k為27. 33,K為42unit/分鐘, 則1^<與1(,不需要增益調整;D、啟動測量將擬合線和生長曲線相除后得到目標曲線,結合已設定的閾值檢出時間得出大腸桿菌初始數量。上述實施方式不應理解為對本發明保護范圍的限制。本發明的關鍵是通過測量預判時間內樣品信號進行樣品背景的扣除,使閾值參數設定統一化。在不脫離本發明精神的情況下,對本發明做出的任何形式的改變均應落入本發明的保護范圍之內。
權利要求
1.一種水質分析方法,包括以下步驟A、加入待測樣品;B、設定目標菌對應的預判期,所述預判期在延遲期內;C、對預判期內采集的信號進行擬合,得到擬合線;D、啟動測量,在測量過程中,根據擬合線和生長曲線得到目標曲線,目標曲線結合已設定的閾值檢出時間,得出目標菌初始量。
2.根據權利要求1所述的水質分析方法,其特征在于所述目標曲線經過擬合線和生長曲線相減或相除得到。
3.根據權利要求1所述的水質分析方法,其特征在于所述預判期與延遲期的時間起算點相同。
4.根據權利要求1所述的水質分析方法,其特征在于在步驟B中,根據延遲期及設定的預判期選擇底物添加方式并添加相應目標物,其中, 方式一特異底物,方式二含特異底物的培養基;在步驟D中,若步驟B中為方式一,則需加入培養基后再啟動測量;若步驟B中為方式二,則直接啟動測量。
5.根據權利要求4所述的水質分析方法,其特征在于所述預判期的時間與延遲期的比值小于M時,底物添加方式為方式一,反之為方式二。
6.根據權利要求5所述的水質分析方法,其特征在于M小于1/3。
7.根據權利要求1 6任一所述的水質分析方法,其特征在于在步驟C中,還包括增益調整步驟,所述增益調整步驟為若預判期內的信號超過儀器量程上限值,則將預判期內的信號進行增益調整后得到擬合線。
8.根據權利要求7所述的水質分析方法,其特征在于所述增益調整步驟為將擬合線的斜率調整至目標菌標準斜率值以下,所述目標菌標準斜率值是儀器量程上限值與目標菌延遲期時間比值。
9.一種水質分析裝置,包括檢測單元和分析單元,其特征在于所述分析單元包括預判模塊、擬合模塊和背景扣除模塊;所述預判模塊用于設定目標菌對應的預判期,所述預判期在延遲期內;所述擬合模塊對檢測單元測得的添加特異底物的待測樣品在預判期內的信號進行擬合,得到擬合線;所述背景扣除模塊用于在測量過程中,根據擬合線和檢測單元測得的待測樣品的生長曲線得到目標曲線,目標曲線結合已設定的閾值檢出時間,得出目標菌初始量。
10.根據權利要求9所述的水質分析裝置,其特征在于所述背景扣除模塊將擬合線和生長曲線相減或相除后得到目標曲線。
11.根據權利要求9所述的水質分析裝置,其特征在于所述預判模塊還根據延遲期及設定的預判期提示底物添加方式,并在擬合模塊得到擬合線后、啟動測量前提示是否需要加入培養基;其中,方式一特異底物,方式二含特異底物的培養基。
12.根據權利要求11所述的水質分析裝置,其特征在于所述預判期與延遲期的比值小于M時,獲得擬合曲線之前,所述預判模塊指示底物添加方式為方式一,獲得擬合曲線之后,指示添加培養基后再進行測量;反之獲得擬合曲線之前,所述預判模塊提示底物添加方式為方式二,獲得擬合曲線之后,指示直接進行測量。
13.根據權利要求11所述的水質分析裝置,其特征在于M小于1/3。
14.根據權利要求9所述的水質分析裝置,其特征在于所述分析單元還包括增益模塊,所述增益模塊用于在檢測單元測得的預判期內的信號超過儀器量程上限值時,將預判期內的信號進行增益調整;所述擬合模塊根據增益調整后的信號得到擬合線。
15.根據權利要求14所述的水質分析裝置,其特征在于所述增益模塊將擬合線的斜率調整至目標菌標準斜率值以下,所述目標菌標準斜率值是儀器量程上限值與目標菌延遲期時間比值。
16.根據權利要求9 15任一所述的水質分析裝置,其特征在于所述檢測單元包括蠕動泵和多通道選向閥,所述待測樣品、底物和用于裝待測樣品的測量池分別與所述多通道選向閥連通。
全文摘要
本發明涉及一種水質分析方法,包括以下步驟A、加入待測樣品;B、設定目標菌對應的預判期,所述預判期在延遲期內;C、對預判期內采集的信號進行擬合,得到擬合線;D、啟動測量,在測量過程中,根據擬合線和生長曲線得到目標曲線,目標曲線結合已設定的閾值檢出時間,得出目標菌初始量。本發明還提供了一種水質分析裝置。本發明具有無需特殊預處理、廣泛適用簡單、高效克服背景干擾等優點。
文檔編號G01N21/64GK102565018SQ20111046168
公開日2012年7月11日 申請日期2011年12月31日 優先權日2011年12月31日
發明者忻鼎承, 趙鵬 申請人:杭州聚光環保科技有限公司, 聚光科技(杭州)股份有限公司