專利名稱：納米金共振散射光譜法快速測定水中亞硝酸鹽的方法
技術領域：
本發明涉及分析化學，具體是納米金共振散射光譜法快速測定水中亞硝酸鹽的方法。
背景技術：
亞硝酸鹽常常存在于加工食品、變質果蔬、水等食物鏈中，人體食用亞硝酸鹽后， 可使人體正常的血紅蛋白被氧化而失去體內輸送氧的能力，導致組織缺氧，從而發生高鐵血紅蛋白癥。另外，亞硝酸鹽與仲胺類物質反應生成具有致癌性的亞硝胺類物質。目前定量測定水中亞硝酸鹽的方法主要有分光光度法、流動注射化學發光法、熒光法、催化光度法及離子色譜法等。這些報道的方法有些實驗步驟較多，試劑用量大，操作時間長；有的靈敏度低，選擇性差，干擾大。
發明內容
本發明的目的是為克服現有技術的不足，而提供一種納米金共振散射光譜法快速測定水中亞硝酸鹽的方法。該方法具有靈敏度高、選擇性好、方法簡便快速、成本低廉等優點，在測定水中的亞硝酸鹽中具有良好的應用前景。實現本發明的目的技術方案是在本發明的條件下，亞硝酸鹽和對氨基苯磺酸反應的產物與α-萘胺反應生成紫紅色物質；當加入納米金及氯化鈉時，該紫紅色物質使得 510 nm處的共振散射峰強度降低，且隨亞硝酸鹽濃度的增加而線性減小。采用熒光分光光度計對該反應得到的溶液進行同步掃描得到共振散射光譜，依照共振散射強度降低值與亞硝酸鹽濃度的線性關系，快速測定水中的亞硝酸鹽。應用納米金共振散射光譜法快速測定水中亞硝酸鹽，包括如下步驟
(1)制備已知濃度亞硝酸鹽的分析體系于5mL試管中，依次加入5 60 μ L 5. 8 X IO"2 mol/L的對氨基苯磺酸溶液，10 50 μ L 0. 1 mol/L的鹽酸溶液，0. 1 40 μ L 2. OXlO-3 mol/L的亞硝酸鹽標準溶液，混勻，室溫反應5分鐘后，再加入20 85 μ L 4. 2X10" 3 mol/L的α-萘胺溶液，混勻，室溫反應40分鐘，然后再加入100 300 μ L 2. 9Χ IO"4 mol/L納米金溶液，20 60 μ L 2. 0 mol/L氯化鈉溶液，混勻，室溫反應5分鐘， 用二次蒸餾水定容到2. 0 mL ；
(2)按步驟(1)的方法制備不加亞硝酸鹽的空白對照體系；
(3)取上述體系的溶液分別置于石英比色皿中，在熒光分光光度計上，同步掃描激發波長、x和發射波長、m，即、x=、m，得到體系的共振散射光譜，測定510 nm處的共振散射強度值為I，同時測定空白對照體系的共振散射強度值為Itl,計算Δ I =I0- I ；
(4)以ΔI對亞硝酸鹽的濃度關系做工作曲線；
(5)依照步驟(1)的方法制備待檢測樣品分析溶液，其中加入的亞硝酸鹽標準溶液替換為被測樣品，并按步驟(3)的方法測定被測樣品分析溶液的共振散射強度值為，計算
ΔI樣品=I(i_I樣品；(6)依據步驟(4)的工作曲線，計算出被測樣品中的亞硝酸鹽的濃度。采用本方法測定亞硝酸鹽的濃度范圍為0. 1 40 μ mol/L。本發明的優點是
與已有的方法相比，本測定方法的儀器簡單，操作簡便，試劑易得，靈敏度高，選擇性好，成本低廉。
圖1為本發明具體實施方式
中亞硝酸鹽標準體系的部分共振散射光譜圖。圖中a 是空白對照體系，含有580 μ mol/L對氨基苯磺酸溶液-1. 0 mmol/L鹽酸溶液-84 μ mol/L α-萘胺溶液-29 μ mol/L納米金溶液-50 mmol/L氯化鈉溶液；
b:是30yL 2. OX 10_3 mol/L亞硝酸鹽標準測試體系，含有580 ymol/L對氨基苯磺酸溶液-1.0 mmol/L鹽酸溶液-84 μ mol/L α-萘胺溶液-29 μ mol/L納米金溶液-50 mmol/ L氯化鈉溶液-30 μ mol/L亞硝酸鹽；
c :40uL 2. OX IO"3 mol/L亞硝酸鹽標準測試體系，含有580 μ mol/L對氨基苯磺酸溶液-1. 0 mmol/L鹽酸溶液-84 μ mol/L α-萘胺溶液-29 μ mol/L納米金溶液-50 mmol/L 氯化鈉溶液-40 μ mol/L亞硝酸鹽。
具體實施例方式應用納米金共振散射光譜法快速測定水中亞硝酸鹽，包括如下步驟
(1)亞硝酸鹽標準測試體系制備在7支5mL試管中，依次加入20 μ L 5.8Χ10_2 mol/L的對氨基苯磺酸溶液，20 μ L 0. 1 mol/L的鹽酸溶液，再分別于1至7支試管中加入 0. 1 μ L、0. 5 μ L、1 μ L、5 μ L、10 μ L、30 μ L、40 μ L 2. OXlO"3 mol/L 的亞硝酸鹽標準溶液，混勻，室溫反應5分鐘后，每管加入40 μ L 4. 2 X 10 - 3 mol/L的α-萘胺溶液，混勻，室溫反應 40分鐘，然后加入200 μ L 2. 9X IO"4 mol/L納米金溶液，50 μ L 2. 0 mol/L氯化鈉溶液， 混勻，室溫反應5分鐘，用二次蒸餾水定容到2. 0 mL ；
(2)用步驟(1)的方法不加亞硝酸鹽標準液制備空白對照體系；
(3)取上述體系的溶液分別置于石英比色皿中，在熒光分光光度計上，同步掃描激發波長λ ex和發射波長λ_，即Xex= λ em，得到體系的共振散射光譜，測定510 nm處的共振散射強度值為I，同時測定空白對照體系的共振散射強度值為Itl，計算Δ I =I0- I ；
(4)以ΔI對亞硝酸鹽的濃度C做工作曲線，獲得工作曲線為Δ 1=15. 31 C+1.32，亞硝酸鹽濃度C的單位為μ mol/L,線性范圍為0. 1 40 μ mol/L ；
(5)樣品測定依照步驟(1)的方法制備待測樣品分析溶液其中加入的水樣為被測樣品。本發明中取水樣1.5 mL，并按步驟(3)的方法測定被測樣品的共振散射強度值為， 計算Δ I樣品=Itl-I樣品=7. 2;
(6)依據步驟(4)的工作曲線，計算求出水樣中亞硝酸鹽濃度為0.51 μ mol/L。
權利要求
1.納米金共振散射光譜法快速測定水中亞硝酸鹽的方法，其特征是測定方法包括步驟如下(1)制備已知濃度亞硝酸鹽的分析體系于5mL試管中，依次加入5 60 UL 5. 8 X IO"2 mol/L的對氨基苯磺酸溶液，10 50 μ L 0. 1 mol/L的鹽酸溶液，0. 1 40 μ L 2. OXlO-3 mol/L的亞硝酸鹽標準溶液，混勻，室溫反應5分鐘后，再加入20 85 μ L 4. 2X10" 3 mol/L的α-萘胺溶液，混勻，室溫反應40分鐘，然后再加入100 300 μ L 2. 9Χ IO"4 mol/L納米金溶液，20 60 μ L 2. 0 mol/L氯化鈉溶液，混勻，室溫反應5分鐘， 用二次蒸餾水定容到2. 0 mL ；(2)按步驟(1)的方法制備不加亞硝酸鹽的空白對照體系；(3)取上述體系的溶液分別置于石英比色皿中，在熒光分光光度計上，同步掃描激發波長、x和發射波長、m，即、x=、m，得到體系的共振散射光譜，測定510 nm處的共振散射強度值為I，同時測定空白對照體系的共振散射強度值為Itl,計算Δ I =I0- I ；(4)以ΔI對亞硝酸鹽的濃度關系做工作曲線；(5)依照步驟(1)的方法制備待檢測樣品分析溶液，其中加入的亞硝酸鹽標準溶液替換為被測樣品，并按步驟(3)的方法測定被測樣品分析溶液的共振散射強度值為，計算ΔI樣品=I(i_I樣品；(6)依據步驟(4)的工作曲線，計算出被測樣品中的亞硝酸鹽的濃度。
全文摘要
本發明公開了一種納米金共振散射光譜法快速測定水中亞硝酸鹽的方法，測定步驟為1、制備已知濃度亞硝酸鹽的分析溶液，測定其510nm處的共振散射強度為I；2、制備不含亞硝酸鹽的空白對照體系，亦測定其共振散射強度為I0；3、計算ΔI=I0-I；4、以ΔI對亞硝酸鹽的濃度C做工作曲線；5、制備被測樣品分析溶液，測定其共振散射強度為I樣品，計算ΔI樣品=I0-I樣品；6、依據工作曲線，計算出被測樣品中的亞硝酸鹽的濃度。本發明的優點是與已有的方法相比，本測定方法的儀器簡單，操作簡便，試劑易得，靈敏度高，選擇性好，成本低廉。
文檔編號G01N21/63GK102435587SQ20111039943
公開日2012年5月2日 申請日期2011年12月6日 優先權日2011年12月6日
發明者吳蒙, 梁愛惠, 蔣治良, 許麗莉, 陸順嬌, 魯曉婷 申請人:廣西師范大學