專利名稱：養殖或屠宰環境中6種擬除蟲菊酯類藥物的測定方法
技術領域：
本發明涉及牛、羊、豬、雞、魚和蝦養殖和屠宰環境中甲氰菊酯，λ -氯氟氰菊酯，氟氯氰菊酯，λ -氯氰菊酯，氟胺氰菊酯，溴氰菊酯等6種擬除蟲菊酯類藥物的檢測方法。
背景技術：
擬除蟲菊酯類農藥脂溶性高、水溶性很差、在環境中殘留期較長、代謝速度很慢。 毒性特點主要為①毒性強；②負溫度依賴性；③選擇毒性；④其它靶標位，各種受體、通道和酶均可能成為擬除蟲菊酯的作用靶標。擬除蟲菊酯類農藥對人或哺乳動物毒性低或有中等毒性，但對蜜蜂和魚則是高毒的，然而接觸該類藥物的人群會有慢性毒性表現頭痛、眩暈、惡心、皮膚瘙癢等。有報道稱，長期接觸該類藥物會引起淋巴結和脾臟損傷，有致癌變的危險。原因在于擬除蟲菊酯類農藥可以影響人體內的鈉離子通道，進而引起一系列神經毒性癥狀，例如抽搐、戰栗、共濟失調、麻痹等。隨著擬除蟲菊酯類藥物的大量濫用和過度使用，導致土壤和環境水的污染。而目前擬除蟲菊酯類農藥的檢測對象主要是針對蔬菜、水果或動物源性的食品等，而針對土壤和環境水中擬除蟲菊酯類農藥的檢測方法仍然缺失。
發明內容
本發明提供用于牛、羊、豬、雞、魚和蝦屠宰和養殖環境的土壤和水體中甲氰菊酯， λ -氯氟氰菊酯，氟氯氰菊酯，λ -氯氰菊酯，氟胺氰菊酯，溴氰菊酯6種擬除蟲菊酯類藥物的免疫親和柱凈化-氣質聯用檢測方法，以治理環境污染，提升我國環境質量。本發明方法包括以下步驟(1) 土壤樣品中加入石油醚-乙醚超聲振蕩提取，取濾液揮干后用甲醇-磷酸鹽緩沖溶液(PH ^ 7. 8)溶解，準備過免疫親和柱凈化；(2)環境水樣品中直接使用磷酸鹽緩沖溶液(pH ^ 7. 8)稀釋，準備過免疫親和柱凈化；(3)濾液加入免疫親和萃取柱，NaCl-PBS-20%甲醇溶液淋洗，甲醇溶液洗脫，正己
烷定容。(4)將定容樣品溶液用氣相-質譜進行分析測試，測得樣品的色譜峰；(5)將測得的色譜峰與各已知藥物的標準色譜峰對照，確定所檢出藥物的名稱。上述步驟C3)所說固相萃取柱為自制的擬除蟲菊酯類的免疫親和萃取柱。本發明采用空白土壤樣本用石油醚-乙醚提取，磷酸鹽緩沖液(PBS)溶解，自制備免疫親和柱凈化；環境水用磷酸鹽緩沖液(PBQ調節pH值后利用免疫親和柱凈化。該方法專一性強、操作簡單、檢測低限低，土壤和環境水檢測低限分別可達到20μ g/kg和5μ g/L。 該方法為治理環境污染，制定相關行業及國家標準提供了參考。
具體實施例方式實施例土壤和環境水樣品中擬除蟲菊酯類殘留檢測
稱取2g空白土壤樣本，置于30mL離心管中，靜置Ih后，進行提取。加入石油醚-乙 Bi (1 1，v/v)6mL。渦旋Imin后進行超聲水浴提取lOmin。離心G000rpm，6min)收集上清液，重復提取一次，合并上清液，在45°C下旋轉蒸發至至干，采用5mL甲醇復溶，移出溶液，離心后用20mL磷酸鹽緩沖溶液(PBQ稀釋，等待IAC凈化。準確量取水樣本IOOmL,過濾后，用磷酸鹽緩沖溶液(PBQ稀釋1倍，等待IAC凈化。將IAC柱用20mL PBS平衡后，上樣，在重力作用下流出；然后進行淋洗，淋洗溶液是含有0. 2M的NaCl-PBS-20%甲醇溶液，淋洗體積為20mL ；最后用4mL甲醇溶液洗脫，并收集洗脫液；使用20mL水和15mL PBS溶液對IAC柱再生，最后將柱保存在4°C于0. 01 %疊氮鈉-PBS溶液中。將收集的洗脫液在氮氣流下吹干，溶解于ImL環己烷溶液中，用GC-MS進行檢測。液相色譜-串聯質譜儀測定典型條件Varian GC 3800-Varian Saturn 2000，毛細管色譜柱VF-5mscolumn(30mX0.載氣高純氦，> 99. 999 %，流速為ImIv升溫程序和進樣口溫度同1. 3. 1.離子阱溫度是220°C傳輸線溫度260°C岐盒溫度45°C倍增器電壓1750v燈絲電流50mA掃描方式MS/MS表1、6種菊酯類藥物的質譜參數
權利要求
1.養殖或屠宰環境中6種擬除蟲菊酯類藥物的測定方法，其特征是包括以下步驟(1)土壤樣品中加入石油醚-乙醚超聲振蕩提取，取濾液揮干后用PH 7.8甲醇-磷酸鹽緩沖溶液溶解或環境水樣品直接使用pH 7. 8磷酸鹽緩沖溶液稀釋，得樣品提取液；(2)所述樣品提取液加入免疫親和萃取柱，NaCl-PBS-20%甲醇溶液淋洗，甲醇溶液洗脫，正己烷定容，；(3)將定容樣品溶液用氣相-質譜進行分析測試，測得樣品的色譜峰；(4)將測得的色譜峰與各已知藥物的標準色譜峰對照，確定所檢出藥物名稱。
2.根據權利要求1所述的測定方法，其特征是所說固相萃取柱為自制的擬除蟲菊酯類的免疫親和萃取柱。
全文摘要
本發明涉及養殖或屠宰環境中6種擬除蟲菊酯類藥物的測定方法，具體是牛、羊、豬、雞、魚或蝦的屠宰或養殖環境的土壤或環境水中甲氰菊酯，λ-氯氟氰菊酯、氟氯氰菊酯、λ-氯氰菊酯、氟胺氰菊酯、溴氰菊酯六種擬除蟲菊酯類藥物的免疫親和柱凈化-氣質聯用的快速鑒定和確證檢測方法。空白土壤樣本利用石油醚-乙醚提取，磷酸鹽緩沖液(PBS)溶解，自制備免疫親和柱凈化；環境水用磷酸鹽緩沖液(PBS)調節pH值后利用免疫親和柱凈化。該方法專一性強、操作簡單、檢測低限低，土壤和環境水檢測低限分別可達到20μg/kg和5μg/L。該方法為治理環境污染，制定相關行業及國家標準提供了參考。
文檔編號G01N30/02GK102507788SQ20111036374
公開日2012年6月20日 申請日期2011年11月15日 優先權日2011年11月15日
發明者丁濤, 張睿, 蔣原, 薛峰 申請人:江蘇出入境檢驗檢疫局動植物與食品檢測中心