專利名稱:一種測定磷酸-5’-吡哆醛含量的高效液相色譜分析方法
技術領域:
本發明涉及一種測定磷酸_5’ -吡哆醛含量的高效液相色譜分析方法。
背景技術:
磷酸-5’ -吡哆醛又稱磷酸吡醛素、吡哆醛-5-磷酸酯、輔脫羧酶,是維生素B6的輔酶形式(轉氨酶、脫羧酶和消旋酶的酶),參與氨基酸代謝中的轉氨基作用,它主要用于生化研究,孕留酮特性的結構修飾,酶抑制劑。磷酸-5’ -吡哆醛的結構式如下
權利要求
1.一種測定磷酸-5’-吡哆醛含量的高效液相色譜分析方法,其特征在于,包括如下步驟1)采用反相高效液相色譜法,高效液相色譜的條件如下 色譜柱ci8,5 μ m,250 X 4. 6mm (I. D.),流動相組成乙腈水=30-10 70-90(v/v),并以磷酸氫二鈉緩沖液調節pH值=6, 流速:1. Oml/min, 柱溫30°C, 檢測波長388nm, 進樣體積10. Ομ 1 ;2)配制磷酸_5’-吡哆醛標準溶液及樣品溶液;3)二極管陣列檢測器在340-500nm之間進行連續掃描;4)制作標準曲線,測定峰面積,計算樣品主成分含量。
2.根據權利要求1所述的高效液相色譜分析方法,其特征在于,流動相組成為乙腈 /K= 30 70 (ν/ν) ο
3.根據權利要求1所述的高效液相色譜分析方法,其特征在于,將測定主成分含量的樣品用水溶解稀釋成0. 2mg/ml后,再測定磷酸_5’ -吡哆醛的含量。
全文摘要
本發明公開了一種測定磷酸-5’-吡哆醛含量的高效液相色譜分析方法。采用反相高效液相色譜法,其高效液相色譜條件如下色譜柱為C18,5μm,250×4.6mm(I.D.);流動相組成為乙腈∶水=30-10∶70-90(v/v),并以磷酸氫二鈉緩沖液調節pH值為6;流速為1.0ml/min;柱溫為30℃;檢測波長為388nm;進樣量為10.0μl。將測定主成分含量的進樣樣品用水溶解稀釋成0.2mg/ml后,再測定磷酸-5’-吡哆醛的含量。用本發明的分析方法能快速準確測定磷酸-5′-吡哆醛的含量,為磷酸-5’-吡哆醛產品的質量控制提供了可靠的分析方法。
文檔編號G01N30/02GK102323350SQ20111022473
公開日2012年1月18日 申請日期2011年8月5日 優先權日2011年8月5日
發明者倪傳紅, 施虹, 胡鳴, 陳浩云, 馬駿 申請人:國藥集團化學試劑有限公司