專利名稱：一種基于自組裝材料對癌細胞表面增強拉曼檢測的方法
技術領域：
一種基于自組裝材料對癌細胞表面增強拉曼檢測的方法，屬于分析化學技術領域。
背景技術：
功能性納米材料包括量子點、金納米粒子、金納米棒等，這些納米材料具有特殊的光學、磁學、電學、熱力學等特性，納米材料的應用已經成為當前研究的熱點。尤其是金納米粒子和金納米棒的特殊的光吸收、光散射效應及拉曼增強效應使得其作為傳感器在納米科學與技術研究中應用最為廣泛的兩種材料。單分散的納米材料通過自組裝手段形成一些獨特的材料具有等離子耦合，電磁場增強，熒光淬滅或者增強及多重功能性質耦合等性質。通過研究可控、動態自組裝材料的性質可以更好地理解宏觀材料的物理和化學性質。在可控納米材料自組裝的過程中，納米材料的各向異性及其表現出來的特異化學反應性質成為納米材料自組裝的關鍵因素。金納米棒同時具有空間幾何和化學各向異性，并且金納米棒可以通過改變長徑比(金納米棒的長度和金納米棒的直徑的比值)調節金納米棒的縱向共振峰來實現金納米棒在可見光或者近紅外區域強的光吸收，因而這些獨特的性質使得金納米棒能夠實現可控自組裝材料良好的 “原料”，進而能夠提供對自組裝納米材料進行理論解析的一個良好的模型。由于介質的某些不均勻性(如電場、粒子數密度等)，光波與介質相互作用時，光波會改變傳播方向，這就是光的散射現象。它包括兩種情況一是光波與介質無能量交換產生彈性散射，如瑞利散射等；另外一種是由印度物理學家C. V. Raman在1擬8年發現的光波與介質發生能量交換，散射光波長與入射光波長之間就會發生位移現象，這時即為非彈性散射，也被稱為拉曼散射現象。Raman由于發現這種新的光散射現象獲得了 1930年的諾貝爾物理學獎。表面增強拉曼散射(Surface Enhanced Raman Scattering, SERS)是拉曼散射的一種，它可以被簡短地描述為當分子吸附在特別制備的金屬表面時，它的拉曼信號強度要比簡單計算的預期值高出IO5-IO6倍的這種現象。這就使得單分子檢測成為了可能。
發明內容
本發明的目的是提供一種基于自組裝材料對活細胞癌細胞表面增強拉曼檢測的方法，制備出組裝結構均一，可控并且具有SERS活性的納米材料組裝體并將其應用于癌細胞進行檢測。本發明的技術方案
表1 DNA的編號、序列及長度
編號序列(5’ -3’ )長度ASYlTAGGAATAGTTATAAAAAMAAAAA25ASY2TTATAACTATTCCTAAAAAMAAAA25ASY3AAMAAAAAA10
注本發明所使用的DNA均購自中國上海生工生物工程有限公司，并通過聚丙烯酰胺凝膠電泳進行純化。—種基于自組裝材料對活細胞癌細胞表面增強拉曼檢測的方法，包括金納米棒探針及金納米粒子探針制備，金納米棒探針和金納米粒子探針的自組裝，癌細胞的培養，表面增強拉曼檢測癌細胞；工藝步驟為
(1)金納米棒探針及金納米粒子探針的制備
金納米粒子和巰基修飾的DNA進行偶聯形成金納米粒子探針； 采用不同的方法對金納米棒的全身、端面及側面修飾DNA形成全身修飾；側面修飾、端面封閉；端面修飾、側面封閉三種不同類型的金納米棒探針
(2)金納米棒探針和金納米粒子探針自組裝
對步驟(1)制備好的金納米棒探針和金納米粒子探針進行自組裝形成三種不同的自組裝結構金納米粒子圍繞金納米棒組裝形成衛星式組裝結構；金納米粒子圍繞金納米棒側面組裝；金納米粒子和金納米棒端面組裝；
(3)Hela細胞的培養
利用培養基對Hela細胞進行培養；
(4)表面增強拉曼檢測癌細胞
將步驟(2)制備好的三種自組裝材料分別加入到步驟(3)培養的Hela細胞中進行表面增強拉曼檢測。所述的基于自組裝材料對活細胞癌細胞表面增強拉曼檢測的方法，金納米粒子探針及金納米棒探針制備
1)金納米粒子探針制備
潔凈的三角燒瓶中加入95mL的超純水，而后向水中加入5mL的濃度為2g/L的氯金酸， 加熱，煮沸，緊接著加入2. 5mL質量濃度1%的檸檬酸三鈉溶液，邊加熱邊攪拌，溶液顏色從淡黃色變成紅色，反應持續6-8min以使檸檬酸三鈉完全沉降，最后，溶液冷卻至室溫，用超純水稀釋到100mL，4°C保藏，即制得粒徑18nm級的金納米粒子；
(T)將5mL的金納米粒子IOOOOrpm離心IOmin用0. 5mL的超純水分散，IOOOOrpm離心
IOmin棄上清，用ImL的超純水分散，4°C保藏、待用；
取步驟①制備的金納米粒子SOyL加入SyL 100 μ M的ASYl，混勻，室溫靜置反
應1 !后，加入2. 1 μ L的2Μ的NaCl溶液至反應體系中NaCl濃度達到50mM，混勻，室溫靜置反應12h ；
所述 ASYl 為5，-TAGGAATAGT TATAAAAAAA AAAAA-3，；
③將步驟②中反應溶液在IOOOOrpm離心lOmin，棄上清，后用80 μ L超純水分散沉
淀，后用超純水清洗一次，4°C保藏、待用，得金納米粒子探針；
2)金納米棒探針制備
晶種合成下0. ImL的2g/L的三水合四氯金酸加入到ImL的0. 2M的十六烷基三甲基溴化銨溶液中，溶液顏色由無色變成黃褐色，然后加入0. 12mL新配制的0. OlM硼氫化鈉溶液，快速攪拌2min，溶液顏色即由黃褐色變為淺棕色；金納米棒生長金種子溶液合成好以后，進行金納米棒的生長，5mL的2g/L的三水合四氯金酸加入到5mL、0. 2M十六烷基三甲基溴化銨溶液中，加入4mL的超純水，混勻，0. 125 mL 的0. OlM硝酸銀溶液加入到上述混合體系中，混勻，隨后將65PL、0. IM抗壞血酸溶液加入上述體系中，28°C下攪拌反應2min，溶液由褐色變成無色，最后，加入0. 05mL的晶種溶液輕柔攪拌混勻20sJ8°C反應4h，制得金納米棒；
將5mL金納米棒IOOOOrpm離心IOmin用0. 5mL的超純水分散，IOOOOrpm離心IOmin 棄上清，用0. 5mL的0. 005M十六烷基三甲基溴化銨CTAB溶液分散，4°C保藏、待用，用于修飾；
(T)全身修飾
取上述待用的金納米棒10 μ L加入4 μ L的100 μ M的ASY2，混勻，室溫振搖反應12h， 6000rpm離心lOmin，棄上清，用10 μ L的超純水分散沉淀，超純水洗一次，4°C保藏、得全身修飾的金納米棒探針；
所述 ASY2 為5’ -TTATAACTAT TCCTAAAAAA AAAAA-3’ ；
側面修飾、端面封閉
取上述待用的金納米棒10 μ L加入1 μ L的10 μ M的輔助ASTO振搖反應12h，封閉端面，后加入4 μ L的100 μ M的ASY2修飾側面，混勻，室溫振搖反應12h，6000rpm離心6min， 棄上清，用IOyL的超純水沉淀，超純水洗一次，4°C保藏、得側面修飾、端面封閉的金納米棒探針；
所述 ASTO 為5，-AAAAAAAAAA-3，；
CD端面修飾、側面封閉
取上述待用的金納米棒10 μ L加入IyL的IOyM的ASY2，混勻，室溫振搖反應12h，后加入4 μ L的100 μ M的輔助ASTO封閉側面，混勻，室溫振搖反應12h，6000rpm離心6min，棄上清，用IOyL的超純水分散，超純水洗一次，4°C保藏、得端面修飾、側面封閉的金納米棒探針；
④對照組
取上述待用的金納米棒IOyL加入4 μ L的100 μ M的輔助ASTO振搖反應12h，6000rpm 離心6min，棄上清，用IOyL的超純水分散，超純水洗一次，4°C保藏、得金納米棒-ASTO復合物。 所述的基于自組裝材料對活細胞癌細胞表面增強拉曼檢測的方法，金納米棒探針和金納米粒子探針的自組裝
(T)金納米粒子圍繞金納米棒組裝形成衛星式組裝結構
取制得的全身修飾的金納米棒探針2 μ L和金納米粒子探針10 μ L，加入12 μ L pH7. 5 的含0. 01%的十二烷基磺酸鈉SDS、20mM KCl的0. OlM Tris-HCl雜交緩沖液，混勻，室溫振搖反應12h ； 金納米粒子圍繞金納米棒側面組裝
取制得的側面修飾、端面封閉的金納米棒探針2μ L和金納米粒子探針9yL，加入 IluL ρΗ7· 5的含0. 01%的SDS、20mM KCl的0. OlM Tris-HCl雜交緩沖液，混勻，室溫振搖反應1 !；
③金納米粒子和金納米棒端面組裝
取制得的端面修飾、側面封閉的金納米棒探針3 μ L和金納米粒子探針3 μ L，加入6 μ L ρΗ7. 5的含0. 01%的SDS、20mM KCl的0. OlM Tris-HCl雜交緩沖液，混勻，室溫振搖反應 12h ；
對照組裝
取制得的金納米粒子探針5 μ L和輔助hsn全身修飾的金納米棒5 μ L，加入10 μ L ρΗ7. 5的含0. 01%的SDS，20mM KCl的0. OlM Tris-HCl雜交緩沖液，混勻，室溫振搖反應 12h。所述的基于自組裝材料對活細胞癌細胞表面增強拉曼檢測方法，表面增強拉曼檢測癌細胞將制備好的三種自組裝材料及對照組裝用超純水稀釋3倍，分別取10 μ L的三種組裝材料及對照組裝分別加入到100 μ L的Hela細胞培養液中，37°C、5%的(X)2恒溫培養箱培養12h，棄上層培養液，對細胞進行拉曼測定，25°C表面拉曼增強儀測定信號。本發明的有益效果表面增強拉曼散射(Surface Enhanced Raman cattering， SERS)是拉曼散射的一種，它可以被簡短地描述為當分子吸附在特別制備的金屬表面時，它的拉曼信號強度要比簡單計算的預期值高出IO5-IO6倍的這種現象。這就使得單分子檢測成為了可能。本發明制備出組裝結構均一、可控并且具有SERS活性的納米材料組裝體并將其應用于癌細胞進行檢測。
圖1 典型的金納米棒和金納米粒子的組裝結構圖。A)金納米粒子繞金納米棒全身自組裝；B)金納米粒子和金納米棒側面自組裝；C)金納米粒子和金納米棒端面自組裝；D)對照組裝。圖2 Hela細胞在加入自組裝材料培養12h的光學顯微鏡照片。A)全身自組裝納米材料；B)側面自組裝納米材料；C)端面自組裝納米材料。圖3 Hela活細胞的表面增強拉曼圖。
具體實施例方式實施例1
金納米粒子和金納米棒探針制備
與本申請人申請的專利一種具有表面增強拉曼活性的自組裝材料的制備方法，申請號101010605799.9的制備金納米粒子和金納米棒探針的步驟類似進行制備本專利所要求的金納米棒和金納米粒子的探針。
1)金納米粒子探針制備
潔凈的三角燒瓶中加入95mL的水，而后向水中加入5mL的濃度為2g/L的氯金酸，加熱，煮沸，緊接著加入2. 5mL質量濃度1%的檸檬酸三鈉溶液，邊加熱邊攪拌，溶液顏色從淡黃色變成紅色，反應持續6-8min以使檸檬酸三鈉完全沉降，最后，溶液冷卻至室溫，稀釋到 100mL，4°C保藏，即制得粒徑18nm級的金納米粒子。φ將上述制備的5mL的金納米粒子IOOOOrpm離心IOmin用0. 5mL的超純水分散，IOOOOrpm離心IOmin棄上清，用ImL的超純水分散，4°C保藏、待用。 取上述制備好的金納米粒子80μ L加入8μ LlOOy M的ASY1，混勻，室溫靜置
反應1 !后，加入2. 1 μ L的2M的NaCl溶液至反應體系中NaCl濃度達到50mM，混勻，室溫靜置反應12h。 將上述步驟中反應溶液在IOOOOrpm離心lOmin，棄上清，后用80 μ L超純水分
散沉淀，后用超純水清洗一次，4°C保藏、待用。2)金納米棒探針制備
晶種合成28. 0°C下0. ImL的2g/L的三水合四氯金酸加入到ImL的0. 2M的十六烷基三甲基溴化銨溶液中，溶液顏色由無色變成黃褐色，然后加入0. 12mL新配制的0. OlM硼氫化鈉溶液，快速攪拌2min，溶液顏色即由黃褐色變為淺棕色；
金納米棒生長金種子溶液合成好以后，進行金納米棒的生長，5mL的2g/L的三水合四氯金酸加入到5mL、0. 2M十六烷基三甲基溴化銨溶液中，加入4mL的水，混勻，0. 125 mL的 0. OlM硝酸銀溶液加入到上述混合體系中，混勻，隨后將65PL、0. IM抗壞血酸溶液加入上述體系中，28°C下攪拌反應2min，溶液由褐色變成無色，最后，加入0. 05mL的晶種溶液輕柔攪拌混勻20s，28V反應4h，制得金納米棒。 將上述制備的5mL金納米棒IOOOOrpm離心IOmin用0. 5mL的超純水分散， IOOOOrpm離心IOmin棄上清，用0. 5mL的0. 005M CTAB分散，4°C保藏、待用
①全身修飾
取上述制備好的金納米棒10 μ L加入4 μ L的100 μ M的ASY2，混勻，室溫振搖反應12h， 6000轉每min離心lOmin，棄上清，用10 μ L的超純水分散沉淀，超純水洗一次，4°C保藏、待用。③側面修飾、端面封閉
取上述制備好的金納米棒10 μ L加入1 μ L的10 μ M的輔助ASTO振搖反應12h，封閉端面，后加入4 μ L的100 μ M的ASY2修飾側面，混勻，室溫振搖反應12h，6000轉每min離心 6min,棄上清，用10 μ L的超純水沉淀，超純水洗一次，4°C保藏、待用。③端面修飾、側面封閉
取上述制備好的金納米棒10 μ L力卩入1 μ L的10 μ M的ASY2，混勻，室溫振搖反應12h，
9后加入4 μ L的100 μ M的輔助ASTO封閉側面，混勻，室溫振搖反應12h，6000轉每min離心 6min，棄上清，用IOyL的超純水分散，超純水洗一次，4°C保藏、待用。④對照實驗
取上述制備好的金納米棒IOyL加入4 μ L的100 μ M的輔助ASTO振搖反應12h，6000 轉每min離心6min，棄上清，用10 μ L的超純水分散金納米棒-ASTO復合物，超純水洗一次， 4°C保藏、待用。實施例3金納米棒探針和金納米粒子探針自組裝 Φ金納米粒子圍繞金納米棒組裝形成衛星式組裝結構
取修飾好的全身修飾的金納米棒2μ L和修飾好的金納米粒子10 μ L，加入12 μ L ρΗ7. 5的0. OlM的Tris-HCl，0. 01%的SDS，20mM的KCl雜交緩沖液，混勻，室溫振搖反應 12h。@金納米粒子圍繞金納米棒側面組裝
取修飾好的側面修飾、端面封閉的金納米棒2μ L和修飾好的金納米粒子9μ L，加入 11 μ L ρΗ 7. 5的0. OlM的Tris-HCl，0. 01%的SDS, 20mM的KCl雜交緩沖液，混勻，室溫振搖反應1 1。§)金納米粒子和金納米棒端面組裝
取修飾好的端面修飾、側面封閉的金納米棒3μ L和修飾好的金納米粒子3yL，加入 6 μ L ρΗ 7. 5的0. OlM的Tris-HCl，0. 01%的SDS, 20mM的KCl雜交緩沖液，混勻，室溫振搖反應1 1。 對照組裝
中金納米粒子5 μ L和輔助ASY3全身修飾的金納米棒5 μ L，加入10 μ L ρΗ7· 5的0. OlM 的Tris-HCl，0. 01%的SDS，20mM的KCl雜交緩沖液，混勻，室溫振搖反應12h。實施例4 Hela細胞培養
本專利采用的癌細胞是Hela細胞。Hela細胞從培養瓶到96孔板的處理過程
Φ去除培養瓶中的舊培養基，每個培養瓶加入2 mL ρΗ 7.4 0. OlM的磷酸鹽緩沖液， 左右輕微晃動培養瓶，然后去除磷酸鹽緩沖液。@然后向每個培養瓶中加入ImL 0. 25%的胰蛋白酶消化液，消化:3min。 將加入的胰蛋白酶消化液去除。 加入2 mL的DMEM培養基(上海滬峰生物科技有限公司提供)，輕輕吹打幾次，直至培養瓶壁上的細胞都分散到培養基中。 將上述制備好的細胞培養液加入到細胞培養板中，每孔加入lOOyL。(6)然后將上述細胞培養板放置在培養條件37°C、5%的0)2恒溫培養箱培養12 h。實施例5表面增強檢測癌細胞
將實施例3制備好的三種自組裝材料及對照組裝用水稀釋3倍，分別取IOyL的三種組裝材料及對照組裝分別加入到每孔含有100 μ L的Hela細胞培養液的96孔板中，(每個孔中含有約10萬個細胞)，37°C、5%的(X)2恒溫培養箱培養12 h，棄上層培養液，對細胞進行拉曼測定，25°C表面拉曼增強儀器測定信號。
權利要求
1.一種基于自組裝材料對活細胞癌細胞表面增強拉曼檢測的方法，其特征在于金納米棒探針及金納米粒子探針制備，金納米棒探針和金納米粒子探針的自組裝，癌細胞的培養，表面增強拉曼檢測癌細胞；工藝步驟為(1)金納米棒探針及金納米粒子探針的制備金納米粒子和巰基修飾的DNA進行偶聯形成金納米粒子探針；采用不同的方法對金納米棒的全身、側面及端面修飾DNA形成全身修飾；側面修飾、端面封閉；端面修飾、側面封閉三種不同類型的金納米棒探針(2)金納米棒探針和金納米粒子探針自組裝對步驟(1)制備好的金納米棒探針和金納米粒子探針進行自組裝形成三種不同的自組裝結構金納米粒子圍繞金納米棒組裝形成衛星式組裝結構；金納米粒子圍繞金納米棒側面組裝；金納米粒子和金納米棒端面組裝；(3)Hela細胞的培養利用培養基對Hela細胞進行培養；(4)表面增強拉曼檢測癌細胞將步驟(2)制備好的三種自組裝材料分別加入到步驟(3)培養的Hela細胞中進行表面增強拉曼檢測。
2.根據權利要求1所述的基于自組裝材料對活細胞癌細胞表面增強拉曼檢測的方法， 其特征在于金納米粒子探針及金納米棒探針制備1)金納米粒子探針制備潔凈的三角燒瓶中加入95mL的超純水，而后向水中加入5mL的濃度為2g/L的氯金酸， 加熱，煮沸，緊接著加入2. 5mL質量濃度1%的檸檬酸三鈉溶液，邊加熱邊攪拌，溶液顏色從淡黃色變成紅色，反應持續6-8min以使檸檬酸三鈉完全沉降，最后，溶液冷卻至室溫，用超純水稀釋到100mL，4°C保藏，即制得粒徑18nm級的金納米粒子；①將5mL的金納米粒子IOOOOrpm離心IOmin用0.5mL的超純水分散，IOOOOrpm離心 IOmin棄上清，用ImL的超純水分散，4°C保藏、待用；②取步驟①制備的金納米粒子80μ L加入8 μ L 100 μ M的ASYl，混勻，室溫靜置反應 12h后，加入2. 1 μ L的2M的NaCl溶液至反應體系中NaCl濃度達到50mM，混勻，室溫靜置反應1 !；所述 ASYl 為5，-TAGGAATAGT TATAAAAAAA AAAAA-3，；③將步驟②中反應溶液在IOOOOrpm離心lOmin，棄上清，后用80μ L超純水分散沉淀， 后用超純水清洗一次，4°C保藏、待用，得金納米粒子探針；2)金納米棒探針制備晶種合成下0. ImL的2g/L的三水合四氯金酸加入到ImL的0. 2M的十六烷基三甲基溴化銨溶液中，溶液顏色由無色變成黃褐色，然后加入0. 12mL新配制的0. OlM硼氫化鈉溶液，快速攪拌2min，溶液顏色即由黃褐色變為淺棕色；金納米棒生長金種子溶液合成好以后，進行金納米棒的生長，5mL的2g/L的三水合四氯金酸加入到5mL、0. 2M十六烷基三甲基溴化銨溶液中，加入4mL的超純水，混勻，0. 125 mL 的0. OlM硝酸銀溶液加入到上述混合體系中，混勻，隨后將65PL、0. IM抗壞血酸溶液加入上述體系中，28°C下攪拌反應2min，溶液由褐色變成無色，最后，加入0. 05mL的晶種溶液輕柔攪拌混勻20sJ8°C反應4h，制得金納米棒；將5mL金納米棒IOOOOrpm離心IOmin用0. 5mL的超純水分散，IOOOOrpm離心IOmin棄上清，用0. 5mL的0. 005M十六烷基三甲基溴化銨溶液分散，4°C保藏、待用，用于修飾；①全身修飾取上述待用的金納米棒10 μ L加入4 μ L的100 μ M的ASY2，混勻，室溫振搖反應12h， 6000rpm離心lOmin，棄上清，用10 μ L的超純水分散沉淀，超純水洗一次，4°C保藏、得全身修飾的金納米棒探針；所述 ASY2 為5’ -TTATAACTAT TCCTAAAAAA AAAAA-3’ ；②側面修飾、端面封閉取上述待用的金納米棒10 μ L加入1 μ L的10 μ M的輔助ASTO振搖反應12h，封閉端面，后加入4 μ L的100 μ M的ASY2修飾側面，混勻，室溫振搖反應12h，6000rpm離心6min， 棄上清，用IOyL的超純水沉淀，超純水洗一次，4°C保藏、得側面修飾、端面封閉的金納米棒探針；ASY3 為5，-AAAAAAAAAA-3，； 端面修飾、側面封閉取上述待用的金納米棒10 μ L加入IyL的IOyM的ASY2，混勻，室溫振搖反應12h，后加入4 μ L的100 μ M的輔助ASTO封閉側面，混勻，室溫振搖反應12h，6000rpm離心6min，棄上清，用IOyL的超純水分散，超純水洗一次，4°C保藏、得端面修飾、側面封閉的金納米棒探針；丨3丨對照組取上述待用的金納米棒IOyL加入4 μ L的100 μ M的輔助ASTO振搖反應12h，6000rpm 離心6min，棄上清，用IOyL的超純水分散，超純水洗一次，4°C保藏、得金納米棒-ASTO復合物。
3.根據權利要求1所述的基于自組裝材料對活細胞癌細胞表面增強拉曼檢測的方法， 其特征是金納米棒探針和金納米粒子探針的自組裝①金納米粒子圍繞金納米棒組裝形成衛星式組裝結構取制得的全身修飾的金納米棒探針2 μ L和金納米粒子探針10 μ L，加入12 μ L pH7. 5 的含0. 01%的十二烷基磺酸鈉SDS、20mM KCl的0. OlM Tris-HCl雜交緩沖液，混勻，室溫振搖反應12h ；②金納米粒子圍繞金納米棒側面組裝取制得的側面修飾、端面封閉的金納米棒探針2μ L和金納米粒子探針9yL，加入 IluL ρΗ7· 5的含0. 01%的SDS、20mM KCl的0. OlM Tris-HCl雜交緩沖液，混勻，室溫振搖反應1 !；'Ei金納米粒子和金納米棒端面組裝取制得的端面修飾、側面封閉的金納米棒探針3 μ L和金納米粒子探針3 μ L，加入6 μ L ρΗ7. 5的含0. 01%的SDS、20mM KCl的0. OlM Tris-HCl雜交緩沖液，混勻，室溫振搖反應 12h ；④對照組裝取制得的金納米粒子探針5 μ L和輔助hSn全身修飾的金納米棒5 μ L，加入10 μ L ρΗ7. 5的含0. 01%的SDS，20mM KCl的0. OlM Tris-HCl雜交緩沖液，混勻，室溫振搖反應 12h。
4.根據權利要求1或4所述的基于自組裝材料對活細胞癌細胞表面增強拉曼檢測方法，其特征在于表面增強拉曼檢測癌細胞將制備好的三種自組裝材料及對照組裝用超純水稀釋3倍，分別取IOyL的三種組裝材料及對照組裝分別加入到100 μ L的Hela細胞培養液中，37°C、5%的CO2恒溫培養箱培養12h，棄上層培養液，對細胞進行拉曼測定，25°C表面拉曼增強儀測定信號。
全文摘要
一種基于自組裝材料對癌細胞表面增強拉曼檢測的方法，屬于分析化學技術領域。本發明包括金納米棒探針及金納米粒子探針制備，金納米棒探針和金納米粒子探針的自組裝，表面增強拉曼檢測癌細胞。表面增強拉曼散射(SurfaceEnhancedRamanScattering，SERS)是拉曼散射的一種，它可以被簡短地描述為當分子吸附在特別制備的金屬表面時，它的拉曼信號強度要比簡單計算的預期值高出105-106倍的這種現象。這就使得單分子檢測成為了可能。本發明制備出組裝結構均一、可控并且具有SERS活性的納米材料組裝體并將其應用于癌細胞進行檢測。
文檔編號G01N21/65GK102346148SQ20111017403
公開日2012年2月8日 申請日期2011年8月18日 優先權日2011年8月18日
發明者嚴文靜, 匡華, 屈昌龍, 徐麗廣, 王利兵, 胥傳來, 趙媛, 郝昌龍, 馬偉 申請人:江南大學