專利名稱：畜禽肉中高、低密度脂蛋白膽固醇含量的測定方法
技術領域：
本發明涉及一種畜禽肉中高密度脂蛋白膽固醇和低密度脂蛋白膽固醇含量的測定方法。
背景技術：
膽固醇分為高密度脂蛋白膽固醇和低密度脂蛋白膽固醇兩種，高密度脂蛋白膽固醇可減少患冠狀動脈心臟病的危險，被稱為“好”膽固醇；低密度脂蛋白膽固醇會增加患冠狀動脈心臟病的危險，被稱為“壞”膽固醇。人體內的膽固醇有兩個來源，一是內源合成，二是來自動物性食物。近年來，隨著生活水平的提高，動物性食物在人們膳食中占的比例逐漸增大，外源的膽固醇攝入過多，誘發了各種心血管疾病。為此，科研工作者研發了高密度脂蛋白膽固醇含量高、低密度脂蛋白膽固醇含量低的畜禽肉，使人們在不降低生活質量的同時降低患心血管疾病的風險。目前，國內還沒有測定畜禽肉中高、低密度脂蛋白膽固醇的含量的標準方法，一些科研工作者常借鑒醫學上測血液中高低密度脂蛋白膽固醇的方法進行測定，首先將畜禽肉加一定比例的生理鹽水進行勻漿，然后離心取上清液，測上清液中兩種膽固醇的含量。由于膽固醇不溶于水，上述方法測定的兩種膽固醇的含量只是畜禽肉滲出液中的含量，它是畜禽肉中高、低密度脂蛋白膽固醇的部分值，并非畜禽肉中兩種膽固醇含量的真值。
發明內容
為了測定畜禽肉中兩種膽固醇含量的真值，申請人廣泛查閱了相關資料，進行了相關試驗技術的集成創新，通過大量的試驗研究，建立了一種畜禽肉中高密度脂蛋白膽固醇和低密度脂蛋白膽固醇的測定方法，為客觀準確地評價畜禽肉提供了新方法。本發明的技術方案是畜禽肉中高密度脂蛋白膽固醇的測定方法，其特征是，將畜禽肉中的脂類用氫氧化鉀和無水乙醇皂化，膽固醇作為不皂化物用無水乙醚提取出來，然后用磷鎢酸-氯化鎂沉淀劑將其中的高密度脂蛋白膽固醇分離出來，最后用氣相色譜儀測出高密度脂蛋白膽固醇的峰面積，根據峰面積計算其含量。具體步驟為(1)皂化取0. 1 1. 5克畜禽肉，用0. 5 1. 5mol/L的氫氧化鉀和無水乙醇在75°C 95°C 水浴上皂化至澄清；所述氫氧化鉀和無水乙醇的體積比為1 1;(2)膽固醇提取然后將皂化后的溶液用乙醚提取3次，之后用蒸餾水洗滌3次，無水硫酸鈉干燥乙醚層，用高純氮吹干或真空干燥箱烘干后，加入無水乙醇溶解提取出的膽固醇；(3)高密度脂蛋白膽固醇的分離然后用磷鎢酸-氯化鎂配成的沉淀劑和膽固醇溶液等體積混合均勻，靜置、離心、 過濾，即得高密度脂蛋白膽固醇溶液；所用磷鎢酸-氯化鎂沉淀劑pH為6. 1 士0. 1，磷鎢酸含量為4. 4克/升，氯化鎂含量為11克/升；
(4)測定與計算最后，用氣相色譜儀外標法測高密度脂蛋白膽固醇溶液中高密度脂蛋白膽固醇的峰面積，通過公式X = cXAXVX100/As/m/1000(X 試樣中高脂蛋白膽固醇的含量，單位為毫克每百克；c 標準工作液中膽固醇的濃度，單位為微克每毫升；A 試樣溶液中膽固醇的峰面積；V 試樣溶液最終定容的體積，單位為毫升；AS 標準工作液中膽固醇的峰面積； m:肉樣的質量，單位為克。)計算出畜禽肉中高密度脂蛋白膽固醇的含量。本發明的技術方案是畜禽肉中低密度脂蛋白膽固醇的測定方法，其特征是，首先是將畜禽肉中的脂類用氫氧化鉀和無水乙醇皂化，膽固醇作為不皂化物用無水乙醚提取出來，用檬酸鈉-肝素沉淀劑將其中的低密度脂蛋白膽固醇分離出來，最后用氣相色譜儀測出低密度脂蛋白膽固醇的峰面積，根據峰面積計算其含量。具體步驟為(1)皂化取0. 1 1. 5克畜禽肉，用0. 5 1. 5mol/L的氫氧化鉀和無水乙醇在75°C 95°C 水浴上緩慢皂化至溶液澄清；所述氫氧化鉀和無水乙醇的體積比為1 1;(2)膽固醇提取然后將皂化后的溶液用乙醚提取3次，之后用蒸餾水洗滌3次，無水硫酸鈉干燥乙醚層，用高純氮吹干或真空干燥箱烘干后，加入無水乙醇溶解提取出的膽固醇；(3)低密度脂蛋白膽固醇的分離用檸檬酸鈉-肝素配成的沉淀劑和膽固醇溶液等體積混合、靜置、離心、過濾，即得低密度脂蛋白膽固醇溶液；所用試劑檸檬酸鈉-肝素沉淀劑pH為5. 12士0. 02，檸檬酸鈉的含量為18. 8克/升，肝素的含量為12500U/升。(4)測定與計算最后用氣相色譜儀外標法測低密度脂蛋白膽固醇溶液中低密度脂蛋白膽固醇的峰面積，通過公式X = cXAXVX100/As/m/1000(X 試樣中低密度脂蛋白膽固醇的含量， 單位為毫克每百克；c 標準工作液中膽固醇的濃度，單位為微克每毫升；A 試樣溶液中膽固醇的峰面積；V 試樣溶液最終定容的體積，單位為毫升-A 標準工作液中膽固醇的峰面積；m:肉樣的質量，單位為克。)計算出畜禽肉中低密度脂蛋白膽固醇的含量。本發明氣相色譜條件優選為色譜柱DB_5彈性石英毛細管柱(30米0. 32毫米X /0. 25微米)載氣99. 99%氮氣，恒流2. 4毫升/分鐘柱溫初始溫度200°C，1分鐘后，以30°C /分鐘升至280°C，保持10分鐘進樣口溫度280°C檢測器溫度290°C進樣量及方式1微升不分流進樣空氣流速350毫升/分鐘氫氣流速30毫升/分鐘本發明的有益效果為本發明能準確定量地測出畜禽肉中高、低密度脂蛋白膽固醇的含量，而采用醫學方法所測得的值為畜禽肌肉組織滲出液中的含量，并非肌肉中全部含量。因此，本發明將為準確評價功能性畜禽肉提供正確可靠的方法。
具體實施例方式實施例1畜禽肉中高密度脂蛋白膽固醇的測定方法1.所用試劑氫氧化鉀(分析純)，無水乙醇(分析純)，無水乙醚(分析純)，無水硫酸鈉(分析純)，蒸餾水，磷鎢酸(分析純)，氯化鎂(分析純)，膽固醇(標準品)，高純氮2.操作方法及步驟(1)皂化稱取0.5 1.0克試樣，置于100毫升帶塞比色管中，加入10毫升lmol/L氫氧化鉀溶液，10毫升無水乙醇，混勻，裝上冷凝管，在75°C 95°C水浴上緩慢皂化至溶液澄清 (約需1小時)，然后用流水冷卻。(2)膽固醇提取將試樣皂化液移入50毫升分液漏斗中，加入10毫升乙醚混勻，靜置分層，將水層放入上述比色管中，并加入10毫升乙醚，輕輕振搖，靜置分層，將乙醚層移入上述分液漏斗中。再加入10毫升乙醚于比色管中，重復提取1次，將乙醚層移入分液漏斗中。用15毫升蒸餾水分三次洗滌分液漏斗中的溶液。分層后棄去水層，用10克無水硫酸鈉干燥乙醚層， 將乙醚層移入另一帶塞比色管中。用高純氮吹干后，加入1毫升無水乙醇溶解吹干后的膽固醇。(3)高密度脂蛋白膽固醇的分離分別稱取磷鎢酸0.044克和氯化鎂0. 11克，定容至10毫升，pH值為6. 1 士0. 1，準確吸取磷鎢酸-氯化鎂溶液0. 5毫升，與等體積的膽固醇提取液混勻，室溫靜置10分鐘后， 3000轉/分鐘離心15分鐘，用過濾器將離心后懸浮固形物過濾掉，濾液即為高密度脂蛋白膽固醇溶液。(4)測定根據試樣溶液中高密度脂蛋白膽固醇的含量情況，選定峰面積相近的標準工作液。標準工作液和試樣溶液中膽固醇的相應值應均在儀器檢測的線性范圍內。標準工作液和試樣溶液等體積間隔進樣測定，根據保留時間定性，外標法定量。氣象色譜條件色譜柱DB_5彈性石英毛細管柱(30米0. 32毫米X /0. 25微米)載氣99. 99%氮氣，恒流2. 4毫升/分鐘柱溫初始溫度200°C，1分鐘后，以30°C /分鐘升至280°C，保持10分鐘進樣口溫度280°C檢測器溫度290°C 進樣量及方式1微升不分流進樣空氣流速350毫升/分鐘氫氣流速30毫升/分鐘(5)計算X = cXAXVX100/As/m/1000X 試樣中高密度脂蛋白膽固醇的含量，單位為毫克每百克；
c 標準工作液中膽固醇的濃度，單位為微克每毫升；A 試樣溶液中膽固醇的峰面積；V 試樣溶液最終定容的體積，單位為毫升；As 標準工作液中膽固醇的峰面積；m:肉樣的質量，單位為克。實施例2畜禽肉中低密度脂蛋白膽固醇的測定方法1.所用試劑氫氧化鉀(分析純)，無水乙醇(分析純)，無水乙醚(分析純)，無水硫酸鈉(分析純)，蒸餾水，檸檬酸鈉(分析純)，肝素，膽固醇(標準品)，高純氮2.操作方法及步驟(1)皂化稱取0.5 1.0克試樣，置于100毫升帶塞比色管中，加入10毫升lmol/L氫氧化鉀溶液，10毫升無水乙醇，混勻，裝上冷凝管，在75°C 95°C水浴上緩慢皂化至溶液澄清 (約需1小時)，然后用流水冷卻。(2)膽固醇提取將試樣皂化液移入50毫升分液漏斗中，加入10毫升乙醚混勻，靜置分層，將水層放入上述比色管中，并加入10毫升乙醚，輕輕振搖，靜置分層，將乙醚層移入上述分液漏斗中。再加入10毫升乙醚于比色管中，重復提取1次，將乙醚層移入分液漏斗中。用15毫升蒸餾水分三次洗滌分液漏斗中的溶液。分層后棄去水層，用10克無水硫酸鈉干燥乙醚層， 將乙醚層移入另一帶塞比色管中。用高純氮吹干后，加入1毫升無水乙醇溶解吹干后的膽固醇。(3)高密度脂蛋白膽固醇的分離分別稱取檸檬酸鈉0. 188g，肝素(125U)，定容至10毫升，pH值為5. 12士0.02，準確吸取檸檬酸鈉-肝素溶液0. 5毫升，與等體積的膽固醇提取液混勻，室溫靜置10分鐘后， 3000轉/分鐘離心15分鐘，用過濾器將離心后懸浮固形物過濾掉，濾液即為低密度脂蛋白膽固醇溶液。(4)測定根據試樣溶液中低密度脂蛋白膽固醇的含量情況，選定峰面積相近的標準工作液。標準工作液和試樣溶液中膽固醇的相應值應均在儀器檢測的線性范圍內。標準工作液和試樣溶液等體積間隔進樣測定，根據保留時間定性，外標法定量。氣相色譜條件色譜柱DB_5彈性石英毛細管柱(30米0. 32毫米X /0. 25微米)載氣99. 99%氮氣，恒流2. 4毫升/分鐘柱溫初始溫度200°C，1分鐘后，以30°C /分鐘升至280°C，保持10分鐘進樣口溫度280°C檢測器溫度290°C 進樣量及方式1微升不分流進樣
空氣流速350毫升/分鐘
氫氣流速30毫升/分鐘(5)計算X = cXAXVX100/As/m/1000X 試樣中低密度脂蛋白膽固醇的含量，單位為毫克每百克；c 標準工作液中膽固醇的濃度，單位為微克每毫升；A 試樣溶液中膽固醇的峰面積；V 試樣溶液最終定容的體積，單位為毫升；As 標準工作液中膽固醇的峰面積；m:肉樣的質量，單位為克。試驗例1 2009年3月 5月，受濟南環億生物科技有限公司委托，我們進行了 “環億1號” 飼料添加劑(具有降低總膽固醇，提高高密度脂蛋白膽固醇的作用)飼喂肉雞的試驗。選 1日齡AA肉雞200只，均分成兩組，對照組采用普通日糧，試驗組采用添加環億1號添加劑的日糧，8周后，每組選5只共10只體重接近的AA肉雞進行屠宰，取胸肉采用兩種方法測高密度脂蛋白膽固醇。(樣品1-5號為對照組，6-10號為試驗組)測定方法一見本實施例1測定方法二 醫學方法。前處理取胸肉加等質量的生理鹽水進行勻漿，將勻漿液 3000轉/分離心10分鐘，取上清液，用測人血清中高密度脂蛋白膽固醇的試劑盒測定。操作步驟(來源于試劑盒說明書)1.標準品的稀釋與加樣在酶標包被板上設標準品孔10孔，在第一、第二孔中分別加標準品100 μ 1，然后在第一、第二孔中加標準品稀釋液50 μ 1，混勻；然后從第一孔、 第二孔中各取100μ 1分別加到第三孔和第四孔，再在第三、第四孔分別加標準品稀釋液 50 μ 1，混勻；然后在第三孔和第四孔中先各取50 μ 1棄掉，再各取50 μ 1分別加到第五、第六孔中，再在第五、第六孔中分別加標準品稀釋液50ul，混勻；混勻后從第五、第六孔中各取50 μ 1分別加到第七、第八孔中，再在第七、第八孔中分別加標準品稀釋液50 μ 1，混勻后從第七、第八孔中分別取50μ 1加到第九、第十孔中，再在第九第十孔分別加標準品稀釋液 50 μ 1，混勻后從第九第十孔中各取50 μ 1棄掉。(稀釋后各孔加樣量都為50 μ 1，濃度分別為 600pg/mL，400pg/mL,200pg/mL,100pg/mL,50pg/mL)。2.加樣分別設空白孔(空白對照孔不加樣品及酶標試劑，其余各步操作相同)、 待測樣品孔。在酶標包被板上待測樣品孔中先加樣品稀釋液40 μ 1，然后再加待測樣品 10μ 1 (樣品最終稀釋度為5倍)。加樣將樣品加于酶標板孔底部，盡量不觸及孔壁，輕輕晃動混勻。3.溫育用封板膜封板后置37°C溫育30分鐘。4.配液將30 (48T的20倍)倍濃縮洗滌液用蒸餾水30 (48T的20倍)倍稀釋后5.洗滌小心揭掉封板膜，棄去液體，甩干，每孔加滿洗滌液，靜置30秒后棄去，如此重復5次，拍干。6.加酶每孔加入酶標試劑50 μ 1，空白孔除外。7.溫育操作同3。
8.洗滌操作同5。9.顯色每孔先加入顯色劑Α50μ 1，再加入顯色劑Β50μ 1，輕輕震蕩混勻，37°C避光顯色15分鐘·10.終止每孔加終止液50 μ 1，終止反應(此時藍色立轉黃色)。11.測定以空白空調零，450nm波長依序測量各孔的吸光度(0D值)。測定應在加終止液后15分鐘以內進行。12.計算以標準物的濃度為橫坐標，OD值為縱坐標，在坐標紙上繪出標準曲線， 根據樣品的OD值由標準曲線查出相應的濃度；再乘以稀釋倍數；或用標準物的濃度與OD 值計算出標準曲線的直線回歸方程式，將樣品的OD值代入方程式，計算出樣品濃度，再乘以稀釋倍數，即為樣品的實際濃度。兩種方法的測試結果見表1。結果顯示，實施例1的方法所測的值顯著大于醫學方法的測定值。表1兩種方法測定AA肉雞胸肉中高密度脂蛋白膽固醇含量的結果比較
實施例1的方法測定的AA肉雞醫學方法測定的AA肉雞胸肉中樣品號胸肉中的高密度脂蛋白膽固醇含的高密度脂蛋白膽固醇含量值
量值(mg/100g)(mg/100g)
18.246.1828 366.2738.596.4448.816.6159.026.7767.055.2977.295.4787.485.6198.136.10109.347.01試驗例2:2009年3月 5月，受濟南環億生物科技有限公司委托，我們進行了 “環億1號” 飼料添加劑(具有降低總膽固醇，提高高密度脂蛋白膽固醇的作用)飼喂肉雞的試驗。選 1日齡AA肉雞200只，均分成兩組，對照組采用普通日糧，試驗組采用添加環億1號添加劑的日糧，8周后，每組選5只共10只體重接近的AA肉雞進行屠宰，取胸肉同時采用兩種方法測低密度脂蛋白膽固醇。(其中樣品1-5號為對照組，6-10號為試驗組)測定方法一見本實施例2測定方法二 醫學方法。前處理取胸肉加等質量的生理鹽水進行勻漿，將勻漿液 3000轉/分離心10分鐘，取上清液，用測人血清中低密度脂蛋白膽固醇的試劑盒測定。操作步驟(來源于試劑盒說明書)1、準備從冰箱取出試劑盒，室溫復溫平衡30分鐘。2、配液用蒸餾水將20倍濃縮洗滌液稀釋成原倍的洗滌液。
3、加標準品和待測樣本取足夠數量的酶標包被板，固定于框架上，分別設置標準品孔、待測樣本孔和空白對照孔，記錄各孔位置，在標準品孔中加入標準品50 μ L ；待測樣本孔中先加入待測樣本10 μ L，再加樣本稀釋液40μ L(即樣本稀釋5倍)；空白對照孔不加。4、溫育37 °C水浴鍋或恒溫箱溫育30min。5、洗板棄去液體，吸水紙上拍干，每孔加滿洗滌液，靜置lmin，甩去洗滌液，吸水紙上拍干，如此重復洗板4次。6、加酶標工作液每孔加入酶標工作液50 μ L，空白對照孔不加。7、溫育37 °C水浴鍋或恒溫箱溫育30min。8、洗板棄去液體，吸水紙上拍干，每孔加滿洗滌液，靜置lmin，甩去洗滌液，吸水紙上拍干，如此重復洗板4次9、顯色每孔先加入顯色劑A液50 μ L，再加入顯色劑B液50 μ L，平板混勻器混勻 30s (或用手輕輕震蕩混勻30s)，37°C避光顯色15min。10、終止取出酶標板，每孔加終止液50 μ L，終止反應(顏色由藍色立轉黃色)。11、測定以空白孔調零，在終止后15分鐘內，用450nm波長測量各孔的吸光值 (0D 值)。12、計算根據標準品的濃度及對應的OD值，計算出標準曲線的直線回歸方程，再根據樣本的OD值，在回歸方程上計算出對應的樣品濃度。最終濃度為實際測定濃度乘以稀釋倍數。兩種方法的測試結果見表2。結果顯示，實施例2的方法測定值大于醫學方法的測定值。表2兩種方法測定AA肉雞胸肉中低密度脂蛋白膽固醇含量的結果比較
權利要求
1.畜禽肉中高密度脂蛋白膽固醇的測定方法，其特征是，將畜禽肉中的脂類用氫氧化鉀和無水乙醇皂化，膽固醇作為不皂化物用無水乙醚提取出來，然后用磷鎢酸-氯化鎂沉淀劑將其中的高密度脂蛋白膽固醇分離出來，最后用氣相色譜儀測出高密度脂蛋白膽固醇的峰面積，根據峰面積計算其含量。
2.如權利要求1所述的畜禽肉中高密度脂蛋白膽固醇的測定方法，其特征是，(1)皂化取畜禽肉，用0. 5 1. 5mol/L的氫氧化鉀和無水乙醇在75°C 95°C水浴上皂化至澄清；所述氫氧化鉀和無水乙醇的體積比為1 1;(2)膽固醇提取然后將皂化后的溶液用乙醚提取3次，之后用蒸餾水洗滌3次，無水硫酸鈉干燥乙醚層，用高純氮吹干或真空干燥箱烘干后，加入無水乙醇溶解提取出的膽固醇；(3)高密度脂蛋白膽固醇的分離然后用磷鎢酸-氯化鎂沉淀劑和膽固醇溶液等體積混合均勻，靜置、離心、過濾，即得高密度脂蛋白膽固醇溶液；所用磷鎢酸-氯化鎂沉淀劑PH為6. 1 士0. 1，磷鎢酸含量為4. 4 克/升，氯化鎂含量為11克/升；(4)測定與計算最后，用氣相色譜儀外標法測高密度脂蛋白膽固醇溶液中高密度脂蛋白膽固醇的峰面積，通過公式X = cXAXVX100/As/m/1000，計算出畜禽肉中高密度脂蛋白膽固醇的含量； 所述公式中其中X 試樣中高脂蛋白膽固醇的含量，單位為毫克每百克；c 標準工作液中膽固醇的濃度，單位為微克每毫升；A 試樣溶液中膽固醇的峰面積；V 試樣溶液最終定容的體積，單位為毫升；AS 標準工作液中膽固醇的峰面積；m 肉樣的質量，單位為克。
3.如權利要求1或2所述的畜禽肉中高密度脂蛋白膽固醇的測定方法，其特征是，所述氣象色譜儀的氣相色譜條件為色譜柱DB-5彈性石英毛細管柱； 載氣99. 99%氮氣，恒流2. 4毫升/分鐘；柱溫初始溫度200°C，1分鐘后，以30°C /分鐘升至280°C，保持10分鐘；進樣口溫度280°C ；檢測器溫度290°C ；進樣量及方式1微升不分流進樣；空氣流速350毫升/分鐘；氫氣流速30毫升/分鐘。
4.畜禽肉中低密度脂蛋白膽固醇的測定方法，其特征是，首先是將畜禽肉中的脂類用氫氧化鉀和無水乙醇皂化，膽固醇作為不皂化物用無水乙醚提取出來，用檬酸鈉-肝素沉淀劑將其中的低密度脂蛋白膽固醇分離出來，最后用氣相色譜儀測出低密度脂蛋白膽固醇的峰面積，根據峰面積計算其含量。
5.如權利要求4所述的畜禽肉中低密度脂蛋白膽固醇的測定方法，其特征是， (1)皂化取畜禽肉，用0. 5 1. 5mol/L的氫氧化鉀和無水乙醇在75°C 95°C水浴上緩慢皂化至溶液澄清；所述氫氧化鉀和無水乙醇的體積比為1 1;(2)膽固醇提取然后將皂化后的溶液用乙醚提取3次，之后用蒸餾水洗滌3次，無水硫酸鈉干燥乙醚層，用高純氮吹干或真空干燥箱烘干后，加入無水乙醇溶解提取出的膽固醇；(3)低密度脂蛋白膽固醇的分離用檸檬酸鈉-肝素配成的沉淀劑和膽固醇溶液等體積混合、靜置、離心、過濾，即得低密度脂蛋白膽固醇溶液；所用試劑檸檬酸鈉-肝素沉淀劑PH為5. 12士0. 02，檸檬酸鈉的含量為18. 8克/升，肝素的含量為12500U/升；(4)測定與計算最后用氣相色譜儀外標法測低密度脂蛋白膽固醇溶液中低密度脂蛋白膽固醇的峰面積，通過公式X = cXAXVX100/As/m/1000計算出畜禽肉中低密度脂蛋白膽固醇的含量； 所述公式中其中X 試樣中高脂蛋白膽固醇的含量，單位為毫克每百克；c 標準工作液中膽固醇的濃度，單位為微克每毫升；A 試樣溶液中膽固醇的峰面積；V 試樣溶液最終定容的體積，單位為毫升；AS 標準工作液中膽固醇的峰面積；m 肉樣的質量，單位為克。
6.如權利要求4或5所述的畜禽肉中低密度脂蛋白膽固醇的測定方法，其特征是，所述氣象色譜儀的氣相色譜條件為色譜柱DB-5彈性石英毛細管柱； 載氣99. 99%氮氣，恒流2. 4毫升/分鐘；柱溫初始溫度200°C，1分鐘后，以30°C /分鐘升至280°C，保持10分鐘；進樣口溫度280°C ；檢測器溫度290°C ；進樣量及方式1微升不分流進樣；空氣流速350毫升/分鐘；氫氣流速30毫升/分鐘。
全文摘要
本發明公開了一種畜禽肉中高、低密度脂蛋白膽固醇含量的測定方法，它是先將畜禽肉中的脂類用氫氧化鉀和無水乙醇皂化，膽固醇作為不皂化物用無水乙醚提取出來，然后用磷鎢酸-氯化鎂沉淀劑將其中的高密度脂蛋白膽固醇分離出來，用檬酸鈉-肝素沉淀劑將其中的低密度脂蛋白膽固醇分離出來，最后用氣相色譜儀測出高密度脂蛋白膽固醇和低密度脂蛋白膽固醇的峰面積，根據峰面積計算其含量。本發明能準確定量地測出畜禽肉中高、低密度脂蛋白膽固醇的含量，而采用醫學方法所測得的值為畜禽肌肉組織滲出液中的含量，并非肌肉中全部含量。因此，本發明將為準確評價功能性畜禽肉提供正確可靠的方法。
文檔編號G01N30/88GK102156175SQ20111006737
公開日2011年8月17日 申請日期2011年3月21日 優先權日2011年3月21日
發明者井慶川, 劉濤, 劉瑞亭, 劉雪蘭, 武彬, 石天虹, 閻佩佩, 魏祥法 申請人:山東省農業科學院家禽研究所